NEISSERIACEAE (MENINGOCOQUES ET GONOCOQUES)

Dr M. Toukam HGY, FMSB Yaounde

OBJECTIFS
Dfinir et classer les Neisseria Dcrire les caractres bactriologiques des

Neisseria Dcrire le pouvoir pathogne des Neisseria

PLAN

INTRODUCTION HISTORIQUE CLASSIFICATION Caractres gnraux NEISSERIA GONORRHEAE ET MENINGITIDIS

HABITAT ET POUVOIR PATHOGENE CARACTERES BACTERIOLOGIQUES DIAGNOSTIC CLINIQUE DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE TRAITEMENT

INTRODUCTION
Le genre Neisseria cocci Gram ngatif comprenant: - 2 espces qui ne sont pathognes que chez lhomme Neisseria gonorrhoeae et Neisseria meningitidis - Des espces commensales des voies ariennes sup, du pharynx ou de la muqueuse vaginale

N. lactamica N. polysaccharea N.sicca N. subflava, flava et perflava N. mucosa N. cinerea

HISTORIQUE
Les gonocoques sont des bactries connues depuis longtemps.

On en parle dj{ dans lancien testament et cest Galien qui a introduit le terme de gonoroia = flux de semence en 130 avant J-C. Neisseria gonorrhoeae fut ensuite dcrit en 1879 par Neisser et cultiv par Leistikow et loeffler en 1882
La premire mningite crbrospinale a t dcrite en 1805

Genve par Vieusseaux. La dcouverte de lagent responsable na lieu quen 1887 par Weichselbaum lors dune mningite purulente. Le mningocoque a t dcrit sous des noms diffrents. Kiefer en 1896 a mis en vidence le portage chez les sujets sains

CLASSIFICATION
FAMILLE :Neisseriaceae GENRE : Neisseria ESPECE : Neisseria gonorrheae,

Neisseria meningitidis, Neisseria lactamica

Caracteres generaux
Les Neisseria sont -des diplocoques gram ngatif accols par une face aplatie donnant laspect en grain de caf -immobiles -non sporuls -arobies stricts -catalase + -oxydase +

NEISSERIA GONORRHEAE

HABITAT ET POUVOIR PATHOGENE

N. gonorrhoeae est une bactrie strictement humaine qui possde des lments de pathognicit volus lui permettant dinfecter les muqueuses et dchapper au systme immunitaire par des dguisements dorigine gntique. Ces facteurs sont en grande partie ports par la membrane externe. Les formes virulentes possdent des pili dadhsion qui avec la protine P II assurent la fixation de la bactrie sur la muqueuse uro-gnitale et augmentent la rsistance de la bactrie la phagocytose La protine P I ou porine semble favoriser lendocytose de la bactrie et son caractre invasif La protine P II va augmenter ladhrence aux cellules eucaryotes et aux phagocytes La protine P III rduirait laction bactricide du srum

HABITAT ET POUVOIR PATHOGENE

Le principal mode de contamination est une transmission sexuelle par un partenaire infect mais la contamination nest pas systmatique(A chaque RS). Linfection de la muqueuse passe par diffrentes phases: -adhrence des gonocoques par les pili la muqueuse -endocytose -transport du gonocoque travers la cellule pithliale dans une vacuole dendocytose o il se multiplie -relargage des germes dans lespace sous endothlial do il peut dissminer dans lorganisme

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES

morphologie

Diplocoques gram ngatif mesurant de 0.6 0.8 m disposs en grain de caf trs caractristique. Dans les produits pathologiques, on les retrouve souvent en situation intracellulaire dans le cytoplasme des polynuclaires

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
culture

-pH optimal 7.5 -Temprature 35 - 36C -Exigence milieu enrichis aux substances organiques: sang, srum -Atmosphre enrichie en CO2 8 10 % ncessaire -Arobie stricte

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
caractres biochimiques -Oxydase + -Catalase +

-Acidifient milieux glucoss -Sans action sur les autres sucres: maltose, saccharose, fructose -Ne possdent pas de btagalactosidase ni de gammaglutamyltransfrase -Ne rduisent pas le nitrate en nitrite

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
antignes

Les gonocoques possdent dans leur paroi des LPS antigniques et toxiques. Les protines de la membrane externe P I, P II et P III sont antigniques
toxines

Le gonocoque ne produit pas de toxines mais excrte une IgA protase qui pourrait protger les microorganismes des IgA scrtoires.

