DIGESTO DE AMOSTRAS DE GUAS RESIDURIAS PARA DETERMINAO DE FSFORO

Resumo
Neste trabalho so propostos dois procedimentos de digesto de matria orgnica em amostras de guas residurias para posterior determinao de P-PO43- utilizando o sistema de anlise por injeo em fluxo (FIA). Inicialmente foi estudado um mtodo de digesto empregando autoclave e foram otimizados: massa de K2S2O8 (0,05-0,5g) e volume de soluo 5,4mol L-1 H2SO4 (0,0 e 0,2mL). O volume de amostra foi 10mL e o tempo de aquecimento foi de 1h e a presso de 1kgf cm-2. A seguir foi estudada a digesto com forno de microondas domstico com tempo de digesto de 1min e com variao da potncia do forno de 500 a 900W. Os dois procedimentos de digesto foram comparados e a escolha do mtodo mais adequado depender da disponibilidade de equipamentos no laboratrio. A freqncia da digesto foi de 100 amostras/ h (autoclave) e 240 amostras/h (forno). A preciso (n=10) foi de 1,3 e 4,8% para a digesto em autoclave e forno, respectivamente. Palavras-chave: ortofosfato, digesto, forno de microondas, esgoto sanitrio, FIA Ana Paula Silveira Paim1* Edson Rivelino Pereira1 Hlio Rodrigues dos Santos2 Marcelo Zaiat1
1 Departamento de Hidrulica e Saneamento da Escola de Engenharia de So Carlos USP 2 Doutorando do Programa de Ps-Graduao em Hidrulica e Saneamento do Departamento de Hidrulica e Saneamento da Escola de Engenharia de So Carlos USP

Summary
In this work two methodologies of digestion of samples of sanitary sewer are proposed, an using autoclave and other, domestic microwave oven. The analito was determined using the flow injection analysis system (FIA). In the method with autoclave were optimized: mass of K2S2O8 (0.05-0.5 g) and volume of 5,4mol L-1 H2SO4 (0.0 and 0.2mL). The sample volume was 10mL and the time of heating was of 1 h and the pressure was 1kgf cm-2. For the oven, the variables optimized in the previous procedure was used and the potency of the oven was varied from 500 to 900W. The two digestion procedures was compared and the choice of the best were depend of equipment disposability in the labor. The analytical frequency was of 100 samples/h in the method of the autoclave and 240 samples/h (oven). The precision (n=10) it was 1.3 and 4.8% for the methods using autoclave and oven, respectively. Keywords: orthophosphate, digestion, microwave, wastewater, flow analysis

*1 Autora para correspondncia: USP-EESC-SHS Av. Trabalhador So Carlense, 400 CEP 13566-590 So Carlos. SP Fone: (16) 3373-9561 Fax: (16) 3372-9550 E-mail: anaspaim@sc.usp.br

Introduo
O fsforo apresenta grande diversidade de formas qumicas. Em guas residurias pode ser encontrado como ortofosfato (PO43-), polifosfato (P2O7) e fsforo orgnico (1). Essas espcies podem causar eutrofizao em lagos e guas paradas, pois so nutrientes para microorganismos, principalmente algas (2). Os microorganismos utilizam o fsforo durante a sntese celular e o transporte de energia, resultando na remoo de cerca de 10 a 30% de fsforo durante o tratamento biolgico de efluentes (1). Nas estaes de tratamento de esgotos comum remover fsforo, seja adicionando produtos qumicos no esgoto bruto e no efluente final ou utilizando organismos primrios (Acinetobacter) entre outros (1). Portanto, importante determinar P-PO43- nas estaes para verificar se ocorreu remoo no processo de tratamento. O fsforo orgnico determinado sob a forma de ortofosfato, aps digesto do material orgnico. A digesto realizada por via seca ou, mais comumente, por via mida em condio cida ou oxidante (3). O procedimento padro de digesto de amostras de guas residurias para determinao de P-PO43- envolve adio de hidrxido de sdio concentrado, gotas de fenolftalena, seguida de digesto em autoclave e novamente adio de fenolftalena e soluo de hidrxido de sdio e posterior diluio (4). Trata-se de um procedimento lento. Quando se trabalha em laboratrios de pesquisa de tratamento de guas residurias, geralmente, o nmero de amostras a serem digeridas elevado. Portanto, importante desenvolver mtodos de abertura de amostras mais

