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GOBERNACIN DE ANTIOQUIA CONVENIO ICA- SECRETARA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL MEDELLN, 2009
La propiedad intelectual de este material pertenece a la Gobernacin de Antioquia, Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural. Prohibida la reproduccin total o parcial, por cualquier medio o con cualquier propsito, sin la autorizacin escrita de estos. Segunda edicin: Diciembre de 2009 Financiacin de la publicacin: Convenio ICA - Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural Diseo, diagramacin e impresin Digital Express Ltda. - Medelln Colaboradores Funcionarios Instituto Colombiano Agropecuario ICA rea Pecuaria Sandra Patricia Acevedo Garcs y Amparo Gmez Ramrez. Bacterilogas Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural Fotografas Todas las fotografas utilizadas en la impresin de esta cartilla, fueron aportadas por funcionarios de la Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural de Antioquia Impreso y hecho en Colombia Medelln, 2009.
Luis Alfredo Ramos Botero Gobernador de Antioquia Edgar Arrubla Cano Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural Juan Guillermo Vlez Gonzlez Director Desarrollo Rural Nestor Yarce Garca Coordinador Regional Antioquia Instituto Colombiano Agropecuario Cristobal Jose Daz Anaya Coordinador Equipo Tcnico de Sanidad Preparado por: Francisco Javier Pabn Hernndez Mdico Veterinario Gloria Elena Guzmn Restrepo Ingeniera Agrnoma, M. Sc Susana Maya Bolvar Ingeniera Agrnoma, Ph. D
Gobernacin de Antioquia Convenio ICA - Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural Medelln, 2009
NDICE
1. 1.1 1.1.2 1.1.3 1.1.4 2. 2.1 2.2 2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.3 2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.3.4 2.3.5 2.3.6 2.3.7 2.3.8 2.4 2.5 2.5.1 2.5.2 2.5.3 2.5.4 2.5.5 2.6 2.7 2.8 2.9 3. 3.1 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.2 3.2.1 3.2.2 Diagnstico pecuario ____________________________________________ Factores bsicos en la toma y envo de muestras al centro de diagnstico ________ Calidad de la muestra _______________________________________________ Cantidad de la muestra _____________________________________________ Tiempo en la ruta crtica de la muestra __________________________________ Recomendaciones generales para el envo de muestras al centro de diagnstico ________________________________ Pruebas diagnsticas solicitadas al centro de diagnstico ____________________ Sugerencias para toma de muestras de sangre ____________________________ Sugerencias para hematologa ________________________________________ Anticoagulantes mas usados _________________________________________ Sugerencias para qumica sangunea, suero o plasma _______________________ Sugerencias en toma y envo de muestras para bacteriologa _________________ Secrecion de oidos _________________________________________________ Secreciones oculares _______________________________________________ Secreciones vaginales ______________________________________________ Lquido cefalorraqudeo _____________________________________________ Liquidos diferentes al cefalorraqudeo___________________________________ Hemocultivos _____________________________________________________ Urocultivos ______________________________________________________ Sugerencias en cultivo bacteriolgico de leches ___________________________ Recuento de celulas somticas en leche (rcs) _____________________________ Sugerencias en la toma y envo de muestras para un estudio parasitolgico ______ Coprolgicos _____________________________________________________ Hemoparasitos parsitos en sangre ___________________________________ Ectoparasitos - parsitos externos _____________________________________ Recomendaciones para el estudio cultivo micolgico en pelos_________________ Recomendaciones para el estudio cultivo micolgico _______________________ Recomendaciones para el estudio de patologa ____________________________ Recomendaciones para examen de citologas _____________________________ Procedimiento frente a una patologa (enfermedad) en un predio ______________ Equipo bsico en oficinas de sanidad para la toma de muestras pecuarias ________ Diagnstico agrcola ____________________________________________ Factores bsicos en la toma y envo de muestras agrcolas ___________________ Calidad de la muestra _______________________________________________ Cantidad de la muestra _____________________________________________ Tiempo en la ruta crtica de la muestra __________________________________ Toma de diferentes tipos de muestras ___________________________________ Plantas grandes ___________________________________________________ Plantas pequeas __________________________________________________
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4.
Diagnstico de daos causados por insectos plagas (diagnstico entomolgico)________________________________ 4.1 Procedimiento general de diagnsticos entomolgicos ______________________ 4.1.1 Estructura afectada sin presencia del insecto causante ______________________ 4.1.2 rea lesionada y presencia del insecto causante ___________________________ 4.2 Como enviar muestras que contengan insectos ___________________________ 4.3 Muestra para determinar organismos benficos en insectos __________________ 4.3.1 Muestras a enviar al laboratorio _______________________________________ 4.4 Equipos de recoleccin de insectos _____________________________________ Diagnstico de daos causados por enfermedades (diagnstico fitopatolgico) ________________________ 5.1 Diagnstico de la enfermedad ________________________________________ 5.1.1 Sntomas por causas biticas _________________________________________ 5.2 Frutos y otros tejidos frescos o suculentos: _______________________________ 5.3 Flores y frutillos cuajados ____________________________________________ 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13.
