Toxoplasma gondii

Toxoplasmose

Toxoplasma gondii
1. Descrito na Frana, em 1908, por Nicolle & Manceaux, em um roedor africano: Ctenodactylus gondi 2. Na mesma poca, em So Paulo, Splendore isolou o mesmo agente de coelhos. 3. O ciclo do parasita s foi totalmente estabelecido em 1970, por Dubey et al. 4. Parasita intracelular obrigatrio, capaz de infectar diversos tipos de tecidos e hospedeiros.

Ctenodactylus gondii

Toxoplasmose: Epidemiologia Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii

Filo Apicomplexa 1. Agente etiolgico - Toxoplasma gondii

2. Zoonose
2 membranas Famlia SarcocystidaeComplexo apicalsimples 1 3. Importante em sade humana e veterinria 1 dupla

Filo Apicomplexa

Distribuiao Universal (13% da populao mundial) hospedeiros: vertebrados homeotrmicos - Frana: 85% de prevalncia - Brasil: herbvoros, insetvoros, roedores, porcos, carnvoros, 50-80% - EUA: 15-68% primatas, outros mamferos e aves taquizoto

Toxoplasma - organelas
* * *

apicoplasto

Genoma de 80 Mb distribudo em vrios cromossomos de 2-6 Mb, organismo predominantemente haplide; Genoma mitocondrial de 6 kb e do apicoplasto de 35 kb; Geneticamente accessvel por transfeco de plasmdeos com diferentes marcadores de resistncia, por isso as vezes utilizado como organismo modelo para Plasmodium; Trs cepas diferentes existem em circulao, somente a cepa I virulenta para os seres humanos.

Toxoplasma gondii
Mecanismos de transmisso: 1) Oral: ingesto de carne contendo cistos 2) Fecal-oral: ingesto de oocistos (fezes de gato) 3) Congnita: contaminao do feto pela passagem de formas infectantes pela placenta 4) Transfuso 5) Transplante INFECO OPORTUNISTA

7 dias mais tarde...

Toxoplasmose
Zoonose
de 200 espcies de

mamferos e aves

Toxoplasma gondii
Diversidade gentica
1. Surpreendentemente pequena para um parasita com tantos hospedeiros e tamanha distribuio geogrfica! Apenas 3-4 gentipos (reproduo clonal) 2. Cepas do gentipo 1 so mais virulentas (camundongos e homem) 3. Cepas do gentipo IV associadas com toxoplasmose ocular???

Ciclo de Vida
Cistos ingeridos pelo gato

Gato: Hospedeiro Definitivo Oocistos no esporulados nas fezes

Cistos ingeridos em carne infectada

Cisto contendo bradizotas em tecidos do hospedeiro intermedirio

Taquizotas transmitidos atravs da placenta

Oocistos na comida, gua ou solo ingeridos pelo hospedeiro intermedirio

Comida e gua contaminadas

Hospedeiros Intemedirios

Oocistos esporulados

Feto infectado

Transmisso da toxoplasmose humana

Contato com fezes de gatos contendo oocistos viveis, presentes na gua, hortalias ou tanques de areia Consumo de carne crua ou mal passada contendo cistos teciduais Taquizotos placenta e infecta o feto nas fases iniciais da gestao quando no h resposta imunitria. Transmisso congnita

Infeco do Hospedeiro Intermedirio

O oocisto esporulado libera os esporozoitos Esporozotos penetram no epitlio intestinal e invadem vrios tipos celulares, particularmente clulas mononucleares Multiplicam-se por endodiogenia.

Infeco do Hospedeiro Intermedirio

Taquizotas (do grego taqui=rpido) so ento liberados e iro invadir novas clulas. Invaso

Escape Disseminam-se por via sangunea ou linftica. Invadem o tecido muscular, nervoso (crebro) e vsceras Fase aguda da doena.

Toxoplasma gondii - penetrao

Taquizotas
intracelular
vacolo parasitforo

membrana clula hospedeira

adeso

penetrao reconhecimento

extracelular

Parasita se desenvolve no interior do vacolo parasitforo (VP)

1. VP modificado pelo parasita a. membrana VP formada pela invaginao membrana plasmtica da clula hospedeira. b. membrana plasmtica internalizada durante invaso c. molculas marcadoras endocitose so seletivamente excludas! d. VP no reconhecido: ausncia de fuso, acidificao e morte intracelular

Como Toxoplasma impede sua destruio pela clula hospedeira?

