Actualizacin

Bioagricultura urbana y cambio climtico

Luca Atehorta Garcs1

Urban Bio-Agriculture and Climate Change Bio-agricultura urbana e mudana climtica

RESUMEN
Ante la realidad del cambio climtico, se deben generar estrategias novedosas que nos permitan superar los factores crticos que ponen en peligro nuestra propia supervivencia. Los productos basados en estos sistemas de cultivo de clulas y tejidos vegetales podran brindar alternativas novedosas para la produccin de alimentos bsicos, garantizando en el futuro la seguridad alimentaria para los colombianos. Palabras clave: Bioagricultura. Cambio Climtico. Cultivos celulares. Biotecnologa vegetal.

ABSTRACT
Climate change is a reality that demands novel strategies that allow us to surpass the critical factors that put our existence in peril. The products based on cell cultures and vegetable tissues could be excellent alternatives to produce basic foods, assuring the food resources required in the future by Colombian people. Key words: Bio Agriculture. Climate change. Cell cultures. Vegetable Biotechnology.

1 Biloga de la Universidad de Antioquia y Ph.D de la Universidad de Nueva York. Actualmente labora en el Instituto de Biologa de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de Universidad de Antioquia. Es la Lder de los grupos de investigacin Biotecnologa y Biotecnologa vegetal de la Universidad de Antioquia.

Correspondencia: Luca Atehorta Garcs. e-mail: latehor@gmail.com Fecha de recibo: 05/10/2007; fecha de aprobacin: 16/11/2007

Bioagricultura urbana y cambio climtico

73

RESUMO
Ante a realidade da mudana climtica, devem-se gerar estratgias inovadoras que nos permitam superar os fatores crticos que pem em perigo nossa prpria sobrevivncia. Os produtos baseados nestes sistemas de cultivo de clulas e tecidos vegetais poderiam brindar alternativas inovadoras para a produo de alimentos bsicos, garantindo no futuro a segurana alimentaria para os colombianos. Palavras chaves: Bio-agricultura. Mudana Climtica. Cultivos celulares. Biotecnologia vegetal.

INTRODUCCIN
De acuerdo a Anderson1 para este milenio no ser necesario cultivar y cosechar los campos. El cultivo de tejidos de ciertas partes de la planta ser la base para el desarrollo de nuevos sistemas de produccin. Por ejemplo, el cultivo de las partes comestibles de ciertas especies agrcolas o frutas podra crecer in vitro. El xito de estos sistemas depender de su estabilidad y precio competitivo, con el fin de poder ser escalados a nivel industrial y comercial2. Si el cambio climtico se convierte en el factor limitante de la produccin agrcola global ser necesario desarrollar nuevos sistemas de produccin, con el fin de garantizar la seguridad alimentaria, y estos sistemas de cultivos se constituirn en lo que podra denominarse BioAgricultura Urbana. En otras palabras, se trata de produccin agrcola en garajes de alta tecnologa, especialmente para ser desarrollada en las grandes ciudades. A travs de estos sistemas de produccin se podrn generar las materias primas de casi todos los productos agrcolas bsicos en pequeos espacios dotados de alta tecnologa, dando paso a un sistema de produccin ms limpia, en funcionamiento durante 24 horas al da y los 365 das del ao, independientemente de factores climticos externos, libre de patgenos, libre de agroqumicos, sin la estacionalidad de los cultivos agrcolas y con la posibilidad de producir organismos genticamente modificados sin que estos interacten con el medio ambiente ni la biodiversidad que los rodea. Adicionalmente, podrn contribuir a la conservacin de la biodiversidad en el suelo y el agua al evitar la extensin de la frontera agrcola, uno de los factores que mayor impacto causan al medio ambiente. Por otro lado, tienen la ventaja de que se pueden implementar en cualquier parte del planeta, inclusive en el espacio, bajo ambientes de microgravedad. La Universidad de Antioquia, y concretamente el Grupo de Biotecnologa Vegetal, viene liderando a nivel nacional estos nuevos sistemas de produccin con el fin de hacerle frente al cambio climtico global y a la prdida de la biodiversidad, con resultados bastante promisorios. A la fecha ha logrado reproducir los tejidos responsables de la produccin del jugo de naranja, cacao, nuez de macadamia, aceite de palma mil pesos y caa de azcar, y trabaja en otros productos primarios de inters global.

74
Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

Colombia podra liderar una transformacin de los sistemas de produccin agrcola, especialmente de productos primarios, en los que su produccin pueda ser escalada y automatizada para generar nuevas bioindustrias del futuro, como respuesta a los posibles impactos que est generando el cambio climtico global y el deterioro ambiental.