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Toma y envo de muestras para anlisis nematolgico ______________ 60 Sntomas por circustancias particulares del ambiente ______________ 61 Instrumentos para muestreo de enfermedades ____________________ 62 Muestras para determinar hongos antagnicos ____________________ 63 Sntomas de presuncin viral ____________________________________ 63 Muestras para determinar dao por herbicidas ____________________ 64 Muestras para determinar viabilidad de semillas ___________________ 65 Anexos ________________________________________________________ 66
NDICE DE TABLA
Tabla 1. Tabla 1. Tabla 1. Tabla 2. Tabla 3. Tabla 4. Tabla 5. Tabla 6. Tabla 7. Tabla 8. Tabla 9. Muestras para exmenes bacteriolgicos_____________________________ 33 Muestras para exmenes bacteriolgicos (continuacin) _________________ 34 Muestras para exmenes bacteriolgicos (continuacin) _________________ 35 Muestras para exmenes de virologa _______________________________ 36 Muestras para exmenes de histopatologa ___________________________ 37 Muestra para exmenes de parasitologa (parsitos internos) _____________ 37 Muestras para exmenes de ectoparsitos (parsitos externos) ____________ 38 Muestras para electrolitos (Ionogramas) _____________________________ 38 Muestras para exmenes de hematozoarios (parsitos en sangre) __________ 39 Muestras para exmenes de enfermedades reproductivas ________________ 40 Muestras de qumica sangunea para enfermedades metablicas ___________ 41
Tabla 10. Muestras de biologa molecular PCR (Reaccin de la Polimerasa en Cadena) __ 41 Tabla 11. Muestras para exmenes de toxicologa _____________________________ 42 Tabla 11. Muestras para exmenes de toxicologa (continuacin) __________________ 43 Tabla 12. Sntomas ms comunes encontrados en plantas asociados a daos por insectos o artrpodos ________________________________________ 55
PRESENTACIN
El Centro de Diagnstico Agropecuario Convenio Ica Secretaria de Agricultura y Desarrollo Rural, cuenta con profesionales calificados en las diferentes reas de la sanidad, los cuales adems de desempear labores de diagnstico como un servicio a la comunidad, se encargan de apoyar la vigilancia zoo y fitosanitaria de nuestro Departamento a travs del desarrollo de campaas de sanidad agropecuaria y proyectos de investigacin aplicada en los temas de inters para nuestra nacin y los pases con los cuales se quiere llegar a tener un comercio de productos de este subsector, con miras al establecimiento y permanencia en los mercados internacionales. Ha sido para el centro de diagnstico agropecuario del convenio una gran preocupacin el poco uso que se da al laboratorio para el diagnstico de enfermedades y plagas, principalmente en el rea agrcola y es su deseo motivar el uso de una herramienta tan importante como el laboratorio para la obtencin de diagnsticos acertados, con lo cual se puedan hacer manejos y controles mas efectivos disminuyendo as los riesgos de perdidas econmicas en la produccin agropecuaria en un alto porcentaje . Por esta razn el equipo tcnico de este centro Agropecuario Convenio Ica Secretaria de Agricultura, se dio a la tarea de elaborar una cartilla en forma ordenada, clara y prctica, con criterios precisos en lo tcnico a fin de que se convierta en una gua para los procedimientos a nivel de campo en el correcto manejo, toma, conservacin y envi del material vegetal y muestras pecuarias al centro de diagnstico. Se espera que esta cartilla sea un manual de procedimientos que permita a profesionales, tcnicos y productores del sector agropecuario prevenir, corregir o mitigar los impactos negativos generados por plagas, enfermedades y sustancias nocivas de la manera mas amigable y racional con el medio ambiente, procurando la seguridad alimentara, obtencin de productos inocuos, la investigacin y el desarrollo tecnolgico, haciendo as mas eficientes las actividades agrcolas y pecuarias de Antioquia.
EDGAR ARRUBLA CANO Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural Departamento de Antioquia Medelln, octubre 2009.
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INTRODUCCIN
Los servicios que brinda el Centro de Diagnstico agrcola y pecuario del convenio ICA-SECRETARIA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL, dan a los profesionales del sector herramientas para desarrollar su trabajo de asistencia tcnica y asesora a los diferentes productores. Los resultados del laboratorio son valiosos siempre que se valide la informacin en campo. Aunque la experiencia y el ojo clnico conducen a los profesionales a un diagnstico presuntivo, no siempre aquellos son confiables, pues las patologas pueden tener sintomatologas semejantes que pueden llevar a diagnosticar y tratar equivocadamente la problemtica, con un incremento en los costos de produccin, desmereciendo la calidad y cantidad del producto final. Por tal motivo el uso del laboratorio es la mejor herramienta para la toma de decisiones, adems, en el Centro de Diagnstico se tiende a la bsqueda de tcnicas cada vez ms rpidas, sensibles, especficas y confiables para un correcto diagnstico. En el Centro de Diagnstico se reconocen e identifican enfermedades y plagas que afectan la produccin agropecuaria, mediante la aplicacin de modernos mtodos y procedimientos diagnsticos e investigacin aplicada de laboratorio y de campo. Los diagnsticos de laboratorio, permiten ir creando un historial fitosanitario y zoosanitario de las patologas de un municipio, una regin o un Departamento, enfocando estas problemticas desde el punto de vista de riesgo poblacional, y no individual, contribuyendo a formular los diferentes planes, programas y proyectos a travs de campaas de prevencin, control y manejo que conducen a una verdadera vigilancia epidemiolgica. El centro de diagnstico cuenta con un equipo de profesionales altamente calificados y con experiencia, que brindan la asesora indispensable en estas reas. Adems garantizamos oportunidad y calidad en los servicios brindados.
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1. DIAGNSTICO PECUARIO
1.1 FACTORES BSICOS EN LA TOMA Y ENVO DE MUESTRAS AL CENTRO DE DIAGNSTICO
El xito para un diagnstico correcto y oportuno depende de tres factores: Calidad de la muestra Cantidad de la muestra Tiempo transcurrido en la ruta crtica
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La muestra debe ser lo ms representativa en cantidad, tanto del animal como del hato (porcentaje de animales de la finca). En trastornos nerviosos: enviar fragmentos de cerebro y/o cerebelo. Trastornos digestivos: fragmentos de intestinos y/o estmagos. Trastornos respiratorios: fragmentos de pulmones y/o trquea. Lo anterior puede ir acompaado de otro tipo de muestra como orina, sangre, secreciones, materia fecal y otras.
Una muestra suficiente, reciente y limpia, tiene alta probabilidad de diagnstico 1.1.4 TIEMPO EN LA RUTA CRTICA DE LA MUESTRA
Es el tiempo transcurrido entre la notificacin del caso y la entrega de los resultados del laboratorio, es un tiempo controlado por el hombre aumentndolo o disminuyndolo, entre ms corto sea el tiempo se va obtener un diagnstico correcto y oportuno. Factores que intervienen: Notificacin del caso Visita a la finca Toma de muestras Envo de muestra al laboratorio Recibo de muestras en el laboratorio Resultado de laboratorio
El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser tiles para el diagnstico.
