TOLERANCIA INMUNOLOGICA

Dr. Sergio Alvizuri Pastor Facultad de Medicina Humana Universidad Nacional Federico Villarreal

Generalidades
El sistema inmune ha desarrollado un conjunto de puntos de control y balances que le permiten diferenciar las seales de peligro de las que no lo son, permitindole responder frente a los antgenos extraos y no a los propios. Los sistemas innato y adaptativo han evolucionado para poder hacer esta distincin.

Generalidades
Tolerancia Central
Es la que se produce durante la maduracin del linfocito (rganos linfoides centrales o primarios)

Tolerancia Perifrica
Es la que se produce cuando el linfocito ya es maduro (rganos linfoides perifricos o secundarios)

Tolerancia Central
Mecanismos de tolerancia central
Delecin clonal
Gen AIRE

Edicin del receptor (Linfocitos B) Anergia clonal Ignorancia clonal

Tolerancia Central
Anergia
Se define como la inactivacin funcional del linfocito dando como resultado la falta de respuesta frente al contacto con antgenos propios.
Las clulas B anrgicas no pueden activarse para proliferar y volverse clulas productoras de anticuerpos Las clulas T anrgicas no pueden ser activadas para proliferar y secretar citoquinas

En los rganos centrales la anergia se presenta sobre todo cuando el contacto es con antgenos solubles, los que tienen menor capacidad para generar seales fuertes.

Tolerancia Central
Edicin del Receptor
Es el principal mecanismo de tolerancia central del linfocito B. El proceso permite que el receptor en editar su especificidad antignica. Se produce como consecuencia de la produccin de molculas Bcl2 de supervivencia consecuencia del reconocimiento de antgenos propios En el timocito en desarrollo, los re-acomodos se producen continuamente en el locus del TCR de ambos cromosomas hasta que se produce la seleccin positiva o la clula muere.

Tolerancia Central
Delecin Clonal
Es el mecanismo por el que las clulas B y T autorreactivas son eliminadas por apoptosis. Linfocitos B, el encuentro con el antgeno propio fijo en las membranas induce contactos cruzados extensos del BCR y la generacin de seales potentes, induciendo apoptosis. Linfocito T, es el mecanismo dominante a nivel central, las clulas que se unen con alta afinidad a los antgenos propios unidos a molculas HLA son eliminadas rpidamente.
Gen AIRE

Timo
Est organizado en una serie de lbulos sobre la base de clulas epiteliales derivadas embriolgicamente de evaginaciones del endodermo intestinal de la tercera bolsa farngea y que forma zonas corticales y medulares bien definidas. Esta estructura de clulas epiteliales proporciona el microambiente para la diferenciacin de las clulas T

Timo

Timo
Las interacciones moleculares permiten el asentamiento de las clulas:
Molculas de adhesin celular
CD44 (HCELL, Ligando de Clulas Hematopoytica para Selectina E/Selectina L) es una molcula de adhesin que participa en el homing de la clulas hematopoyticas (Integrina a2)

Quimiocinas
Factor derivado de clulas estromales CXCL12 quimiotctico para clulas progenitoras que expresan CXCR4+ (en el humano)

Las clulas epiteliales producen hormonas que promueven la aparicin de marcadores de diferenciacin de los LT y una diversidad de funciones

Timulina, timosina a1, factor humoral tmico y timopoyetina.

Timo
Corteza externa
Clulas nodriza, son clulas epiteliales especializadas

Corteza profunda
Contiene clulas epiteliales con prolongaciones dendrticas ramificadas, con un alto contenido de MHC clase II, forman una red y los linfocitos tienen que pasar entre ellas camino a la mdula tmica

Mdula
Se encuentran clulas dendrticas provenientes de la mdula sea La clulas epiteliales expresan niveles altos de HLA clase I y II

Ontogenia del Linfocito T

Los progenitores llegan al timo e ingresan a travs de las vnulas de endotelio alto de la unin crticomedular los linfocitos carecen de las molculas CD4 y CD8 por lo que se denominan clulas doble negativas (DN), expresan el receptor de quimiocina CCR7, y migran por influencia de quimiocinas como la CCL19 y CCL21 hacia la zona subcapsular externa

