ANTIMICROBIANOS

Sustancia producida por un microorganismo o elaborada en forma total o parcial por sntesis qumica, la cual inhibe el desarrollo o mata a otros microorganismos. Producto sintetizado por microorganismos = ATB Compuesto obtenido por sntesis qumica = QUIMIOTERAPICO

HISTORIA
1935 : Colorante rojo Prontosil (sulfanilamida) 1929 1940 : Fleming Florey et al. PENICILINA

1944 : ESTREPTOMICINA

Deben expresar las siguientes caractersticas:

abcdToxicicidad selectiva Accin bactericida No inducir resistencia Permanecer estable en los lquidos corporales y tener un largo perodo de actividad eSer soluble en humores y tejidos

fg-

No inducir respuesta alrgica en el husped

Tener un espectro de accin limitada

CLASIFICACION DE LOS ANTIBACTERIANOS

ORIGEN: Naturales o biolgicos Sintticos Semisintticos EFECTO: Bactericida Bacteriosttico MECANISMO DE ACCION:

 PARED CELULAR.. Penicilinas Cefalosporinas MEMB. CELULARPolimixina B Colistina Anfotericina B-Nistatina_Ketoconazol SINTESIS PROTEICA.Macrlidos-Cloramfenicol Aminoglucsidos-Rifampicinas ALTERACIONES DNA..Quinolonas- Metronidazol ANTIMETABOLITOSSulfas Trimetoprim

 ESPECTRO DE ACTIVIDAD: Amplio Intermedio Reducido ESTRUCTURA QUIMICA: Beta-Lactmicos (Penicilinas, Cefalosporinas)

Macrlidos (eritromicina)

Polipptidos (Colistina) Rifamicinas (Rifampicina) Aminoglucsidos (Gentamicina) Quinolonas (Norfloxaxina) Sulfonamidas (Sulfamidas) Fenicoles (CMP) Tetraciclinas Glucopptidos ( Vancomicina)

MECANISMO DE ACCION
Para que un ATB ejerza su ACCION, es necesario que llegue al FOCO DE INFECCION penetre en la clula bacteriana y alcance intracelularmente la concentracin necesaria

El ingreso puede ser por difusin o transporte activo y acta en un sitio determinado de la estructura bacteriana (target o diana) especfico para cada antibitico

INHIBICION SINTESIS DE PARED

Proceso complejo de 4 etapas: 1. Formacin del precursor n-acetilmurmico (Fosfomicina-Cicloserina) 2. Transporte del precursor (Bacitracina) 3. Formacin del polmero lineal (Vancomicina) 4. Transpeptidacin (beta-lactmicos)

Inhibicin de la sntesis de PARED por bloquear transpeptidasas (PBP):

Actn solamente sobre el microorganismo que est en fase de crecimiento. Gram (+) y (-) Interfieren en las uniones peptdicas para ir formando el peptidoglicano, creando puntos de debilidad (inhiben transpeptidasas) Favorecen la accin de las propias autolisinas bacterianas. Ej: penicilina ampicilina- cefalosporina de 1ra. y 2da. generacin

DAO DE LA MEMBRANA CELULAR

Actan desde el momento que el antibitico se pones en contacto con el microorganismo. Especialmente para Gram (-). Muy txicos : Polimixina B (uso local externo) Colistina (inyectale) Se unen a fosfolpidos de la membrana produciendo desorganizacin estructural, aumento de la permeabilidad y lisis celular. Los antifngicos polienos (anfotericina B, nistatina, ketoconazol), actan a nivel de membrana pero se unen al ergosterol o inhiben su sntesis. (Recordar que las bactrias carecen de esteroles en su membrana.)

 Los ATB que actan sobre la pared celular y la membrana citoplasmtica, tienen efecto BACTERICIDA

INHIBICION SINTESIS PROTEICA

TRADUCCION: es la formacin del polipptido para dar finalmente la protena. Esta seccin tiene tres etapas: iniciacin elongacin terminacin Ej.: sitio blanco a nivel de la subunidad 30S del ribosoma para Aminoglucsidos, y la subunidad ribosomal 50S para Cloramfenicol y Macrlidos (eritromicina-lincomicina) (Recordar que el ribosoma bacteriano es 70S a diferencia del eucariota que es 80S)

INHIBEN FUNCIONES DEL DNA Esta accin se realiza de 3 formas: Interfiriendo la replicacin del DNA (Quinolonas. Inhiben la subunidad A de la DNAgirasa))

Impidiendo la transcripcin (Rifamicinas.Inactiva la RNApolimerasa DNA dependiente, 1er, paso en la transcripcin))

Inhibiendo la sntesis de metabolitos esenciales: cido flico (Sulfonamidas Trimetoprim)

Mecanismos de modificaciones genticas

MUTACIONES

MECANISMOS DE RECOMBINACION
Proveen las bases de la variabilidad gentica en bacterias, que ser seleccionada por las condiciones del medio

 La recombinacin entre el gen transferido y el genoma de la clula husped suele suceder en condiciones de gran homologa entre ambos DNA Todos los mecanismos de transferencia gentica funcionan unidireccionalmente.