SIGNOS Y SNTOMAS
Vulvovaginitis en bovinos
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Diarrea en lechones
Equino caquctico
LESIONES MACROSCPICAS
Placentitis en bovinos
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Pulmn bovino, con lesiones granulomatosos por tuberculosis Bovino con lceras en lengua
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Transporte de tejidos separados en bolsas plsticas y termo con refrigeracin y su respectivo protoloco
Transporte de tejidos en bolsa plstica con refrigeracin en caja de cartn hermticamente cerrada y su respectivo protocolo
Aborto en bovinos, es de las principales manifestaciones observadas en enfermedades reproductivas por causas infecciosas y estos se presentan generalmente despus de los 45 das de gestacin.
ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
Abortos y momificaciones en bovinos
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Abortos en porcinos
Toma de sangre en bovino con vacutainer en vena caudal, previa desinfeccin del sitio
EDTA (sales de potasio o de sodio en concentracin de 1mg / 1 ml de sangre), valido en todas las especies. Heparina (0.5 Mg. por 4.5 ml de sangre), oxalatos (potasio y sodio) y citrato de sodio al 3.8%
ENFERMEDADES HEMOPARASITARIAS
Anaplasma en bovinos
Babesia en bovinos
Tripanosoma en bovinos
Sujecin e inmovilizacin de porcinos en toma de sangre en la vena cava, previa desinfeccin del sitio
Serologa: En el suero se detectan anticuerpos especficos contra determinados antgenos, para lo cual se recomienda tomar muestras pareadas, de un mismo animal con un intervalo de 15 das entre ellas. Las muestras pueden ser 10 ml de sangre sin anticoagulante conservadas en refrigeracin o 2 ml de suero conservado en congelacin para la prueba deseada.
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2.3 SUGERENCIAS EN TOMA Y ENVO DE MUESTRAS PARA BACTERIOLOGA Las muestras para estudio deben ser lo ms frescas posibles, conservadas en refrigeracin (no congelar), tomadas aspticamente y antes del tratamiento con antibiticos. En caso de ser hisopados, conservar en medio de mantenimiento.
BACTERIOLOGA Y VIROLOGA
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Hisopado nasal en porcinos Hisopado traqueal en aves Hisopados y medio de conservacin para cultivo bacteriolgico o viral
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Esta muestra es necesario enviarla de inmediato al laboratorio. Ya que algunas bacterias que no sobreviven con el almacenamiento prolongado o cambios bruscos de temperatura. El volumen de la muestra debe ser representativo, aproximadamente de 3 a 4 mililitros.
2.3.6 HEMOCULTIVOS
Materiales: Alcohol yodado y antisptico, jeringa estril, mechero, algodones estriles y frascos con el medio de cultivo. Recoleccin de la muestra: Despus de haber sujetado al paciente y haber seleccionado cuidadosamente el sitio de puncin, debe hacerse una asepsia cuidadosa de la piel para reducir la incidencia de contaminacin del hemocultivo. La piel debe de desinfectarse y luego con alcohol por 3 veces del centro a la periferia. Las tapas de caucho de los frascos que contienen el medio de cultivo mas el anticoagulante que potencialmente pueden estar contaminadas, deben de desinfectarse con una solucin de yodo y el exceso de sustancia descontamnate debe removerse antes de tomar la muestra. En todos los casos debe actuar el antisptico durante un minuto, una vez que se ha descontaminado el sitio de la puncin no debe tocarse nuevamente con el dedo a menos que este haya sido desinfectado de igual manera o que se usen guantes estriles para hacer la puncin.
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La muestra debe tomarse con una jeringa de 5 ml, para pequeas especies y de 10 ml para grandes especies, aunque es preferible hacerlo directamente por medio de un aditamento especial con el cual pueden tomarse directamente en el frasco con el medio de cultivo. Los recipientes en que se toman las muestras directamente, deben colocarse por debajo del sitio de la puncin, para evitar el reflujo de la sangre. La aguja se introduce directamente en la vena, si esta se pierde o hay que efectuar una segunda puncin debe usarse una nueva aguja o un nuevo equipo para la toma de la muestra, estas precauciones deben tenerse en cuenta para reducir el riesgo de contaminacin de la muestra con flora normal de la piel. Las muestras deben mezclarse cuidadosamente e inmediatamente enviarla al laboratorio.
2.3.7 UROCULTIVOS
Materiales: Sondas estriles, catteres estriles, guantes, frascos estriles de boca ancha y alcohol yodado y antisptico. Recoleccin de la muestra: En general todos los animales para la toma hay que realizar un lavado riguroso de los genitales externos con el fin de remover los organismos contaminantes, se debe utilizar jabn y abundante agua limpia. En grandes especies la muestra de orina se puede recolectar por miccin limpia y debe ser de la mitad del chorro de la orina, la muestra se debe tomar en un frasco estril el cual no se debe destapar hasta el momento de la toma de la muestra, no tocar la boca de este y tomarla directamente en el frasco con una cantidad apropiada para el procedimiento de esta, enviar inmediatamente al laboratorio de lo contrario se debe refrigerar. Otros mtodos muy utilizados en pequeos animales son la utilizacin de sondas catter y puncin vesical, siendo esta ultima la ms utilizada. Despus de localizar la vejiga lavar y desinfectar, puncionar con jeringa estril y tomar aproximadamente 5 ml, y enviarla al laboratorio. El catter es considerado uno de los mejores mtodos pero no se ha tenido en cuenta que este puede introducir infecciones. La muestra por ningn motivo debe ser guardada en nevera ya que los cambios de temperatura afectan la viabilidad de los microorganismos. No recoger muestras del suelo porque estas llevan consigo bacterias contaminantes que se encuentran all y pueden llevar a un diagnstico errado. La muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte adecuado, se debe procesar inmediatamente llegue al laboratorio.
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y se recolecta la muestra de cada cuarto individual en tubos estriles que contenga el preservativo. La muestra se debe preservar y mantener refrigerada mientras llega al laboratorio. Se debe tomar aproximadamente 10 ml de cada pezn.