Toxoplasma impede a fuso de lisossomos ao vacolo parasitforo

A passagem de T. gondii por clulas no interfere com a viabilidade das clulas e no influi na infectividade do taquizoita ao contrrio do que acontece com esporozoitas de Plasmodium

Dentro da clula hospedeira, o taquizoito se desenvolve dentro de um vacolo parasitforo com o qual no ocorre fuso com lisossomos

Infeco do Hospedeiro Intermedirio

Quando a resposta imune torna-se mais potente, o parasita passa a se dividir mais lentamente e formam-se cistos teciduais contendo formas conhecidas como bradizotas (do grego bradi=lento).

Fase crnica em que se perpetua a infeco.

Toxoplasma gondii - bradizoitas

Bradizotos (bradys = lento), reproduo por endodiogenia de forma lenta

Centenas bradizotas

Taquizotas causam toda a patologia da infeco aguda.

Os taquizotas: dividem-se rapidamente e agressivamente, destruindo tecidos. podem cruzar a barreira hemato-enceflica e transplacentria. Quando o sistema imune consegue controlar a replicao dos taquizotas, eles se diferenciam em bradizotas e formam cistos teciduais.

Cistos contendo bradizotas latentes mantm a infeco por toda vida

Bradizotas: marcam o incio da fase crnica da infeco. so resistentes a pH baixo e a enzimas digestivas quando passam pelo estmago. so resistentes a todas as drogas disponveis atualmente. Cistos formam-se preferencialmente no crebro, nos msculos esquelticos e cardaco e no globo ocular. so altamente infectivos se ingeridos

SNC

Msculo

Que fatores determinam a converso de taquizotos em bradizotos?

Produo de IFN- e IRN, variao de pH, choque trmico, inibio de enzimas mitocondriais?

Hospedeiro definitivo
1.Felinos, principalmente os jovens e imunodeprimidos 2.Gatos adquirem a infeco aps a ingesto de animais infectados cujos tecidos contm taquizotos ou bradizotos 3.Durante a fase intestinal, os merozotos podem invadir a mucosa intestinal e alcanar outros orgos, havendo desenvolvimento de taquizotos e bradizotos, como ocorre nos hospedeiros intermedirios 4.O perodo pr-patente varia de acordo com o estgio do parasita ingerido: 1. Oocisto: >20 dias 2. Taquizotos: >19 dias 3. Bradizotos: 3-10 dias 5.Menos de 50% dos gatos eliminam oocistos aps a ingesto de taquizotos e quase 100% dos gatos que ingerem bradizotos eliminam oocistos.

O ciclo intestinal no gato

G F

A. Cistos (bradizotas) B. Esquizontes C, D e E. Merozotas F. Gametcitos (microgametcito e macrogametcito) G. Oocisto (no esporulado) H. Oocisto (esporulado)

Esquizogonia (reproduo assexuada) Ocorre no interior das clulas epiteliais Gametogonia (reproduo sexuada) Esporogonia Ocorre no solo

Oocisto
No infeccioso antes da esporulao Oocistos no esporulados esfricos Oocistos esporulados so elipsides Cada oocisto possui 2 esporocistos elipsides Cada esporocisto contm 4 esporozotas
Esporocistos

oocisto

Esporozotas Os oocistos aparecem nas fezes dos gatos entre 3-5 dias aps a ingesto de cistos teciduais ou entre 20-34 dias aps a ingesto de oocistos.

Infeco do homem (HI) ingesto do oocisto esporulado

Uma vez no hospedeiro o que o parasita faz?

