Respirao e efeitos da composio da atmosfera

Fisiologia e Tecnologia Ps-colheita

Ps-graduao em Fruticultura Instituto Superior de Agronomia
Domingos P. F. Almeida

Taxas de respirao
Classe Respirao a 5 C
(mg CO 2.kg-1.h -1)

Produtos

Muito baixa Baixa Moderada

<5 5 10 10 20

Nz, avel, castanha, amndoa, tmara Ma, citrinos, uva, kiwi, cebola, batata Damasco, banana, cereja, pssego, nectarina, pra, ameixa, figo, couve, canoura, alface, pimento, tomate Morango, framboesa, amora, couveflor, abacate Alcachofra, feijo-verde, couve-deBruxelas, flores cortadas Espargo, brcolo, cogumelos, ervilha fresca, espinafre, milho-doce

Alta Muito alta Extremamente alta

20 40 40 60 >60

Teor de acares em frutos

Fruto Total Glucose Frutose Sacarose
(% peso fresco)

Abacate Lima Tomate Pra Ma Anans Uva Tmara

0,4 0,7 2,8 10,0 11,6 12,3 14,8 61,0 1,6 2,4 1,7 2,3 8,2 32,0 1,2 7,0 6,1 1,4 7,3 23,7 8,2 1,0 3,6 7,9

Kays (1997)

Converses de carbohidratos
Amido Glucose Sacarose glucose + frutose

Transporte fotoassimilados
A sacarose o a car de transporte na maioria das plantas. Sintetizada do citosol das clulas mesfilo. Translocada no floema. Utilizada nas clulas receptoras. Mas alguns frutos no acumulam sacarose. Para onde vai a sacarose ?

Invertase
Sacarose + H 2O glucose + frutose Hidrlise irrevers vel. Existem diversas formas de invertase, presentes em diversos compartimentos celulares:
Neuta Citoplasma cida Vacolo Parede celular - Fracamente associada Parede celular - Fortemente associada

Invertase (mRNA e actividade) durante o desenvolvimento do bago de uva

(Boss & Davies, 2001)

Sacarose sintase

Sacarose + UDP UDP-glucose + frutose Reaco reversvel, mas in vivo, a enzima cataliza a degradao da sacarose.

Originalidades da mitocndria vegetal

Semelhante dos animais em:
Morfologia Composio de fosfolpidos nas membranas Cadeia de transporte de electres via citocromo oxidase e fosforilao oxidativa Ciclo TCA

Diferente no que diz respeito a:

Taxa de consumo de O 2 (por unidade de prote na) muito maior nas mitocndrias vegetais Capacidade para oxidar NADH na ausncia de citocromo c Oxidao de cidos gordos muito baixa ou nula nas mitocndrias vegetais Oxidao de cidos orgnicos importante. Ciclo TCA pode ser alimentado por malato.

Gliclise e fermentao alcolica

Glicose Hexoses-P F-1,6-BiP e Trioses-P
ADP ATP ADP Piruvato cinase ATP ATP ADP ATP ADP NAD+ NADH + H+ Fosfofructocinase

Etanol

Compostos C3 fosforilados

CO2
Condies anaerbicas

Acetaldedo

Piruvato
Condies aerbicas

Ciclo TCA

Regulao da gliclise

Frutose- 6 - P + ATP Frutose-1,6 - BiP + ADP + Pi PFK

PPi-fosfofrutocinase (PPK, EC 2.7.1.90)

Fosfofrutocinase (PFK, EC 2.7.1.11)

Frutose- 6 - P + PPi Frutose-1,6- BiP+ Pi PPK

Piruvato cinase (PK, EC 2.7.1.40)

Fosfoenolp iruvato + ADP Piruvato + ATP PK

Ciclo dos cidos tricarboxlicos

Piruvato Acetil-CoA CO2 cis-Aconitato Oxaloacetato
NADH NAD+

Citrato

Malato
Complexo I

Isocitrato
NAD+ NADH

CO2 CO2

Fumarato
UQ FADH2 FAD

NAD+ NADH

-Cetoglutarato
GDP GTP

Succinato

Composio
cidos orgnicos

Mlico

Uva, ma , pra, banana, pssego, ameixa, cereja, brcolo, cenoura, alface, cebola Citrinos, anans, morango, figo, hortcolas de folhas, tomate, batata Uva (~ mlico) Espinafre Amora Kiwi

Ctrico Tartrico Oxlico Isoctrico Qunico

O teor em cido mlico decresce durante o amadurecimento O teor em acar aumenta (geralmente)

Oxidao do malato
CO2

Piruvato
Enzima mlica

Piruvato desidogenase

Malato

Acetil-CoA

Malato desidrogenase

Citrato sintase

Oxaloacetato Citrato CO2 PEP

Transporte de electres
NADH

Complexo II (Succinato desidrogenase) UQ

Complexo I (NADH desidrogenase)

ADP + Pi ATP

Complexo III (Citocromo bc1 ) Oxidase Alternativa Citocromo c Complexo IV (Citocromo oxidase) O2