De acuerdo con la FAO, la poblacin mundial alcanza hoy ms de 6.500 millones de habitantes. En 1950 nuestro planeta era de 2.500 millones de habitantes, pero su crecimiento se ha acelerado en las ltimas dcadas y se espera que para el 2.050 nuestra poblacin sea de 8.900 millones de habitantes3. A travs de la historia, tanto las comunidades locales como los gobiernos han estado preocupados por la posibilidad de alimentar la creciente poblacin, y esta preocupacin contina viva durante este nuevo milenio debido a la creciente demanda de alimentos para toda la poblacin global. La experiencia nos ha mostrado que los sistemas agrcolas ms progresivos y productivos son aquellos de los pases industrializados, con escaso o nulo crecimiento poblacional, mientras que en muchos pases en va de desarrollo la produccin agrcola est retrasada frente al crecimiento de la poblacin. Este caso es crtico en pases africanos y algunos pases de Asia y Amrica Latina carentes de recurso socioeconmicos, no slo para producir, sino tambin para comprar alimentos. Otro aspecto crtico est en las desigualdades para acceder a los alimentos. Se estima que cerca de 1.300 millones de personas de las regiones en va de desarrollo viven con menos de un dlar al da, haciendo imposible satisfacer sus demandas de un alimento bsico. Ms de 800 millones de habitantes en el planeta no tienen cmo suplir sus necesidades bsicas nutricionales4. El gran reto es hacer factible que este segmento de la poblacin pueda satisfacer sus demandas, ya sea a travs de producir sus propios alimentos o a travs de su capacidad econmica para comprarlos y que estos sean alcanzados mediante un uso sostenible de sus recursos. La intensificacin y expansin de la explotacin de la tierra para agricultura no puede ser ignorada, especialmente porque se convierte en un factor limitante en la conservacin de los recursos naturales. Cuando las adaptaciones tecnolgicas no pueden ser seguidas para dar paso al aumento en la produccin de alimentos y demandas agrcolas, la presin resulta en un incremento de la explotacin de los recursos naturales y degradacin del medio ambiente. Este es el reto ms delicado de las sociedades pobres, para las que es difcil sopesar adecuadamente las preocupaciones respecto a las futuras generaciones en contraste con el legtimo derecho de sobrevivir y tener calidad de vida para las generaciones de hoy.

Crecimiento de la poblacin y seguridad alimentaria

Bioagricultura urbana y cambio climtico

75

La migracin es un fenmeno voltil entre los problemas demogrficos. Flujos migratorios pueden aparecer, cambiar de intensidad e incluso reversar en corto tiempo. Desde el punto de vista econmico y social las polticas de migracin son complejas, siendo a menudo consecuencia de pobreza, violencia y falta de seguridad alimentaria, creando inestabilidad, tensiones y problemas ambientales en las reas de desplazamiento. La migracin causa cambios en la distribucin espacial de las poblaciones, siendo la ms notable la urbanizacin. Las Naciones Unidas han estimado que hacia 1955 las reas urbanas de los pases en va de desarrollo concentraban cerca del 20% de su poblacin, mientras que hoy este porcentaje ha crecido en un 40% y se estima que para el ao 2020 la mayor parte de la poblacin ser urbana. Las urbanizaciones son comnmente asociadas a la idea de modernizacin. Desde el punto de vista rural, la urbanizacin puede promover el desarrollo del comercio agrcola y contribuir con productos de demanda urbana e incrementar el progreso y modernizacin de la vida en los campos. Sin embargo, la realidad demuestra que el desplazamiento de la poblacin rural a las ciudades es creciente, debido ms a la pobreza, que a las oportunidades econmicas en los sectores no agrcolas, trayendo como consecuencia un incremento de los problemas de seguridad alimentaria y generando prdida de mano de obra en el sector rural, fundamental para el desarrollo de la agricultura y produccin de alimentos. Lo anterior trae como consecuencia la importacin de los alimentos bsicos, lo que desde luego encarece el costo de vida en las reas urbanas.

Migracin y urbanizacin

Para nadie es hoy incuestionable la degradacin del medio ambiente, el aumento de los gases de invernadero como consecuencia de la industrializacin y el consecuente aumento de la temperatura, generando un cambio climtico global. Como consecuencia de estos acelerados cambios en el medio ambiente, se cre el Pnel Intergubernamental sobre Cambio Climtico (IPCC), conformado por ms de 2.500 cientficos y funcionarios gubernamentales de l00 pases. Estos fueron convocados en Bruselas para discutir el problema e impacto del cambio climtico global y generar una declaracin para que los gobiernos tomen las medidas necesarias para evitar una catstrofe ambiental5. Despus de intensos debates y negociaciones entre cientficos y funcionarios gubernamentales, el panel present un informe bastante sombro para el mundo en el que la vida de millones de personas se ver afectada por escasez de agua, el avance de las enfermedades y dificultades con las cosechas. Uno de los principales autores del informe, Salim Ul-Huq, manifest que existen evidencias contundentes sobre el impacto del clima en el mundo que va desde las regiones polares al trpico. En su opinin, el impacto del cambio climtico se siente ahora. Tenemos un muy buen documento, dijo Rajendra Pachauri, presidente del IPCC. Dicho informe fue enviado a los lderes del G8 antes de la cumbre de junio de 2007, en la que se reunieron los pases ms industrializados del mundo6.