2.5.1 COPROLGICOS
Con guante o funda plstica introducir la mano en el recto del animal y estimular mediante masajes el esfnter anal.
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Cuando se haya obtenido la cantidad suficiente de materia fecal de 20 a 40 gramos, el guante es reversado hacia adentro. Si la muestra tardara ms de 2 horas en llegar al laboratorio, pasar una parte de la muestra a un recipiente con formalina al 10% y otra sin formalina, ni refrigeracin, especialmente cuando se desea investigar parsitos pulmonares (identificacin de larvas) y coccidias. Si la muestra puede llegar al laboratorio en menos de 2 horas, cerrar el guante o la funda. Identificar y enviar la muestra refrigerada. Cuando se quiera evaluar el estado de infestacin de un grupo de animales, deben tomarse muestras por edades. En este caso, se recolectaran pequeas muestras de heces tomadas al azar.
El sitio de puncin debe estar limpio; esto incluye, recorte de pelo, desinfeccin con solucin yodada por 2 veces y finalmente limpiar con alcohol. Tomar la muestra preferiblemente en estado febril y antes de tratamiento. La mejor muestra es de sangre capilar (Cola u oreja). Las placas para el extendido de sangre deben ser nuevas, libres de rayas y grasas.
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Los extendidos deben ser muy delgados para que los glbulos rojos queden separados y facilite la observacin de los hemoparsitos Los frotis deben protegerse de las moscas y rayos solares. Una vez secados los extendidos se envuelven en papel absorbente o papel higinico en placas separadas y se envan al laboratorio. Se recomienda recoger sangre con EDTA como anticoagulante a concentracin de 1 mgrs/ ml de sangre, esto con el fin de hacerle el hematocrito y conocer el estado de deshidratacin del animal. Tambin puede hacerse un montaje en fresco y hacer micro hematocrito para observar tripanosomas en movimiento. Rotular correctamente la muestra.
Con la hoja de un bistur raspar la parte superior del doblez varias veces hasta lograr algo de sangrado en la zona. Transferir el material raspado a la gota de aceite o glicerina colocada sobre el portaobjeto.
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Colocar una laminilla (Cubre objeto) sobre el material a observar, y enviar al laboratorio. Tener en cuenta que los raspados se deben hacer cerca de los bordes de las lesiones activas, evitando incluir costras secas, pelos o lanas.
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Material purulento de lesiones abiertas: Escobillones estriles, tubos tapa rosca con solucin salina, agua destilada y guantes. Recoleccin de la muestra: Estas lesiones pueden ser fistulas y lceras entre otras. Para obtener la muestra limpie la zona afectada con agua destilada estril, nunca use alcohol yodado porque este lesiona los tejidos y afecta los resultados de los cultivos. Despus de sujetar el paciente prosiga con un escobilln y de un sitio poco expuesto al ambiente, tome la muestra impregnando completamente el algodn con la misma, ponga el escobilln en un tubo tapa rosca que contenga solucin salina estril, la cual debe tapar por completo la parte del escobilln que contiene la muestra. El volumen de la muestra es algodn del escobilln completamente impregnado del material.
VIROLOGA
Cerebro hemorrgico en bovio y signos nerviosos. Conservar un fragmento en refrigeracin y otro en formol al 10%
Seleccin del especmen: Los siguientes son los parmetros para una adecuada remisin de los tejidos. Seleccione los tejidos con lesiones y muestras de rganos que tengan lesiones, si no hay evidencia de lesiones, seleccionar tejidos, rganos y sistemas que den cuenta de los signos clnicos del animal. Si no hay lesiones macroscpicas, ni signos de una enfermedad especifica, se toma la muestra de varios rganos Ocasionalmente se enva el animal completo de especies menores y vivos para patologa.
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Una muestra inapropiada bien sea por mala fijacin, mala escogencia en las muestras que se envan, lisis en los rganos no permite llegar a un diagnostico correcto. Manipulacin de los tejidos: La manipulacin de los tejidos debe ser cuidadoso y delicado.
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Fijacin de los tejidos en formol al 10%. Es importante incluir partes normales del rgano enviado. El alcohol no es un sustituto del formol como tampoco lo son el agua o la congelacin. Los fragmentos enviados deben tener un espesor mximo de 0.5 centmetros. La relacin tejido formol es de 10 a 1. Los recipientes deben ser de boca ancha y en lo posible plsticos. Empacar las muestras con el formol lo ms pronto posible despus de la remocin. Colocar los especmenes de diferentes sitios anatmicos en frascos separados y con el fijador adecuado. Marcar cada frasco con la relacin del sitio anatmico de la muestra. Hacer una lista de las muestras enviadas y descripcin de cada una (Forma, color, aspecto, tamao y otros). Consistencia, tamao, distribucin de las lesiones y relacin con el sitio anatmico. Llenar el formato con la resea completa, se requiere de la informacin esencial y pertinente de una manera concisa.
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Transporte y conservacin de tejidos separados en refrigeracin y formol al 10% para identificacin de patgenos y lesiones, se adjunta protocolos
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Comience diligenciando el protocolo del caso a atender, trate de definir el origen del problema y los riesgos de difusin segn la informacin recolectada.
Examen clnico de los animales. Comience inspeccionando los animales sanos o aparentemente sanos, observe sntomas y signos clnicos de todos los animales y obtenga un DIAGNSTICO PRESUNTIVO, de lo que est sucediendo en la finca. Si el caso lo amerita y si es posible contine con los siguientes pasos. Toma de muestras Tome muestras recientes, suficientes y adecuadas segn el nmero de animales afectados o un porcentaje de los animales del hato. Limpieza y desinfeccin Limpie y desinfecte antes y despus de la toma de la muestra los elementos, equipo y lugar donde se tomo la muestra. Cambie la ropa utilizada en el procedimiento Envo de muestras al laboratorio. o o o o Use recipientes y medios de conservacin adecuada. Rotule cada muestra Anexe el protocolo, o la informacin del caso. Confirme con el laboratorio si las muestras llegaron y en qu estado.