DIAGNOSTIC CLINIQUE
Chez lhomme: urtrite aigue = forme la + frquente

Incubation: 2-5jrs -Urtrite purulente avec rougeur du mat, -Suintement, coulement mat -Brulure mictionnelle complications: prostatites pididymite rtrcissement urtral

DIAGNOSTIC CLINIQUE
Chez la femme

Lattaque gnitale se fait au niveau de lendocol bien quon puisse retrouver N.gonorrhoeae au niveau de lurtre, des glandes de skene, des glandes de Bartholin. La symptomatologie volue trs bas bruit Incubation: 10 jours environ -Leucorrhes -Dysurie -Saignements Linfection peut se dissminer provoquant salpingite, pelvipritonite pouvant aller jusqu{ la strilit

DIAGNOSTIC CLINIQUE
Cas particuliers

-Manifestations dissmines Moins frquentes. Elles se manifestent par un syndrome de polyartralgie associ a une dermatite -Manifestations nonatales La transmission du gonocoque peut se faire verticalement. Ainsi une conjonctivite gonococcique peut tre observe. -Infections ano-rectales et pharynges Lies au comportement sexuel. Le prurit anal et les saignements peuvent tre observs Les gonococcies pharynges sont le + souvent asymptomatiques mais peuvent donner des angines

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE

Il repose sur lexamen bactriologique qui comporte: -Un examen direct par coloration de Gram -Une culture sur milieux spciaux avec isolement et identification des germes -Une tude de la sensibilit aux antibiotiques

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Le prlvement Il constitue un temps essentiel de lexamen La nature du prlvement est en fonction de lge, du sexe, des pratiques sexuelles et de la nature de linfection -chez lhomme: on prlve une goutte du pus urtral(la goutte matinale) aprs massage prostatique ventuellement ou on recueille lurine du 1er jet. La ractivation de linfection par lingestion de la bire la veille du prlevement est classiquement cit.

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
-chez la femme : les prlvements doivent tre multiples et peuvent tre faits au niveau de lendocol, des glandes de skne ou de Bartholin ou au niveau de lurtre -dans les formes cliniques gnralises, il faut avoir recours aux hmocultures, aux ponctions de liquide articulaire, liquide de vsicule cutane ou au prlvement de pus oculaires On peut galement tre amen faire des prlvements de loropharynx, ano-rectaux

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Culture

2 milieux sont classiquement utiliss: -chocolat= glose au sang cuit + supplment vitaminique (milieu modifi de Thayer Martin) -milieux clairs ex. milieu mningocoque-gonocoque pour isolement de gonocoque de Sanofi Diagnostic Pasteur Pour faciliter lisolement des Neisseria pathognes partir des sites pluri microbiens, des supplments antibiotiques peuvent tre ajouts:
Vancomycine pour inhiber les germes gram + Colimycine pour inhiber les germes gram Un agent antifongique type nystatine ou fungizone

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Identification Elle repose sur la morphologie et les caractres enzymatiques et biochimiques

Les colonies de gonocoques apparaissent au bout de 24 48h. Ce sont des colonies gristres de 0.5 1 mm de diamtre . Elles ont un bord irrgulier et un aspect brillant ou mat. Lisolement sur milieu slectif facilite lidentification

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Techniques immunologiques La recherche dantigne donne de bons rsultats dans les PU et les urines du 1er jet mais manque de sensibilit dans les prlvements endocervicaux. Il existe aussi des ractions croises avec les Neisseria commensales diminuant la spcificit du test dans les prlvements plurimicrobiens.
Biologie molculaire Les tests par amplification gnique sont plus sensibles que la culture

Prophylaxie
-prophylaxie locale: prservatifs -traiter le ou les partenaires sexuels -prophylaxie obligatoire chez tous les nouveau-ns: instillations de collyre au nitrate dargent

NEISSERIA MENINGITIDIS

HABITAT ET POUVOIR PATHOGENE

N. Meningitidis a un rservoir strictement humain (portage sain et malades).Il colonise la paroi postrieure du rhinopharynx. Il peut tre isol en labsence de toute manifestation clinique. La transmission se fait par la salive et les gouttelettes de pflgge
N. meningitidis est responsable de: -mningite crbro-spinale -coryza -rhinite -Affections ORL diverses -septicmies avec complications rnales, pricardiques et articulaires -conjonctivites purulentes aigues surtout chez lenfant