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Tabela 1. Resultados obtidos variando a massa de persulfato de potssio

Persulfato de potssio(g) Persulfato de potssio(mg L-1) P-PO43- (mg L-1) 0,05 0,10 0,20 0,30 0,40 0,50 100 200 400 600 800 1000 7,6 7,8 7,9 7,9 8,0 7,8

rpidas sem prejuzo de preciso e exatido. A radiao microondas tem sido muito utilizada na digesto de amostras de diferentes matrizes. Os procedimentos de digesto podem empregar frascos abertos ou fechados (5,6) e podem ser usados em batelada ou com sistemas de fluxo acoplados (7-10). Essa tcnica apresenta como vantagens alta eficincia no aquecimento da mistura reacional, sem alterar as estruturas dos ons e/ou molculas e reduzido tempo da digesto causado pelo controle da potncia do forno (7). Os procedimentos de digesto empregando a radiao microondas tm sido usados para amostras de matrizes diversas, tais como, peixe (11), material cermico (12), solos (13-15), cabelo (16), leite e leo diesel (5), entre outros. Este trabalho teve como principal objetivo a avaliao e comparao entre dois procedimentos de digesto, em autoclave e em forno de microondas domstico, para determinao de fsforo em guas residurias. A determinao de fsforo total foi realizada empregando anlise por injeo em fluxo (FIA) com deteco espectrofotomtrica e aplicada para guas residurias de suinocultura e para esgoto sanitrio.

adicionando-se 680mL de gua em um Bquer e 35mL de cido sulfrico concentrado (H 2 SO 4 ). Aps homogeneizao e resfriamento adicionou-se 215mL de soluo 4% (m/v) de molibdato de amnio e 72mL de soluo 0,3% (m/v) de tartarato de potssio e antimnio. A seguir, a soluo foi transferida para um balo volumtrico de 1000mL e o volume foi completado com gua. A soluo 6% (m/v) de cido ascrbico foi preparada pesandose 6,0g de cido ascrbico e dissolvendo-se em 100mL de gua. A soluo 5,4mol L -1 de cido sulfrico foi preparada tomando-se 60mL de gua num Bquer e adicionando-se lentamente 30mL de cido sulfrico concentrado e completando com gua o volume para 100mL. A soluo padro estoque de 25,0mg P-PO 4 3- L -1, foi preparada dissolvendo-se 0,1099g do fosfato monobsico de potssio (KH2PO4), o qual foi seco por uma hora a 105oC em 800mL de gua. Aps dissoluo, completou-se o volume para 1000mL com gua. Solues padres de trabalho nas concentraes de 1, 2, 4, 6, 8 e 10mg P-PO43- L-1 foram preparadas a partir de adequada diluio em gua da soluo padro estoque de fsforo. Foram digeridas para a determinao de P-PO43-, amostras de guas residurias compreendendo efluentes de suinocultura, efluentes da microfiltrao tratando gua bruta e esgoto sanitrio proveniente de estao de tratamento composta por reatores anaerbios seguidos de reatores aerbios e de sistema de flotao por ar dissolvido.

