Cienc. Tecnol. Aliment. Vol. 2, No. 5, pp.

234-239, 2000 Copyright 2000 Asociacin de Licenciados en Ciencia y Tecnologa de los Alimentos de Galicia (ALTAGA).

ISSN 1135-8122

USO DE UM DETECTOR POTENCIOMTRICO DE SENSIBILIDADE AUMENTADA PARA A DETERMINAO DE CLORETOS EM LEITE E PRODUTOS LCTEOS POR FIA
POTENTIOMETRIC FLOW TITRATION WITH INCREASED SENSITIVE DETECTOR FOR DETERMINATION OF CHLORIDES IN MILK AND DAIRY PRODUCTS

USO DE UN DETECTOR POTENCIOMTRICO DE SENSIBILIDAD AUMENTADA POR FIA PARA LA DETERMINACIN DE CLORUROS EN LECHE Y PRODUCTOS LACTEOS

Lima, J. L. F. C.1; Delerue-Matos, C.2*; Vaz, M. C. V. F.2

1

CEQUP/Departamento de Qumica-Fsica, Faculdade de Farmcia (U.P.) Rua Anbal Cunha 164, 4050 Porto, Portugal. CEQUP/Departamento de Engenharia Qumica, Instituto Superior de Engenharia, Instituto Politcnico do Porto, Rua de S. Tom, 4200 Porto, Portugal.
2*

Recibido: 11 de Diciembre 1999; recibida versin revisada: 27 de Marzo de 2000; aceptado: 29 de Marzo de 2000 Received: 11 December 2000; received in revised form: 27 March 2000; accepted: 29 March 2000

Abstract
This paper describes the development of a flow injection analysis (FIA) system for the determination of chlorides in dairy products by potentiometric flow titration with increased sensitive detector. The potentiometric detection system used consisted of a silver ion-selective detector electrode based on a homogeneous crystalline double membrane and its potential difference was measured against a common reference electrode by an external electronic device. Milk samples were straight injected into the automatic system whereas cheese, butter and yoghurt samples were prepared according to reference methods and the solution produced was inserted without further treatment. The results obtained for chloride determinations using FIA titration are in agreement with those provided by the reference methods (R.D. < 4%). The sampling rate accomplished with the automatic system varied from 130 to 250 samples per hour, depending on the samples chloride concentration. 2000 Altaga. All rights reserved.

Keywords: Chloride, milk, dairy products, potentiometry, increased sensitive detector

Resumen
Este artculo describe el desarrollo de un sistema de injeccin en flujo (FIA) para la determiancin de cloruros en productos lacteos por titulacin potenciomtrica con un detector de sensibilidad aumentada. El sistema de deteccin potenciomtrico usado consiste en un electrodo selectivo a los iones plata constituido por dos membranas cristalinas homogneas siendo la diferencia de potencial medida por un electrodo de referencia comn por un dispositivo electrnico externo. Las muestras de leche fueron inyectadas directamente en el sistema y las muestras de queso, mantequilla y yogurt fueron preparadas siguiendo las indicaciones de los mtodos de referencia y la solucin resultante inyectada directamente. Los resultados obtenidos con el sistema FIA propuesto son concordantes con los obtenidos usando los mtodos de referencia (R.D. < 4%). La velocidad de anlisis del sistema automtico varia entre 130 a 250 muestras por hora, dependiendo de la concentracin de cloruros en las mismas. 2000 Altaga. Todos los derechos reservados.

Palabras clave: Cloruros, leche, productos lacteos, potenciometra, detector de sensibilidad aumentada.

Resumo
Neste trabalho descreve-se o desenvolvimento de um sistema de titulao potenciomtrica, com sensibilidade aumentada, baseado na tcnica de anlise por injeco em fluxo (FIA), para a determinao de cloretos em vrios produtos lacteos. O elctrodo indicador de configurao tubular, sensvel ao catio prata constituido por duas membranas cristalinas homogneas sendo a soma de potencial de cada membrana efectuada externamente atravs de um dispositivo construido para o efeito. As amostras de leite foram injectadas directamente no sistema e as amostras de queijo, manteiga e iogurte foram preparadas de acordo com as recomendaes dos mtodos de referncia, sendo a soluo resultante intercalada sem tratamento adicional. Os resultados obtidos com o sistema FIA proposto so concordantes com os fornecidos pelos mtodos de referncia (D.R.< 4%). O ritmo de amostragem fornecido pelo sistema automtico variava entre 130 e 250 amostras por hora, dependendo da concentrao do anio cloreto nas amostras. 2000 Altaga. Todolos dereitos reservados.

