EUMYCETOS

CITOLOGA Y REPRODUCCIN FISIOLOGA Y METABOLISMO ----------------Tcnicas de laboratorio y Materiales utilizados en Micologa

HONGOS O EUMYCETOS
SON ORGANISMOS QUE POSEEN NCLEO DEFINIDO Y UNA PARED CELULAR CUYO COMPONENTE PRINCIPAL ES LA QUITINA, AUNQUE EN ALGUNOS GRUPOS TAMBIN SE ENCUENTRA CELULOSA, MANANOS Y GLUCANOS. SU CUERPO SE DENOMINA THALLO O MICELIO, Y ESTE, DA ORIGEN AL MICELIO DE FRUCTIFICACIN, QUE A SU VEZ, PUEDE ORIGINAR UNA REPRODUCCIN ASEXUAL, COMO SEXUAL O AMBAS A LA VEZ.

 EN CUANTO A SU ORIGEN Y EVOLUCIN SON POLIFILTICOS Y PERTENECEN AL REINO FUNGI (PROTISTAS SUPERIORES) PORQUE POSEEN CITOLOGA EUCARIOTA Y SIN MOVILIDAD. POR SU METABOLISMO SON CONSIDERADOS HETERTROFOS (AUSENCIA DE CLOROFILA) Y CRECEN EN UN AMPLIO RANGO DE PH Y TEMPERATURA (EURITRMICOS). SUS COLONIAS PRESENTAN ASPECTOS MUY VARIADOS, QUE VAN DESDE ALGODONOSO, LANOSO, VELLOSO, HASTA CREMOSO O PASTOSO EN OTROS.

Hongos o Eumycetos
- Reino FUNGI CITOLOGA EUCARIOTA. UN CUERPO; THALLO O MICELIO (UNICELULAR O FILAMENTOSO). SIN MOVILIDAD. FRUCTIFICACIN ASEXUAL Y SEXUAL. METABOLISMO HETERTROFO / FUENTE H.C. DESARROLLAN EN UN AMPLIO RANGO DE PH y TEMPERATURA ( 0 - 50 C EURITRMICOS )

POLIFILTICOS, POR ORIGEN Y EVOLUCIN. (ALGAS > < HONGOS > < PROTOZOARIOS)

M I C E L I O
DE ACUERDO CON SU FUNCIN SE DISTINGUEN: MICELIO VEGETATIVO ENCARGADO DE LA NUTRICIN, SOSTN, RESISTENCIA, DISEMINACIN, ETC. MICELIO DE FRUCTIFICACIN VINCULADO CON LA REPRODUCCIN, ESTO ES, LA FORMACIN DE NUEVOS INDIVIDUOS QUE POSEEN Y MANTIENEN TODAS LAS CARACTERSTICAS DE LA ESPECIE.

El MICELIO VEGETATIVO puede ser:

Tipo LEVADURAS (UNICELULAR). Tipo MOHOS (PLURICELULAR).

Tipo LEVADURAS o levaduriforme:

ORIGINA CLULAS SIMPLES AISLADAS, OVOIDES O ESFRICAS, QUE SE MULTIPLICAN POR BROTACIN, ESCISIN (BIPARTICIN) O PROCESO INTERMEDIO.

PSEUDOHIFAS
Algunos hongos producen a partir de una sola clula y por brotacin sucesiva, cadenas lineales o ramificadas de clulas, pero sin los septos caractersticos, el micelio pseudotabicado mal llamado pseudomicelio.

Eumycetos Tipo levaduras

LEVADURAS
MICELIO UNICELULAR

GRAM: Micelio unicelular

GRAM: PSEUDOHIFAS (Pseudomicelio)

 Tipo MOHOS:
EST REPRESENTADO POR FILAMENTOS CON RAMAS DISPUESTAS EN TODAS DIRECCIONES (HIFAS), CONFORMANDO EL MICELIO FILAMENTOSO..
ESTE TIPO DE MICELIO PUEDE PRESENTAR PAREDES TRANSVERSALES (TABIQUES O SEPTOS) A CIERTOS INTERVALOS:

MICELIO FILAMENTOSO TABICADO.

 CUANDO EL PROTOPLASMA DE LAS HIFAS NO POSEE SEPTOS, se denomina:

MICELIO CONTINUO O CENOCTICO.

EUMYCETOS Tipo Mohos

COLONIAS DE MOHOS

MICELIO FILAMENTOSO TABICADO

AMANITA

El micelio vegetativo puede desarrollar con respecto a la superficie del medio de cultivo o substrato, en tres sentidos:
AREO. RAMPANTE (adherido al medio). SUMERGIDO (en el medio de cultivo).

Las temperaturas de incubacin son de 28C y 37C segn se trate del origen de la muestra.
Los hongos oportunistas y patgenos primitivos productores de micosis profundas crecen en ambas temperaturas.

