UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA

Centro Universitario de Ciencias de la Salud

Doctorado en Ciencias Biomdicas

Enfermedades Neurodegenerativas

Generalidades sobre la -Sinucleina

Ing. Jos Roberto Lpez Ruiz Maestro titular: Dra. Roci Gonzlez

Contenido
Introduccin ......................................................................................................... 3 -Sinucleina ......................................................................................................... 3 Funciones de la -Sinucleina ............................................................................... 4 Formas patolgicas de la -Sinucleina ................................................................ 5 Sinucleinopatas ................................................................................................... 7 Terapias contra sinucleinopatas ......................................................................... 8 Referencias .......................................................................................................... 9

Introduccin
Es una protena de 140 aminocidos que forma el sustrato patolgico para la enfermedad de Parkinson idioptico (IPD), demencia por cuerpos de Lewy (DLB), as como de la atrofia sistmica mltiple (MSA), que conforman un conjunto de desordenes conocidos como sinucleinopatas (1).

-Sinucleina
El gen humano que codifica para la -Sinucleina (SNCA) se ubica en el cromosoma 4q21.3-q22 y se extiende hasta las 111kb (Figura 1a). El gen SNCA est comprendido por siete exones, cinco de los cuales corresponden a la regin codificante (Figura 1b) y que se encuentra altamente conservada entre vertebrados. Estructuralmente la -Sinucleina es una protena de 140 aa cuya secuencia puede ser dividida en tres regiones con distintas caractersticas (Figura 1c) (2). El dominio amino-terminal altamente conservado codifica para una serie de repeticiones de 11 aminocidos con un motivo consenso de KTKEGV similar a los dominios de unin a los lpidos de las apolipoprotenas, el cual forma hlices antipticas bajo ciertas condiciones (3).

Figura 1. Representacin esquemtica de la Sinucleina. a) Estructura del gen SNCA, b) mRNA y c) la protena y sus dominios (4).

Funciones de la -Sinucleina
Adems del bien estudiado papel de las sinucleinas en el contexto de las enfermedades neurodegenerativas, el papel biolgico que estas desempean no se conoce aun. Existen trabajos en los que se concluye que las sinucleinas juegan un papel en la homeostasis de los neurotransmisores monoamnicos. Un componente clave en por de la medio neurotransmisin de A los es la recaptura de de los de

neurotransmisores norepinefrina y

transportadores de la

dopamina, con

serotonina.

travs

interaccin

estos

transportadores, el citoesqueleto de las neuronas y las protenas de andamiaje presinpticas -Sinucleina, -Sinucleina y -Sinucleina, modulan el trafico, la expresin y la funcin de los transportadores monoamnicos en la superficie celular, por lo que desempean un papel central en la regulacin de la recaptura monoamnica (5-7). La sealizacin de neurotransmisores monoamnicos en el cerebro se encuentra regulada a varios niveles, incluyendo la biosntesis (Figura 2-1), el rellenado y liberacin de vesculas (Figura 2-2 a 4) y la recaptura (Figura 2-5). Todos estos procesos se encuentran influenciados por lo menos por un miembro de la familia de las sinucleinas. La -Sinucleina regula la actividad de la tirosin hidroxilasa, la cual participa en la biosntesis de la dopamina y la norepinefrina (8). Los neurotransmisores monoamnicos recin sintetizados deben ser cargados en vesculas a travs del transportador vesicular monoamnico (VMAT2), el cual puede ser modulado por la -Sinucleina (9, 10), por lo que esta regula la tasa de llenado de vesculas (5). Los niveles de las sinucleinas alteran el numero y la distribucin de las vesculas (11-15), por lo tanto impacta el proceso de traslocacin de vesculas (6). La fusin de vesculas con la membrana presinptica que es mediada por el complejo SNARE, libera los neurotransmisores monoamnicos en la sinapsis (7); la formacin de los complejos SNARE depende de los niveles normales de las sinucleinas (16). Finalmente, los neurotransmisores liberados son removidos de la sinapsis por los transportadores monoamnicos

(MAT), cuya funcin es modulada por los tres miembros de la familia de las sinucleinas (6, 7, 17, 18).

Figura 2. Modulacin de la homeostasis monoamnica por las sinucleinas. 1) Sntesis de neurotransmisores monoamnicos, 2 y 3) Rellenado de vesculas, 4) Liberacin del neurotransmisor y 5) Recaptura. (19)

