II-164 - AVALIAO DA PRESENA E ATUAO DE BACTRIAS NITRIFICANTES EM FILTRO BIOLGICO PERCOLADOR COM LATERAIS ABERTAS

Paulo de Castro Viera Engenheiro Sanitarista e Ambiental, Doutorando em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos / SMARH UFMG. Marcos von Sperling(1) Engenheiro Civil. Doutor em Engenharia Ambiental pelo Imperial College, Universidade de Londres. Professor Titular do Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental da UFMG. Juliana Calabria de Arajo Biloga. Doutora em Hidrulica e Saneamento pela Escola de Engenharia de So Carlos da Universidade de So Paulo. Professora adjunta do Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental da /UFMG. Renata Corts de Oliveira Graduanda em Cincias Biolgicas pela PUC MG. Clarissa Fernandes da Silva Biloga, Especialista em Tecnologia Ambiental pela UFMG, mestranda em Engenharia Ambiental da UFOP. Endereo (1): Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental; Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antnio Carlos 6627 Escola de Engenharia, Bloco 1 - sala 4622; 31270-901 - Belo Horizonte Brasil. Tel.: +55 31 3409-1935 (e-mail: marcos@desa.ufmg.br) RESUMO Este trabalho objetivou relacionar a abundncia das bactrias nitrificantes (oxidadoras de amnia e de nitrito) com as eficincias de remoo de N-amoniacal (converso a nitratos) em um filtro biolgico percolador sem paredes laterais (denominado FBPA), sob condies diferenciadas de altura e cargas, atuando no ps-tratamento de efluentes de reator UASB (equivalentes populacionais entre 250 e 500 habitantes). Os efluentes do sistema (UASB/FBPA) foram monitorados atravs dos parmetros OD, DQO, DBO, NTK, N-amoniacal, nitrito e nitrato por meio de amostragens compostas de 24 horas e uma frequncia de coleta de trs vezes por semana. O biofilme do FBPA foi caracterizado em diferentes profundidades (topo, 50 cm, 160 cm e 270 cm) quanto abundncia de bactrias oxidadoras de amnia (BOA) e de bactrias oxidadoras de nitrito (BON) pela tcnica dos tubos mltiplos (nmero mais provvel - NMP). O FBPA foi operado em trs etapas com taxas de aplicao superficial (TAS) mdia de 4,1 e 9,2 m/m.d, resultando em cargas orgnicas volumtricas (COV) mdias de 0,08 a 0,16 kg DBO/m.d. Os resultados obtidos no efluente do FBPA apresentaram concentraes mdias de Namoniacal de 20 a 25 mg/L e de nitrato de 1,95 a 9,16 mg/L. Os valores encontrados para as BOA foram de 10 2 a 106 NMP/mL a 50 cm, 104 a 108 a 160 cm e de 106 a 1011 a 270 cm. Os valores mnimos e mximos observados de NMP/mL para as BON foram de 103 e >109 a 50 cm, de 103 e >1013 a 160 cm e para 270 cm de 103 e 1011. As abundncias das BON predominaram em relao s BOA na maior parte de todo o perodo estudado. Os valores encontrados para as BON apresentaram tendncia de diminuio ao longo da profundidade do FBPA. Mesmo apresentando as maiores abundncias de bactrias nitrificantes, e temperaturas mais prximas das condies timas de desenvolvimento destas bactrias, alm de melhores condies operacionais aplicadas em termos de carga orgnica e nitrognio, no foi observada nesta condio uma maior eficincia de remoo de N-amoniacal. Neste sentido, acredita-se que alm de outros fatores, o tempo de residncia do lquido no FBPA possa ter sido um dos fatores limitantes que mais impactou e influenciou nas eficincias de remoo de N-amoniacal. PALAVRAS-CHAVE: Esgotos Sanitrios, Filtro Biolgico Percolador, Nitrificao, Bactrias Oxidadoras de Amnia e Bactrias Oxidadoras de Nitrito. INTRODUO Para a reduo dos nveis de lanamento da amnia presente nos esgotos sanitrios, os processos biolgicos so os mais utilizados, devido sua simplicidade, eficincia e menores custos, quando comparados com processos fsico-qumicos. Um dos sistemas mais empregados recentemente o de reatores UASB seguidos por filtros biolgicos percoladores (FBPs). No entanto, em FBPs dimensionados com as taxas (hidrulicas e orgnicas) convencionais para a remoo da matria orgnica remanescente de reatores UASB, tem se observado uma dificuldade na remoo do nitrognio
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amoniacal por nitrificao. Desta forma, acredita-se que a compreenso da comunidade bacteriana responsvel pela nitrificao em FBPs seja essencial para a otimizao do projeto e operao desses sistemas, quando se almeja a remoo satisfatria da amnia. A nitrificao consiste na oxidao da amnia a nitrato realizada por microrganismos quimiolitoautotrficos (ou quimioauttrofos) sob condies aerbias estritas. A primeira etapa (oxidao da amnia a nitrito) geralmente associada s bactrias do gnero Nitrosomonas, embora outras como Nitrosococcus e Nitrosospira possam contribuir para o processo de converso do nitrognio amoniacal a nitrito. Na segunda etapa (oxidao do nitrito a nitrato), a oxidao do nitrito a nitrato est associada comumente ao gnero Nitrobacter. No entanto, bactrias do gnero Nitrospina, Nitrococcus e Nitrospira foram encontradas em reatores com biofilme (GUJER, 2010; USEPA, 2009; GERARDI, 2006). Para que ocorra nitrificao em reatores aerbios com biofilmes, como no caso dos FBPs, necessrio que eles sejam dimensionados com baixas cargas, para permitir que as bactrias nitrificantes no sejam dominadas pelas heterotrficas na competio por alimento e oxignio disponvel. importante considerar que devido taxa de reproduo das bactrias nitrificantes ser mais lenta do que a das bactrias heterotrficas, necessrio garantir a permanncia das nitrificantes no sistema pelo maior tempo possvel, evitando que sejam varridas do sistema ou eliminadas por predadores (USEPA, 2009; METCALF & EDDY, 2003). Gerardi (2006) comenta que em condies ideais, o tempo de reproduo de bactrias nitrificantes de aproximadamente 8 a10 horas. Em funo de condies adversas que ocorrem naturalmente em sistemas de tratamento, como no caso de lodos ativados, o tempo de reproduo destas bactrias pode variar de 2 a 3 dias para atingir uma efetiva nitrificao. Isto implicando na necessidade de elevados tempos de residncia celular para que ocorra um estabelecimento da populao de bactrias nitrificantes que so capazes de conduzir a nitrificao eficiente. Associado s condies operacionais (TAS e COV aplicadas e recirculao do efluente), os fatores fsicos (caractersticas do meio suporte e altura), conjuntamente com os fatores ambientais (concentrao de OD e Namoniacal; pH, alcalinidade, temperatura; e agentes inibidores) e os mecanismos de transferncia de massa do biofilme representam os principais agentes reguladores do desempenho na remoo de nitrognio amoniacal (nitrificao) nos FBPs (USEPA, 2009; FLORNCIO et al., 2009; METCALF & EDDY, 2003; WEF, 1992). Segundo Gerardi (2006) estes agentes reguladores conduziram a uma nitrificao completa ou incompleta, uma vez que no processo existem dois grupos de bactrias nitrificantes e duas reaes bioqumicas. Quanto s configuraes possveis, os FBPs podem ser projetados para a remoo secundria combinada de DBO e amnia, conhecidos como sistemas de nico estgio, ou sistemas que realizam a nitrificao terciria (sistema de dois estgios). O sistema de nico estgio, alvo desta pesquisa, geralmente consiste em FBPs em paralelo recebendo o efluente do tratamento primrio, com uma taxa aplicada inferior de FBPs para a remoo exclusiva de matria orgnica. Para este caso, espera-se que a remoo de DBO ocorra principalmente nas camadas mais altas do meio suporte do FBP e, medida que falte substrato (DBO) nas camadas mais baixas, ocorra tambm a nitrificao (USEPA, 2009; METCALF & EDDY, 2003; WEF, 1992; USEPA, 1991). Neste sentido, est sendo pesquisada uma concepo inovadora de FBP, desenvolvida no DESA-UFMG e denominada filtro biolgico percolador aberto (FBPA). Esta unidade no possui paredes laterais, o que permite uma circulao mais intensa do ar, com maior aporte de oxignio para as bactrias nitrificantes. Dessa forma, este trabalho teve como objetivo quantificar bactrias nitrificantes e relacionar a abundncia das bactrias oxidadoras de amnia e de nitrito com as eficincias de remoo do N-amoniacal (converso a nitratos) no FBPA sob diferentes taxas de aplicao hidrulica. MATERIAL E MTODOS Esta pesquisa foi conduzida no Centro de Pesquisa e Treinamento em Saneamento (CePTS) UFMG/COPASA, localizado na ETE Arrudas (Estao de Tratamento de Esgoto da cidade de Belo Horizonte/MG). O aparato experimental utilizado foi constitudo pelo sistema combinado, reator anaerbio de manta de lodo (UASB) seguido por filtro biolgico percolador aberto (FBPA) sem decantador secundrio, aplicado ao tratamento de esgotos sanitrios. Os esgotos sanitrios, antes de serem encaminhados para o sistema UASB/FBPA so tratados preliminarmente pelas etapas de gradeamento e desarenao da ETE Arrudas (COPASA MG).