0,5 ADP + 0,5 Pi 0,5 ATP

ADP + Pi ATP

Efeito do etileno e cianeto na taxa de respirao Libertao de O2 em L.g-1 .h-1

Produto Ma Abacate Limo Batata Beterraba Cenoura Controlo 6 35 7 3 11 12 Etileno 16 150 16 14 22 20 Cianeto 18 150 21 14 24 30

Kays (1997)

Cadeia de transporte de electres na clula vegetal

(Siedow & Umbach, 1995)

Regulao do metabolismo em funo da carga energtica

AMP
% total

ATP

CE =
ADP Carga energtica

ATP + 0,5 ADP ATP + ADP + AMP

Adenilato cinase

Velocidade relativa

ATP + AMP 2 ADP

Catabolismo

Anabolismo Carga energtica

Relao entre a carga energtica e a incidncia de acidentes fisiolgicos internos em pra

(Saquet et al, 2003)

Quociente respiratrio

Substrato Glucose cido mlico

Equao da respirao C6 H12 O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2 O C4 H6 O5 + 3 O2 4 CO2 + 3 H2 O

QR 1,0 1,3

cido esterico C18 H36 O2 + 26 O2 18 CO2 + 18 H2 O Fermentao C6 H12 O6 2 C2 H6 O + 2 CO2 + 2 H2 O

0,7 >> 1

Classificao de frutos com base no padro respiratrio durante o amadurecimento Climactrico

Abacate Ameixa Banana Carambola Damasco Diospiro Feijoa Figo Fruta po Goiaba Kiwi Litchi * Ma Manga Maracuj Meloa Mirtilo Nectarina Papaia Pra Pssego Tomate

No-climactrico
Amora Anans Azeitona Caju Cereja Kumquat Laranja Lima Limo Malagueta Melancia * Morango Pimento Tomateiro arbreo Toranja Uva

rgos Climactricos

Janela de Oportunidade

Tamanho

Respirao

rgos No-climactricos
(Exemplo da uva)

Pintor Tamanho

Respirao

O papel do climactrico respiratrio?

Energia necessria para a sntese de novas enzimas associadas ao amadurecimento Mas...
As necessidades so inferiores energia produzida durante o climactrico Frutos no-climactricos possvel dissociar o climactrico respiratrio de algumas alteraes associadas ao amadurecimento

Resposta ao etileno? Hiptese da quase-autonomia da mitocndria ?

Efeito da concentrao de O 2 na taxa de respirao Libertao de CO2 em mg.kg-1 .h-1

Temperatura (C) Produto
Ar Espargo Couve-Bruxelas Morango Couve-flor Alface Pepino Batata-primor Cenoura Tomate Batata Cebola 28 17 15 20 16 6 10 13 6 3 0 3% O2 25 14 12 14 15 5 10 7 5 2 Ar 63 50 52 45 31 13 20 19 15 4 7 10 3% O2 45 35 45 45 25 8 18 11 6 3 4 Ar 127 90 127 126 80 15 40 33 30 6 8 20 3% O2 75 70 86 60 45 10 30 25 12 4 4
Kays (1997)

Oxidases de elevado Km e de baixo Km

Equao de Michaelis- Menten

v=

Vmax [S ] Km + [S]

v=

Vmax [S ] K 1 + [S]
2

Vmax

.Vmax

Km

[S]
K 1/2 K m aparente

Oxidases de baixo Km
Citocromo c oxidase
K1/2 = 0,25 5 % O 2 Aumenta com a temperatura

Exemplos de oxidases (e oxigenases) de elevado Km

Polifenol oxidase (PPO)

o-di-hidroxifenois + O2 o-benzoquinonas + H2 O

Lipoxigenase (LOX)
Motivo cis-cis-1,4-pentadieno

OOH

R-CH=CH-CH2-CH=CH-R + O 2 R-CH-CH-CH2-CH=CHR

cido linoleico (18:2 9, 12) e linolnico

ACC oxidase (ACO)

ACC + O2 C2 H4 + CO2 + HCN

Oxidase alternativa

Concentraes recomendadas de O 2 e de CO2 para algumas hortalias

(Saltveit, 2003)

Concentraes recomendadas de O2 e de CO 2 para hortalias que apresentam diferenas na mesma espcie

(Saltveit, 2003)

Atmosfera controlada
1929 1965 1978 Atmosfera controlada comercial Low oxygen (2%) Ultra low oxygen (1,2%)

Ser possvel encontrar uma composio da atmosfera ptima?

Etapas para a determinao da concentrao de O2 ptima

(Saltveit, 2003)

Respirao de alface e danos provados pela anaerobiose em atmosferas com diferentes concentraes de O2

Nota: no caso da alface o limite inferior do nvel de O2 pode ser mais baixo do que o valor que induz fermentao pois os benefcios da reduo do acastanhamento enzimtico so maiores do que os efeitos indesejveis no aroma.