Cambio climtico y agricultura

7
Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

Al describir en lneas generales las conclusiones del informe, Martin Parry, copresidente del segundo grupo de trabajo del IPC, dijo que la evidencia demostraba que el cambio climtico estaba teniendo un efecto directo en los mamferos, las plantas y el agua. Por primera vez no estamos llamando la atencin con modelos simulados, sino que contamos con registros y datos experimentales con los cuales podemos medir y cuantificar dicho impacto en forma confiable y verdadera. Parry describi las cuatro reas del mundo que se consideran como las ms vulnerables al cambio climtico: El rtico, en donde las temperaturas estn aumentando rpidamente y el hielo se est derritiendo; frica Sub-sahariana, en donde se prev que las reas secas van a secarse an ms; las islas pequeas, por su falta de capacidad para adaptarse y los mega deltas de Asia, en donde miles de millones de personas estarn ante un riesgo inminente de inundacin. Como resultado de lo anterior, el impacto ms severo lo sentirn los pases ms pobres del mundo, los cuales estarn luchando ante las sequas severas6. El estudio advierte que entre 75 y 250 millones de personas en frica podran enfrentar escasez de agua en 2020. Igualmente estima que la produccin de las cosechas podra caer hasta en 30% en el sur y centro de Asia6. El informe dice claramente que el cambio climtico est ocurriendo y tiene efectos en los ecosistemas y en la sociedad, con efectos particularmente crticos en los pases en desarrollo. Es un mensaje desolador, pero ahora est en manos de los gobiernos para que acten y se tomen las medidas necesarias para evitar esta catstrofe ambiental, afirma Richard Klein del Instituto de Medio Ambiente de Estocolmo6. Los ms pobres de los pobres del mundo van a ser los peor golpeados y los ms vulnerables en trminos del impacto del cambio climtico, asegur Pachauri, quien aadi que esas personas tambin son las menos equipadas para manejar los efectos de tal cambio6.

Ante los problemas que enfrentamos hoy, la comunidad cientfica mundial y nacional tiene grandes retos que asumir para poder generar nuevas alternativas que permitan superar o minimizar en parte esta situacin. El problema de seguridad alimentara se constituye en una barrera de desarrollo social, econmico, poltico y ambiental, debido a la incapacidad de satisfacer las demandas nutricionales alimentaras de la poblacin y su produccin estar en grave peligro ante la amenaza de una catstrofe climtica global. La pregunta que surge es cmo la ciencia y la tecnologa podrn servir para implementar nuevos modelos de produccin? La biotecnologa vegetal y especficamente los procesos de cultivo in vitro de clulas y tejidos podran abrir un nuevo horizonte cientfico para el desarrollo de alimentos bsicos independientes de los cultivos en campo y, aunque este hecho ya fue mencionado, no existe literatura cientfica que evidencie trabajos de investigacin en este tema especfico. La mayor parte de las investigaciones han sido

Retos tecnolgicos

Bioagricultura urbana y cambio climtico

77

orientadas a la produccin de metabolitos secundarios de alto valor agregado, quizs debido a que la produccin de alimentos bajo sistemas agrcolas tradicionales nos brinda una forma ms econmica, viable y segura de producirlos. Sin embargo, los tiempos estn cambiando y el clima global tendr serios impactos en los sistemas agrcolas, especialmente en los pases pobres del tercer mundo, donde se concentra la mayor parte de la poblacin global. Ante este hecho, como cientficos debemos adelantarnos al tiempo, generando investigaciones que nos garanticen la produccin de alimentos bsicos independiente de los factores ambientales externos y es aqu donde la biotecnologa vegetal podr proveer un sistema alternativo, viable y probablemente ms verstil para generar alimentos de futuro.

Haberlandt8 fue el pionero en intentar aislar y cultivar clulas vegetales a partir de hojas de plantas con flores, pensando que este sistema podra ser una excelente oportunidad para investigar las propiedades y el potencial de las clulas vegetales, con el fin de entender las diferentes interrelaciones celulares y las influencias complementarias de stas en organismos multicelulares. A pesar de que Haberlandt nunca logr la divisin de clulas libres, su trabajo se constituy en un estmulo para los investigadores que persistieron en este intento y que permitieron abrir una nueva frontera de investigacin en este campo. La utilizacin del cultivo de clulas simples ha tenido un gran impacto para las investigaciones en fisiologa y bioqumica, especialmente para el estudio del metabolismo celular y para determinar el efecto de varias sustancias sobre las respuestas celulares. En el rea gentica, la clonacin de una sola clula ha permitido el mejoramiento de cultivos a travs de la fusin de protoplastos y los sistemas y tcnicas modernas de transformacin gentica8. A la fecha el progreso en este campo ha sido tan espectacular, que es posible no slo el cultivo de clulas libres, sino que es factible inducir la divisin celular en un cultivo totalmente aislado y originar una planta completa a partir de ste9. Adicionalmente el cultivo in vitro de clulas en suspensin ha abierto la posibilidad de generar nuevas alternativas de produccin, ya que provee un sistema viable para la produccin comercial de una gran cantidad de productos fitoqumicos conocidos como metabolitos secundarios y primarios. La Tabla 1ilustra sobre algunos productos naturales de importancia industrial. Las plantas nos proveen del alimento bsico esencial, al igual que de numerosas materias primas de inters en la industria. Las plantas superiores producen una gran variedad de productos primarios y secundarios. Estos ltimos juegan un papel secundario en los procesos bsicos de la vida de la planta, pero a menudo tienen un papel ecolgico importante como, por ejemplo, la atraccin de polinizadores o defensa qumica contra los micro-organismos, insectos o predadores10.