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Para o tratamento prvio dos esgotos encaminhados ao FBPA foram utilizados dois reatores UASB em escala de demonstrao, reatores UASB geminados e o reator UASB do sistema compacto UASB/FBP cilndrico, sendo que cada reator UASB foi utilizado separadamente em cada etapa de operao do FBPA. A utilizao de dois reatores UASB diferentes durante a pesquisa foi devido vazo requerida em cada fase de operao do FBPA. Observa-se que os reatores foram operados em cada etapa da pesquisa com semelhantes tempos de deteno hidrulica (aproximadamente de 6 h) e velocidade ascensional (aproximadamente de 1 m/h). O FPBA foi operado sob diferentes taxas de aplicao superficial (TAS) e alturas do meio suporte. A primeira etapa de operao do FBPA foi conduzida com uma TAS mdia de 4,1 m/m.d e uma altura total do meio suporte de 2,3 m (com uma camada de 0,8 m de pedra de mo no fundo e acima uma camada de 1,5 m de brita n 4). Para a segunda etapa da pesquisa, o FBPA foi operado em duas fases com as TAS de 4,1 e 9,2 m/m.d e uma altura total de 3,5 m (uma camada de 2,2 m de brita n 4 no interior do FBPA e duas camadas de pedra de mo com 0,8 m no fundo e 0,5 m no topo). Acredita-se que a configurao da segunda etapa possa promover uma maior rea de fixao do biofilme e melhor espalhamento do lquido. Informaes mais detalhadas sobre as caractersticas do FBPA so apresentadas em Vieira e von Sperling (2011) e Vieira et al. (2011) Na Figura 1 apresentada uma vista geral das unidades de tratamento do aparato experimental.
UASB geminados (Etapa 1 e Etapa 2 - F1)

FBPA

UASB compacto (Etapa - 2F2)