Diagnstico del laboratorio Los resultados reportados en el laboratorio, son una herramienta fundamental para la toma de decisiones. Vigilancia y seguimiento epidemiolgico. Consiste en recolectar la mayor informacin concerniente a la presentacin de la enfermedad y sus anlisis para la toma de acciones en su prevencin, control o erradicacin. Es una herramienta bsica para la planificacin del hato. Ante un caso proceda de la siguiente forma: Identifique las fuentes de infeccin Biolgicas (insectos, roedores y otros) y mecnicas (vehculos, agujas, utensilios en general). Priorice los factores de riesgo que facilitaron su presentacin. Determine el rea de riesgo focal (finca o predio) y peri focal (predios alrededor donde se presento la enfermedad). Plantee recomendaciones para la prevencin, control y erradicacin de la enfermedad.
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Bolsas plsticas Cepillo de cerdas Cinta indicadora de pH Desinfectante Frascos de boca ancha Glicerina tamponada Jeringas desechables Nariguera Portaobjetos Soga o lazo Termos plsticos Toallas desechables
Tubos vacutainer (Tubos al vacio) con y sin anticoagulante Observacin: Es importante estar verificando el estado de los instrumentos y medios de conservacin para la toma de las muestras.
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ENFERMEDAD
MUESTRA (S)
Septicemia Bacteriemia
Sangre con Anticoagulante (EDTA) Hemocultivo. Fragmentos de rganos: (bazo, hgado, Riones, ganglios linfticos
Carbn Sintomtico
--Refrigeracin Refrigeracin
--No hacer necropsia. (Zoonosis). --No haber tenido tratamientos con antibiticos en los 8 das anteriores.
Impregnar tiza, algodn, o material absorbente Recipiente estril limpio con sangre o lquido de orificios naturales. Enviar oreja desde la base. Bolsa plstica Recipiente esteril. Antes de las 24 horas
Mastitis
Recipiente: Frasco, tubo estril o cuando se especifique se puede usar bolsa plstica estril.
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ENFERMEDAD Recipiente o bolsa plstica estril. Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Tubos con medio nutritivo Caryblair Tioglicolato. Recipiente estril. Recipiente estril con medio BHI
Enteritis
Infertilidad
Problemas Renales
Enfermedades Hdricas
NOTA: El laboratorio prefiere preparar los extendidos a partir de los tejidos enviados
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MUESTRA (S)
Hisopos estriles.
Semen.
Secreciones vaginales
Enviar 20-30 mililitros de orina, tomar por sonda puncin vesical. Recipiente estril
Refrigeracin
Enviar inmediatamente. Previo lavado con agua y jabn de las zonas. Enviar inmediatamente.
ENFERMEDAD
MUESTRA (S)
Listeriosis
sangre, leche y orina Recipiente estril Recipiente estril Refrigeracin Refrigeracin Precaucin Zoonosis Transporte inmediato
Salmonelosis
Ttano
Tuberculosis
Ganglios tracto respiratorio mesentricos y/o mamarios. Recipiente con cido brico al 1%.
Refrigeracin
Precaucin Zoonosis
Secreciones, leche. Recipiente estril Recipiente bolsa plstica estril Recipiente estril Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Previo lavado rectal
Pasteurelosis
Paratuberculosis
Exudado - trasudado
Secreciones lquidas
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Aislamiento de Virus Recipiente estril con Refrigeracin o glicerina tamponada o congelacin. Solucin saturada de azcar Jeringa Congelacin
Enfermedades vesiculares
Rabia bovina
NOTA: En general para enfermedades virales enviar: Sangre, cerebro, ganglios linfticos, hgado, bazo, tonsilas o amgdalas, rin, pulmn; siempre por separado y congelado. Igualmente se puede usar el medio de Hanks, glicerina tamponada ms antibiticos. IBR: Rinotraquitis Infecciosa Bovina, D.V.B: Diarrea Viral Bovina y E.E.V: Encefalitis Equina Venezolana
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MUESTRA (S)
Liquido vesicular.
ENFERMEDAD
MUESTRA (S)
10 gramos de papiloma
ENFERMEDAD
MUESTRA (S)
Frascos o bolsas Plsticas No utilizar refrigeracin ni Tomar del recto. Transporte limpias y secas. preservativos inmediato.
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ENFERMEDAD
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MUESTRA (S)
Sarna
Dermatofitos (Hongos).
NOTA: Para anlisis de productos garrapaticidas, enviar garrapatas vivas en frasco tapado y con orificios en la tapa y para la identificacin o clasificacin, enviar en recipientes con alcohol etlico al 70%.
ITEM
MUESTRA (S)
Suero plasma
ENFERMEDAD
MUESTRA (S)
Frotis de sangre perifrica Extendidos (oreja -cola) y sangre con delgados en anticoagulante (EDTA). portaobjetos. Congelacin del suero Refrigeracin. No congelacin.
No refrigeracin, transporte en seco fijar placas con alcohol metlico por 3 minutos.
Prueba de Elisa para cada hemoparsito. Transporte inmediato. Validar parmetros con la clnica del animal.
Hemograma Completo
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ENFERMEDAD
Tricomoniasis
Brucelosis, Leucosis I.B.R, D.V.B, 10 mls. Sangre sin Leptospirosis anticoagulante (sueros) Anemia Infecciosa Equina, Neospora y otras. Tubos estriles secos
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MUESTRA (S) Solucin salina fisiolgica o Ringer lactato. No refrigerar y evitar rayos solares.
Lavado prepucial con Frasco oscuro estril. 100 ml. de solucin salina No refrigerar. fisiolgica.
Buen lavado. Estimular miccin antes de la toma Enviar inmediatamente Descanso sexual por 8 das, previo a la toma
Estimular miccin antes de la toma. Enviar inmediatamente Previo a la toma haber estado en descanso sexual por 8 das.
Refrigeracin
PRUEBA
MUESTRA (S)
Enzimas: ALT GPT AST GOT ALP, Glucosa, Urea, Colesterol total, Creatinina, Protenas Sricas Totales, Albumina, Bilirrubina Total.