Gen AIRE
Las clulas tmicas epiteliales medulares (mTECs) pueden expresar antgenos que se encuentran en determinados rganos, diferentes del timo. La expresin de muchas de estas protenas depende de un solo gen denominado Regulador de Autoinmunidad (AIRE) Sus defectos se asocian con la presencia de autoanticuerpos dirigidos contra diferentes glndulas (Sindrome de Poliendocrinopata Tipo I)

Gen AIRE

Tolerancia Central
Ignorancia Clonal
Se refiere a los linfocitos autorreactivos que han escapado a los mecanismos de tolerancia debido a su baja afinidad por el antgeno propio o, porque este se encuentra en muy poca cantidad (epitope criptognica). Las clulas autorreactivas pasan a la circulacin y pueden activarse bajo ciertas condiciones: (1) si la concentracin de antgeno se incrementa por muerte celular excesiva o (2) cuando se liberan seales de co-estimulacin potentes, durante las infecciones.

Tolerancia Perifrica
Ocasionalmente linfocitos T y B autorreactivos escapan a la seleccin negativa y pasan a los tejidos perifricos. La tolerancia perifrica ha evolucionado como una red de seguridad que permite detectar las clulas T y B que evaden los mecanismos de control en los rganos linfoides centrales. Mecanismos
Anergia de linfocitos T Apoptosis por Fas-FasL Inmunoprivilegio

Tolerancia Perifrica
Anergia de Linfocitos B
Los linfocitos B, dependientes del linfocito T requieren de dos seales para activarse: (1) la del antgeno y (2) de las molculas CD40 CD40L. La ausencia de colaboracin del LT provoca la anergia de las clulas B, por ausencia de la segunda seal.
Los LB anrgicos no pueden ingresar a los folculos de los ganglios ni del bazo y son relegados al borde del folculo de las clulas B (exclusin folicular), donde mueren por falta de factores de estimulacin.

Tolerancia Perifrica
Anergia de Linfocitos T
Se cree que es el principal mecanismo de control del LT en la periferie El LT virgen para activarse requiere de dos seales, del complejo antgeno/HLA y TCR y del par de co-estimulacin (B7 CD28). Si se genera la primera seal en ausencia de la segunda el mRNA de la IL-2 se degrada con rapidez y el linfocito entra en anergia Para que las CPA expresen molculas de co-estimulacin primero deben activarse, porque las molculas B7 no se expresan de forma constitutiva.

Tolerancia Perifrica
Interacciones Fas FasL
Tiene un papel importante para la remocin de los linfocitos autorreactivos maduros Los linfocitos activados expresan la molcula Fas sobre su membrana que se activa al unirse al Fas-L Las personas que tiene mutaciones del gen Fas son portadoras de un trastorno autoinmune llamado Sindrome Linfoproliferativo Autoinmune (ALPS).

Apoptosis

Tolerancia Perifrica
Clulas T Reguladoras/Supresoras
Son linfocitos T CD4+, se generan en el timo y expresan el CD25. Adems expresan el factor de transcripcin FOXP3 que induce a los linfocitos T a adquirir actividad inmunosupresora en los tejidos perifricos. Los Treg constituyen aproximadamente el 10% de los LTCD4+ perifricos. En ratones la ausencia de Treg da lugar a la aparicin de enfermedades autoinmunes rgano especficas como tiroiditis, gastritis, y diabetes tipo I, lo que se evita con el reemplazo de Treg. Una vez activadas su funcin de supresin no depende del antgeno y son capaces de regular tanto linfocitos TCD4+ como CD8+ autorreactivos

Tolerancia Perifrica
Inmunoprivilegio
Son sitios del organismo donde no se desarrollan respuestas inmunes a patgenos, clulas tumorales o tejidos transplantados no compatibles. Incluyen a los ojos, testculos, cerebro, ovarios y placenta. Se cree que el inmunoprivilegio se debe a la falta de drenaje linftico y a la presencia de una barrera sangunea, ambos impiden factores que las clulas autorreactivas puedan tener contacto con los antgenos. Otros factores que tienen un papel importante son los efectos inmunosupresores de la IL-10 y el TGF-b as como la expresin de FasL

APOPTOSIS
Dr. Sergio Alvizuri Pastor

Definicin
Es un proceso de eliminacin celular que se caracteriza por vesiculacin o retraccin de la membrana plasmtica, exposicin de fosfatidilserina, condensacin del ncleo, fragmentacin internucleosomal del DNA y fagocitosis de los restos por las clulas vecinas

Definicin
Es un proceso de eliminacin celular que se caracteriza por retraccin de la membrana plasmtica, retencin de las organelas y condensacin de la cromatina nuclear, frecuentemente acompaado de fragmentacin nuclear. Algunas lneas celulares presentan burbujeo plasmtico con la liberacin de cuerpos apoptsicos que pueden contener organelas y/o fragmentos nucleares.