(Saltveit, 2003)

Atmosfera prtica de segurana e os benefcios da reduo do O 2

Morango
K1/2 (20 C) = 1,0 kPa O2 Fermentao < 1,2 kPa O2

Ma pr-climactrica + MCP
K1/2 (22 C) = 1,0 kPa O2 Fermentao < 1,5 kPa O2

Ma amadurecimento
K1/2 (22 C) = 9,0 kPa O2 Fermentao < 2,5 kPa O2

Regra de Vant Hoff e Q10

Dentro do intervalo de temperaturas relevantes do ponto de vista fisiolgico, a velocidade das reaces biolgicas aumenta 2 a 3 vezes por cada aumento de 10 o C na temperatura. 10

R2 T2 T1 Q10 = R 1

Intervalo de temperatura (C) 0-10 10-20 20-30 30-40

Valores do Q10 2.5-4.0 2.0-2.5 1.5-2.0 1.0-1.5

Respirao: resumo
C6H12O6 + 6 O 2 6 CO2 + 6 H2O + 686 kcal

C6H12O 6 Moles Massa (g) 1 180

O2 6 192

CO 2 6 264

H2O 6 108

Atmosfera controlada e modificada

Fisiologia e Tecnologia Ps-colheita

Ps-graduao em Fruticultura Instituto Superior de Agronomia
Domingos P. F. Almeida

Atmosfera controlada
Vantagens Inconvenientes Produtos que beneficiam da utilizao comercial da AC/AM

Variveis que podem ser controladas

1. 2. 3. 4. 5. 6. Durao do armazenamento Temperatura Humidade relativa Concentrao de O 2 Concentrao de CO2 Concentrao de etileno

Evoluo das recomendaes para a ma Coxs Orange Pippin a 3,5 C em Inglaterra

O2 (%) 21 16 3 2 1,25 1 CO 2 (%) 0 5 5 <1 <1 <1
Durao armazenamento (semanas) Data aproximada

13 16 21 27 31 33

1920 1935 1965 1980 1986

(In Thompson, 1998)

Problemas na determinao da composio ptima da atmosfera

Variabilidade biolgica Tecnologia de sensores e controladores Parmetros mutuamente exclusivos

Elementos de uma cmara de AC

(alm da cmara frigorfica)

Revestimento estanque Dispositivos de:

Regulao da concentrao de CO2 Regulao da concentrao de O 2 Limitao das variaes de presso Vlvulas Balo de compensao

Analisadores
CO 2 O2

Eventualmente
Gerador de N2 Sistema informtico de gesto da atmosfera

Colocao em regime
Fecho da cmara quando estabelecido o equilbrio trmico Reduo do n vel de O2
Respirao (lento) Purga com N2 (rpido)

Elevao do nvel de CO2

Respirao

Sistemas de produo de N2
Vantagens
R pida colocao em regime

Desvantagens
Custo de investimento Custo de funcionamento

Sistemas
PSA Pressure Swing Adsorption Membranas fibras ocas

PSA Pressure Swing Adsorption

(Wills et al., 1998)

Filtro molecular com carvo activado que retm o oxignio

(Mazollier & Millet, 2002)

Membranas de fibras ocas

(Wills et al., 1998; Mazollier & Millet, 2002)

Controlo do O2
Adio de O 2

Ar atmosf rico

Remoo de O 2 Limites de tolerncia

Concentrao < 2%: 0,15% Concentrao > 2%: 0,30%

Controlo do CO2
Adio de CO2
Respirao Botijas Gelo seco (durante o transporte)

Reduo do CO2
Sistemas no renovveis Cal

Ca (OH ) 2 + CO2 CaCO3 + H 2 O

Capacidade: 1 kg cal absorve 0,4 kg CO 2 Sistemas renovveis Carvo activado Filtro molecular: Silicato de aluminio clcio

Tolerncia: 0,5%

Sistemas hipobricos
Armazenamento a presso < patm Clculo da concentrao de O2

pO2 =

Presses

pcmara DPV 21 pexterior

Varivel: 40-380 mmHg

Vantagem
Remoo do etileno

Problema
Controlo da perda de gua Manter o ar com humidade relativa ~100%

Controlo da cmara

Analisador de CO2 : Infravermelhos Analisador de O2 : Paramagntico

(Mazollier & Millet, 2002)

Atmosferas modificadas
Embalagem em atmosfera modificada (MAP) Geradas pelo produto de forma passiva Modificadas activamente

Atmosfera modificada

(Moldo & Empis, 2000)

Modificao da atmosfera
H2 O O2 CO2

O2
Interior embalagem

H2 O CO2

Permeabilidade de alguns filmes

Transmisso de vapor de gua (g/m2 /24 h) 38 C/90% HR Permeabilidade de filmes com 25 m a 25 C (cm3 /m2/24h/atm)

Filme

O2

N2

CO 2

Polietileno PEbd Polietileno PEad Copolmero EVA

18 7-10

7800 2600

2800 650

42000 7600

40-60

12500

4900

50000