Biotecnologa vegetal

7
Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

Muchos de estos productos naturales han sido utilizados como fuentes de numerosos productos industriales, incluyendo qumicos agrcolas, productos farmacuticos y aditivos alimenticios Aunque algunos de estos productos naturales han sido reemplazados por sustitutos sintticos debido al costo, algunos qumicos de importancia comercial y alto valor agregado todava son extrados de plantas11,12. De acuerdo con Lambie13 ,de los 30 alcaloides medicinales en uso 24 son todava extrados de plantas. La dependencia de la humanidad de los productos naturales contina debido a la dificultad de sintetizarlos por la complejidad de sus estructuras, lo que ha aumentado los procesos de bioprospeccin en la bsqueda de nuevos bioactivos naturales. Tabla 1. Productos naturales producidos a partir de plantas de importancia industrial
Productos Farmacuticos Alcaloides Esteroides Cardenolides Aditivos y saborizantes Endulzantes Agentes amargantes Pigmentos Pigmentos & Perfumes Pigmentos Fragancias Agroqumicos & Qumicos Finos Agroqumicos Qumicos finos Piretrinas, salannina, azadiractina Porteases,vitaminas, lpidos, ltex, aceites Shikonin,antocianinas, betalanas Aceites de rosa, jazmn y lavanda Stevioside, Thaumatina Quinina Crocn Ajmalicine, atropina, berberina, codena, reserpina,vincristina, vinblastina Diosgenn Digitoxina, digoxina Bioactivos

Fuente: Bhojwani & Razdan, 1996.14

A pesar del potencial que ofrece el cultivo de clulas y tejidos vegetales no slo para investigaciones bsicas, sino tambin para el desarrollo de investigaciones aplicadas a la produccin de productos de inters y en especial para los pases que, como Colombia, poseen una gran biodiversidad vegetal, su implementacin en nuestro pas ha sido escasa o casi nula, lo que contrasta con la gran cantidad de investigaciones al respecto realizadas en pases desarrollados y con poca diversidad, tal como lo ilustran las Tablas 2 a la 7.

Bioagricultura urbana y cambio climtico

7

Tabla 2. Ejemplo de compuestos producidos exclusivamente en cultivo de tejidos y no en plantas intactas

Compuesto Epchrosine Dehydrodiconiferyl-alcoholg-b-D-glucoside Paniculid A Pericine Rutacultin Tarennosid Voafrine A & Voafrine B Especie vegetal Ochrosia elliptica Plagiorhegma dubium Agrographis paniculata Picralima ntida Ruta graveolens Gardenia jasminoides Voacanga africana
14

Referencias Pawelka et al, 1986 Arens et., 1985 Butcher & Connolly, 1971 Arens et al, 1982 Steck et al, 1971; Nahrstedt et al, 1985 Ueda et al., 1981 Stockigt et al, 1983

Fuente: Bhojwani & Razdan,1996.

Tabla 3. Algunos ejemplos de cultivos celulares vegetales que han producido compuestos naturales en cantidades iguales o mayores que la planta completa en forma natural
Producto Ajmalicine Anthraquinonas Beberine Caffeine Catharanthine Diosgenin Ginsenoside Rosmarinic acid Serotonin Serpentine Shikimic acid Shikonin Trigonelline Tripodiolide Vomilenine Especie vegetal Catharanthus roseus Morinda citrifolia Coptis japonica Coffea arabica Catharanthus roseous Dioscorea deltoidea Panax ginseng Coleus blumei Paganum harmala Catharanthus roseus Galium molugo Lithorspermum erythrorhizon Trigonella foenum-graecum Tripterygium wilfordii Rauwikfia serpentina Rendimiento en % DW en la planta completa 0,3 2,2 2,4 1,6 0,0017 2,4 4,5 3 2 0,26 2-3 1-2 0,4 0,01 0,004 Rendimiento en cultivo celulares 1 18 13,4 1,6 0,005 7,8 27 23 2 2 10 15-20 5 0,2 0,214 Referencias Zenk et al, 1977 Zenk et al., 1975 Murria, 1984 Anderson et al., 1986 Kurz et al., 1981 Tal et al., 1982 Misawa, 1984 Ulbrich et al., 1985 Sasse et al, 1982 Deus-Neumann & Zenk, 1984 Amrhein et al, 1980 Fujita, 1988 Radwan & Kokate, 1980 Hayashi et al.m 1982 Stockigt et al, 1981.

Fuente: Bhojwani & Razdan,199614.

0
Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

Tabla 4. Metabolitos secundarios de alto valor producidos en cultivos celulares vegetales

Compuesto Antraquinonas Antocianinas Atropina Alcaloides de Benzofenantridina Berberina Capsaicina cido 0-coumarin Glucsido Malonil Flavona Ginkgolidos Alcaloides indoles (Ajmalicina, Serpentina) Malonil Isoflavona glucsidos Diosgenina Codena Nicotina Podofilotoxina Betalanas Acido Rosmarnico Sanguinarina Saponinas Sapoln Shikonina Taxol Tripdiolida Vanilina Fuente de clulas Rubia fruticosa Daucus carota Vitix vinfera Datura innoxia Eschsholtzia californica Thalictrum minus Coptis japnica Capsicum frutescens Melilotus albal Petroselinun hortense Ginkgo biloba Catharantus roseous Cicer arietinum Dioscorea deltoidea Papaver somniferum Nicotiana tabacum Linum lbum Basella alba Coleus blumei Papaver somniferum Panax gingesn Solanum avicularee Lithospermum erythrorhizum Taxus brevifolia Tripterygium wilfordii Vanilla planifolia
a