FIGURA 1: Vista geral do aparato experimental reatores UASB e FBPA (CePTS UFMG/COPASA). O biofilme gerado e o efluente do FBPA foram caracterizados quanto s abundncias das bactrias nitrificantes, bactrias oxidadoras de amnia (BOA) e bactrias oxidadoras de nitrito (BON), nas diferentes etapas e fases de operao. O biofilme foi coletado em diferentes profundidades (topo; 50 cm; 160 cm; e 270 cm) do meio suporte (brita n 4). Observa-se que na primeira etapa de operao do FBPA foram coletadas amostras do biofilme em apenas dois pontos de amostragem (topo e 50 cm), com carter exploratrio, visto que o FBPA ainda no possua os dispositivos de coleta ao longo da profundidade do meio suporte. Os pontos de amostragem do biofilme no FBPA so ilustrados na Figura 2. O processo de extrao do biofilme foi realizado atravs da lavagem das britas e pedras de mo com tampo fosfato salino (PBS). O lquido contendo o biofilme foi armazenado em frascos e transportado ao laboratrio de microbiologia do Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental (DESA- UFMG), sendo armazenado a cerca de 4 C. A determinao da abundncia das bactrias nitrificantes foi realizada pela tcnica de tubos mltiplos (NMP - Nmero Mais Provvel) segundo metodologia apresentada em Kieling (2004). O monitoramento do esgoto bruto (ps-tratamento preliminar por gradeamento e desarenao) e dos efluentes (UASB e FBPA) foi realizado com amostragens compostas em 24 horas (alquotas coletadas a cada hora), com uma frequncia de coleta de trs vezes por semana. Os parmetros fsico-qumicos discutidos neste trabalho so: oxignio dissolvido (OD), DQO, DBO5, NTK, nitrognio orgnico (N-orgnico); Namoniacal (N-NH4+ + NH3), nitrito (N-NO2-) e nitrato (N-NO3-). Estes parmetros foram determinados segundo metodologia proposta por APHA/AWWA/WEF (2005) com as excees do N-orgnico, amnia livre (NH3) e do nitrato (N-NO3-). O N-orgnico foi mensurado pela diferena entre as concentraes de NTK e N-amoniacal. A forma livre ou
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no ionizada da amnia (NH3) foi mensurada pela equao de seu percentual em relao ao N-amoniacal para guas doces, apresentada em Reis e Mendona (2009). O nitrato (N-NO3-) foi realizado pelo mtodo colorimtrico do salicilato apresentado em Rodier (1980). Os limites de deteco do nitrato e do nitrito, segundo os mtodos utilizados so de 0,1 mg/L e de 0,005 mg/L, respectivamente. (b)

(c)

(a) FIGURA 2: Pontos de coleta do biofilme no FBPA: (a) profundidade dos pontos de coleta; (b) vista da lateral e da tubulao perfurada passando por dentro das camadas do meio suporte; (c) dispositivo de amostragem (canaleta de PVC) com meio suporte (brita n 4). RESULTADOS E DISCUSSO Os resultados apresentados neste trabalho referem-se s seguintes etapas de operao do FBPA: primeira etapa (Etapa 1) de 7 de abril a 4 agosto de 2010 (aproximadamente quatro meses); primeira fase da segunda etapa (Etapa 2-F1) de 29 setembro de 2010 a 13 de julho de 2011 (aproximadamente oito meses) e a segunda fase da segunda etapa - E2F2 de 26 de agosto de 2011 a 2 de maro de 2012 (aproximadamente sete meses). No perodo de 5 de agosto a 28 de setembro de 2010 foi interrompido o monitoramento do FBPA para a obra de elevao do meio de enchimento e a troca do sistema de distribuio. No perodo de 14 de julho de 2011 a 25 de agosto foram realizados ajustes na troca de reator UASB (geminados para compacto) e ajuste da vazo aplicada no FBPA para a nova TAS. Os resultados mdios das condies de operao impostas ao FBPA em cada uma das fases so apresentados na Tabela 1. Conforme a classificao proposta por Metcalf & Eddy (2003), as taxas mdias aplicadas podem ser classificadas como de baixa taxa para as cargas orgnicas volumtricas (COV) e de taxa intermediria para a taxa de aplicao superficial (TAS). Estas taxas estiveram dentro das condies esperadas para a ocorrncia conjunta de nitrificao e remoo de DBO tpica de FBP de nico estgio, reportadas em USEPA (1991). A relao DBO/NTK afluente ao FBPA, importante para a avaliao da nitrificao em filtro biolgico percolador, resultou em valores abaixo do limite mximo recomendado para a operao de FBPs de estgio nico (remoo conjunta de DBO e N-amoniacal). As vazes mdias aplicadas de 33 m/d (Etapa 1 e Etapa 2-F1) e de 69 m/d (Etapa 2-F2) corresponderam aos equivalentes populacionais aproximados de 250 e 500 habitantes, respectivamente. TABELA 1: Resultados mdios das condies impostas ao FBPA e suas alturas nas etapas de operao.
Etapa de operao Altura total (m) Vazo (m/d) TAS (m/m.d) CHV (m/m.d) COV (kg DBO 5 /m.d) DQO/DBO 5 Afluente DBO5/NTK Afluente

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Etapa 1 Etapa 2-F1 Etapa 2-F2

2,3 3,5 3,5

33 (8) 33 (7) 69 (9)

4,1 (1,0) 4,1 (0,7) 9,2 (0,9)

1,9 (0,3) 1,6 (0,2) 2,51 (0,2)

0,16 (0,08) 0,08 (0,04) 0,11 (0,04)

2,4 (1,0) 2,7 (0,6) 2,5 (0,4)

2,7 (2,2) 2,4 (1,1) 1,2 (0,3)

