Dr M.

Toukam FMSB/HGY

OBJECTIFS
I- Dfinir lhemoculture et decrire les conditions de sa realisation II- Dvelopper les principes de lanalyse des rsultats dhemoculture

PLAN
Definition et Generalites 2. Indications dune hemoculture 3. Techniques de lhemoculture 4. Interpretation des resultats dune hemoculture
1.

1. Dfinition et Gnralits
Lhmoculture est la culture du sang pour rechercher les

germes.

Cest un examen essentiel dans la recherche tiologique des

maladies infectieuses a dissmination sanguine.

EIle consiste en un prlvement aseptique de sang veineux

dans des milieux spcifiques monophasiques (liquide seule) ou diphasiques (liquide + solide) de prfrence qui sont ensuite incubs pendant plusieurs jours a plusieurs semaines dans des conditions favorables a la croissance des germes.

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 Elle est effectue si possible avant la mise en route d'une

antibiothrapie.
L'hmoculture permet galement de raliser un

antibiogramme sur le germe isol, et oriente ainsi le mdecin dans le choix du traitement antibiotique.
On ralise en gnral 3 prlvements diffrents, quelques

heures d'intervalle, effectus si possible au moment d'un pic d'hyperthermie ou d'hypothermie ou lors de frissons qui signent une dcharge bactrimique.

 Une hmoculture positive signe une bactrimie.

Une bactrimie accompagne d'un syndrome

infectieux est une septicmie. Le choc septique est la forme grave de septicmie; le pronostic vital est souvent en jeu.

 Les renseignements cliniques doivent parfois orienter

le laboratoire sur le germe recherch comme Listeria monocytogenes, les mycobactries, les bactries croissance lente ou difficile (Brucella, Campylobacter, Legionella, Mycoplasmes, Leptospira, Groupe HACEK, Streptocoques dficients, Bartonella), les champignons pour permettre de choisir les milieux de culture adaptes (Bactec, Isolator ).

2. Indications de lhemoculture
Fievres au long cours
Hypothermie Suspicion dendocardite Choc infectieux

3. Techniques de lhmoculture
Prlvement Le prlvement de sang veineux se fait le plus souvent dans la veine situe au pli du coude. 1 a 2 ml pour lenfant 5 a 10 ml pour l adulte Les conditions dasepsie rigoureuses doivent tre respectes pour viter une contamination (germes de la peau le plus souvent).

Ensemencement Le sang prlev est ensemenc dans deux types de flacons: - un flacon arobie pour les germes arobies et aroanarobies - un flacon anarobie (sans oxygne) pour les germes anarobies et les germes aroanarobies.

 Ces flacons sont ensuite incubs dans une tuve

37 C, si lon ne dispose pas dautomate. leur aspect (recherche d'un trouble, de petites colonies sur le tapis de globules rouges au fond, disque moir sous la surface, etc.) sera rgulirement vrifi pour rechercher la prsence de germe. En gnral, on repique galement ces flacons, c'est-dire qu'on en ensemence quelques gouttes sur des gloses nutritives riches, gnralement 24 et / ou 48 h aprs le prlvement. On garde les cultures en moyenne une quinzaine de jours.

 Si lon utilise un automate, les flacons sont tests a

intervalles de quelques minutes pour dceler des signes de croissance bactrienne (acidification, diminution de l'oxygne ou prsence de CO2). En cas de dtection de bactries une alerte est donne pour que les flacons soient rapidement traits par un technicien.

4. Interpretation des rsultats

Rsultat ngatif Les diffrentes hmocultures sont striles, aucun germe na pouss. - Une hmoculture ngative ne permet pas forcement de conclure a une absence d'infection, mais simplement qu' l'instant prcis o le prlvement a t effectu il n'y avait pas de germes dans le sang. - Le germe responsable de l'infection a des exigences culturales trs particulires et qu'il ne pousse pas dans les milieux de cultures usuels. Le rsultat est alors faussement ngatif. - Il peut sagir dune infection virale: Seules les bactries et les champignons sont isols dans les flacons usuels dhmocultures. - Une antibiothrapie avant hmoculture peut galement donner un rsultat faussement ngatif (infection dcapite).

Rsultat positif Les cultures ne sont pas striles, un germe est retrouv. En cas de culture positive, il faut effectuer des repiquages pour identifier prcisment le germe incrimin. Les cultures sont positives au bout de quelques jours, mais parfois les germes poussent plus lentement, soit parce que le patient a t trait par des antibiotiques avant le prlvement, soit parce qu'il s'agit de germes croissance lente. Une fois isol, il faut faire lantibiogramme: tester la sensibilit de ce germe diffrents antibiotiques.

 Devant des hmocultures positives, on se retrouve

devant plusieurs cas de figures qui ncessitent la prise en compte de la clinique : - Hmocultures positives avec un seul germe retrouv : si c'est une bactrie pathogne spcifique, le rsultat n'est significatif que si l'on retrouve le germe sur un ou plusieurs flacons.

- Hmocultures positives avec un seul germe retrouv : si c'est une bactrie pathogne opportuniste, le rsultat sera significatif si on le retrouve sur plusieurs flacons, mais on conclura une contamination probable si on ne le retrouve que sur un flacon.
- Hmocultures positives avec isolement de plusieurs germes : terrain dbilit (dficit immunitaire, cirrhose ...), foyer infectieux digestif ou cutan, cholcystite (polymicrobisme habituel), souillure lors du prlvement cause d'une mauvaise technique (trs frquent).