Ciclo assexuado

1. O parasita invade o epitlio intestinal e vrios tipos celulares, particularmente clulas mononucleares e linfcitos 2. Multiplicao por reproduo assexuada, formao de taquizotos (tachus = rpido) Disseminao por via sangunea ou linftica 3. Os taquizotas invadem os tecidos muscular, nervoso (crebro) e vsceras 4. Fase aguda da doena

Infeco aguda do homem (HI) Oocisto - taquizotas

Ciclo assexuado

1. Taquizotas bradizotas (lento) 2. Cistos - tecido muscular, nervoso (crebro) e vsceras (pulmo, fgado, bao e rins)

3. Fase crnica da doena

Infeco crnica no homem (HI) Taquizotas - bradizotas

Toxoplasmose: Caractersticas clnicas

Forma Adquirida: Perodo de incubao (1 a 4 semanas) Fonte infeco (carga parasitria) Febre Mialgia Adenopatia Cefalia Cronicidade da infeco Leso ocular (Retinocoroidite) Marcador sorolgico IgM / IgG Reativao da infeco

Patologia

 Pacientes imunodeficientes (aidticos, imunossuprimidos):

Patologia

- Comprometimento do SNC: encefalite, resultando em leso intracerebral - Miocardite ou pneumonite

Patologia
Toxoplasmose congnita
Infeco primria aguda adquirida pela me at o sexto ms de gravidez. - Mais grave no primeiro trimestre da gravidez - 45% dos fetos so infectados. Destes: - 60% apresentam forma subclnica podendo desenvolver toxoplasmose ocular mais tarde; - 9% morte fetal; - 30% sofrem danos severos (hidrocefalia, calcificao cerebral, retinocoroidite e retardamento mental). Marcador sorolgico IgM e IgA Gravidade da doena no feto inversamente proporcional ao tempo de gestao.

Toxoplasmose congnita
Problemas graves em 20-30% crianas nascidas com toxoplasmose 90% retinocoroidite 69% calcificaes cerebrais 50% hidrocefalia ou microcefelia 33% retardo mental severo 60% perturbaes neurolgicas 23% retardo mental 53% problemas de viso 10% problemas de audio

Toxoplasmose congnita - cerebral

 Adquirida ps-nascimento: unilateral e autolimitante; Leso ocular freqentemente assintomtica, evidente devido a inflamaes recorrentes no futuro; Viso embaada e opacidades vtreas.

Toxoplasmose ocular

Congnita * Leses bilaterais: edema, degenerao, cataratas, estrabismo Pode s se manifestar na idade adulta

Neurotoxoplasmose pelo protozorio Toxoplasma gondii

Manifestaes clnicas em pacientes aidticos Sinais focais Febre (> 38C) Confuso Convulso Meningite Achados Tomogrficos Localizao nica Localizao mltipla (< 5) Localizao mltipla (> 5) 21% 71% 8% 78% 69% 64% 28% 25%

Aspectos da neurotoxoplasmose em paciente aidtico. Reativao da Infeco.

 Laboratorial Pesquisa do parasita Pesquisa de anticorpos Avaliao da imunidade especfica para fins de diagnstico Clnico (sugestivo)
Pesquisa do parasita ou de seus antgenos.

Diagnstico

Congnita
taquizotos

Inoculao em camundongo: sangue, lquido amnitico, lquido cfaloraquidiano, placenta (>30 dias) seroconverso e pesquisa de no peritneo e microcistos. Em cultura de clulas: fibroblastos (~ 1 semana) IFA Pesquisa de antgenos: sensvel s na fase aguda. PCR: lquido aminitico, sangue de cordocentese, lquido cfaloraquidiano.

Toxoplasmose congnita
DIAGNSTICO DA INFECO FETAL 1-ULTRASSONOGRAFIA: Rastreio de Espessamento anormal da placenta; Dilatao de ventrculos laterais; Necrose cerebral focal; Ascite;Calcificaes intracranianas mensalmente at o final da gravidez. 2-AMNIOCENTESE: A partir da 14 semana pode ser colhido lquido amniticoPCR 3-CORDOCENTESE: Entre a 20-24 semanas ( quando o feto j imunocompetente), para toda gestante com toxoplamose aguda ou reagudizada (excluindo portadoras de HIV). Sorologia IgM/IgG.

Diagnstico sorolgico da toxoplasmose

64000 16000 8000 4000 1000 256 64 16

IgG IgM
8 24 meses

Perfil I

Perfil II

Perfil III

Perfil I: Toxoplasmose recente: IgM elevada e IgG de baixa avidez. Perfil II: Transio: IgG de alta avidez e IgM baixa ou residual. Perfil III: Infeco latente ou crnica: IgG de alta avidez, ttulos intermedirios, IgM ausente.

Toxoplasmose Diagnstico de mulheres grvidas

IgG (+) IgM (-) = infeco crnica / imunidade IgG (+) IgM (+) = infeco recente ou aguda IgG (-) IgM (+) = infeco aguda IgG (-) IgM (-)= nunca teve contato com Toxoplasma

Risco!