CHV: Carga Hidrulica Volumtrica (Vazo/Volume do FBP). ( ): desvio padro. Na Tabela 2 apresentada uma sntese dos resultados mdios das concentraes dos parmetros monitorados em cada etapa de operao do FBPA, os quais so discutidos posteriormente. TABELA 2: Resultados mdios das concentraes obtidas em cada etapa de operao.
Esgoto bruto UASB FBPA n Mdia DP n Mdia DP n Mdia Etapa 1 30 482 143 31 207 92 28 135 DQO Etapa2-F1 61 454 137 67 190 76 66 124 (mg/L) Etapa2-F2 50 388 135 51 114 42 51 88 Etapa 1 30 244 73 32 86 36 30 52 DBO Etapa2-F1 56 239 75 62 71 29 59 49 (mg/L) Etapa2-F2 34 245 105 33 48 17 33 34 Etapa 1 8 32 4 8 37 11 8 25 NTK Etapa2-F1 54 31 5 61 33 6 60 23 (mg/L) Etapa2-F2 31 32 5 34 37 4 36 31 Etapa 1 7 24 3 7 30 5 7 22 Namoniacal Etapa2-F1 51 25 5 59 29 6 57 20 (mg/L) Etapa2-F2 29 26 5 35 31 5 34 25 Etapa 1 7 7 1 7 8 6 7 4 N-orgnico Etapa2-F1 50 6 2 57 4 2 55 3 (mg/L) Etapa2-F2 41 7 3 46 7 3 44 6 Etapa 1 19 0,006 0,005 18 0,029 0,10 17 0,715 Nitrito Etapa2-F1 68 0,026 0,074 65 0,009 0,044 60 0,990 (mg/L) Etapa2-F2 60 0,032 0,048 40 0,017 0,024 49 1,540 Etapa 1 23 < 0,10 18 < 0,10 20 2,48 Nitrato Etapa2-F1 65 < 0,10 62 < 0,10 63 9,16 (mg/L) Etapa2-F2 58 < 0,10 45 < 0,10 53 1,95 Esgoto bruto: aps tratamento preliminar; n: nmero de amostras; Mdia: mdia aritmtica; DP: desvio padro. Parmetros Operao DP 5 79 38 25 34 13 4 8 4 3 6 5 1 2 3 0,827 0,832 1,175 1,18 4,89 1,56

As eficincias medianas de remoo de DQO no FBPA em relao ao efluente do reator UASB foram de 30% (Etapa 1), 44% (Etapa2-F1) e 26% (Etapa2-F2). As eficincias medianas globais (UASB+FBPA) de DQO foram de 66% (Etapa 1), 79% (Etapa2-F1) e 77% (Etapa2-F2). Para DBO 5 as eficincias medianas de remoo no FBPA foram de 36% (Etapa 1), 42% (Etapa2-F1) e 21% (Etapa2-F2). As eficincias medianas globais de DBO 5 foram de 75% (Etapa 1), 82% (Etapa2-F1) e 85% (Etapa2-F2). Apesar de no comprometer as eficincias globais de DQO e DBO, as eficincias de remoo no FBPA na Etapa 2 F2 reduziram aproximadamente pela metade quando comparado com a Etapa 2- F1. Acredita-se que este fato est relacionado com o melhor desempenho do reator UASB utilizado na Etapa 2 F2. No caso do N-amoniacal as eficincias de remoo medianas no FBPA em relao ao efluente do reator UASB atingiram na Etapa 1 28%, 40% para Etapa2-F1 e 19% na Etapa2-F2. Na Figura 3 so apresentados principais percentis das concentraes e das eficincias de remoo de N-amoniacal no FBPA.

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50 45 40 35 30

90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
FBPA-E1 FBPA-E2F1 FBPA-E2F2

20

Nm -a ) L / g ( l c a i n o

15 10 5

E1
EB UASB FBPA EB

E2F1
UASB FBPA EB

E2F2

(a)

0
UASB FBPA

(b)

FIGURA 3: Estatsticas das concentraes (a) e das eficincias de remoo (b) de N-amoniacal. Na Figura 4 so apresentadas as sries temporais (com mdia mvel de 4 termos) das concentraes de Namoniacal (a), Nitrognio orgnico (b), nitrito (c) e nitrato (d) afluente e efluente do FBPA. Conforme os valores apresentados das concentraes de N-amoniacal, nitrito e nitrato, nota-se uma maior ocorrncia de nitrificao durante a Etapa 2 F1 (altura do FBPA de 3,5 m e TAS de 4,1 m/m.d) quando comparado com as outras duas etapas de operao do FBPA. Essa melhor nitrificao possivelmente foi determinada pelos menores valores de COV e da relao DBO/NTK aplicados ao filtro quando comparado com os valores obtidos na primeira etapa (altura do FBPA de 2,3 m e TAS de 4,1 m/m.d). No entanto, apesar da COV e da relao DBO/NTK impostas no FBPA na Etapa 2 - F2 (altura de 3,5 m e TAS de 9,2 m/m.d) terem obtido valores inferiores aos da Etapa 2F1, foi observada uma expressiva reduo na eficincia de N-amoniacal, passando de 40% (Etapa 2 - F1) para 19% (Etapa 2 - F2).
50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

N . c i f E

-a ) % ( l c a i n o m

25

E1

E2F1

E2F2

(a)
4,0 3,5 3,0 2,5 2,0 1,0 0,5 0,0 1,5

-N -( 3 g O m ) L /

-N -( 2 g O m ) L / Nm -a ) L / g ( l c a i n o

50 45 40 35 30 25 20 15 E1 10 5 0

20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0

E1

E2F1

E2F2

Nm -a ) L / g ( l c a i n o

E1
Perodo de operao

E2F1

Nr -o ) L / m ( o c i n g

(b)
25
E1 E2F1

E2F2
Perodo de operao

E2F1

E2F2

E2F2

20 15 10 5 0

o r t i N

P F A R B O

(c)
Perodo de operao

o a r t i N
(d)