Localizacin Vacuola Excretado Excretado Excretado Vacuola Vacuola Vacuola Vacuola Vacuola-Excretado Intracelular Vacuola Vacuola Excretado Excretado Intracelular Excretado Excretedo b

Referencia Schulte et al., 1984 Barz et al, 1990 Do & Cormier, 1990 Barz et al, 1990 Tanahashi & Zenk, 1990 Fujita & Tabata, 1987 Lindsey, 1986 Barz et al, 1990 Barz et al, 1990 Carrier et al, 1986 Zenk et al. 1977 Barz et al, 1990 Tal et al, 1983 Heinstein, 1985 Mantell et al, 1983 Smollny et al, 1992 Cyunel, 1989 Zenk, 1977 Eiler et al, 1985 Payne et, 1991 Roisin et al, 1997 Tabata et Fujita, 1985 Christen et al, 1989 Kutney, 1995 Knuth & Sahai, 1989

Clulas inmobilizadas (a) Suspensiones de clulas libres( b) Fuente: Bhojwani & Razdan,199614

Cultivo de clulas diferenciadas para la produccin de alimentos (metabolitos y/o productos primarios)
A pesar de la escasa informacin cientfica sobre los productos primarios (materias primas alimenticias), los bioprocesos para la obtencin de estas materias primas son prcticamente iguales a la produccin de metabolitos secundarios, con la excepcin de que los genes responsables de su produccin son constitutivos, es decir, se expresan directamente sobre el tejido que da origen al producto de inters, mientras

Bioagricultura urbana y cambio climtico

1

Tabla 5. Produccin de productos farmacuticos potenciales en cultivo de clulas vegetales

Compuesto Acido rosmarnico Sanguinarina Alcaloides Benzophenanthridinicos Podophyllotoxina Forskolina Polisacridos Anthraquinona Berberina Actividad biolgica Antioxidante, antiviral, anti-inflamatorio Antibitico, antiviral, antitumoral Antimicrobial, antitumoral, antiviral Antitumoral Antitumoral Potenciadores inmunolgicos Laxativo Antibacterial, anti.-inflamatorio antimalrico Anti-inflamatorio Antiplaquetario Antitumoral Antibacterial, anti-inflamatorio, saneamiento de heridas Fuente vegetal Coleus blumei Orthosiphon aristatus Papaver somniferum Eschscholtzia californica Thalictrium bulgaricum Linum album Coeus forskohlii Echinacea purpurea Morinda citrifolia Coptis japnica Rendimiento 3,3 g/l 10 m mol/g FW 3,6 mg/gFW 25 mg/g DW 0,4 mg/m 0,3% DW 0,073% DW 10-100 ppm del volumen de la suspensin 2,5 g/l 7g/l Elicitor - Levadura Quitina soluble Jasmonato Levadura Clulas inmovilizadas con alginato de calcio Metil-jasmonato Agaropectina Acido pctico

Scopolamina Ginkglidos(GA) Paclitaxel (Taxol) Shikonina

Solanum aviculare Ginkgo biloba Taxus media Lithospermum erythrorhizon

127 m g/gFW 0,0000013% DW 110 mg/l 4 g/L

Fuente: El-Geweley, 1998. 15

Tabla . Elicitacin de metabolitos secundarios en clulas vegetales

Compuesto Acido rosmarnico Sanguinarina Isoflavonoides Echinatina Medicarpina, Maackiaina Isoflavonoides, Isolflavononas Amidas de Hidroxicinamommil Bergapten Elicitor Extracto de levaduraa Quitina solubilizadaa Extracto de levaduraa Alginato de Sodio Asochyta rabiei Levadura Levadura Polyporus umbellatusa Cultivo celular Orthosiphom aristatus Papaver sommniferum Pueraria lovata Glycorrhiza echinata Cicer arietinum Cicer arietinum Solanum Khasianum Petroselinum crispumb Ref Sumaryono et al, 1991 Kurz et al, 1990 Sankawa et al, 1995 Ayabe et al, 1986 Barz et al, 1990 Barz & Mackenbrock, 1994 Mhlenbeck et al, 1996 Reil & Berger, 1996

