Equipe: George Cunha Lo Santiago Ren Victor Victor Teixeira Yasmine Lima

Prtica de Qumica Orgnica Aplicada Biotecnologia

Isolamento da cafena do ch

ISOLAMENTO DA CAFENA DO CH PRETO 1. Introduo O ingrediente ativo que torna o ch preto e o caf valiosos para o homem a cafena. Cafena um alcalide, uma classe de compostos em que contm nitrognio e tem as propriedades de uma base orgnica amnica (alcalino, portanto, alcalide).

Estrutura da Cafena (1,3,7-trimetilxantina)

Ch e caf no so as nicas fontes de cafena. Outras fontes so noz de cola, folhas de mate, sementes de guaran e, em pequenas quantidades, amndoas de cacau. O alcalide puro foi isolado pela primeira vez do caf em 1821 pelo qumico francs Pierre Jean Robiquet. A cafena pertence famlia de compostos que ocorrem naturalmente chamados xantinas. As xantinas, na forma de suas plantas progenitoras, so possivelmente conhecidas mais antigamente como estimulantes. Todos eles, em diferentes graus, estimulam o sistema nervoso central e a musculatura esqueltica. Esta estimulao resulta em um aumento do estado de alerta, da capacidade de sair do sono e um aumento da capacidade de pensar. A cafena a mais poderosa xantina nesse aspecto. Neste experimento, a cafena isolada das folhas do ch. O principal problema com o isolamento da cafena no existe sozinha nas folhas de chamas acompanhada por outras substncias naturais que devem ser separadas. O principal componente das folhas de ch a celulose, que o principal material constituinte de todas as clulas vegetais. Celulose um polmero da glicose. Como a celulose praticamente insolvel em gua, ela no representa problemas no processo de isolamento. Cafena, por outro lado, solvel em gua e uma das principais substncias extradas da soluo chamada ch.

A cafena constitui cerca de 5% do peso das folhas de ch. Taninos tambm se dissolvem em gua quente usada para extrair a cafena das folhas de ch. O termo tanina no se refere a um simples composto homogneo, ou mesmo substncias que tem estruturas qumicas similares. Taninos so compostos fenlicos que tem peso molecular entre 500 e 3000 Da. Eles so largamente usados para bronzear couro. Eles precipitam alcalides e protenas da soluo aquosa. Taninos so normalmente divididas em duas classes: aquelas que podem ser hidrolisadas e aquelas que no podem. Taninos de primeiro grau que so encontradas no ch geralmente produzem glicose e cido glico quando so hidrolisadas. Estes taninos so steres de cido glico e glicose. Eles representam estruturas em que cada um dos grupos hidroxilas da glicose foi esterificado por grupos digaloil. Os taninos no hidrolisados encontradas no ch so condensaes de polmeros de catequina. Estes polmeros no so estruturas uniformes; molculas de catequina so normalmente ligadas no anel nas posies 4 e 8.

Quando a extrao realizada atravs da gua quente, os taninos hidrolizveis so parcialmente hidrolisados, significando que o cido glico livre tambm encontrado no ch. Os taninos, por causa dos grupos fenlicos, e o cido glico, por causa do grupo carboxila, so ambos cidos. Se carbonato de clcio, um sal bsico, adicionado ao ch preto, os sais de clcio destes cidos

so formados. A cafena pode ser extrada da soluo bsica de ch com diclorometano, mais os sais de cido glico e as taninas que no so solveis em diclorometano e ficam para trs como slidos insolveis. A cor marrom da soluo de ch preto devido aos pigmentos flavonides e clorofilas e seus respectivos produtos de oxidao. Embora clorofila seja solvel em diclorometano, a maioria das outras substncias no ch no . Ento, a extrao com diclorometano da soluo bsica de ch remove quase toda a cafena pura. O diclorometano facilmente removido por destilao (ponto de ebulio igual a 40C) deixando a cafena crua. A cafena pode ser, ento, purificada por recristalizao ou sublimao.

2. Objetivo Extrair e isolar a cafena presente no ch preto.

3. Procedimento Experimental Colocar 25 g de folhas de ch secas, 10 g de carbonato de clcio em p e 250 mL de gua em um balo de 500 mL equipado com um condensador por refluxo. Tampar as aberturas inutilizadas no frasco e aqueer a mistura sobre refluxo brando para prevenir solavancos por cerca de 20 minutos. Usar a manta de aquecimento ou um bico de Bunsen para aquecer. Agite ocasionalmente o frasco durante o perodo de aquecimento. Enquanto a soluo est quente filtrar a vcuo utilizando filtro de papel. Esfrie o filtrado (lquido filtrado) para a temperatura ambiente, e usando um funil de separao de 500 mL, extraia-o, com uma poro de 50 mL de cloreto de metileno (diclorometano). Mexa a mistura vigorosamente por 1 minuto. As camadas devem se separar depois de um descanso de vrios minutos, embora alguma emulso esteja presente na camada orgnica inferior. A emulso pode ser quebrada e a camada orgnica pode ser seca ao mesmo tempo, passando a camada inferior lentamente atravs de sulfato de magnsio anidro. Coloque um pequeno pedao de algodo em um funil e adicione 1 cm de camada de sulfato de magnsio anidro em cima do algodo. Passe a camada orgnica diretamente do funil de separao atravs do agente secante e recolha o filtrado num frasco seco.