Perodo de operao

UASB-E1 FBPA-E2F2 Mdia Mvel UASB -E2F1

FBPA-E1 UASB-E2F2 Mdia Mvel FBPA-E2F1

UASB-E2F1 Mdia Mvel UASB-E1 Mdia Mvel FBPA-E2F2

FBPA-E2F1 Mdia Mvel FBPA-E1 Mdia Mvel UASB-E2F2

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FIGURA 4: Srie temporal das concentraes de N-amoniacal (a), N-orgnico (b), Nitrito (c) e Nitrato (d) dos efluentes do UASB e FBPA, com mdias mveis de 4 termos. Para a remoo conjunta de DBO e nitrognio amoniacal em FBPs utilizando meio suporte de pedra recomendada a utilizao de COVs de 0,07 a 0,25 kg DBO/m.d (METCALF & EDDY, 2003; WEF, 1992). Cabe ressaltar que esta recomendao baseada em FBPs recebendo efluentes de decantadores primrios e no para o ps-tratamento de efluentes de reatores UASB. Desta forma acredita-se que os FBPs atuando no pstratamento de efluentes de reatores UASB possa apresentar desempenho na remoo de DBO e N-amoniacal (nitrificao) diferente. Como o reator UASB proporciona maiores eficincias de remoo de matria orgnica biodegradvel do que os decantadores primrios, gerando um efluente com menor relao DBO/NTK, acreditase que a nitrificao no sistema UASB/FBP seja mais favorvel. Neste sentido, acredita-se que as variaes das COVs aplicadas de 0,16 kg DBO/m.d (Etapa 1) para 0,08 kg DBO/m3.d (Etapa 2 F1) foram influenciadas pela expanso do volume do filtro e tambm pela ligeira melhora no desempenho do reator UASB. J na Etapa 2 F2 de operao do FBPA, apesar da TAS aplicada ter sido mais que dobrada, o valor mdio da COV (0,11 kg DBO/m.d) no sofreu uma forte alterao, quando comparado com a etapa anterior (Etapa 2 F1), provavelmente devido a uma melhor eficincia de remoo de DBO no reator UASB utilizado nesta etapa de operao. Valores de DBO/NTK inferiores a 3 geralmente indicam a possibilidade da predominncia do processo de nitrificao em relao oxidao da matria orgnica, e consequentemente uma maior presena de bactrias nitrificantes. Observa-se que a diminuio da relao DBO/NTK apresentada na Etapa 2 - F1 (2,4 mg DBO/mg NTK) para a Etapa 1 (2,7 mg DBO/mg NTK) de operao do FBPA, devido melhora na eficincia de remoo de DBO no reator UASB, possa ter conduzido a menores taxas de crescimento de microrganismos heterotrficos, e assim, diminuindo a competio por oxignio e espao no meio suporte com os microrganismos autotrficos (bactrias nitrificantes). O mesmo no pode ser proposto para a Etapa 2 F2, mesmo operando com uma relao DBO/NTK (1,2 mg DBO/mg NTK) inferior s duas etapas anteriores. Uma anlise por meio das sries temporais de N-amoniacal (Figura 4 a), depois do segundo ms de operao (novembro de 2010), sugere que as concentraes tenderam a se estabilizar, ao passo que, ao mesmo tempo, o nitrato apresentou um aumento de produo (Figura 4 c), indicando o possvel estabelecimento da nitrificao. Este fato pode estar associado com o aumento da formao do biofilme, em espessura e populao microbiolgica, j que foi observado um ligeiro aumento na abundncia de BOA e BON no biofilme do FBPA com o passar do tempo de operao. Observa-se que a operao do FBPA ficou interrompida entre os meses de junho e setembro de 2010. Ainda analisando a srie temporal de N-amoniacal, observa-se que as concentraes no efluente do reator UASB, assim como do FBPA, apresentaram um aumento no final da Etapa 2 F1, a partir do ms de maio de 2011. Acredita-se que tal fato possa estar relacionado ao perodo seco, no qual o esgoto afluente ETE Arrudas mais concentrado. Por outro lado, durante o perodo chuvoso essas concentraes so diludas pela entrada de gua de chuva no sistema de esgotamento sanitrio, podendo ser observado a partir do ms de novembro de 2011 (incio do perodo chuvoso em Belo Horizonte) j na Etapa 2 F2 de operao do FBPA. Ao longo de todo o perodo estudado, as BOA apresentaram valores de NMP/mL de 102 a 106 na profundidade de 50 cm, 104 a 108 a 160 cm e de 106 a 1011 a 270 cm. J para as BON verificou-se valores mnimos e mximos de 103 e >109 NMP/mL na profundidade de 50 cm, de 103 e >1013 a 160 cm e para a profundidade de 270 cm de 103 e 1011. Na Figura 5 (a e b) so apresentados os valores de BOA e BON observados ao longo das etapas de operao e no perfil do filtro biolgico percolador (50 cm, 160 cm e 270 cm).

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BON (NMP)
1E+00 1E+02 1E+04 1E+06 1E+08 1E+10 1E+12 1E+14
1E+00 1E+02

50 1E+04 160 270

BOA (NMP/mL)

15/10/2010-E 2F1 4/5/2011-E 1 2F 4/5/2011-E2F 1

1E+06 1E+08 1E+10 1E+12 1E+14

9/2/2011-E2F 1 BON (NMP/mL) 13/7/2011-E2F2 5/10/2011-E2F2 1E+00 1E+02 1E+04 1E+06 1E+08 1E+10 1E+12 1E+14 21/12/2011-E2F2 15/2/2012-E2F2
50