Los ambientales se incuban a temperatura ambiente. Los hongos, a diferencia de las bacterias comunes tienen crecimiento lento. Los tiempos de incubacin van desde 7 a 60 das.

FORMAS ESPECIALES DEL MICELIO VEGETATIVO

EL MICELIO VEGETATIVO ADOPTA DIFERENTE MORFOLOGA PARA FACILITAR DETERMINADAS FUNCIONES VINCULADAS A SU ADAPTACIN AL MEDIO Y SUPERVIVENCIA.

ELEMENTOS DE PROPAGACIN (DISPERSIN, DISEMINACIN, MULTIPLICACIN, ETC.) NACEN EN CUALQUIER PUNTO DEL THALLO Y SE MULTIPLICAN VEGETATIVAMENTE; POR CIERTA SIMILITUD CON LAS ESPORAS VERDADERAS SE LOS CONOCE O DENOMINA THALLOSPOROS (CONIDIOS).

A. BLASTOSPORAS - BLASTOCONIDIOS: CLULAS QUE SE MULTIPLICAN POR BROTACIN (GEMACIN) Y ESTN PRESENTES, EN GENERAL, EN HONGOS DE MICELIO UNICELULAR AUNQUE TAMBIN SE PRODUCEN EN LOS HONGOS DE MICELIO FILAMENTOSO.

ELEMENTOS DE NUTRICIN A. RIZOIDES: HIFAS ESPECIALES QUE PENETRAN

EN EL SUSTRATO ALIMENTICIO; SE RAMIFICAN A MODO DE RAICILLAS DESEMPEANDO FUNCIONES DE ABSORCIN DE LOS NUTRIENTES. SE OBSERVAN EN MOHOS DE MICELIO FILAMENTOSO CONTINUO.

B. HIFAS DE PERFORANTES E INFECTANTES: Poseen diferentes formas. Invaden las clulas de la epidermis del hospedador, atraviesan su pared celular y penetran en su interior. Son ricas en contenido enzimtico, que favorecen su poder infectante.

ELEMENTOS DE RESERVA Y RESISTENCIA A. Clamidosporas: clula de pared gruesa que se forma en el recorrido de una hifa o en su parte terminal. Pueden ser terminales o intercalares, rico en sustancias de reserva. Funcin: perdurar en ambientes desfavorables.

B. Esclerotes: ovillado de hifas, una zona

externa mas densa y esclerosada (pseudoparnquima) y una interna laxa, donde las hifas permanecen definidas y viables, el prosnquima. Es multicelular y visible.

FISIOLOGA Y METABOLISMO FNGICO

Los hongos necesitan para su crecimiento carbono, y para ello utilizan fuentes de carbono qumicamente complejas; el nitrgeno es metabolizado a partir de sales sencillas como nitratos y amonio o de otras sustancias de origen orgnico (proteinas). Tambin son importantes los minerales como el fsforo,. magnesio,. azufre,. cobre,. hierro,.potasio,y.calcio,.etc.

Los monosacridos y otros compuestos pequeos e hidrosolubles que contienen carbono son el alimento ms importante y asimilable (con mayor rapidez) por los hongos. Independientemente de todos los sustratos que pueden degradar para su crecimiento, la glucosa es el azcar ms utilizado. Fuente de carbono universal.

MICELIO DE FRUCTIFICACIN
REPRODUCCIN ASEXUAL Este tipo de micelio originado a partir del micelio vegetativo, se caracteriza por poseer hifas frtiles (esporforos / conidiforo), especializadas para la reproduccin. Generalmente se diferencian del micelio vegetativo (somtico) por su morfologa y cambios en su pigmentacin.

 La R.A. es la ms importante para la diseminacin o multiplicacin de las especies.

Se repite varias veces al ao (en el laboratorio ocurre tantas veces como nuevos repiques se practiquen) originando infinita cantidad de nuevos individuos a travs de esporas asexuales.
Podra generalizarse que, la reproduccin asexual involucra cualquier mtodo de proliferacin que origine nuevos individuos.

ESPORAS: clula diferenciada.

Unidad de reproduccin que mantiene las caractersticas de la herencia, ya sean de origen asexual o sexual. Las esporas fngicas toman el nombre acorde con su origen y/o el fruto que las produce o contiene.

CLASIFICACIN DE LAS ESPORAS Existen diversos tipos y se los puede caracterizar segn:
MORFOLOGA: esfricas, ovoides, piriformes, aciculares, helicoidales, oblongas, reniformes y vermiformes. NMERO Y DISPOSICIN de sus clulas (tabiques): amerosporas, didimosporas, fragmosporas, dictiosporas, etc.