Palabras chave: cloreto, leite, produtos lcteos, potenciometria, detector de sensibilidade aumentada.

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ALTAGA 2000 INTRODUO

Lima et al.: Uso de um detector potenciomtrico de sensibilidade aumentada ... Os elctrodos tubulares sensveis ao catio prata mais usados como indicadores nas titulaes FIA, so de segunda espcie (Lima e Rangel, 1989) ou de membrana cristalina, podendo estes ltimos dividir-se em membrana heterognea (Alegret et al., 1995), ou homognea (Ferreira et al., 1994b; Ferreira et al., 1996). Relativamente aos elctrodos tubulares de segunda espcie, alm de responderem a fenmenos de oxidao reduo, a sua membrana mais facilmente afectada pela composio da amostra, necessitando em alguns casos de uma operao prvia de dilise antes da medio, para evitar o contacto directo com a amostra (Van Staden, 1986). Os elctrodos de membrana cristalina homognea apresentam vantagens relativamente aos de membrana heterognea porque o potencial menos afectado pela composio da matriz e a resposta mais rpida (Alegret et al., 1987; Alegret et al., 1989), o que permite a introduo das amostras no sistema sem tratamento prvio, maiores ritmos de amostragem e um campo de aplicao mais vasto. Neste trabalho descreve-se o desenvolvimento de um sistema FIA com titulao potenciomtrica e sensibilidade aumentada, para a determinao de cloretos em vrios tipos de leite, queijos, manteigas e iogurtes. O elctrodo indicador de configurao tubular, sensvel ao catio prata (Couto et al., 1998) constituido por duas membranas cristalinas homogneas de Ag2S sendo a soma de potencial efectuada externamente atravs de um dispositivo construido para o efeito (Lapa et al., 1993). Este detector foi seleccionado, porque permite, no caso das titulaes em fluxo, obter resultados mais exactos, ao diferenciar amostras com concentraes muito semelhantes e mais precisos (Hibbert et al., 1990). Na montagem desenvolvida, a amostra intercalada numa soluo transportadora que contem ies prata, sendo a diminuio da concentrao de catio prata no tansportador, monitorizada por intermdio de um elctrodo de dupla membrana cristalina homognea de Ag2S. MATERIAIS E MTODOS Reagentes e solues Todos os reagentes utilizados foram de qualidade p.a , no tendo sido submetidos a qualquer tratamento adicional. As solues foram preparadas em gua desionizada, com condutividade inferior a 0,1 S/cm. As solues de anio cloreto usadas para traar a curva de calibrao foram preparadas por diluio rigorosa de uma soluo de concentrao 20000,0 mg/L, obtida por pesagem rigorosa de cloreto de sdio, previamente seco a 100C. As solues de catio prata, usadas como titulante no mtodo de referncia e na aferio da resposta do elctrodo de configurao tubular e membrana cristalina homgenea dupla, sensvel ao catio prata, foram preparadas a partir de nitrato de prata slido. A