50

13/7/2011-E2F2 5/10/2011-E2F2 21/12/2011-E2F2

15/2/2012-E2F2

4/5/2011-E2F 1

160

13/7/2011-E2F2 5/10/2011-E2F221/12/2011-E2F2 15/2/2012-E2F2

160

) m c ( A B F e a i d n u f o r P

(a)
15/10/2010-E2F1 13/7/2011-E2F2 9/2/2011-E2F1 5/10/2011-E2F2

) m c ( A B F e a i d n u f o r P

270

) m c ( A B F e a i d n u f o r P
270

(b)
4/5/2011-E2F1 21/12/2011-E2F2 8/6/2011-E2F1 15/2/2012-E2F2

FIGURA 5: Determinao da abundncia de BOA (a) e BON (b) (atravs do Nmero mais provvel), no biofilme do FBPA nas diferentes profundidades amostradas. Para o grupo das BON verificou-se tendncia de aumento desta populao a partir do final da Etapa 2-F1, ficando mais evidente com o passar da Etapa 2-F2, quando a COV (0,11 kgDBO/m.d) e DBO/NTK estiveram inferiores a etapa anterior e que promoveu uma maior nitrificao (Etapa 2-F1). Uma maior concentrao de nitrito e menor produo de nitrato no efluente do FBPA tambm foram observadas neste perodo (Etapa 2 F2), evidenciando uma nitrificao parcial no FBPA. Observa-se tambm que os valores encontrados de BON (NMP/mL) foram maiores em relao aos valores de BOA na maior parte do perodo estudado, sugerindo predominncia das BON em relao s oxidadoras de amnia (BOA) como pode ser verificado na Figura 5 (a) e (b). MAYER et al. (1999) comentam que reatores de biofilme, como FBPs, atinge uma mxima capacidade de eficincia de matria orgnica e nitrognio quando o biofilme j est completamente constitudo. Estes mesmos autores apontam que a estabilizao do biofilme pode levar de 3 a 4 semanas, em meses de temperatura elevadas, e mais de trs meses em meses de temperatura baixas. As abundncias de BON apresentaram de uma forma geral uma ligeira diminuio ao longo da profundidade do FBPA, exceto na ltima coleta realizada na Etapa 2 F2 (15/02/2012). Esta tendncia no foi observada para o grupo das bactrias oxidadoras de amnia (Figura 5 a), j que foi verificada uma distribuio mais uniforme das abundncias entre as trs profundidades amostradas do FBPA, ocorrendo em alguns momentos at um ligeiro aumento de suas abundncias nas camadas mais profundas do FBPA. Estas observaes contrariam as expectativas de encontrar uma maior abundncia de BOA em relao s abundncias de BON, ocorrendo com mais intensidade a nitritao (oxidao da amnia a nitrito) do que a nitratao (oxidao do nitrito a nitrato), nas camadas superiores do FBP, por se acreditar que nas camadas superiores existe maior disponibilidade de amnia do que nitrito e tambm uma maior competio por espao e oxignio com as bactrias heterotrficas. No estudo apresentado por Missagia et al. (2008), o aumento significativo da quantidade de clulas de Nitrobacter (gnero mais conhecido de BON), identificado pela tcnica de hibridao in situ com sondas fluorescentes (FISH), foi detectado do meio para o fundo em FBPs de escala reduzida, operando com diferentes COVs (0,24 e 0,38 kgDBO/m.d) e com diferentes tipos de meios suportes (escria de alto-forno, anis plsticos, aparas de condute e Downflow Hanging Sponge), em consonncia com as elevadas concentraes de nitrato e baixas concentraes de DBO tambm verificadas nesta altura dos FBPs. Por outro lado, as abundncias de clulas de BOA e Nitrospira permaneceram constantes ao longo do perfil vertical destes FBPs. Em outro estudo apresentado por Persson et al. (2002), o biofilme de um FBP em escala real foi caracterizado em diferentes profundidades e perodos. O gnero Nitrosomonas (gnero mais conhecido de BOA) foi identificado pela tcnica de FISH como predominante dentre as bactrias nitrificantes, sendo encontrado ao longo de todo o filtro em diferentes ocasies de amostragem. Os autores tambm observaram uma tendncia na

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diminuio de abundncia com a profundidade do FBP, assim como o potencial de oxidao de amnia. Estas observaes contrariam os resultados apresentados no biofilme amostrado no FBPA at o momento. Das quatro formas possveis de ocorrer nitrificao incompleta (ou parcial), existem duas que resultam na produo e acumulao do nitrito (GERARDI, 2006). Uma destas duas formas parciais de nitrificao ocorre quando a amnia menor do que 1 mg/L, o nitrito maior do que 1 mg/L e o nitrato maior do que 1 mg/L. Esta forma parcial no foi observada em nenhuma etapa de operao do FBPA como pode ser observado nas sries temporais das concentraes (Figura 4 a, c e d), j que as concentraes de amnia foram sempre superiores a 10 mg/L. A outra forma de nitrificao incompleta acontece quando as concentraes de amnia, nitrito e nitrato so maiores do que 1 mg/L. Esta forma foi observada com maior frequncia na Etapa 2-F2, quando as concentraes de amnia, nitrito e nitrato apresentaram percentuais de 100%, 42%, 70% acima de 1 mg/L. Dentre os fatores responsveis por estas duas formas de nitrificao incompleta, a queda de temperatura considerada um fator comum para as duas. A temperatura pode exercer uma importante influncia no processo de nitrificao, promovendo impactos na ventilao e oxigenao do meio, no coeficiente de reaerao do lquido, no coeficiente de difuso do substrato no biofilme e na taxa de crescimento especfica mxima de organismos nitrificantes. O processo de nitrificao ocorre ao longo de uma faixa de intervalo entre 4 e 45C, sendo que para as Nitrosomonas a temperatura tima de 35C e para Nitrobacter na faixa de 35 a 42C (USEPA, 2009). Neste sentido, observa-se uma tendncia de correlao entre a temperatura do ar em Belo Horizonte no perodo estudado (Figura 6 a) com as abundncias das bactrias nitrificantes, principalmente para o grupo das bactrias oxidadoras de nitrito (BON). Esta tendncia fica mais pronunciada a partir do ms de julho de 2011, quando as temperaturas mdias dirias dos perodos entre coletas do biofilme tendem a se elevar. O impacto da temperatura na taxa de crescimento especfica mxima parece ter sido mais sentido pelas BON, como pode ser observado com mais evidncia na coleta do dia 15/02/2012. Nesta coleta foi estimado o maior resultado de NMP de BON nos pontos amostrados mais profundos, e no perodo entre a coleta anterior (21/12/2011) ocorreram as maiores mdias dirias (mdia diria do perodo de 23,7C) e menores variaes de temperatura dentre os perodos entre coletas do biofilme (Figura 7 b).

