Ciclo de Krebs

Profa. Msc. Aline Cristina Andrade Mota Miranda

Onde ?
Onde paramos na ltima aula?

Preparem-se e vamos continuar o metabolismo dos carboidratos!!!!

Ciclo de Krebs

Espao intermembrana

Sir Hans Krebs: 1937 Oxidao completa do Acetil-CoA

Matriz

2 CO2, GTP, 3 NADH e 1 FADH2

Membrana interna Membrana externa

Enzimas:

Localizao mitocondrial: matriz Utilizao e regenerao do oxalacetato

Ciclo:

O que Acetil-CoA ??
Princpios de BioqumicaLehninger

Ciclo de Krebs

Acetil-CoA
Manual de Bioqumica com correlaes clnicas-Devlim

De onde vem o Acetil-CoA ??

Ciclo de Krebs

Oxidao das biomolculas X ciclo do cido ctrico

GLICOSE PIRUVATO

AMINOCIDOS

ACETIL-CoA

Ciclo do cido ctrico

CIDOS GRAXOS/ CORPOS CETNICOS

CO2 e coenzimas reduzidas

Ponto de convergncia do metabolismo degradativo de carboidratos, aminocidos e cidos graxos.

Ciclo de Krebs

Fontes e destinos do Acetil-CoA

Manual de Bioqumica com correlaes clnicas-Devlim

Ciclo de Krebs

Complexo Piruvato Desidrogenase

Trs subunidades catalticas

Intermedirios fortemente ligados

Tiamina pirofosfato (TPP)- Vitamina B1 Lipoamida- AG-lisina Flavina adenina dinucleotdeo (FAD)

Complexo piruvato Desidrogenase

Piruvato
Princpios de BioqumicaLehninger

Acetil-CoA

Ciclo de Krebs

Complexo Piruvato Desidrogenase

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Complexo Piruvato Desidrogenase

Manual de Bioqumica com correlaes clnicas-Devlim

Ciclo de Krebs

Complexo Piruvato Desidrogenase

Manual de Bioqumica com correlaes clnicas-Devlim

Contrao muscular:

Ca2+ fosfatase oxidao do piruvato ativao da piruvato desidrogenase no tecido adiposo ativao da piruvato desidrogenase no tecido cardaco
Ciclo de Krebs

Insulina:

Catecolaminas: epinefrina

Complexo Piruvato Desidrogenase

Deficincia do complexo enzimtico

Aumento dos nveis sricos de lactato, piruvato e alanina Acidose lctica crnica Deficincia neurolgica

Deficincia de Tiamina
Tiamina metabolizada rapidamente

1. Ligao tiamina enzima fraca

2. Deficincia de tiamina: desnutrio/anorexia/alcoolismo Enzimas menos funcionais

Msculos e tecido nervoso: necessidade de ATP

Sinais de deficincia: cansao, manifestaes neurolgicas e cardacas 3. O lcool inibe a absoro desta vitamina: Sndrome de Korsakov (amnsia) Ciclo de Krebs

CICLO DE KREBS CICLO DOS CIDOS TRICARBOXLICOS

1. Formao de citrato Condensao de Claisen

H+ + OH-

Citrato sintase

ACETIL-COA

OXALACETATO

CITRATO

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Ponto de regulao! [citrato] inibidor competitivo

[OAA]

o Sintase: condensao de duas molculas orgnicas para formar uma ligao C-C o Acetila + cido dicarboxlico (carbono ) o Citrato: cido tricarboxlico Ciclo de Krebs

2. Isomerizao de citrato a isocitrato

o Rearranjo de uma OH- : facilitar a oxidao, transferncia de eltrons o Aconitato hidratase o Fluoracetato (veneno) Fluorocitrato potente inibidor da aconitase
Princpios de Bioqumica-Lehninger

CITRATO

CIS-ACONITATO

ISOCITRATO

Acoplamento de energia! Ciclo de Krebs

3. Formao de -cetoglutarato e CO2 Descarboxilao oxidativa

Isocitrato desidrogenase

ISOCITRATO

-CETOGLUTARATO

Princpios de Bioqumica-Lehninger

o Isocitrato desidrogenase: removem hidrognios contendo eltrons ou tomos de hidreto o Oxidao do lcool e liberao do CO2 a partir da carboxila o Isocitrato desidrogenase citoslica: NADPH Ciclo de Krebs

4. Formao de succinil-CoA e CO2 Descarboxilao oxidativa

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Complexo -cetoglutarato desidrogenase