A determinao do anio cloreto no leite uma das anlises mais frequentemente efectuada, uma vez que o seu doseamento constitui por um lado, um processo simples de deteco de mastites e por outro permite identificar fraudes resultantes de adio de sal ao leite com o objectivo de elevar a sua massa especfica. No caso do queijo e manteiga, o doseamento dos cloretos importante devido influncia que este elemento exerce sobre o paladar destes produtos (Herrero et al., 1992). A concentrao de anio cloreto no leite proveniente de vacas saudveis oscila entre 800 e 1200 mg/L, podendo contudo aumentar para valores muito superiores em leites provenientes de vacas com mastite. O valor de 1400 mg/L normalmente usada como fronteira entre leite normal e adulterado (Van Staden, 1986). Os mtodos de referncia para a determinao de cloreto em leites e produtos lcteos (queijo, manteiga e iogurtes) baseiam-se na titulao directa com nitrato de prata e deteco visual do ponto final, usando cromato de potssio como indicador (Mtodo de Mohr) (NP - 1509, 1985) ou deteco potenciomtrica, usando um elctrodo de AgCl/Ag ou um elctrodo selectivo ao io cloreto (AOAC, 1990) ou ainda no mtodo de Charpantier Volhard, onde ocorre a precipitao do anio cloreto com excesso de catio prata e posterior titulao desse excesso com anio tiocianato (NP - 471, 1983). Na automatizao da determinao de cloretos em produtos alimentares, a anlise por injeco em fluxo (FIA) tem sido uma metodologia bastante usada, quando associada a tcnicas de deteco como a espectrofotometria de UV/vis e a potenciometria. No caso da deteco por Uv/vis, os trabalhos descritos na literatura submetem as amostras a um tratamento prvio ou incorporam no sistema FIA unidades de dilise para eliminar vrios tipos de interferentes (Leon e Centrich, 1991; Herrero et al., 1992; Morais et al., 1997). Dentro dos sistemas com deteco potenciomtrica, uns efectuam a medio directa do cloreto, usando elctrodos de configurao tubular, sem soluo de referncia interna, sensveis ao anio cloreto (Ferreira et al., 1994a; Lima et al., 1996; Prez-Olmos et al., 1997), enquanto outros utilizam as titulaes FIA, usando um elctrodo sensvel ao catio prata, como indicador. As titulaes FIA baseiam-se no controlo da reprodutibilidade do perfil de disperso do segmento de amostra (titulado), injectado num fluxo contnuo (titulante) (Ruzicka e Hansen, 1988; Rhee e Dasgupta, 1985; Stewart, 1986). Normalmente usa-se como reactor uma cmara de mistura com agitao magntica onde se gera uma distribuio exponencial da concentrao, que relaciona a largura de pico com a concentrao das solues injectadas. Nestas condies h uma relao linear entre a largura de pico e o logaritmo da concentrao do analito, a partir da qual se determina, por interpolao grfica, a concentrao da espcie na amostra.

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Cienc. Tecnol. Aliment. Vol. 2, No. 5, pp. 234-239, 2000 concentrao foi padronizada por titulao com uma soluo padro de anio cloreto. A soluo de nitrato de potssio 0,1 mol/L usada como ajustador de fora inica e de pH foi obtida por dissoluo de KNO3, em gua. Instrumentao No sistema FIA as solues foram propulsionadas com uma bomba peristltica Gilson Minipuls 3 e tubos de PVC da mesma marca e as amostras inseridas no sistema com uma vlvula de injeco Rheodyne de 6 portas, modelo 5020. Como elctrodo indicador usou-se um de dupla membrana cristalina homognea de Ag2S, de configurao tubular, sensvel ao catio prata construido segundo Couto et al., 1998 e como elctrodo de referncia um de dupla juno Orion 90-00-02. A aquisio do sinal analtico de cada membrana foi efectuada atravs de um circuito somador electrnico externo construido para o efeito (Lapa et al., 1993). A diferena de potencial entre o elctrodo indicador e o elctrodo de referncia foi medida com um decimilivoltmetro da marca Crison, modelo 2002 (0,1 mV) ligado a um registador Kipp & Zonnen BD 111. Os componentes da montagem foram ligados entre si com tubos de PTFE (0,8 mm d.i.). O material auxiliar de laboratrio, nomeadamente elctrodo de terra e suportes para os elctrodos, tubular e de referncia, foram construidos segundo Alegret et al., 1987. Para gerar o perfil de disperso exponencial da amostra utilizou-se uma cmara de mistura com agitao magntica, construida segundo Valcarcel e Luque de Castro, 1987, cujo volume interno foi determinado experimentalmente, sendo igual a 320 L. Os mtodos de referncia para os diferentes produtos lcteos e padronizao das solues de catio prata foram efectuados num sistema de titulao automtico constituido por uma bureta Crison Model Micro Bur 2031, controlada por um computador Hyundai Model Super 16, com uma interface Avantech Model PCL 720 (Lapa e Lima, 1991). Como elctrodo indicador utilizou-se um de membrana cristalina homognea sensvel ao catio prata, de configurao convencional (Ferreira e Lima, 1994). O elctrodo de referncia e o decimilivoltmetro empregues foram idnticos aos utilizados no sistema FIA. Preparao das amostras Os leites maternizados foram reconstituidos, de acordo com as recomendaes dos fabricantes, antes de injectados no sistema. Relativamente aos outros produtos lcteos, o iogurte apenas foi diluido; o queijo e a manteiga foram emulsionados com gua aquecida e a emulso resultante arrefecida temperatura ambiente, segundo indicaes das normas oficiais (AOAC, 1990; NP-1509, 1985).