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(a)
40

(b)
35 30 25 20 15 10
E1 E2F1 E2F2

Perodo avaliado entre coletas do biofilme

14/06/2010 15/06/2010 15/07/2010 16/10/2010 14/07/2010 15/10/2010 09/02/2011 04/05/2011 08/06/2011 13/07/2011 05/10/2011 21/12/2011 15/02/2012

C )

Temperaturas dirias (C) Mx.

29,2 29,4 33,3 32,9 32,8 28,8 28,2 33,8 32,8 32,0

Mn.
8,8 11,9 8,5 16,1 16,0 16,8 16,9 10,7 12,9 16,7

Md.
19,7 19,6 20,7 23,4 23,3 20,0 19,3 21,2 21,0 23,7

( o d u t r a p m e T

5 0

Mxima diria

Mnima diria

Mdia diria

10/02/2011 05/05/2011 09/06/2011 14/07/2011 16/10/2011 22/12/2012

Mx.: mxima; Mn.: Mnima; Md.: Mdia.

FIGURA 6: Temperatura do ar em Belo Horizonte: (a) srie temporal das mximas, mnimas e mdias dirias; (b) quadro dos valores mximos, mnimos e das mdias dirias para os perodos entre as coletas do biofilme. Observa-se tambm, que na etapa de operao do FBPA (Etapa 2F1), quando a nitrificao foi mais intensa (maiores taxas de nitrificao) e consistente (manteve uma constncia na remoo de N-amoniacal), o perodo que apresentou as temperaturas mdias dirias mais elevadas foi aquele que resultou nas maiores eficincias de remoo de N-amoniacal, como pode ser identificado nas sries temporais das concentraes de N-amoniacal (Figuras 4 a) e da temperatura do ar em Belo Horizonte (Figura 7 a). Importante ressaltar que a estimativa do NMP de bactrias nitrificantes pela tcnica dos tubos mltiplos realizada temperatura de 28C (temperatura de incubao dos tubos mltiplos), bastante superior s temperaturas mdias dirias observadas entre os perodos de coleta do biofilme (Figura 7b). Desta forma, as estimativas de NMP de BOA e BON observadas no biofilme do FBPA podem estar superestimadas para as condies de temperatura local. Por outro lado, Arajo et al. (2009) comentam que a tcnica dos tubos mltiplos pode subestimar as abundncias de bactrias nitrificantes, devido s caractersticas dessas bactrias de formarem aglomerados, e/ou das diferentes exigncias de cultivo entre as diversas espcies de oxidadoras de amnia. Segundo estes autores o mtodo do NMP permite estimar a densidade da populao microbiana sem uma contagem individual das clulas ou colnias, e o tamanho de populaes estimado com base na maior diluio na qual o crescimento pode ser obtido. No entanto, mesmo apresentando as maiores abundncias de bactrias nitrificantes, temperaturas mais prximas das condies timas de desenvolvimento destas bactrias, alm de melhores condies operacionais aplicadas em termos de carga orgnica e de nitrognio, no foi observada uma maior ocorrncia de eficincia de remoo de N-amoniacal. USEPA (2009), Gerardi (2006), Metcalf & Eddy (2003) e WEF (1992) sugerem que os fatores que impedem a nitrificao no sistema de tratamento de esgotos sanitrios so: populao insignificante de bactrias nitrificantes; presena de DBO solvel que inibe as bactrias nitrificantes; ausncia ou baixas concentraes de oxignio molecular livre; e o curto tempo de deteno hidrulica (TDH) ou residncia do lquido no reator biolgico. Sero comentados os dois ltimos, e que ainda no foram explorados no texto. As concentraes mdias e percentil 10% de oxignio dissolvido no efluente do FBPA em todo o perodo estudado foram, respectivamente, de 5,1 e 4,7 mg/L na Etapa 1, na Etapa 2-F1 de 5,4 e 4,7 mg/L e na Etapa 2F2 de 5,2 e 3,4 mg/L, como pode ser observado na Figura 8 (a e b). Segundo USEPA (2009), a faixa de concentrao de OD que limita a nitrificao est entre 0,5 e 2,5 mg/L, tanto em sistemas com biofilme aderido
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quanto em sistemas com biomassa suspensa, dependendo do grau de transferncia de massa e o tempo de reteno de slidos no sistema. A taxa de crescimento mxima das bactrias nitrificantes atingida em concentraes de OD entre 2 e 2,5 mg/L, no entanto, faz-se necessrio o tempo de contato adequado no sistema. Portanto, em funo das concentraes de OD no efluente do FBPA apresentadas ao longo de todo o perodo estudado, superiores aos valores recomendados para que ocorra a nitrificao, acredita-se que o OD no tenha sido o fator limitante de maior impacto nas eficincias de remoo de N-amoniacal. Ressalta-se aqui a provvel boa ventilao proporcionada pelas laterais abertas do filtro percolador objeto da presente pesquisa.
8,0 7,0 6,0 5,0 4,0
E1 E2F1 E2F2

8 7 6 5 4 E1 E2F2 E2F2

) L / g m ( D O

3,0 2,0 1,0 0,0

) L / g m ( D O
(b)
Perodo de operao

3 2 1 0
UASB FBPA UASB FBPA UASB FBPA

(a)

