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Cromatografa de Gases-Masas

01/04/2013

Cromatografa Definicin:
Cromos=Color Grafos=Escritura.
Tcnica utilizada para la separacin de los componentes de una mezcla a travs de una columna, en la cual estos se distribuyen entre dos fases, una estacionaria y otra mvil. Aprovechando los equilibrios diferenciales entre ellas.

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Cromatografa Definicin:
ter de petrleo mezcla de pigmentos

CaO3

pigmentos separados

Cromatografa = kroma [color] + graph [escritura] (griego)


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Clasificacin de la cromatografa
En papel.
En capa fina

Cromatografa

En Columna.
De gases.

De lquidos.

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Clasificacin de la cromatografa
Cromatografa de gas-lquido

Cromatografa de gases
Cromatografa de gas-slido

Permeacin en gel (GPC).


Cromatografa de lquidos Fase reversa. Intercambio inico.

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Clasificacin continuacin.
FM = Lquido FM = Gas
Cromatografa Lquida Cromatografa Gaseosa (CG) Cromatografa Gas-Slido (CGS) Cromatografa Gas-Lquido (CGL)
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Slida
En CG a FE puede ser:

Lquida

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Aplicaciones de Cromatografa de gases.


o Farmacutica.

o Petroqumica.
o Anlisis ambiental. o Medicina forense. o Qumica de Alimentos. o Anlisis de polmeros.

o Medicina deportiva.
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Esquema de un cromatgrafo de gases.

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Gas de arrastre.
Gas de arrastre= Carrier= Fase mvil.
Tiene como funcin trasladar la muestra a travs de todo el sistema.

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Fase mvil (Carrier).

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Caractersticas del gas de arrastre.


Alta
Bajo

pureza.

peso molecular.

Inherte.
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Gases de arrastre.
Nitrgeno.
Helio.

Argn.
Hidrgeno.

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Inyectores.
Es el punto de introduccin de la muestra al sistema, en donde se vaporiza mediante calentamiento, siendo arrastrada por la fase mvil hacia la columna.

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Diagrama de Inyector

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Inyector Split-Splitless.
1

2
3 4 5

1 2 3 4 5 6

Septa Entrada de gas de arraste Liner Columna Capilar Purga de gas de arraste Vlvula de control de

purga.

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Columnas.
La columna es el corazn del sistema, es en donde se lleva a cabo la separacin de los componentes de una mezcla por la fase lquida.

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Clasificacin por su dimetro.


Empacadas

1/4 -1/8 de pulgada.

Semicapilares.

0.53mm de dimetro.

Capilares.

0.32-0.21mm dimetro.

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Clasificscin de columnas.

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Columnas empacadas vs capilares.


Menor sangrado de FE temperatura programada Separaciones rpidas temperaturas menores Mayor eficincia (d N)
f

con con

Mayores volumenes de muestra


Menor reproducibilidad

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Migracin de analitos.

Una migracin lenta por la columna provoca inevitablemente un alargamiento de su banda:


TIEMPO

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Eficiencia de la columna.
Eficiencia: Capacidad de elucin con un mnimo de dispersin del analito. Empacada.

Capilar.

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Columnas Capilares vs Empacadas.


Menor ensanchamiento (dispersin).

Mayor resolucin de picos.

Mejor sensibilidad.
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Detectores.
Sensa la salida de los compuestos eluidos de la columna de acuerdo con alguna propiedad fsica o qumica del analito generando una seal elctrica.

Representada por una grfica SEAL vs TIEMPO.

Tiempo
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Clasificacin de detectores.
UNIVERSALES:: Genera una seal para cualquier Sustancia eluida. SELECTIVOS: Detectan sustancias con alguna Propiedad fsico-qumica.
ESPECFICOS: Detectam substancias que posen determinado elemento ogrupo funcional en sus estructuras.

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Detectores ms comnes.

Detector por Conductividad Trmica

DCT TCD

Detector por Ionizacin de Flama

DIC FID

Detector por Captura de Eletrones

DCE ECD

Detector Espectromtrico de Masas

EM MS

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Cromatografa de gases-masas.

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Cromatografa de Gases-Masas.
Es una tcnica analtica que combina las propiedades de: Separacin de compuestos por CG. La identificacin de dichos compuestos por Espectrometra de Masas.

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Espectro de Masas.
Es una representacin grfica de la masa de un in vs. su abundancia.

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Componentes del sistema.

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Interfase
Despus de eluir los compuestos de la columna estos deben ser introducidos directamente a la cmara de ionizacin.

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Interface capilar directa.

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Tipos de Ionizacin.

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Mtodos de Ionizacin.

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Ionizacin de la muestra.