Generalidades
Caractersticas morfolgicas:
Condensacin del ncleo y citoplasma Retraccin celular marcada Segmentacin internucleosomal de la cromatina ampollamiento de la membrana plasmtica Exposicin de molculas de sealizacin para ser fagocitadas

Control molecular
Los mecanismos de muerte los llevan a cabo una familia de proteasas cistena aspartatoespecficas conocidas como caspasas (proteasas cisteinil aspartato) que degradan protenas vitales (eg. Lamininas), que por proteolisis activan enzimas que contribuyen con la destruccin celular. Muchas caspasas se encuentran presentes en clulas sanas bajo la forma de pro-enzimas quiescentes (zimgenos).

Mecanismos de activacin de las Caspasas

Zimgenos pd N-t largos (caspasas 1,2,4,5,8,9,10,11,12)

Protenas Adaptadoras (FADD, MORT, Apaf-1) Zimgenos pd N-t cortos

Agregacin de zimgenos

(caspasas 3,6,7)

Caspasas activas (o por granzimas)

Mecanismos
No Secretor
Depende la interaccin con receptores (Fas-FasL) o de la activacin de protenas pro-apoptticas

Secretor
Por accin citotxica llevada a cabo por los CTL y las clulas NK (perforinas y granzimas)

Mecanismos no Secretores

Apoptosis: Fas/FasL

Rutas Apotsicas Receptor/Ligando

Ligando de muerte

Receptor de Muerte

FADD

Activacin caspasa 8

FLIP
Activacin caspasa efectora Proteolisis de protenas vitales APOPTOSIS

Apoptosis por Noxa

Rutas Apotsicas: Noxa

Drogas Citotxicas Dao del DNA p53 Dao mitiocondrial Liberacin de citocromo c

Deprivacin de citoquinas
Protenas BH3-only

Apaf-1 Activacin caspasa 9

Smac/Diablo

IAP Prots de supervivencia Bcl-2 Activacin de caspasas efectoras Lisis proteinas vitales

Bax/Bak

APOPTOSIS

Familia Bcl-2

Apoptosis: Rutas

Apoptosis: Rutas

Mecanismo Secretor
Durante la sinapsis inmunitaria se liberan grnulos que contienen perforinas y granzimas dentro de la clula que va a eliminar. Las perforinas son necesarias para que la accin de las granzimas sea eficiente. En los humanos y roedores se han identificado 11 granzimas En la clula blanco la GranB inicia la cascada de caspasas activando las caspasas-3 y -8

Rol Fisiolgico de la Apoptosis

Maduracin y Funcin de LB
Seleccin Negativa
Eliminacin de clulas autorreactivas (BIM) Eliminacin de clulas anrgicas (Fas) Edicin del receptor (Bcl-2, Bcl-xL)

Supervivencia de LB activados
Receptores de la familia TNF (activacin de la expresin de genes bcl-2, bcl-xL)

Respuesta humoral
Maduracin de la afinidad. La supervivencia de las clulas productoras de anticuerpos debe permitir la proteccin sin producir dao por complejos inmunes

Maduracin y Funcin de LT
Maduracin, Seleccin Positiva y Negativa
Defectos del pre-TCR (activacin p53, receptor ?) Corteza tmica: receptores funcionales (expresin Bcl-2) Mdula tmica: clulas autorreactivas (activacin BIM)

Organos perifricos: clulas en reposo

Supervivencia: IL-4, 6 y 7 (Bcl-2 y Bcl-xL?) Interacciones TCR-HLA

Organos perifricos: clulas activadas

LT activados: IL-2 y citoquinas relacionadas (Bcl-2 y Bcl-xL y BIM) Estimulacin repetitiva (Muerte Celular Inducida por Activacin o AICD): Fas-FasL Cese de la inflamacin: AICD, disinucin de citoquinas