Lavar o sulfato de magnsio com 1 a 2 ml de diclorometano fresco. Repita a extrao com outra poro de 50 mL de diclorometano na camada aquosa restante no funil de separao, e repita a secagem, como descrito acima, com uma poro fresca de sulfato de magnsio anidro. Colete a camada orgnica no frasco contendo o primeiro extrato de diclorometano. Esses extratos devem agora estar claros, no apresentando sinais visveis de contaminao pela gua. Se um pouco de gua passar pelo filtro, repita a secagem, como descrita acima, com uma poro fresca de sulfato de magnsio anidro. Recolha os extratos em um recipiente seco. Verta o extrato orgnico seco em um balo. Remova o diclorometano por destilao em um banho de vapor (vaporizao rotativa tambm pode ser utilizada). O resduo da destilao contm a cafena pode ser purificada atravs de cristalizao.

Cristalizao (Purificao): Dissolva o resduo da extrao do diclorometano da soluo de ch preto em aproximadamente 10 ml de diclorometano. Voc deve aquecer a mistura em um banho de vapor para dissolver o slido. Transfira a soluo para um erlenmeyer com 5 ml de diclorometano adicionais. Coloque em uma chapa aquecedora e evapore a soluo verde-claro at secar por calor em um banho de vapor na capela. O resduo obtido na evaporao do diclorometano , depois, cristalizado por um mtodo de mistura de solventes. Usando um banho de vapor, dissolva o resduo em uma pequena quantidade (aproximadamente 6 ml) de acetona quente e adicione pouco a pouco ter de petrleo de baixo ponto de ebulio (30C 60C) para que a soluo torne-se turva. Esfrie a soluo e colete os cristais obtidos filtrando-os com um com um funil de Bchner. Utilize uma pequena quantidade de ter de petrleo para transferir os cristais para o funil de Bchner. Um segundo grupo de cristais pode ser obtido concentrando-se o contedo a ser filtrado. Pese o produto (uma balana analtica pode ser necessria). Calcule a porcentagem de peso obtido baseando-se (comparando-o) com os 25 g de ch originalmente usados e determine o ponto de fuso. O ponto de fuso da cafena pura 236C.

4. Resultados e Discusso O carbonato de clcio quando em soluo dissocia-se, liberando ons Ca2+ em soluo. Os taninos e o cido glico, que possuem certa solubilidade em diclorometano, quando reagem com o Ca2+ formam sais insolveis e precipitam, sendo facilmente removidos por filtrao. A gua presente em soluo pode formar emulso (mistura entre dois lquidos imiscveis em que um deles, a fase dispersa, encontra-se na forma de finos glbulos no seio do outro lquido, a fase contnua, formando uma mistura estvel). Ento, o sulfato de magnsio anidro pode ser utilizado para retirar a gua da soluo, desfazendo, desta forma, a emulso. A mistura de solventes pode ser utilizada para melhorar a eficcia do processo de cristalizao. A cafena uma substncia predominantemente polar (3.64 D). A acetona possui certa polaridade (2.91 D), deste modo, a cafena apresenta solubilidade na acetona. O outro solvente utilizado o ter de petrleo, uma mistura de hidrocarbonetos de frmula C5H12 e C6H14. O ter de petrleo apresenta certa solubilidade em acetona, entretanto, a cafena no miscvel no ter, representando uma condio ideal para o processo de cristalizao. A turbidez da soluo que ocorre depois da adio do ter de petrleo indica que a precipitao dos cristais ocorreu. A cafena em sua forma totalmente pura apresenta-se como um p branco, representando cerca de 5% do peso das folhas de ch. Mudanas na colorao ou uma extrapolao da quantidade mxima de cafena que pode ser obtida so indicadores de presena de impurezas ao final do processo.

5. Bibliografia

PAVIA, D.L.; LAMPMAN, G.M.; KRIZ, G.S. Introduction to Organic Laboratory Techniques: a contemporary approach, Third Edition, Saunders College Publishing, 1988. http://pt.wikipedia.org/wiki/Emuls%C3%A3o http://pt.wikipedia.org/wiki/Cafe%C3%ADna http://pt.wikipedia.org/wiki/Acetona