Formas patolgicas de la -Sinucleina

Las tres mutaciones sin sentido que se sabe que causan PD familiar (A30P, E46K y A53T) se encuentran en la regin anfiptica, lo que sugiere que esta regin de la protena desempea una funcin fundamental. La regin hidrofbica central de la -Sinucleina se asocia con un incremento en la tendencia de esta protena de formar fibrillas (20). El extremo carbono-terminal contiene principalmente residuos cargados negativamente y se encuentra en forma desdoblada (4). Bajo ciertas condiciones, los monmeros de -Sinucleina interaccionan para formar los agregados prefibrilares o protofibrillas, las cuales a su vez pueden formar fibrillas insolubles (21-23). La hiptesis ms aceptada sobre la toxicidad de la -Sinucleina propone que las protofibrillas son citotxicas, mientras que los agregados fibrilares de la protena representan un mecanismo citoprotector en la PD (24, 25). Apoyando esta hiptesis, en los cerebros de pacientes con PD y DLB (26), las protofibrillas se encuentran incrementadas y se han asociado con la
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neurotoxicidad en clulas que sobreexpresan la -Sinucleina, as como en modelos de ratn (21, 27). Las modificaciones postraduccionales en la regin carbono terminal de la Sinucleina, como las oxidaciones, nitraciones y las fosforilaciones, afectan la capacidad de la -Sinucleina de agregarse IN VIVO (28-30). Por ejemplo, la fosforilacin en la serina 129 incrementa la capacidad de la -Sinucleina de

fibrilizarse, mientras que las fosforilacin de la tirosina 125 previene su fibrilacin (31). De forma similar, el truncamiento del extreme carbono terminal, acelera la agregacin de esta protena IN VITRO (32, 33). Se ha detectado -Sinucleina truncada en los cuerpos de Lewy tanto en PD como en DLB (34, 35). Ratones transgnicos que sobreexpresan la -Sinucleina cuyo extremo c-terminal se encuentra truncado, presentan perdida celular en la SNc pero no en el rea tegmental ventral (36), lo que sugiere una cierta toxicidad de la -Sinucleina truncada en neuronas dopaminrgicas de la SNc. Adicionalmente se encontrado que tanto los cuerpos de Lewy como otros tipos de inclusiones en las sinucleinopatas, presentan inmunoreactividad contra ubiquitina (37, 38). Evidencia reciente indica que la -Sinucleina se encuentra ubiquitinada en los cuerpos de Lewy (39, 40). De forma interesante las especies ubiquitinadas de -Sinucleina que se encuentran en los cuerpos de Lewy se encuentra mono y di ubiquitinada en lugar de poliubiquitinada, por lo que no puede ser degradada por la va del proteasoma (34, 39-41). Las consecuencias funcionales de la mono y di ubiquitinacin, as como su papel en la formacin de los cuerpos de Lewy y la neurodegeneracin permanece indefinidas. Las tres formas patolgicas ms importantes de las inclusiones que contienen Sinucleina son los cuerpos de Lewy (Figura 3a) y neuritas de Lewy (42), inclusiones oligodendrogliales (43) (Figura 3b) y esferoides axonales (44) (Figura 3c), aunque tambin existen inclusiones intranucleares neuronales y gliales en el caso de MSA.

Figura 3. Principales inclusiones patolgicas. a) Cuerpo de Lewy en neurona de la sustancia nigra, b) Inclusin citoplsmica oligodendroglial y c) Esferoide axonal. (45)

Sinucleinopatas
Las dos sndromes sinucleinopticos que son diagnosticados por la presencia de los cuerpos de Lewy y las neuritas de Lewy son la enfermedad de Parkinson (PD)(46) y la demencia con cuerpos de Lewy (DLB)(47). En la mayora de los pacientes, estas dos sinucleinopatas son fciles de diferenciar clnicamente debido a la presencia de deficiencias motoras en los pacientes con PD (48) y la demencia en la DLB (47). La atrofia sistmica mltiple es una enfermedad neurodegenerativa progresiva, espordica y se presenta en adultos, en la cual se ha reconocido que los pacientes presentan caractersticas del parkinsonismo, ataxia cerebelar y signos de disfuncin piramidal (49). Histricamente se han reconocido tres desordenes, pacientes con sntomas cerebelares que se considera que pertenecen a la atrofia olivopontocerebelar (OPCA); pacientes con un desorden parkinsoniano conocido como degeneracin striatonigral (SND); y pacientes con el sndrome Shy-Drager (SDS). El descubrimiento que estas caractersticas clnicas pueden ocurrir al mismo tiempo, llevo al reconocimiento que estas representan una sola enfermedad (MSA). El subsecuente descubrimiento de caractersticas patolgicas en comn, como las inclusiones citoplsmicas gliales (GCI), confirmaron que se tratan de una misma entidad. En la tabla 1 podemos encontrar las manifestaciones clnicas de cada una de estas enfermedades.

Tabla 1. Caractersticas clnicas tpicas de IPD, MSA y DLB.

Terapias contra sinucleinopatas

Una estrategia sugerida es reducir los niveles de -Sinucleina interfiriendo los factores que controlan su transcripcin (50), o utilizando estrategias de RNAi. Las terapias orientadas a disolver los agregados o prevenir su ensamblaje por medio de pequeos pptidos u otras molculas, son estrategias obvias. Otras estrategias novedosas incluyen intentos por mejorar las defensas celulares endgenas contra las protenas mal plegadas, como por ejemplo, incrementando la expresin celular de chaperones o aumentando la autofagia (51), lo que resultara en una disminucin de los agregados de -Sinucleina. Por ltimo, otra estrategia se basa en la hiptesis de que la PD involucra una patognesis similar a los priones, por lo que nuevas terapias se orientan a la transferencia intercelular de -Sinucleina; ya sea inhibiendo la liberacin de las protenas al espacio extracelular o inhibiendo la recaptura en las neuronas vecinas.

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