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De cada amostra, aps tratamento adequado, retiraram-se diferentes tomas, utilizadas simultaneamente no mtodo de referncia e no sistema FIA. Mtodos de referncia Para a avaliao do teor de cloretos no leite, a Norma Portuguesa (NP - 471, 1983) refere o mtodo volumtrico de argentometria, segundo o processo de Charpantier-Volhard. Este mtodo de referncia apresenta a desvantagem de consumir muito tempo. Na literatura encontra-se descrito o doseamento do anio cloreto por titulao potenciomtrica (Fernandes et al., 1982) e os resultados referidos, comprovam que esta tcnica constitui uma alternativa ao processo usado na Norma Oficial Portuguesa (NP-471, 1983). No caso da manteiga, a Norma Portuguesa para a determinao de cloretos (NP-1509, 1985), recorre tcnica de Mohr. Para a determinao do io cloreto em queijos, no existindo Norma Portuguesa, usou-se Official Methods of Analysis (AOAC, 1990) que recomenda a titulao potenciomtrica com AgNO3. No caso do iogurte no se encontrou nenhum procedimento de referncia para esta determinao. Para todos os produtos lcteos a determinao potenciomtrica (Fernandes et al., 1982) foi a tcnica adoptada por constituir uma alternativa vantajosa aos procedimentos de referncia. Para a execuo do mtodo de referncia mediuse rigorosamente um volume de amostra para um goblet contendo uma barra magntica colocado sobre um agitador, e acidulou-se a soluo com cido ntrico. Posteriormente introduziu-se o par de elctrodos na soluo e usou-se o titulador automtico referido em 2.2, que controlava as adies de titulante. O valor da concentrao de cloretos na amostra foi calculado a partir da avaliao do ponto de inflexo da curva de titulao, obtida por representao grfica da 2 derivada, com um programa de computador desenvolvido para o efeito.

RESULTADOS E DISCUSSO Sistema FIA desenvolvido As titulaes FIA para a determinao de cloretos em leites, iogurtes, queijos e manteigas, foram realizadas usando a montagem monocanal esquematizada na Fig. 1. As solues padro e as amostras (titulado) so intercaladas na soluo de transporte (S.T.) contendo catio prata (titulante). Na cmara de mistura (C.M) ocorre simultaneamente a disperso do segmento de amostra no transportador e a reaco do anio cloreto com o catio prata. O perfil de concentrao gerado pela diminuio da concentrao de Ag (I) no transportador monitorizado

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Lima et al.: Uso de um detector potenciomtrico de sensibilidade aumentada ...

