EGFR Tyrosine Kinase Inhibitors Activate Autophagy as a Cytoprotective Response in Human Lung Cancer Cells

Weidong Han, Hongming Pan, Yan Chen, Jie Sun, Yanshan Wang, Jing Li, Weiting Ge, Lifeng Feng, Xiaoying Lin, Xiaojia Wang, Xian Wang, Hongchuan Jin

INTRODUO

CANCER DE PULMO

O cncer de pulmo representado em quase 95% dos casos por carcinomas, sendo os 5% restantes representados sobretudo por sarcomas e linfomas. Clinicamente, os carcinomas pulmonares so classificados em carcinomas nonsmall-cell lung cancer (NSCLC) e carcinomas de pequenas clulas.

INTRODUO MODALIDADES DE TERAPEUTICAS ONCOLGICAS Cirurgia Radioterapia Quimioterapia Terapias Biolgicas Terapias Moleculares

Novas Abordagens Teraputicas

Terapia Gnica Terapia Molecular Dirigida (TMD -Terapias-alvo.) Terapia Celular

INTRODUO

Teraputica Molecular Dirigida Agir diretamente no foco

PROLIFERAO CELULAR

EGFR

APOPTOSE METASTASE ANGIOGENESE

INTRODUO

INTRODUO

EGFR
3 VIAS DE SINALIZAO

Ras/MAPK

PI3K/Akt

JAK/STATs

INTRODUO

Autofagia
A

INTRODUO

Fig 1-Inibidores do receptor do factor de crescimento epidermal (EGFR); A GEFiTINIB (Iressa, AstraZeneca); B ERLOTINIB (Tarceva, Genentech).

OBJETIVO

Estudar o papel da autofagia associada ao tratamento com TKIs no desenvolvimento do cancro do pulmo

MATERIAIS E MTODOS Western blot

Anticorpo e Reagentes Cultura celular Citotoxidade

RNA de interferncia

Microscopia a laser confocal imunofluorescente para LC3 e co-localizao do lisossoma

PCR Real-time

Microscopia eletrnica

Anlise estatstica

RESULTADOS INDUO DE AUTOGAFIA POR EGFR TKI

LC3->Marcador bioqumico especfico para autofagia.

Linha celular A549

Ambos inibidores aumentaram os nveis de mRNA. Confirmando a induo de autofagia

INIBIO DA VIA DE SINALIZAO Akt/mTOR/P70s6k por EGFR-TKIs

Bloqueio de autofagia AUMENTA induzida por EGFR-TKI morte celular

Bloqueio de autofagia AUMENTA morte celular induzida por EGFR-TKI

Linha celular A549

EGFR-TKIs induziu autofagia em celulas cancerigenas com baixo nvel de expresso de EGFR

Consideraes finais
Este trabalho reforou a noo de que as clulas cancerginas podem sobreviver em um ambiente estressante, com a inibio de vias envolvidas na oncognese, atravs da induo de autofagia. Foi confirmado bioquimicamente e biologicamente que a autofagia pode ser activada por GEFITINIB OU ERLOTINIB, em duas linhas celulares de cancro do pulmo A549, H1299. Ambos TKIs podem induzir autofagia mesmo quando a expresso de EGFR foi reduzida. Embora GEFITINIB e ERLOTINIB foram desenvolvidos como inibidores especificos direcionados para o dominio cinase da EGFR, entretanto, resultados recentes indicam que estes 2 inibidores podem ter outros alvos, como no-receptores de tirosina cinase que atuam tambm no UPSTREAM da via PI3K/Akt/mTOR

Consideraes finais
A inibio da autofagia tem o potencial para melhorar a eficcia clnica de EGFR-TKI para o tratamento do cancro. Assim, em combinao de estratgias teraputicas que visam inibir autofagia em doentes tratados com quimioterapia convencional ou terapia dirigida com EGFR-TKI representa uma abordagem promissora com maior eficcia para pacientes com cancro.

Grazie per la vostra attenzione/ Obrigado pela vossa ateno!