ALT o GPT: Alamina aminotransferasa o Transaminasa glutamico pirvica, AST o GOT: Aspartato aminotransferasa o transaminasa oxaloacetica, ALP: Fosfatasa alcalina
ITEM
Semen
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ITEM
Urea
Mercurio
Plomo
Talio
Cianuro
OBSERVACIN: En tejidos se debe enviar por separado una cantidad no inferior a 100 gramos.
ITEM
Clorados
Warfarinas
Mico toxinas
Amonaco
Colinesterasa
Cerebro, suero.
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3. DIAGNSTICO AGRCOLA
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Tome las muestras a media maana o media tarde cuando la intensidad del sol no sea muy fuerte, evite tomar muestras inmediatamente despus de una lluvia o de aplicar algn producto por va foliar. Toda muestra debe ser remitida con la mayor informacin posible, ya que los datos all consignados son vitales para un buen diagnstico y una buena recomendacin.
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Debido a la gran diversidad de sntomas que se pueden presentar a nivel de campo en los diferentes cultivos, se hace necesario realizar muestreos diferenciales, los cuales son planteados a continuacin.
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Para el caso de plantas de PORTE BAJO (plantas pequeas) enviar de 2 a 3 plantas completas y para plantas de gran tamao enviar las estructuras o partes de la planta que muestren los sntomas ms caractersticos en los diversos estados de desarrollo del problema.
Es bsico realizar una observacin detenida de las plantas para tratar de buscar y capturar los insectos asociados al problema, para esto se puede entrar al cultivo y quedarse un tiempo quieto, para que los insectos reinicien su actividad, igualmente sacudir fuertemente la planta colocando en la parte baja de la misma una hoja blanca grande, una carpeta o algo similar que facilite la recoleccin de los insectos que caigan para su envo al laboratorio.
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Las mariposas, polillas o insectos de cuerpo delicado no se deben depositar en frascos con alcohol ni manipular demasiado, para stos se trabaja en empaques transitorios que consiste en hojas de papel, cartulina o papel mantequilla, dobladas en forma de triangulo. En cada una coloque un solo ejemplar.
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Depositar en frascos con alcohol al 70%. Si el nmero de larvas o ninfas es alto, se deposita una parte en un frasco con alcohol y el resto en otro frasco con el substrato o material de donde se encontr. Esto permite hacerles a los insectos vivos un seguimiento en cmaras de cra, encontrndose en muchos casos sus enemigos naturales ya sean parasitoides u hongos entomopatgenos.
Para recolectar muestras de insectos que atacan frutos como por ejemplo moscas, recoja las frutas puede constatar la presencia de larvas, pero evite enviar las frutas partidas. Puede observar primero las frutas cadas que posean larvas de mayor tamao y prximas a empupar, estas frutas se depositan en bolsas o frascos con un poco de aserrn, suelo o papel. Cuando las frutas tienen tejidos suculentos (muy acuosos) deposite una buena cantidad de aserrn o papel para evitar que los jugos de la fruta produzcan encharcamiento en la bolsa o frasco. Pupas
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Se depositan en frascos con aserrn y con sustrato o material (tierra u hojarascas) de donde se encontr. No las deposite en alcohol porque se necesitan vivos para hacerles seguimiento en cmaras de cra, hasta obtener adultos, los cuales pueden ser identificados mas fcilmente.
Este material se debe enviar al laboratorio en el medio donde se encontr (suelo, hojas, troncos, etc.) o en frascos con tul o una tapa perforada, que garanticen la llegada de los insectos vivos al laboratorio, se deben transportar lo ms rpido posible. Si los insectos se encuentran muertos se envan en frascos sin adicionar ninguna sustancia.
CONVENIO ICA - SECRETARA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLN, 2009
Horas de recolecta Depende de la actividad particular de cada insecto (hbitos) de manera muy general para los insectos diurnos a partir de la 10 de la maana y para los de hbitos crepusculares y nocturnos a partir de la 6 de la tarde. Sin embargo hay que tener en cuenta que las condiciones ambientales como lluvias, vientos excesivos, granizadas, bajas temperaturas, entre otros, pueden reducir la actividad de muchos insectos, lo que hace difcil visualizarlos y recolectarlos.
o o o o o o
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Instrumentos de muestreo Empaques transitorios: estos se utilizan cuando se trata de recolecciones o muestras muy abundantes, son los adecuados para guardar mariposas o liblulas. Palas de jardinera: esta es muy til para captura de insectos subterrneos Pinzas: ms usado en laboratorio o para manipular insectos que pueden causar picaduras o mordeduras. Papel absorbente Bolsas plsticas Tijeras podadoras o machete Lpiz para el marcado de la muestra
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Tabla 12. SNTOMAS MS COMUNES ENCONTRADOS EN PLANTAS ASOCIADOS A DAOS POR INSECTOS O ARTRPODOS.
SNTOMAS AGENTE CAUSAL caros Salta hojas Larvas de moscas Gusanos Perlas de Tierra caros Thrips Moscas Insectos ESTRUCTURA VEGETAL DONDE SE UBICA Hojas Tallos Races Raz y suelo alrededor de estas. TOMA DE MUESTRA OBSERVACIONES
Agallas
Estas se envan envueltas en Recolectar hojas, tallos y papel absorbente y en una races con sintomatologa bolsa plstica. Los insectos que se encuentren se empacan en frascos con alcohol y si son numerosos se envan en el sustrato o estructura afectada.
Torcimiento
Hojas, Recolectar todas las En el formulario enfatice Ramas Tallos, estructuras con la labores culturales, factores Cogollos sintomatologa ms tpica. ambientales y de manejo Tallos Frutos Recolectar las estructuras sintomatologa toda Enfatice humedad del suelo, con condiciones ambientales y de manejo
Edema
Roa
caros
Frutos
Se deben recolectar muchos frutos con esta No tome muestras en avanzado sintomatologa. No se estado de descomposicin. recomienda recoger las muestras del suelo. Si las plantas son de gran tamao, se seleccionan las partes de tallo, frutos o races afectadas. La muestra se debe acompaar con partes de las plantas sanas y enfermas. Si son plantas pequeas, se seleccionan dos o tres plantas completas. Hojas realizar observacin detenida una Tenga presente que este tipo de sntoma, puede obedecer a afecciones en las races o en la base del tallo. Por lo cual debe revisar la presencia de lesiones o agallas que puedan tener la raz, el tronco o las ramas. Esta sintomatologa se observa generalmente cuando el problema ha avanzado mucho. Se requiere el uso de jama o red entomolgica. Revisar el sistema de races.