Equipamentos
Os equipamentos utilizados para preparao das amostras foram: autoclave vertical marca Phoenix; balana analtica marca Sartorius, modelo BP 211D; banho-maria marca Marconi modelo MA 1561-6. O sistema de anlise por injeo em fluxo (FIA) foi composto por injetor-comutador de acrlico construdo no CENA-USP (1718); espectrofotmetro Femto modelo 432 equipado com cela de fluxo de vidro com volume interno de 180L e percurso ptico de 12mm; bomba peristltica Ismatec modelo IPC, provida com tubos de tygon; tubos de polietileno de 0,8mm e junes de acrlico tipo T. Foi utilizado ainda um forno de microondas domstico da marca Brastemp com potncia varivel de 150 a 900W para o tratamento das amostras. As amostras foram inseridas em frascos
Tabela 2. Variao do volume de amostra de gua residuria de suinocultura

Experimental Solues de reagentes e amostras

Todas as solues de referncia foram preparadas a partir de reagente de grau analtico usando gua purificada (condutividade menor que 0,1S cm-1) obtida em um sistema Mille-Q (Millipore, USA). Soluo estoque de molibdato de amnia 4% (m/v) foi preparada adicionando-se 40,0g de molibdato de amnio tetraidratado [(NH4)6Mo7O244H2O] em 900mL de gua. A mistura foi agitada com barra magntica durante quatro horas. A seguir, a soluo foi transferida para um balo volumtrico de 1000mL e o volume completado com gua. A soluo foi armazenada em frasco plstico e sob refrigerao. Soluo estoque de tartarato de potssio e antimnio 0,3% (m/v) foi preparada adicionando-se 3,0g de tartarato de potssio e antimnio hemidratado K(SbO)C4H4O61/2H2O em 900mL de gua. Aps completa dissoluo a soluo foi transferida para um balo volumtrico de 1000mL e o volume completado com gua. A soluo foi armazenada em frasco mbar e sob refrigerao. Soluo do reagente colorido de molibdato foi preparada

Amostra (mL) 0,3 0,4 0,5 1,0 2,0 4,0

Persulfato de potssio (mg L-1) 666 500 400 200 100 50

P-PO43- (mg L-1) 149,4 164,3 105,6 77,5 76,9 72,6

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Tabela 3. Comparao entre as concentraes de P-PO43- obtida para as amostras digeridas atravs da digesto proposta em autoclave e padro

Amostras 1a 2a 3a 4a 5a 6b 7b 8b
a b

Mtodo proposto (mg P-PO43- L-1) 6,2 0,1 5,8 0,0 5,4 0,0 7,1 0,1 4,4 0,0 149,4 2,2 97,1 1,3 164,3 3,6

Mtodo padro (mg P-PO43- L-1) 7,4 1,1 5,3 0,0 5,1 0,0 6,9 0,1 4,1 0,0 148,4 2,9 98,8 1,8 156,9 3,8

esgoto sanitrio gua residuria de suinocultura t calc = 0,85; t 95% = 2,365

de polietileno da marca Corning com volume interno de 50mL. As condies para preparao de amostras assistidas por microondas podem ser otimizadas atravs do ajuste de trs parmetros: potncia do magnetron, tempo de aquecimento e quantidade de recipientes no interior do forno.

potssio em tubos de polietileno com volume interno de 50mL. Os frascos foram fechados para evitar a perda da amostra e homogeneizou-se a mistura com agitao. Foi avaliada a melhor forma de digerir as amostras: com ou sem prato giratrio. Sem o prato giratrio, os seis tubos foram posicionados no local definido anteriormente como o de maior incidncia das microondas. Com o prato giratrio, os seis tubos foram distribudos em pontos distintos no interior do forno. Em ambos procedimentos, o forno foi ligado na potncia mxima (900W) durante o intervalo de um minuto. Aps definir qual a melhor estratgia, variou-se a potncia do forno de 500 a 900W durante o intervalo de tempo de um minuto, para cada potncia, utilizando o prato giratrio. Foram traadas curvas analticas com as solues de referncia digeridas atravs dos dois procedimentos propostos e tambm pelo mtodo padro (4). Em todos os testes determinouse o teor de P-PO43- contido nas amostras, empregando anlise por injeo em fluxo (FIA).