Homogenados autoclavados (a) Fuente: Bhojwani & Razdan,199614

2
Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

en los metabolitos secundarios algunos de los genes que se codifican para dichos compuestos pueden expresarse bajo condiciones de stress en tejidos o clulas localizadas fuera del centro de produccin, haciendo difcil su expresin y manipulacin. Cualquier cultivo celular se inicia con una seleccin del material parental de calidad lite que deseamos multiplicar o producir y ste es un factor crtico. Igualmente importante es el estado fisiolgico de desarrollo de la planta donante del explante especializado y utilizado para iniciar el proceso. Durante el desarrollo de la planta cada rgano o tejido tiene un perodo crtico, en el cual se presenta un rata de multiplicacin (divisin) celular acelerada que es ptima para la seleccin del explante. Una vez definido este perodo de alta divisin celular para la especie sobre la cual vamos a obtener el producto primario, se llevan a cabo todos los procedimientos estndar para el establecimiento de un cultivo in vitro. El tejido diferenciado responsable de la produccin del metabolito o producto primario es el seleccionado como material bsico (explante) y se procede a establecer el cultivo trasladando secciones pequeas del explante sobre un medio fresco, nutritivo previamente definido, que contenga una composicin hormonal adecuada para generar una rata de divisin celular permanente. Generalmente el medio debe contener un balance de auxinas y citoquininas adecuadas. La seleccin del tipo de hormonas y su concentracin deber ser cuidadosa, con el fin de evitar un desarrollo morfogentico no deseado o inducir una alta variabilidad gentica dentro del cultivo. Como respuesta a la composicin qumica y hormonal del medio de cultivo el explante desarrollar un proceso de callognesis constante, el cual crece desde las reas de corte hasta cubrir la totalidad del explante diferenciado. A medida que ste se va desarrollando y diferenciando, se separa del explante inicial y se procede a realizar subcultivos sobre medio fresco con la misma composicin qumica y hormonal (cada 15 o 30 das) y bajo las mismas condiciones de cultivo definidas al inicio del cultivo, con el fin de generar una cantidad apreciable y razonable de tejido celular que facilite el establecimiento de las suspensiones celulares. El subcultivo repetido genera un callo friable (en constante divisin) dando origen a una suspensin celular fina dentro del medio lquido16,17. Para obtener clulas libres, pedazos de callos diferenciados y no diferenciados son transferidos a medio lquido y colocados en constante agitacin (normalmente entre 80-90 rpm). A estos cultivos se les denomina clulas en suspensin. La agitacin del cultivo ejerce al menos las siguientes funciones: 1. Crea una presin sobre la masa de clulas o agregados para que stas se disgreguen en pequeos grupos y clulas individuales. 2. Mantiene una distribucin uniforme de los nutrientes y hormonas sobre los tejidos 3. Provee un intercambio de gases entre el medio y el aire del cultivo contenido en el recipiente.

Bioagricultura urbana y cambio climtico

3

Una vez establecido el cultivo en suspensin, estudiados todos los parmetros fsico-qumicos y biolgicos y luego de realizar todas la pruebas de viabilidad, se procede a la obtencin de alcuotas de la suspensin para transferirlas a medio fresco. Durante el periodo de incubacin la biomasa celular se incrementa, debido a la divisin y crecimiento (enlargamiento). Durante este periodo se procede a realizar el estudio de la cintica celular para la especie definida y subcultivando nuevamente para mantener la suspensin celular en constante crecimiento. Debido a que la produccin de los metabolitos primarios es constitutiva, lo importante en este proceso es mantener constante la capacidad de divisin celular, el crecimiento, el desarrollo y diferenciacin del tejido. Para mantener la produccin de los productos primarios de inters es importante realizar toma de muestras para evaluar la calidad del producto producido va HPLC y HPLC acoplado a masas, o mediante otras tcnicas que nos den la certeza de la calidad del producto producido. Para garantizar la calidad de la suspensin es necesario hacer un tamizaje del cultivo, con el fin de descartar agregados grandes de ste y slo dejar en el subcultivo pequeos agregados celulares con el fin de que todas las celulares reciban la misma calidad y cantidad de medio de cultivo. Sin embargo, la textura de la suspensin es genticamente controlada y a menudo es difcil obtener una buena dispersin celular bajo cualquier condicin. A pesar de lo anterior, es posible manipular la composicin del medio de cultivo para lograr una mayor disgregacin, agregando pequeas cantidades de enzimas hidrolticas tales como celulasas y pectinasas18 u otras sustancias, como extracto de levadura17. Para el caso de metabolitos primarios estos procesos son menos dispendiosos, ya que a medida que el cultivo se va diferenciando, se obtienen los productos de inters. Con el fin de dar una nocin general sobre los procesos de cultivo para la produccin tanto de metabolitos primarios como secundarios, se ha realizado en el Diagrama 1 la ilustracin de los pasos a seguir en cualquier sistema de cultivo en suspensin. En Colombia slo unos cuantos laboratorios han implementado el cultivo de clulas en suspensin para la produccin de metabolitos secundarios, pero a nivel mundial ya existen empresas, como Diversa y Phyton, que producen varios productos de alto valor agregado a partir del cultivo de clulas en suspensin y a nivel de biorreactores a escala industrial, como lo ilustra la Tabla 8. Durante los ltimos 30 aos ha habido un creciente inters entre los cientficos para producir productos naturales de alto valor agregado mediante el cultivo de clulas en suspensin, con el fin de superar los problemas asociados con la produccin industrial de fitoqumicos mediante la extraccin de los compuestos a partir de plantas crecidas en forma natural (poblaciones naturales). La implementacin exitosa de estos procesos puede realizarse a lo largo de todo el ao, independiente de la estacionalidad de la planta, independiente de factores ambientales, patgenos, agroqumicos, entre otros factores, adems de que se evita poner en riesgo de extincin a aquellas especies que producen productos de inters13.