FIGURA 7: Srie temporal com mdias mveis de 4 termos (a) e estatsticas (b) das concentraes de oxignio dissolvido nos efluentes dos reatores UASB e do FBPA. Devido quantidade relativamente pequena de energia obtida a partir da oxidao da amnia ionizada e do nitrito, as bactrias nitrificantes reproduzem-se muito lentamente. Desta forma se torna necessrio manter no reator biolgico estas bactrias e o prprio lquido no maior tempo possvel. Neste sentido, em funo de todo o comportamento apresentado pelo processo de nitrificao discutido anteriormente, acredita-se que o tempo de residncia do lquido possa ter influenciado nas eficincias de remoo entre as etapas de operao do FBPA. Observa-se que o tempo de residncia do lquido no FBPA possivelmente aumentou da Etapa 1 para a Etapa 2F1 devido a elevao do meio suporte do FBPA de 2,3 m para 3,5 m, aumentando assim o volume do FBPA, j que a que vazes mdias aplicadas (33 m/d) foram semelhantes. Esta alterao estrutural no filtro, elevao do meio suporte, possivelmente tenha influenciado nas melhores eficincias de remoo de N-amoniacal, conduzindo maiores produes de nitrato e menores concentraes de nitrito, tanto pelo aspecto de elevar o tempo de residncia do lquido quanto no aspecto de reduzir a competio das bactrias autotrficas e heterotrficas. A diminuio do tempo de residncia do lquido no FBPA na Etapa 2-F2 comparado com a Etapa 2-F1 foi conduzida pelo aumento da vazo de 33 m/d para 69 m/d, sendo que as alturas do FBPA foram s mesmas nestas duas etapas de operao (3,5 m). Desta forma, acredita-se que a reduo de aproximadamente de 50% das eficincias de remoo de N-amoniacal, conjuntamente com o aumento prximo de 40% na produo de nitrito, da Etapa 2-F2 para a Etapa 2-F1, provavelmente tenha sido influenciado pela reduo do tempo de residncia do lquido no FBPA. CONCLUSES Com a proposta de quantificar e relacionar as bactrias oxidadoras de amnia (BOA) e de nitrito (BON) com as eficincias de remoo do N-amoniacal (converso a nitratos) em uma concepo inovadora de filtro biolgico percolador) sem paredes laterais (FBPA), sob condies diferenciadas de altura e cargas, no ps-tratamento de esgotos de reator UASB, podemos extrair as seguintes concluses:

Aps a interveno estrutural do FBPA (elevao do meio suporte), que ocorreu entre a Etapa 1 e a

Etapa 2-F1 (agosto a setembro de 2010), a populao de bactrias nitrificantes na profundidade de 50 cm diminuiu consideravelmente. Uma tendncia de evoluo das abundncias de BOA e BON para as trs profundidades amostradas (50 cm, 160 cm e 270 cm) observada com maior clareza j no final da Etapa 2-F1 (6 meses aps a interveno estrutural), principalmente para o grupo de BON.

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 As eficincias de remoo de N-amoniacal tenderam a se estabilizar logo depois do segundo ms da

interveno estrutural (novembro de 2010) ao passo que, ao mesmo tempo, o nitrato apresentou um aumento de produo, indicando o possvel estabelecimento da nitrificao. As abundncias das BON predominaram em relao s BOA na maior parte de todo o perodo estudado. As abundncias de BON apresentaram uma ligeira diminuio ao longo da profundidade do FBPA, principalmente do meio para o fundo do filtro. Esta tendncia no foi observada para o grupo das bactrias oxidadoras de amnia, j que foi verificada uma distribuio mais uniforme das abundncias entre as trs profundidades amostradas do FBPA, ocorrendo em alguns momentos at um ligeiro aumento de suas abundncias nas camadas mais profundas. Foi observada uma tendncia de correlao entre a temperatura do ar em Belo Horizonte no perodo estudado com as abundncias das bactrias nitrificantes, principalmente para o grupo de BON. Esta tendncia fica mais pronunciada a partir do ms de julho de 2011, quando as temperaturas mdias dirias dos perodos entre coletas do biofilme tendem a se elevar. Foi observado que na Etapa 2F1 de operao do FBPA, onde a nitrificao foi mais consistente, o perodo que apresentou as temperaturas mdias dirias mais elevadas foi aquele que resultou nas maiores eficincias de remoo de N-amoniacal. Em funo das concentraes de OD no efluente do FBPA apresentadas ao longo de todo o perodo estudado, superiores aos valores recomendados para que ocorra a nitrificao, acredita-se que o OD no tenha sido o fator limitante de maior impacto nas eficincias de remoo de N-amoniacal. Mesmo apresentando as maiores abundncias de bactrias nitrificantes, temperaturas mais prximas das condies timas de desenvolvimento destas bactrias, alm de melhores condies operacionais aplicadas em termos de carga orgnica e nitrognio, no foi observada neste conjuntamente uma maior ocorrncia de eficincia de remoo de N-amoniacal. Desta forma, acredita-se que o alm de outros fatores limitantes, o tempo de residncia do lquido no FBPA possivelmente impactou e influenciou nas eficincias de remoo de N-amoniacal, conduzindo a maiores produes de nitrato e menores concentraes de nitrito, para as mesmas TAS.

AGRADECIMENTOS Os autores agradecem o suporte recebido pelas instituies: Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico CNPq, Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de Minas Gerais FAPEMIG, Fundao Nacional de Sade - FUNASA e Companhia de Saneamento de Minas Gerais COPASA. Os autores ainda agradecem ao sr. Raimundo Magela (operador do CePTS) pelo apoio nos trabalhos de campo e aos demais membros do grupo de pesquisa em tratamento de esgotos do DESA/UFMG. REFERNCIAS

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