Figura 1. Sistema FIA desenvolvido para a determinao de cloretos em leite e produtos lcteos: B.P - bomba peristltica; Vi - volume de injeco (50 L); A - amostra; ST - soluo de transporte (1,0x10 -4 mol/L em AgNO3 preparada em KNO3 0,1 mol/L e HNO3 1,0x10-3 mol/L; Q1 = 9 mL/min); L1 = 30 cm; C.M. - cmara de mistura com agitao magntica; E - esgoto; E.T. - elctrodo de terra; E.S.I. - elctrodo selectivo de io; E.R. - elctrodo de referncia; MV - decimilivoltmetro; REG. - registador; Som - somador.

pela variao de potencial entre o elctrodo indicador (de membrana dupla cristalina homognea-E.S.I) e o elctrodo de referncia (E.R.) obtendo-se uma relao linear entre a largura de pico (amplitude de sinal analtico) e o logaritmo da concentrao de anio cloreto. Optimizao do sistema FIA desenvolvido A optimizao do sistema consistiu na escolha da concentrao de Ag+ a usar na soluo transportadora, ajuste de fora inica, volume de injeco e caudal. Essa optimizao foi feita recorrendo ao mtodo univariante e tendo sempre em conta o melhor compromisso entre reprodutibilidade, amplitude de sinal analtico, ritmo de amostragem e economia de reagentes. Atendendo a que a concentrao de cloretos nos diferentes tipos de leite e produtos lcteos muito varivel, traaram-se curvas de calibrao com solues padro de concentraes em cloreto compreendidas entre 50 e 2000 mg/L, utilizando 3 concentraes de Ag+ na soluo transportadora (10-5; 10-4 e 10-3 mol/L). Com a soluo de Ag+ de concentrao de 10-5 mol/L obtinha-se picos mais largos o que implica ritmos de amostragem bastante mais baixos. Para a soluo de concentrao 10-3 mol/L a largura dos picos diminuia muito, tornando menos precisa a determinao de cloretos nas amostras com menor

concentrao neste io. Por isso escolheu-se a soluo de Ag + de concentrao de 10 -4 mol/L. A soluo transportadora continha alm de Ag+, nitrato de potssio 0,2 mol/L como ajustador de fora inica e HNO3 1x103 mol/L para prevenir a precipitao de xidos e hidrxidos de prata. Posteriormente, fixando este transportador testaram-se vrios volumes de injeco (Vi) entre 25 e 75 L tendo-se optado pelo volume de 50 L, porque permite um bom compromisso entre sensibilidade analtica e ritmo de amostragem. Estudo idntico foi efectuado para o caudal tendo-se variado este entre 5 e 10 mL/min. Observou-se que para o caudal de 9 mL/min era possvel obter um alto ritmo de amostragem e boa reprodutibilidade analtica. As concentraes das amostras foram obtidas por interpolao em curvas de calibrao e efectuando as medies da largura de pico 50 mV acima da linha de base, sendo os valores posteriormente convertidos em mg/100g de amostra. Resultados A qualidade dos resultados obtidos pelo sistema FIA proposto (CF) foi avaliada por comparao dos valores mdios de cinco determinaes com os resultados mdios

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Cienc. Tecnol. Aliment. Vol. 2, No. 5, pp. 234-239, 2000 de cinco determinaes fornecidos pelo mtodo de referncia (CR), sendo os desvios relativos inferiores a 4% (Tabela 1). Com os valores mdios obtidos pelos dois mtodos, mtodo FIA (CF) e mtodo de referncia (CR), estabeleceu-se tambm uma recta de regresso CF = 0,342 ( 8,080) + 1,003 ( 0,021) CR (r = 0,998). Como se pode constatar pelo valor da ordenada na origem (0,342), pelo declive (+1,003), pelo coeficiente de correlao (r = 0,998) e pelos valores dos desvios relativos (< 4% - Tabela 1) existe uma boa concordncia entre as duas metodologias utilizadas. Tambm foi aplicado o teste t-Student para um intervalo de confiana de 95%, tendose obtido um valor (0,735) inferior ao tabelado (2,093). A preciso (repetitibilidade) da metodologia FIA proposta foi avaliada determinando o desvio padro relativo (RSD%) para doze injeces consecutivas de uma amostra cuja concentrao mdia se situava sensivelmente a meio da curva de calibrao (1212,3 mg/L ou 117,7 mg/100g), e o valor obtido foi 0,5%. O ritmo de amostragem variou entre 130 a 250 amostras/h, dependendo da concentrao da amostra em causa.