RESISTENCIA BACTERIANA
Es la disminucin o ausencia de sensibilidad de una cepa bacteriana a uno o varios antibiticos Primaria: natural o intrnseca. No existe blanco de accin para ese antibitico en ese microorganismo Secundaria: es la que se origina por seleccin que produce el antibitico a partir de una poblacin bacteriana sensible

MECANISMOS GENETICOS DE LA APARICION Y DISEMINACION DE LA RESISTENCIA ATB

Mutaciones cromosmicas puntuales: * genes pre-existentes

- Eventos de ocurrencia espontnea, persistente y se transmite por herencia - De un solo o varios pasos - Seleccin de mutantes resistentes a mltiple antibiticos

MECANISMOS GENETICOS DE LA APARICION Y DISEMINACION DE LA RESISTENCIA ATB

Adquisicin de nuevos genes: - Transformacin (poca importancia clnica) - Transduccin
(DNA plasmdico incorporado a transferido a otra bacteria) un fago y

- Conjugacin (Plsmidos R.)

- Transposicin: (plsmido a plsmido; plsmido a

cromosoma)

PLASMIDOS R
Transportan genes de resistencia a los antibiticos, y con frecuencia varios genes de resistencia son transportados por un nico plsmido R Algunos plsmidos R son el resultado de la seleccin por el antibitico Determinante r agrupacin de genes de resistencia del plsmido R (complejo de transposones) Factor de transferencia de resistencia regin con genes involucrados en la transferencia de resistencia mediante conjugacin

RESISTENCIA GENETICA

Figura 1

RESISTENCIA GENETICA

MECANISMOS DE RESISTENCIA
INHIBICION

ENZIMATICA (-lactamasas; transferasas

ALTERACION DEL SITIO BLANCO ( Ribosoma PBP) EFLUJO (Extraccin del ATB)

MODIFICACIONES DE LA PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA (Porinas)

MECANISMOS DE RESISTENCIA EN ATB BETA-LACTAMICOS

1) PRODUCCION DE BETA-LACTAMASAS 2) ALTERACION DE (PBP) - Reduccin en la afinidad en las PBP pre-existentes - Prdida o aumento en la cantidad de PBP - Aparacin de PBP nuevas (ej PBP 2a) 3) ALTERACION DE PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA EXTERNA 4) EFLUJO

PARED: SITIO BLANCO DE ATB BETA-LACTAMICOS

Accin de la beta-lactamasa

ENZIMAS BETA-LACTAMASAS
Enzimas presentes en microorganismos Gram (+) y (-) En Gram (+) son extracelulares, inducibles por la presencia del sustrato, tienen alta afinidad por este.(Ej beta-lactamasa para penicilinas y cefalosporinas) Su sntesis est mediada por plsmidos, transposones y genes cromosmicos En microorganismos Gram (-) son constitutivas y estn unidas a la clula, baja afinidad por el sustrato. (Ej beta-lactamasa de espectro extendido ESBL)

Mediadas por genes plasmdicos y cromosomas

-lactamasas susceptibles a inhibidores de -lactamasas (ESBL)

PBP modificadas, que no pueden ser reconocidas por el antibitico

La modificacin de las G (-)

PORINAS de la membrana externa de los

Disminuye su permeabilidad a los antibiticos beta-lactmicoos, y as el antibitico no puede interactuar con su protena blanco (PBP)

Figura 4

EFLUJO
LA BACTERIA ES CAPAZ DE EXPULSAR EL ATB MEDIANTE UN MECANISMO DE TRANSPORTE ACTIVO QUE CONSUME ATP

Figura 6

AMINOGLUCOSIDOS: Modificacin del sitio blanco ribosomal; hidrlisis enzimtica (estearasa);

Alteracin de los sistemas de produccin energtica, cierra los canales inicos, de modo que el ATB no puede ingresar al citoplasma

Figura 5

TECNICAS MOLECULARES PARA LA DETECCION DE RESISTENCIA

Hibridacin con sondas especficas Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) Mtodos por unin especfica por complementariedad de bases

VENTAJAS
Pueden obtenerse resultados directamente del aislamiento clnico Se evala el genotipo del microorganismo, mientras que las tcnicas de sensibilidad slo definen el fenotipo expresado La evaluacin del genotipo, para algunos casos, es ms rpida que el fenotipo, debido al crecimiento lento del microorganismo (ej Mycobacterium tuberculosis)

DESVENTAJAS
Poca sensibilidad si hay pocos microorganismos en la muestra Se requiere un ensayo diferente para cada resistencia a antibitico buscada La resistencia de un microorganismo a un antibitico puede ser consecuencia de la combinacin de varios mecanismos asociados No son de utilidad ante un mecanismo de resistencia no definido No existen normas para efectuar estos mtodos genticos

TEST DE SUSCEPTIBILIDAD A ANTIBIOTICO

CUALITATIVOS: Test por difusin con disco (antibiograma) CUANTITATIVOS ( CIM): Test de dilucin en Caldo o Agar