4
Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

Diagrama 1. Procesos para el cultivo de clulas vegetales bajo condiciones sumergidas Seleccin de la especie vegetal Cultivo de callos Seleccin de lneas celulares altamente productoras Cultivo de clulas en suspensin en medio lquido (Matraz) Optimizacin del cultivo y seleccin Transferencia a un biorreactor con capacidad por encima de 10-50 litros Transferencia a un biorreactor con capacidad de 1.000-2.000 litros Transferencia a un biorreactor con capacidad arriba de los 10.000 litros Cosecha de clulas y recuperacin del producto final (Down stream process) Secado en spray (Spray dryer) Evaluacin de pureza y calidad de producto final (HPLC)

El cultivo de clulas no slo contribuye a la conservacin de la biodiversidad, sino que permite la sntesis de nuevos productos naturales al mismo tiempo que sirven como biofbricas para convertir productos de bajo valor en productos de alto valor agregado, adems de generar nuevos compuestos que normalmente no se producen bajo condiciones naturales. Aunque los metabolitos secundarios son los productos de mayor valor agregado producidos por cultivos celulares, poca o ninguna atencin han recibido los metabolitos primarios o los productos primarios, quizs debido a que su cultivo tradicional sigue siendo la forma ms econmica de producirlos. Aunque la mayor parte de los cultivos agrcolas tienen como finalidad la produccin de los productos bsicos alimenticios localizados en rganos especficos, constituidos de clulas diferenciadas), surge la pregunta de por qu no hemos implementado el cultivo de las clulas y tejidos especializados de estos cultivos para la produccin in vitro de dichos productos o alimentos bsicos.

Bioagricultura urbana y cambio climtico

5

Tabla 7. Escalado de algunos metabolitos secundarios producidos en cultivos celulares vegetales

Producto Shikonina Beberidina Fuente vegetal Lithospermum erythrorhizon Thalictrum minus Coptis japnica Saponinas de ginseng Taxol Sanguinarina Panax gingseng Taxus brevifolia Papaver somniferum Tipo de biorreactor Cultivo en Batch en un sistema de 2 etapas Cultivo en Batch y flujo continuo Flujo continuo con un agitador de turbina Cultivo celular y de races en matraz Agitador de turbina Reactor de Aire (Airlift) 20.000 75.000 300 Volumen (Litros) 750 4.000

Fuente: Smith, 1995.19

Tabla . Productos de alto valor agregado a partir de cultivos de clulas

Cultivos en campo Costo de la tierra de cultivo Preparacin del suelo Sistemas de riego Costo de los insumos para la siembra Costo mano de obra no calificada Costos energticos Costo control de malezas Costo control de pestes, predadores Costo debido a efectos climticos Costo del tiempo de produccin (depende del cultivo/estacionalidad) Costo de cosecha Costos de post cosecha, seleccin (prdida y rechazo de productos no adecuados) Costos de almacenamiento temporal/Bodegaje Costos de empaque, embalaje y transporte del producto Costos ambientales asociados al cultivo Costo del producto final/Materia prima sin transformacin Venta y beneficios Imprevistos Cultivos en suspensin Costo de la planta fsica/Valor del rea de cultivo tecnolgico Compra e instalacin de equipos de alta tecnologa Costo de servicios pblicos: agua, luz, energa Costo de los insumos para el cultivo celular Costo de obra de mano altamente calificada Costos energticos Know How No aplica/Produccin limpia Costos debido a cambio climtico/ procesos confinados Costo de tiempo de produccin (dependiente del protocolo de cultivo in vitro) Costo del proceso de recuperacin del producto final Costo de anlisis de calidad de producto final Costos de almacenamiento temporal Costos de empaque, embalaje y transporte del producto final Costos ambientales asociados al cultivo. Costos del producto final/ Materia prima de alta calidad Venta y beneficios Imprevistos


Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

La respuesta parece ser que el costo de produccin es demasiado alto, y quizs la productividad no sea superior cuando se compara con la produccin bajo sistemas agrcolas tradicionales. Sin embargo, parece que nadie ha hecho el ejercicio completo para un anlisis comparativo, desde implementar la produccin de un producto bsico mediante cultivo celulares hasta llevarlo a escala piloto e industrial, evaluando los costos de cada etapa. Una vez establecidos, analizados y costeados todos los parmetros, stos podran ser comparados con la produccin del mismo producto bsico bajo condiciones naturales y realizando una evaluacin sobre costos de produccin agrcola convencional y desventajas ambientales vs. costos de produccin tecnolgica y beneficios ambientales. Haciendo un ejercicio mental se deberan estudiar, al menos comparativamente, los parmetros expresados en Tabla 8. Teniendo en cuenta la urbanizacin de las ciudades, el crecimiento de la poblacin y el cambio climtico, la Universidad de Antioquia ha venido implementado el cultivo de clulas y tejidos diferenciados, bajo la idea de lo que podramos denominar BioAgricultura Urbana de Alta Tecnologa para la produccin futura de alimentos. La idea que enmarca estos desarrollos est basada en la necesidad de generar alternativas de produccin diferentes a las convencionales con el fin de garantizar la seguridad alimentaria en el futuro, especialmente a nivel de las grandes ciudades, que facilite una produccin independiente de los factores climticos externos, produccin limpia, libre de patgenos, libre de agroqumicos e independiente de la estacionalidad, adems de que contribuya a la conservacin de la biodiversidad al evitar o minimizar extensin de la frontera agrcola. Estos procesos podran ser extremadamente valiosos en caso de una catstrofe ambiental. Si el cambio climtico es una realidad que debemos enfrentar, maana podra ser demasiado tarde para generar alternativas novedosas que nos permitan superar estos factores crticos que ponen en peligro nuestra propia supervivencia. Cultivo de vesculas de naranja dulce var. Garca Valencia (Citrus sinensis)

Bioagricultura urbana y cambio climtico

7

Cultivo de clulas diferenciadas de tejido cotiledonar de cacao (Theobroma cacao)