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Tabela 1.- Resultados obtidos na determinao do teor de cloretos em diferentes tipos de leite e produtos lcteos usando o sistema FIA e o mtodo de referncia e correspondentes desvios relativos.

Amostras 1a) 2a) 3a) 4a) 5a) 6a) 7a) 8a) 9a) 10b) 11b) 12b) 13c) 14c) 15c) 16d) 17d) 18e) 19e) 20e)

FIA (mg/100g) 488,6 3,5 529,3 4,2 406,0 3,3 311,3 2,4 455,7 4,5 418,6 2,6 408,5 1,1 414,5 2,3 290,6 3,4 125,7 2,2 117,7 1,1 116,4 2,5 225,8 3,3 273,5 3,5 442,3 4,2 555,1 5,3 807,3 6,3 112,0 2,5 101,0 3,3 89,9 1,3

REF (mg/100g) 482,4 3,7 543,5 5,9 414,4 4,7 320,3 2,7 442,0 4,7 425,2 3,8 394,7 2,4 416,5 2,4 281,5 2,4 122,2 3,2 115,1 2,3 115,3 2,6 227,4 3,5 280,4 3,5 434,5 2,1 564,1 2,6 794,7 6,6 109,0 3,6 102,5 3,9 91,5 2,6

D.R. (%) +1,3 -2,6 -2,0 -2,8 +3,1 -1,6 +3,5 -0,5 +3,2 +2,9 +2,3 +1,0 -0,7 -2,5 +1,8 -1,6 +1,6 +2,8 -1,5 -1,7

CONCLUSES O sistema FIA proposto verstil uma vez que permitiu a determinao de cloretos em todos os tipos de matrizes ensaiadas, aps tratamento prvio de acordo com o tipo de amostras, constituindo por isso uma boa alternativa aos mtodos de referncia, mesmo quando se usa um titulador automtico. A comprovar isto esto os resultados concordantes e os elevados ritmos de amostragem (130 a 250 amostras/h) obtidos. um sistema monocanal, econmico e de fcil implementao em qualquer laboratrio de anlise. Uma outra vantagem do sistema FIA apresentado reside na utilizao da potenciometria como tcnica de deteco, uma vez que esta apresenta um intervalo de resposta linear alargado e o sinal analtico no afectado pela cor ou turvao das amostras, permitindo efectuar o doseamento dos cloretos naquele tipo de amostras sem necessidade de utilizao de unidades de dilise, muitas vezes usadas nas determinaes colorimtricas. Por outro lado, a utilizao de um detector potenciomtrico de membrana cristalina homognea e sensibilidade aumentada permite obter resultados mais exactos, ao diferenciar amostras com concentraes muito semelhantes.

a)Amostras de diferentes tipos de leites maternizados; b)Amostras de diferentes tipos de leites de vaca; c) Amostras de manteiga; d) Amostras de queijo; e) Amostras de iogurte.

Alegret, S.; Florido, A.; Lima, J.L.F.C.; Machado, A.A.S.C. (1989). Flow-through tubular iodide and bromide selective electrodes based on epoxy resin heterogenous membranes. Talanta, 36, 825-829. Alegret, S.; Lima, J.L.F.C.; Machado, A.A.S.C.; MartinezFbregas, E.; Paulis, J.M. (1987). A new procedure for construction of mouldable shape membrane ionselective electrodes accommodating crystalline sensors dispersed in epoxy resin. Quim.Anal, 6, 176-180. AOAC (1990) - Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 15th Edition, Arlington, USA. Couto, C.M.C.M.; Lima, J.L.F.C.; Montenegro, M.C.B.S.M. (1998). Construction and evaluation of a crystalline silver double-membrane tubular potentiometric detector for flow injection analysis. Application to chloride determination in wine. Analusis, 26, 182-186. Fernandes, C.L.V.A.; Lima, J.L.F.C.; Machado, A.A.S.C. (1982). Utilizao de elctrodos selectivos de ies na determinao do teor em cloretos do leite. Rev. Port. Qum., 24, 213-221.