-CETOGLUTARATO

SUCCINIL-COA

Ligao tioster

Semelhante ao complexo piruvato desidrogenase 3 enzimas e 5 cofatores o TPP: reaes de quebra de ligao C-C prximo ao grupo cetnico (ou -carbonila) o Lipoato: resduos de enxofre (grupo dissulfeto) recebe eltrons (FAD) transfere o fragmento acila da tiamina para CoA-SH o FAD recebe os eltrons e passa ao NAD+ Ciclo de Krebs

5. Formao de Succinato

Succinil-CoA sintetase ou

SUCCINIL-COA

Succinato tioquinase

SUCCINATO

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Energia da hidrlise da ligao tioster sntese de GTP sntese de protenas mitocondriais/DNA/RNA Fosforilao em nvel do substrato - enzimas solveis e intermedirios qumicos Ciclo de Krebs

Jogo da memria

Quantos

eltrons j foram retirados do grupamento acetila inicial?

Dois

pares

6. Oxidao do succinato e Formao de fumarato

Transferncia de eltrons single! SUCCINATO

Succinato desidrogenase

FUMARATO

- nica enzima do ciclo que est ligada membrana (membrana interna da mitocndria) - Ligada ao FAD (ligao covalente)- FAD no pode estar livre - Concentrao de FADH2 no regula vias metablicas

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Ciclo de Krebs

7. Hidratao do fumarato malato

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Fumarase

FUMARATO

MALATO

Ciclo de Krebs

8. Oxidao do malato, com regenerao do oxalacetato

o Utilizao do oxaloacetato: citrato sintase o Estimula a reao direta o Fgado em jejum: oxidao de AG NADH/NAD+ Reao inversa malato gliconeognese
Princpios de Bioqumica-Lehninger

Malato desidrogenase L-MALATO OXALACETATO

Ciclo de Krebs

Jogo da memria

Quantos

eltrons foram retirados do grupamento acetila inicial?

Quatro

pares

Princpios de BioqumicaLehninger

Ciclo de Krebs

Rendimento

3 NADH 2,5 molculas ATP = 7,5 molculas ATP 1 FADH2 1,5 molculas ATP 1 GTP 1 ATP

10 molculas de ATP por ciclo

Ciclo de Krebs

Regulao do ciclo

Mensageiros do ciclo:

ATP e ADP NADH/NAD+

3 fatores principais dirigem o fluxo de um ciclo:

Disponibilidade do substrato Inibio por acmulo do produto Regulao alostrica

Ciclo de Krebs

Regulao do ciclo de Krebs

Princpios de BioqumicaLehninger

I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I

Piruvato
ATP, succinil-CoA, NADH, AG
Complexo piruvato desidrogenase

AMP, CoA, NAD+, Ca+2

Acetil-CoA
ATP, succinil-CoA, NADH, citrato
Citrato sintase

ADP
CITRATO

OXALACETATO
Malato desidrogenase

ISOCITRATO
Isocitrato

ATP, NADH Ca2+ , ADP

desidrogenas e
-Cetoglutarato desidrogenase

MALATO

-CETOGLUTARATO Succinil-CoA, NADH Ca2+, ADP

Succinato desidrogenas e

SUCCINIL-COA

Ciclo de Krebs

Ciclo de Krebs

A reduo de coenzimas no a nica funo do ciclo! Os intermedirios podem ser usados como precursores em vias biossintticas. A retirada de intermedirios pode ser compensada por reaes que permitem restabelecer o seu nvel:

Reaes anaplerticas Reaes de preenchimento!

Ciclo de Krebs

Piruvato
Glicose
Piruvato carboxilase cidos graxos Esterides

Gliconeognese

Fosfoenolpiruvato carboxiquinase

Acetil-CoA Citrato liase: acetilCoA

Glutamina

Fosfoenolpiruvato

Oxalacetato

Citrato

Prolina Arginina

Fosfoenolpiruvato carboxilase

Transaminao
Serina Glicina Cistena Fenilalanina Tirosina Triptofano Pirimidinas Aspartato Asparagina

Malato
Enzima

-Cetoglutarato

Glutamato

mlica

Piruvato

Succinil-CoA

Purinas

Porfirinas Heme

Transaminao/ Glutamato desidrogenase

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Ciclo de Krebs

Fgado: gliconeognese Tec. Nervoso: neutransmissores

Princpios de Bioqumica-Lehninger

Ciclo de Krebs

HORA DE BEBER GUA!! ... Ou conseguir espinafre, claro!!!

Melhor Referncia Bibliogrfica?

Devlim Marks Lehninger