Caa de azcar Saccharum officinarum. Bajo condiciones de oscuridad (Foto izquierda) y bajo condiciones de luz (Foto derecha)


Produccin + Limpia - Julio - Diciembre 2007 - Vol. 2 No. 2

En la actualidad, el Grupo BioVeg viene trabajando en varios cultivos: naranja, cacao, macadamia, caa de azcar, entre otras. En las fotos de las pginas anteriores se ilustran algunos ejemplos, y se espera implementar el cultivo de cereales y semillas bsicas como maz, arroz, trigo, cebada y soya, entre otros. Como parte de sus avances se registr una patente y, en el futuro, se espera registrar otros productos basados en estos sistemas de cultivo que podran brindar alternativas novedosas para la produccin de alimentos bsicos, garantizando en el futuro la seguridad alimentaria para los colombianos.

REFERENCIAS
1. ANDERSON,J. Feeding a hungrier world. In : Phytopathology News. Vol. 30, No. 6 (1996a); p. 90-91. 2. GUPTA DUTTA, S. and IBARAKI, Yasuomi.. Plant Tissue Culture Engineering. Netherlands: Springer, 2005. 480 p. 3. FARIAS, Diego Ramiro; RODRGUEZ RODRGUEZ, Vicente y SANZ GIMENO, Alberto. La poblacin mundial. [online]. Espaa: CSIC. Instituto de Economa y Geografa, s.f. [Citado noviembre 2007]. URL disponible en: <http://www.madrimasd.org/cienciaysociedad/feria/publicaciones/Feria6/41/Inst_Economia_Geografia.pdf> 4. GRUPO DE COPENHAGUE. Principales reivindicaciones ante la Cumbre de Monterrey.(Mxico) 18 al 23 de marzo de 2002 Bruselas. Financiacin del desarrollo. [online]. Bruselas : sodepaz, 2002. [Citado noviembre 2007]. URL disponible en: <http://www.sodepaz.org/monterrey/Copenhague.PDF> 5. SISTEMA DE NACIONES UNIDAS. Organizacin Meteorolgica Mundial y Programa Ambiental de las Naciones Unidas. Panel 5. Intergubernamental del Cambio Climtico. s.l. : Naciones Unidas, 1988. 6. BBC. Cambio climtico afectar a millones. [online]. London: BBC,Viernes, 6 de abril de 2007. [Citado noviembre 2007]. URL disponible en: <http://news.bbc.co.uk/hi/spanish/science/newsid_6532000/6532347.stm> 7. HABERLANDT, G. Culturversuchemit isolierten Pflazenzellen. In: Sitzungsber. Math, Naturwiss, KI, Kais. Akad.Wiss. Wien. Vol. 111 (1902); p. 69-92. 8. BAJA. Y.P.S. Biotechnology in Agriculture and Forestry 17. High Tech and Micropropagation I. Berlin: Springer-Verlag, 1991. 555 p. 9. PIERIK, R.L.M. Cultivo in vitro de las plantas superiores. Palermo, Espaa : Ediciones Mundi-Prensa, 1990. 326 p. 10. WINK, M. Plant breeding; Importance of plant secondary metabolites for production against pathogens and herbivores. In : Theoretical and Applied Genetics. Vol. 75 (1988); p. 225-233.

Bioagricultura urbana y cambio climtico



11. SAUERWEIn, M.; YOSHIMATSU, K. & SHIMOMURA, K.. Further approaches in the production of secondary metabolites by plant tissue cultures. In: Plant Tissue Cult. Lett. Vol. 9 (1992); p.1-9. 12. MISAWA, M.. Plant Tissue Culture: An alternative for production of useful metabolites. Rome: FAO Agriculture Services Bull, 1994. 87 p. 13. LAMBIE, A.J. Commercial aspects of the production of secondary compounds by immobilized plant cells. In: CHARLWOOD, B.V. & RODEES, M.J.C. (Eds). Secondary Products from Plant Tissue Culture. Oxford: Clarenton Press, 1990. p.265-278. 14. BHOJWANI, S.S. and RAZDAN, M.K. Plant Tissue Culture. Theory and Practice. msterdam: Elsevier, 1996. 766 p. 15. EL-GEWELEY, M.R. (Editor). Biotechnology Annual Review. Vol. 4. New York : Elsevier, 1998. 394 pgs. 16. WILSON, H.M. & STREET, H.E. 1975.The growth, anatomy and morphogenetic potential of callus and cell suspension cultures of Hevea brasiliensis. In: Annals of Botany. Vol. 39 (1975); p. 671-682. 17. NOGUCHI, M. et al.. Improvement growth rates of plant cell culture. In: W. Barz et al. (Eds.), Plant Tissue Culture and the Bio-technological Application. Berlin : Springer, 1977. p. 85-94. 18. STREET, H.E.. Cell (Suspension) cultures-techniques. In: STREET, H.E. (Ed.), Plant Tissue and and Cell Culture. s.l. : Blackwell, 1977b. p. 61-102. 19. SMITH, M.A. L.Large-scale production of secondary metabolites. In: TERZI, M.; CELLA, R. and FALAVIGNA, A. (Eds.). Current Issues in Plant Molecular and Cellular Biology. Dordrecht: Klewer Academic, 1995. p. 669-674.