UNIVERSIDAD AUTONOMA BENITO JUAREZ DE OAXACA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

TEMA: PRUEBA DE AGLUTINACIN EN PLACA LTEX PARA LA DETERMINACIN CUALITATIVA Y SEMI-CUANTITATIVA DE ANTIESTREPTOLISINA-O EN SUERO SIN DILUIR

MATERIA: LABORATORIO DE INMUNOLOGA

ALUMNA: SORIANO CRUZ MNICA

CATEDRATICO: Q.B. FRANCISCA MARGARITA

SEMESTRE

7 Q.B. UNICO

Oaxaca de Jurez, Oaxaca.

MARZO del 2012

INTRODUCCIN El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las personas en ttulos bajos, debido a que las infecciones estreptoccicas son comunes. Sin embargo un ttulo alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infeccin reciente producida por estreptococo hemoltico grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis puerperal, erisipela. La anti-estreptolisina O es el conjunto de anticuerpos especficos frente a la estreptolisina O, un enzima extracelular producido por estreptococos del grupo A de Lancefield -hemoltico (Streptococcus pyogenes). Es importante que el estreptococo - hemoltico del grupo A sea identificado correctamente en el laboratorio porque es necesario implementar un rpido tratamiento del paciente infectado, no slo para controlar la infeccin primaria. La anti-estreptolisina puede detectarse desde una semana a un mes despus de la infeccin del estreptococo. Streptococcus pyogenes causa una amplia variedad de infecciones en las vas respiratorias altas tales como la faringitis aguda. Otras manifestaciones de infeccin por Streptococcus pyogenes incluyen glomerulonefritis, fiebre reumtica, endocarditis bacteriana y fiebre escarlata. El diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sino que debe integrar los datos clnicos y de laboratorio. Por lo tanto, a pesar de no ser una prueba especfica para fiebre reumtica, apoya su diagnstico cuando lo sugieren la historia y los signos clnicos. Entre las pruebas para su deteccin tenemos el cultivo en agar sangre con la manifestacin de la -hemlisis, sensibilidad a la bacitracina, determinacin serolgica de Antiestreptolisinas, entre otras muchas. El estreptococo pyogenes (grupo A) produce diversas sustancias y toxinas extracelulares. Las dos hemolisinas, estreptolisina O y estreptolisina S, lbil y estable frente al oxgeno respectivamente, pueden lisar eritrocitos humanos y de otras especies as como las membranas celulares de los PMNS, plaquetas y otras clulas. La estreptolisina O es antignica; es decir, estimula al paciente infectado la produccin de anticuerpos, las Antiestreptolisinas, que determinadas en el laboratorio pueden ser de utilidad para diagnosticar infecciones por este microorganismo.

OBJETIVO. Que el alumno entienda la importancia y aprenda a antiestreptolisina-O en suero. FUNDAMENTOS DEL MTODO. La estreptolisina O, producida por el estreptococo -hemoltico de grupo A, tiene la propiedad de producir hemlisis cuando se pone en contacto con glbulos rojos. Al colocar distintas diluciones de un suero que contenga antiestreptolisina O en presencia de dosis constantes de estreptolisina O, se produce una reaccin antgeno-anticuerpo que neutraliza la capacidad hemoltica de la misma. Este fenmeno se evidencia por una inhibicin de la hemlisis al agregar suspensin de glbulos rojos del 3 al 5%. El ttulo de antiestreptolisina ser la recproca de la mxima dilucin del suero del paciente capaz de neutralizar totalmente la estreptolisina. realizar la prueba de aglutinacin de

DESARROLLO. a) MATERIALES Y REACTIVSO NECESARIOS. Torniquete Sistema vacutainer. Torundas. 1. Solucin Buffer NaCl 7.40 gr. Fosfato monopotasico anhdrido 3.17 gr. Fosfato di sdico anhdrido 1.81 gr. Agua destilada cbp. Ajustar el Ph de 6.5 a 6.7 conservar en refrigeracin y deshacer en caso de que se desarrollen los hongos. 2. Suspensin de glbulos rojos al 5 %: En la solucin buffer agregar hemates del grupo O Rh positivo previamente lavados con solucin salina tres veces, (0.5 ml de hemates en 99.5 ml de solucin buffer). 3. estreptolisina O 4. suero del paciente inactivado, durante 30 min. A 56 o 5 minutos a 62 C.

b) PROCEDIMIENTO. 1. Extraer una muestra de sangre del paciente, recolectndola en un tubo seco (sin anticoagulante) y una vez bien coagulada la sangre, centrifugar para separar el suero. Es importante que evitar que se hemolice la muestra 2. Aadir una gota de la muestra de suero del paciente no diluida utilizando una pipeta en un circulo de la placa 3. Coloque una gota de los controles positivo y negativo en otros cirulos dentro de la misma placa 4. Agite suavemente el frasco de ltex. Coloque una gota del reactivo de ltex junto a la gota de la muestra de suero en cada una de los crculos ocupados. 5. Mezcle ambas gotas con el agitador o mezclador desechable, cubriendo por completo toda la superficie del crculo. 6. Agite manualmente la placa por 2 minutos de manera que la mezcla rote suavemente y despacio dentro de los crculos. 7. Despus de 2 minutos examine cada crculo para observar la ausencia o presencia de aglutinacin.

CLCULO Y REPORTE DE RESULTADOS No se observo aglutinacin en el crculo de la placa que contena el suero-muestra del paciente, por lo tanto se llego a la conclusin de que el resultado es negativo.

CONCLUSIN. La realizacin de esta prctica fue de gran ayuda para entender la importancia de la identificacin del anticuerpo antiestreptolisina O correctamente, ya que esto influye en el diagnostico de del grupo A de Lancefield -hemoltico (Streptococcus pyogenes), y asi implementar un rpido tratamiento del paciente infectado. ANEXOS. 1. Menciones la importancia de las estreptolisinas en el diagnostico clnico. Es importante que el anticuerpo antiestreptolisina O sea identificado correctamente en el laboratorio porque es necesario implementar un rpido tratamiento del paciente infectado, no slo para controlar la infeccin primaria (faringitis aguda, Hypoderma, escarlatina, erisipela o celulitis), sino tambin para prevenir las complicaciones potenciales serias, como fiebre reumtica, endocarditis y valvulitas reumtica y glomerulonefritis aguda o crnica.

2. En qu enfermedades se encuentran elevadas las ASO? El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las personas en ttulos bajos, debido a que las infecciones estreptoccicas son comunes. Sin embargo un ttulo alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infeccin reciente producida por estreptococo -hemoltico grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis puerperal, erisipela. Tiene adems especial inters en los procesos que aparecen como segunda enfermedad: fiebre reumtica y glomerulonefritis aguda. Por lo tanto, a pesar de no ser una prueba especfica para fiebre reumtica, apoya su diagnstico cuando lo sugieren la historia y los signos clnicos

3. Qu otros mtodos conocen para su determinacin? Entre las pruebas para su deteccin tenemos el cultivo en agar sangre con la manifestacin de la -hemlisis, sensibilidad a la bacitracina, determinacin serolgica de Antiestreptolisinas, entre otras muchas.

BIBLIOGRAFA.
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Estreptolisina, anticuerpos (asto)

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ANTI-ESTREPTOLISINA O (ASO) ANTI-STREPTOLYSIN O (ASO)

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O-Estreptolisina
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