Hojas
Envolver en papel absorbente Por lo general son insectos de y luego meter en bolsas tamao pequeo. plsticas
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SNTOMAS
TOMA DE MUESTRA
OBSERVACIONES
Estas se envan envueltas en Resaltar prcticas culturales, y papel absorbente y en una condiciones climticas bolsa plstica. La muestra se enva igual que las de muerte repentina. Se recomienda no recoger los Resaltar prcticas culturales frutos del suelo, se prefiere material del rbol que presente la sintomatologa Plantas pequeas En plantas pequeas recolecte una o dos plantas con diferente estado de desarrollo del problema. Plantas de porte alto recolecte una porcin de cada estructura enve muestra de las diferentes partes de la planta (raz, ramas, hojas) La mayora de los insectos que causan este problema son de hbitos nocturnos Empaque por separado la raz y el suelo de tallos, ramas y hojas. Algunos de los insectos causantes se pueden quedar quietos o camuflarse con el tejido vegetal.
Estructuras perforadas
Gusanos Termitas
Gusanos
Tallos
Defoliaciones
Polinizacin deficiente Larvas de moscas Condiciones ambientales extremas Cucarrones pequeos a menudo de colores brillantes. Gusanos Hormigas Grillos Chinches
Flores
Estas se envan envueltas en papel absorbente y en una bolsa plstica. Se envan flores, cogollos y Especifique condiciones ramas climticas de la zona (lluvias, veranos prolongados, vientos fuertes)
Hojas
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Estos sntomas pueden ser causados por otros organismos como hongos, bacterias, micoplasma, virus, nematodos o problemas abiticos ver diagnstico de daos causados por enfermedades.
En este caso colecte al menos 15 hojas representativas de todos los estados de infeccin. Para plantas con hojas pequeas, corte una rama con sus hojas intactas. Empaque en papel toalla y luego en bolsa plstica sellada. Para las hojas muy suculentas limpie el exceso de humedad y empquelas individualmente en doble papel toalla seco y colquelas en una bolsa de plstico. Adjunte informacin sobre aplicacin de pesticidas y condiciones ambientales que precedieron la toma de la muestra.
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En este caso colecte toda la planta, de ser posible, con raz y suelo. Extraiga las plantas herbceas cuidadosamente del suelo, de tal forma que las races se mantengan intactas con su rizsfera (suelo alrededor de las races), Coloque las races con su rizsfera en una bolsa plstica; y empaque la parte area con papel toalla y bolsa plstica sellada. En el caso de plantas perennes colecte un manojo generoso de las races alimenticias (las ms delgadas) con su rizsfera y empaque en una bolsa plstica sellada; incluya adems races largas que muestren pudricin con suelo. En este caso colecte adems varias ramas o ramillas con follaje mostrando un rango de sntomas, empaque con papel toalla y bolsa plstica sellada. Describa correctamente la sintomatologa observada como decoloracin de races, chancros, etc.
PUDRICIN (B,H):
La desintegracin de tejidos ocurre por accin de patgenos. Mas comn en rganos de reserva (frutos, races, tubrculos)
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CRECIMIENTO ANORMAL: Se hace evidente en las formas de hipertrofia, hiperplasia, fasciacin, epinastia, distorsin abscisin prematura (B,H,N,V) CHANCROS Y AGALLAS: Seleccionar ramas o ramillas con agallas jvenes. Cortar ramas sanas y afectadas. Colocar las muestras sin humedad en un papel grueso sellado o en un envase hermtico, no en bolsa plstica. Colecte el suelo circundante al pie de la planta y empaque en una bolsa plstica sellada.
CARBONES EN ESPIGAS, MAZORCAS, TUBRCULOS: Colecte varias espigas (cereales, pastos, forrajes, caa de azcar, etc.) y frutos (mazorcas de maz, tubrculos de papa, etc.) y envulvalos individualmente en papel toalla y luego en bolsa de plstico selladas. Empaque la muestra en el sitio de infeccin del cultivo dado que este patgeno se distribuye fcilmente y contamina el resto del cultivo.
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Deficiencia de calcio
Estrs hdrico
Recolecte: todos los detalles de la afeccin, especifique humedad del suelo y las condiciones ambientales precedentes, anote la distribucin de la sintomatologa en la planta y en el campo, as como las labores culturales realizadas (aplicaciones de plaguicidas, herbicidas, fertilizantes etc.). FACTORES DE PREDISPOSICIN Los factores ambientales que favorecen la incidencia y afeccin por los patgenos son temperaturas y humedades desfavorables a la planta y favorables al patgeno; deficiencias nutricionales o excesos de fertilizacin favorables para el crecimiento de patgenos; acumulacin de sustancias metablicas en condiciones de almacenaje; carencia de oxgeno (por exceso de agua); carencia o exceso de radiacin solar; efecto residual de herbicidas usados para otros cultivos no susceptibles; prcticas culturales inapropiadas (dao a la deshierba, riegos o podas inoportunas y suelos compactos).
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SIGNOS DEL PATGENO Algunos patgenos son reconocidos a simple vista sobre las plantas afectadas. El aspecto algodonoso o pulverulento de otros, los delata. Los picndios de algunos hongos, en cambio, son apenas perceptibles, pero con una lupa de 10X se observa su presencia. Las hembras de algunos nemtodos forman quistes o agallas caractersticos en ciertos cultivos, que pueden ser reconocidos a simple vista por los especialistas. Las bacterias pueden formar exudados caractersticos, pero los micoplasmas y virus, solo se pueden ver con equipos especializados. Cuando las causas del dao fitopatolgico no pueden determinarse en forma directa, es necesario seguir una serie de tcnicas de laboratorio que nos permitan llegar a la conclusin del diagnstico.