Resultados e Discusso
O procedimento padro de digesto de amostras de guas residurias para determinao de P-PO43- envolve adio de hidrxido de sdio concentrado, gotas de fenolftalena, seguida de digesto em autoclave e novamente adio de fenolftalena e soluo de hidrxido de sdio e posterior diluio (4). Trata-se de um procedimento lento. Quando se trabalha em laboratrios de pesquisa de tratamento de guas residurias, geralmente, o nmero de amostras a serem digeridas elevado. Portanto, importante desenvolver mtodos de abertura de amostras mais rpidas. Neste trabalho, a autoclave foi mantida a presso de 1kgf cm-2 durante uma hora conforme sugerido no mtodo padro (4) e estudou-se a variao da massa de persulfato, fixando-se o volume de 10mL para amostras de guas residurias. Conforme mostra a Tabela 1, ao variar a massa de persulfato de 0,05 a 0,50g, a variao na concentrao obtida de P-PO43- foi muito pequena. Considerando que os valores obtidos so prximos e visando reduzir o consumo do sal, fixou-se em 0,20g a massa do sal para as digestes adicionais. As amostras de guas residurias de suinocultura contm elevada quantidade de slidos, por isso verificou-se, conforme Tabela 2, que com menor volume de amostra, a digesto foi mais eficiente. Portanto, para as amostras de guas residurias de suinocultura, fixou-se o volume de amostra em 0,4mL.
Tabela 4. Estudo da variao da potncia do forno de microondas

Digesto das amostras com autoclave

Foram usados tubos de vidro, volume interno de 20mL, no qual adicionou-se 10mL de amostra de esgoto domstico e 0,2mL de soluo 5,4mol L-1 de H2SO4. Para as amostras de guas residurias de suinocultura, efetuou-se estudos variando o volume das amostras e fixou-se em 0,4mL. Variou-se a massa do persulfato de potssio em 0,05; 0,10; 0,20; 0,30; 0,40 e 0,50g para verificao da massa que resultaria na digesto mais eficiente. Os tubos foram devidamente fechados e organizados dentro de um recipiente para serem digeridos na autoclave. Quando a presso interna da autoclave atingiu de 1kgf cm-2, regulou-se o controlador para que essa presso fosse mantida durante o intervalo de tempo de uma hora. Ao trmino desse perodo, desligou-se a autoclave. Foram digeridas amostras e solues de referncia pelo procedimento proposto e padro (4) e aps o resfriamento foi determinado o fsforo atravs do processo de anlise por injeo em fluxo (FIA) (4,17). Curvas analticas foram traadas com as solues de referncia e as amostras digeridas atravs dos dois procedimentos.

Digesto das amostras com forno de microondas domstico

Realizou-se o mapeamento do forno com Bqueres contendo gua para verificar qual era a regio do forno com maior incidncia de microondas. Foi selecionada a regio na qual a gua contida no Bquer atingiu a maior temperatura. Adicionaram-se 10mL de amostra de esgoto domstico, 0,2mL de soluo 5,4mol L-1 de H2SO4 e 0,2g de persulfato de

Potncia do forno(W) 500 650 800 900

P-PO43-(mg L-1) 4,44 0,06 4,84 0,07 5,07 0,02 5,07 0,10

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Tabela 5. Comparao entre as concentraes de P-PO43- obtidas atravs da digesto de amostras na autoclave, no forno e empregando o mtodo padro

Amostras 1a 2a 3b 4b 5b 6c 7d
a b

Mtodo da autoclave(mg P-PO43- L-1) * 4,8 0,1 11,0 0,1 4,0 0,1 4,8 0,1 5,2 0,1 19,7 0,4 16,2 0,5

Forno de microondas(mg P-PO43- L-1) ** 4,5 0,1 8,3 0,2 4,0 0,1 4,6 0,1 5,1 0,1 20,5 0,1 14,7 0,6

Mtodo padro(mg P-PO43- L-1) 4,9 0,0 7,0 0,1 3,9 0,1 4,8 0,1 5,1 0,0 19,3 0,1 10,7 1,3

esgoto sanitrio reator anaerbio de leito expandido (escala real) c esgoto sinttico d efluente de reator em batelada com aerao intermitente (escala de bancada) * t calc = 1,515; ** t calc = 1,363; t 95% = 2,447