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Fuente de Iones.
Inner Source O-ring

Handle

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Cuadrupolo
Electron Multiplier Electron Reflector

Filament Quadrupole Mass Filter

Entrance Lens Lens 2 Lens 1 Ionizer

GC Column

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Quadrupole.
Consiste barras. en cuatro
Opera en pares (X o Y) cada par tiene un voltaje. nicamente los iones con m/z pueden pasar exitosamente a travs del filtro (eje Z)
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Quadrupole.
Las barras con alta corriente elimina iones con baja relacin m/z. Las barras con baja corriente eliminan iones con relacin m/z excesiva.

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Trayectoria de los iones EI.


Magnet Filament Lens 2 + Analytical Quadrupole Pre Quads Phosphor Screen Photomultiplier

Repeller
Collector

Lens 1

Magnet

Conversion Dynode

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Ionizacin Electrnica.
molecule + e-

molecule +

+ 2e-

molecule +

mole + ion

cule

radical

mole +

mo +

le

neutral molecule
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Ventajas ionizacin electrnica


Construccin simple. Alta eficiencia en la ionizacin. Modelos de fragmentacin altamente caracterizables fingerprints. Bibliotecas de espectros EI. Presenta pocas reacciones secundarias debido a choques.

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Desventajas ionizacin electrnica.


La muestra debe estar en estado gaseoso. Puede causar excesiva fragmentacin. Algunos compuestos no generan ion molecular. Pobre diferencia entre ismeros.

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Detector.
Fotocathode Electron optics Focusing Electrode First dynode

Electron multiplier
Anode

Mounting Base
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Detector Fototubomultiplicador.
Placa de fsforo. Conversin de los e a fotones. Photomultiplier Sellado en vidrio Elimina contaminacin 10 aos de vida Puede realizar la deteccin de un solo in

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Sistemas de generacin de vaci.


El vaci permite asegurar que los iones formen un haz lo suficientemente estable para llegar al detector.

El vaci debe ser tan bajo que impida la colisin de los iones con molculas de la muestra, el gas u otros iones.

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Por qu se necesita un alto vaco?.


1. L a vida til de los filamentos es mucho mayor cuando se utiliza EI.

2. El vaci previene o disminuye la oxidacin de las superficies de la fuente de iones.

3. A presin atmosfrica el aire ionizado ocasiona un background que puede formar una seal tan grande como la de un analito.
4. Las reacciones intermoleculares entre los iones del aire y los compuestos puede resultar en reacciones no controladas e irreproducibles.

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Bombas de vaco.
Bombas de alto vaco (10-4 a 10-12 Torr) Difusin de aceite No tiene movimiento de partes Turbo-molecular Clean - no utiliza aceite Bomba Mecnica ( hasta 10-4 Torr)

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Bomba turbomolecular.

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Bomba de difusin de aceite.

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Monitoreo de iones.
Espectros de massas completos colectados y archivados en intervalos regulares de tiempo.
TIC: Total Ionn Chromatogram SIM: Single Ion Monitoring

TIC
Universal

SIM
Selectivo Mayor Sensibilidad

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Anlisis cualitativo.
1. TIC: Es la representacin total de iones o fragmentos detectados en funcin de la relacin m/z en funcin del tiempo.

2. SIM: Selecciona una fraccin de una especie de inters representada por el nmero iones detectados para una masa en particular en funcin del tiempo.

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Anlisis cualititativo.
TIC Aparecem los picos correspondientes a todas substancias eludas

SIM (m/z = 149) Cromatograma construido a partir de los mismos datos usando fragementos com masa = 149 (ftalatos: plastificante)

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Identificacin de compuestos.

MASA / CARGA

TiEMPO

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Identificacin de compuestos.

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Calibracin del masas.


La calibracin interna del masas se realiza utilizando un compuesto de referencia HEPATCOSA (PFTBA Perfluoro Terbutil Amina).
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Tune externo.
Tiene la funcin de verificar que la ionizacin y fragmentacin en la fuente de iones se lleve de forma correcta.
DFTPP: Deca Fluoro Trifenil Fosfina

Compuestos semivoltiles.

TUNE
BFB: Bromo Fluoro Benceno

Compuestos voltiles.

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Tune externo DFTPP.

Identificacin de DFTPP en TIC scan.

Espectro de masas y cromatgrama.

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Uso de biblioteca de espectros.


1 2 1. Espectro obtenido vs referencia. 2. Estructura qumica. 3. Identificacin del compuesto. 3

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Verificacin del masas.

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Control de calidad.

Blanco electrnico. Blanco de proceso. Estndar de verificacin. Estndar control. Spikes. Surrogados.

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Surrogados.
Son compuestos qumicamente similares a los analitos de inters, pero que no se espera encontrarlos en la muestra.

Surrogado.

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Identificacin de surrogado.

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Referencias.
1. TurboMass GC Mass Spectrometer Hardware Guide Perkin Elmer. 2. Practical Introduction to GC-MS Analysis with Quadrupole, Michael Oehme; Desk Library of Chemistry 1998, Germany. 3. www.chemkeys.com

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