BIBLIOGRAFIA Alegret, S.; Alonso, J.; Bartrol, J., Garca-Raurich, J.; Martnez-Fbregas, E.; Snchez-Rodrguez, J. (1995). Potentiometric determination of chloride ion in milk and dairy products by FIA titration. Quim. Anal. 14, 121-124.

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Lima et al.: Uso de um detector potenciomtrico de sensibilidade aumentada ... Lima, J.L.F.C.; Rangel, A.O.S.S.; Souto, M.R.S. (1996). Potentiometric determination of chloride in vegetables by flow-injection analysis. Commun. Soil Sci. Plant Anal., 27, 37-46. Morais, S.; Alcaina-Miranda, M.I.; Lzaro, F.; Plant, M.; Maquieira, A.; Puchades, R. (1997). Evaluation of the dialysing yield of membranes with different composition. Application to the analysis of chloride in fruit juices by flow injection. Anal. Chim. Acta, 353, 245-254. Norma Portuguesa, NP - 1509 (1985). Determinao do teor de cloretos em manteiga. Norma Portuguesa, NP - 471 (1983). Determinao do teor de cloretos em leites. Prez-Olmos, R.; Herrero, R.; Lima, J.L.F.C.; Montenegro M.C.B.S.M. (1997). Sequential potentiometric determination of chloride and nitrate in meat products. Food Chem., 59, 305-311. Rhee, J.S.; Dasgupta, P.K. (1985). Studies on peak width measurement-based FIA acid-base determinations. Mikrochim. Acta, III, 49-64. Ruzicka, J.; Hansen, E.H. (1988). Flow Injection Analysis. John Wiley & Sons, New York. Stewart, K.K. (1986). Time-based flow injection analysis. Anal. Chim. Acta, 179, 59-68. Valcrcel, M.; Luque de Castro, M.D. (1987). FlowInjection Analysis. Principles and Applications, John Wiley & Sons, Chichester, England. Van Staden, J.F. (1986). Flow-injection analysis of chloride in milk with a dialyser and a coated tubular inorganic chloride-selective electrode. Anal. Lett., 19, 1407-1419.

Ferreira, A.M.R.; Rangel, A.O.S.S.; Lima, J.L.F.C. (1996). Determination of chloride in soils by flow-injection potentiometric pseudotitration. Commun. Soil. Sci. Plant Anal., 27, 1437-1445. Ferreira, I.M.P.L.V.O.; Lima, J.L.F.C.; Rangel, A.O.S.S. (1994a). Flow injection sequential determination of chloride by potentiometry and sodium by flame emission spectrometry in instant soups. Anal. Sci., 10, 801-805. Ferreira, I.M.P.L.V.O.; Lima, J.L.F.C.; Rangel, A.O.S.S. (1994b). Flow injection titration of chloride in food products with a silver tubular electrode based on an homogeneous crystalline membrane. Food Chem., 50, 423-428. Herrero, M.A.; Atienza, J.; Maquieira, A.; Puchades, R. (1992). Flow injection spectrophotometric determination of calcium, phosphate and chloride ions in milk. Analyst, 117, 1019-1024. Hibbert, D.B.; Alexander, P.W., Rachmawati, S.; Caruana, S.A. (1990). Multiple sensor response in segmented flow analysis with ion-selective electrodes. Anal.Chem., 62, 1015-1019. Lapa, R.A.S.; Lima, J.L.F.C. (1991). Computer-controlled ion-selective electrode switch. J. Autom. Chem., 13, 119-122. Lapa, R.A.S.; Lima, J.L.F.C.; Reis, M.S.H. (1993). Ion selective electrodes for potassium and calcium with a summing operational amplifier. An assessment of their analytical usefulness in determination of parenteral and haemodialysis solutions. IL Farmaco, 48, 1605-1616. Leon, J.A.; Centrich, F. (1991). Determination of chloride in food by segmented continuous-flow analysis (CFA) and flow-injection analysis (FIA). Alimentaria, 28, 5759. Lima, J.L.F.C.; Rangel, A.O.S.S. (1989). Chloride pseudo titration in wines by FIA with a Ag2S/Ag tubular electrode as detector. J. Food Comp. Anal., 2, 356363.

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