Monilia en cacao
Roya
Escoba de bruja
Por lo anteriormente expuesto, cada sintomatologa de campo requiere de un material vegetal y de unas tcnicas de diagnstico especificas.
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Para el diagnstico de hongos antagnicos, se recomienda observar en el cultivo que esta siendo afectado, las plantas que aparentemente se encuentran ms sanas o que muestren tolerancia a la enfermedad, de estas se debe tomar en diferentes partes una cantidad de aproximadamente 500 gramos del suelo que esta alrededor de las races, el cual se empaca y enva al laboratorio, para que los hongos sean diagnosticados, aislados y repicados masivamente.
Trichoderma sp
Beauveria bassiana
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Virus en papa Virus en tomate
Este tipo de diagnstico se realiza en laboratorios especializados, y necesita ser especifico en la demanda del servicio o sea tener claro de cual grupo de herbicida se sospecha. La visita del tcnico, en este caso es importante dado que realiza una observacin integrada de la problemtica como el estado del cultivo, rea afectada, estado de las malezas, revisin de la sintomatologa, tanto en el cultivo como en las malezas de hoja ancha. Cuando se toman este tipo de muestras se deben hacer observaciones a nivel de campo que pueden ayudar al diagnstico como son: encrespamiento de hojas nuevas, engrosamiento de venas, la lamina foliar aparece encorvada hacia arriba o hacia abajo, observar si la sintomatologa es generalizada o en focos, si los potreros cercanos estn quemados o no, si la sintomatologa es mas fuerte en las orillas del cultivo, si las malezas dentro del cultivo se encuentran afectadas. Aclarar si la toxicidad es por una aplicacin o por la utilizacin de abono orgnico no madurado y con residuos de herbicidas. Para el diagnstico se debe recolectar material de planta severa, mediana y levemente afectadas y enviar material suficiente de hojas, tallos a fin de determinar el producto que caus la toxicidad.
Fototoxicidad
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Las semillas son las estructuras responsables de perpetuar la especie, stas se encuentran biolgicamente en reposo, contienen un embrin con actividad metablica. Poseen la facultad de germinar, emerger y dar origen a plantas sanas y vigorosas. Para lo cual deben estar intactos sus componentes, de manera que le permitan mantenerla no solo viva, sino con altos ndices de vitalidad. La semilla tiene 3 partes bsicas: el embrin, tejidos de reserva alimenticia y la cubierta. La cual va siendo modificada durante el desarrollo, en la madurez presenta una apariencia caracterstica, generalmente seca, endurecida, engrosada y de color caf. La envoltura proporciona a la semilla proteccin mecnica para el embrin, haciendo posible manejar la semilla sin daarla, pudiendo as ser almacenada por perodos considerables de tiempo. La viabilidad es la capacidad de la semilla para conservarse viva y germinar. La prueba estndar para determinar la viabilidad es la prueba rpida de TZC (tetrazolio) que es un compuesto orgnico que en contacto con las partes vivas de la semilla colorea los tejidos de rojo, siendo esta una reaccin enzimtica. La cantidad de muestra a enviar es de ms o menos 100 gramos de semilla. La prueba tiene una duracin de 18 a 24 horas. Esta prueba no diferencia semillas vivas de semillas latentes.
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13. ANEXOS
No.
USO DIAGNSTICO Y PROCESAMIENTO
FECHA DE RECEPCIN:
2. IDENTIFICACIN Y LOCALIZACIN
PROPIETARIO: MUNICIPIO: MED. VETERINARIO:
3. MOTIVOS DE SOLICITUD
Diagnstico Movilizacin Cuarentena Compraventa Otro Cul
4. TPO DE EXPLOTACIN
BOVINOS Leche Carne Doble propsito Raza: AVES Comercial postura Comercial engorde Comercial reproduccin Comercial postura engorde Traspatio Raza: PORCINOS Comercial cra Comercial engorde Comercial completo Urbano Rural Raza: EQUINOS Labor Deporte Paso fino Raza: OVINOS-CAPRINOS OTRA ESPECIE Comercial Urbano Rural Raza: Cul
5. NOTIFICACIN
Predios vecinos afectados CUNTOS S NO
6. CRONOLOGA
Da Primer enfermo Notificacin Primera visita Md. Vet. Mes Ao
7. SINTOMATOLOGA
8. LESIONES EN LA NECROPSIA
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9. DIAGNSTICO PRESUNTIVO:
TRATAMIENTO:
12. POBLACIN
ESPECIE B O V I N O S Terneros (as)< 1 ao Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL P Lactantes<2 meses O R Machos 2-6 meses C Hembras 2-6 meses I N Machos>6 meses O S Hembras>6 meses TOTAL OVI-CAPRINOS EQUINOS <4 semanas A 4-7semanas V 8-22semanas E S >22 semanas TOTAL POBLACIN Enfermos Muertos(1) Total
C A N I N O S F E L I N O S
S I L V E S T R E
ESPECIE Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL OTROS
14. RESULTADOS
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Muestra
Fecha
1. INFORMACIN GENERAL
1.1 Interesado: 1.3 FAX: DIRECCIN: 1.4 Telfono: 1.2 Ciudad:
Anlisis
2. INFORMACIN FINCA
2.1 Nombre de la finca: 2.3 Municipio: 2.2 Vereda: 2.4 Departamento: PROPIETARIO: 2.5 Altitud msnm: TEMPERATURA MEDIA:
PESADA
MEDIA
LIVIANA
PROCEDENCIA DE LA SEMILLA
4.7 Estado de desarrollo del cultivo: (marcar con x)
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4.7.3 Vegetativo
4.7.4 Floracin
DENSIDAD DE SIEMBRA
PLANTAS / ha
Kg / ha
EXTENSIN AFECTADA
5.5 Ramas Otro
6. INFORMACIN SOBRE APARIENCIA GENERAL (Solo para muestras fitopatolgicas) (Indique con X)
6.1 Marchitez 6.5 Enanismo 6.2 Con reas muertas 6.6 Pudricin Cuales: 6.3 Amarillamiento 6.7 Manchas 6.4 Quemazn Otro
Cuales:
10. RESULTADOS
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