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES

Morphologie

Ce sont des diplocoques gram de 0.6 0.8 m de diamtre disposs en grain de caf apparaissant parfois capsuls et en situation intraleucocytaire dans le LCR purulent

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
Culture

Elle est + facile que celle du gonocoque car les mningocoques se dveloppent sur glose ordinaire. Mais il est prfrable au sortir de lorganisme dutiliser des milieux riches (glose au sang ou glose au sang cuit) que lon peut rendre slectif par adjonction dantibiotiques. -Ce sont des arobies stricts qui se dveloppent dans une atmosphre normale -pH optimal: 7.2 -Temprature optimale: 37c Ils ne survivent que trs peu dans le milieu extrieur. Ils ne peuvent supporter les variations de temprature, de pH.

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
Caractres biochimiques et enzymatiques

-oxydase + -catalase + -dgrade le glucose le maltose -Sans action sur le saccharose et le lactose -possde une GGT
Caractres antigniques

Les polyosides capsulaires dterminent 12 srogroupes: A, B,C, X, Y, Z, 29E, W135,H, I, K et L. 90% des infections sont dues aux srogroupes A,B et C. A lintrieur des groupes, il existe des srotypes et des sous types dtermins par les protines des membranes externes

CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
Toxines

Le mningocoque ne produit pas dexotoxine mais possde une endotoxine structure lipopolysaccharidique. Les souches pathognes possdent des pili facilitant leur adhsion et produisent les IgA protases

DIAGNOSTIC CLINIQUE
TDD: Mningite crbrospinale Elle est caractrise par: -incubation: 3 10 jours -rhinopharyngite apparente ou non -dbut brutal marqu par Fivre Cphales intenses Vomissements Raideur de la nuque Photophobie Voire convulsions et dlires Et parfois une ruption ptchiale, des douleurs articulaires et mme le coma

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Il est fond sur la prsence de la bactrie dans le LCR et dans le sang
Le prlvement

N meningitidis est une bactrie fragile et sensible aux variations de temprature, prsentant une autolyse spontane. Lensemencement devra donc tre immdiat et les prlvements traditionnels sont: -LCR -Hmocultures -Lsions cutans lorsque les purpuras sont observs -Nasopharynx ( N. meningitidis est trouv uniquement sur la paroi postrieure du rhinopharynx et non sur les amygdales)

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Lexamen direct

Dans un LCR purulent, on peut voir en situation intra ou extracellulaire, des diplocoques gram- mais ils sont parfois trs rares=lexamen direct peut tre ngatif
La culture

Elle est indispensable (mme en cas de liquide clair) et se fait sur milieux riches et avec incubation 37c. Les colonies apparaissent en 24h. Ils sont bord rguliers, de 1 2mm de diamtre, blanchtres ou gristres, muqueuses suivant les souches et pouvant sagrandir dans les jours suivants

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
Lidentification Elle est base sur -caractres biochimiques

-caractres antigniques Recherchs par agglutination sur lame dune suspension de la souche par des srums anti mningocoques. On dispose des srums anti A, anti B, anti C et polyvalent. Il existe toutefois certaines souches ingroupables ou polyagglutinables

DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
La recherche dantigne soluble On peut mettre en vidence dans le LCR, le srum ou les urines lantigne du mningocoque { laide des ractifs au latex sensibiliss par un antisrum. Ce test est peu sensible et manque de spcificit dans les urines La mthode par contre-immuno-electrophorse est utilisable mais + longue La PCR Le gnome du mningocoque peut tre recherch dans le LCR ou dans le srum

TRAITEMENT
Resistances naturelles: vancomycine, teicoplanine, trimthoprime,lincosamides, colistine et polymyxine B Resistances acquises: sulfamides, penicilline, chloramphnicol, tetracycline, macrolides, rifampicine

RECAPITULATIF
CARACTERES
OXYDASE CATALASE GLUCOSE MALTOSE LACTOSE SACCHAROSE CULTURE A 37c pH OPTIMUM

N. GONORRHEAE
+ + + + 7.5

N. MENINGITIDIS
+ + + + + 7.2

GGT
EXIGENCE EN CO2 EXIGENCE EN MILIEU ENRICHI

+ +

+
-

BON COURAGE