Diagnstico do gato pesquisa de oocistos nas fezes

Tratamento
Nos 3 primeiros dias de tratamento Do 4 dia em diante Adultos 25 a 50 mg 500 mg a 1g 2-4x ao dia 5-10 mg/dia Crianas Pirimetamina Sulfadiazina cido folnico 2 mg/kg 25 mg/kg/dia 4x ao dia 1 mg 1 mg/kg 25 mg/kg/dia 4x ao dia 1 mg Tempo de tratamento

Pirimetamina Sulfadiazina cido folnico

75 a 100 mg 500 mg a 1g 2-4x ao dia 5-10 mg/dia

4 a 6 semanas

4 semanas

Fonte: SVS, 2006

Controle
Saneamento (pessoal e ambiental) Educao sanitria Evitar fezes e contato com gatos Controle de roedores Limpeza de caixas de areias Controle de insetos sinantrpicos No ingerir carne crua ou mal cozida No ingerir leite cru Higienizao adequada das verduras

Toxoplasmose vs. grvidas

* Pacientes que iniciam o pr-natal IgG positivas e IgM negativas so consideradas imunes e sem riscos de toxoplasmose congnita (exceto pacientes HIV-positivas ou imunocomprometidas que podem ter reativao da doena crnica e toxoplasmose congnita) ______________________________________________________ * Pacientes suscetveis (IgG e IgM negativas) devem evitar contgio. - evitar ingesto de carnes cruas, alimentos mal lavados e contato com felinos. - fazer rastreamento pr-natal de soroconverso durante o pr-natal por repetio da sorologia trimestral. - A espiramicina uma preveno secundria aps infeco e no pode deixar de ser feita.

Vacinas?
Objetivo : Inibir infeco inicial (IgA na mucosa intestinal) Inibir infeco geral (resposta celular Th1) Inibir infeco transplacentar (IgG)

Gold Standard e imunizao com T. gondii cepa S48

GM Bhopale, 2003 Microbes and Infection

Relao Parasita-Hospedeiro
__Controle parasita
a. reposta imune humoral b. reposta imune celular (Interferon- ) essencial para a converso de infeco aguda em crnica (taquizoita - responsvel pela disseminao do parasita) em crnica (bradizoita - responsvel pela perpetuao do parasita) c. resposta imune efetiva - formao de cistos imunessupresso - desencistamento e reativao - encefalite d. cistos persistem por anos! e. rupturas ocasionais cistos isolados - inflamao- necrose

__Escape mecanismos defesa hospedeiro

a. Vacolo parasitforo no fusognico b. No apresenta Ags superfcie clula hospedeira c. Cistos

Interao parasita-hospedeiro: Como reage o hospedeiro ao parasita?

1. Resposta celular
NK NO IFN T IL12 M

IFN, IL2 T (CD8+)

OH. PQ (Tromboxano)

2. Resposta humoral
(Antgenos reconhecidos: SAG1, protenas MIC etc.) IgG, IgM, IgA e IgE, complemento lisa taquizoitos na presena de anticorpos especficos

3. Controle de formas bradizoitos em cistos

- O rompimento ou no da parede do cisto parece depender do nvel de IFN e NO

- No caso de imunossupresso bradizoitas se transformam em taquizoitos novamente! Mensageiro: cido abscisico

A resposta diferente em lugares diferentes

Crebro (dados de estudos em camundongos)
* Clulas T possivelmente se ligam a receptores endoteliais antes da extravaso * Antgeno de parasitas apresentado por clulas glia e clulas T so ativadas para secretar IFN * Microglia e astrcitos participam na destruo do parasita e de clulas infectadas

Olhos
* Normalmente, o lquido intra-ocular contm imunosupressores * Taquizoitos e cistos so encontrados na neuroretina e no epitlio pigmentado da retina * IFN e TNF + NO parecem limitar a infeco ao menos no camundongo

Leitura citada e recomendada: Internet: Artigos encontrados no PubMed procurando por:

Toxoplasma gondii + vaccines Toxoplasma gondii + retinochoroiditis Toxoplasma gondii + pathology

Livros: Luis Rey: Parasitologia Markell, John, Krotoski: Medical Parasitology