 ANATOMA: en general estn compuestas por doble pared, una externa, el exosporio, y una interna, endosporio. La pared puede ser lisa o rugosa. PIGMENTACIN: esporas de colores claros, amarillas, verdes, rojas, etc. que se denominan hialosporas. Esporas de colores oscuros (pigmento melnico), castaos, caf, negros, etc. las feosporas.

Amerosporas (Sin septos)

Didimosporos (1 tabique)

Fragmosporos hialinos (Hialosporos)

Dictiosporos (Esporos muricados)

EJEMPLOS DE ESPORAS
CONIDIOS: ESPORAS ASEXUALES EXTERNAS, EN
FUNGI IMPERFECTI (DEUTEROMYCETES).

ESPORANGIOSPORAS: ESPORAS ASEXUALES

INTERNAS DENTRO DE ESPORANGIOS EN LOS ZYGOMYCETES.

ASCOSPORAS: ESPORAS SEXUALES DENTRO DE

ASCOS (FRUTOS) EN ASCOMYCETES.

ESPORAS SEXUALES INTERNAS La reproduccin sexual de los hongos se realiza como consecuencia de la unin de 2 gametas (ncleos) compatibles. Esta accin se produce en tres etapas: PLASMOGAMIA la fusin de dos protoplastos. (reunin en una clula de 2 ncleos haploides (n + n).

MEIOSIS dos divisiones nucleares consecutivas, una de las cuales es reduccional. Como resultado de la misma se producen cuatro ncleos haploides (n+n+n+n). CARIOGAMIA fusin de dos ncleos y formacin de un ncleo diploide (2n).

TAXONOMIA
ESTUDIOS MACRO Y MICROMORFOLGICOS DE LAS CEPAS

Aspergillus ochraceus

Aspergillus nidulans (Anamorfo)

CONIDIOS EN CADENETA

CONIDIOS EN CABEZUELA

Fragmoconidios (feosporos) Dreschlera sp.

Ctedra de Micologa Medica. Carrera de Microbiologia. FCV.UNLP. EHR 09

CLEISTOTECIOS
CON HIFAS ORNAMENTALES

Emericella nidulans (TELEOFORMO)

TCNICAS.MATERIALES. MEDIOS DE CULTIVO y REACTIVOS.

Las tcnicas micolgicas estn especialmente vinculadas a demostrar la morfologa de los hongos macro/microscpica (macro / micromorfolgica).

Para este fin son necesarios algunos materiales: ansas en anillo, en gancho, esptulas, agujas de diseccin, portaobjetos, cubreobjetos, lquidos de montar, escala micromtrica, etc.

MTODOS DE TRABAJO
En general los preparados se hacen en fresco entre porta y cubreobjetos, adicionando una gota de lquido de montar como: Guegun, Patterson, Lactofenol o inclusive una gota de solucin fisiolgica.
Los medios de cultivo comunes para aislamiento y crecimiento de hongos son Agar miel de Sabouraud, Agar glucosado de Sabouraud, Czapeck-Dox y Agar papa glucosa.

Materiales (rutina)
Ansa en anillo: para trabajar con hongos tipo levaduriformes. Ansa en gancho: para trabajar con hongos tipo mohos o filamentosos. Esptulas: para cortar el medio de cultivo o sembrar por estra en profundidad. Agujas de diseccin: para disgregar o separar el material en el preparado (portaobjetos). Escala micromtrica graduada: medicin de clulas y otros elementos fngicos.

Lquidos de montar
Guegun: Azul Cotton (Azul de algodn, Azul marino de metilo), Sudan III, tintura de yodo y cido lctico. Se observan tanto micelio como frutos con un tinte azul claro o celeste, vacuolas de lpidos (color rosa) y elementos de reserva hidrocarbonados (color caoba-marrn claro). Patterson: Acetato de potasio, alcohol metlico, glicerina y agua destilada. Se observan los hongos por refringencia o contraste ya que el reactivo es incoloro..

MEDIOS DE CULTIVO.
Para cultivo y aislamiento de mohos y levaduras

Agar miel de Sabouraud Peptona 20 g Miel de abejas 80 g Agar 20 g Agua corriente csp 1000 ml

Agar Sabouraud glucosa

Mohos y levaduras
Peptona 10 g Glucosa 40 g Agar 20 g Agua corriente csp 1000 ml

CLASIFICACIN SIMPLIFICADA
BASADA EN LAS FORMAS REPRODUCTIVAS ASEXUALES Y SEXUALES

Clase ZIGOMYCETES

ZIGOSPORAS

Clase ZYGOMYCETES

ZIGOSPORAS HETEROTLICAS

PERITECIO

ASCOCARPO Ascos con ascosporas

Clase Deuteromycetes
(Fungi Imperfecti)

Micromorfologa
Aspergillus sp (ANAMORFO)

Clase Basiomycetes