A seguir, estudou-se o efeito da acidez, adicionando-se 0,2mL de 5,4mol L-1 de H2SO4 nas amostras de guas residurias a serem digeridas. Verificou-se que as concentraes obtidas do analito foram maiores para as amostras nas quais o cido foi adicionado, visto que a presena do cido faz com que os polifosfatos sejam convertidos a fosfatos. Para um volume de amostra de esgoto domstico de 10mL, fixou-se o volume de cido em 0,2mL. Uma vez estabelecidas as melhores condies da digesto, verificou-se a eficincia da digesto em autoclave, analisandose amostras de esgoto sanitrio e de guas residurias de suinocultura. Os resultados so mostrados na Tabela 3. A exatido foi averiguada empregando-se a digesto das solues de padres e de amostras (t calc = 0,85), sendo obtidos resultados que concordam entre si em nvel de 95% de confiana (t 95% = 2,365). Tambm foram obtidas outras caractersticas analticas importantes tais como: consumo de reagentes de 0,2g de persulfato de potssio e 60mL de cido sulfrico concentrado por determinao e desvio padro relativo de 1,3% (n=10) em uma amostra contendo 5mg P-PO43- L-1. As variveis da digesto utilizando a autoclave aps terem sido otimizadas, foram mantidas para os estudos de digesto de amostras digeridas em forno de microondas domstico. Inicialmente foi realizado o mapeamento do forno e determinouse o ponto de maior incidncia de microondas. Testou-se a digesto com e sem o prato giratrio. Os resultados obtidos empregando o prato giratrio e distribuindo seis frascos em diferentes pontos no interior do forno, eram semelhantes queles obtidos sem o prato. Optou-se por utilizar o prato, pois para o intervalo de um minuto, foi possvel digerir maior nmero de amostras. Variou-se a potncia do forno de 500 a 900W, mantendo o intervalo de tempo de digesto de um minuto. A concentrao obtida com o mtodo padro (4) foi de 5,10mg P-PO43- L-1 e os resultados obtidos eram comparados com este valor. Conforme mostra a Tabela 4, as concentraes do analito foram semelhantes utilizando a potncia de 800 e 900W. Fixouse, ento, a potncia em 800W. Uma vez estabelecidas as melhores condies da digesto, verificou-se a eficincia dos procedimentos propostos analisando-

se amostras de esgoto domstico. A exatido foi averiguada empregando-se a digesto das solues de padres e de amostras na autoclave, no forno e de acordo com o mtodo padro (4) sendo obtido os resultados mostrados na Tabela 5. O consumo de reagentes por determinao foi o mesmo j descrito para o mtodo da autoclave. O desvio padro relativo foi de 1,3%, 4,8% e 1,7% no mtodo proposto na autoclave, no forno de microondas e no mtodo padro, respectivamente, para 10 repeties (n=10) em uma amostra contendo 5,0mg P-PO43L-1. A freqncia analtica da digesto foi de 100, 240 e 100 amostras por hora para o mtodo proposto na autoclave, no forno de microondas e o mtodo padro, respectivamente. Os resultados obtidos no mtodo proposto usando autoclave (tcalc=1,515) e forno de microondas domstico (tcalc=1,363) concordam entre si em nvel de 95% de confiana (t95%= 2,447).

Concluses
Os procedimentos para digesto de amostras de guas residurias, propostos neste trabalho, quando comparados ao mtodo padro (no qual necessrio alcalinizar a amostra e posteriormente diluir) apresentam algumas vantagens, tais como: maior rapidez no preparo da amostra; menor manipulao das amostras; minimizao nos erros das medidas; menor consumo de reagentes. Alm disso, a preciso e a exatido foram satisfatrias. A escolha do mtodo mais adequado depender da disponibilidade de equipamentos no laboratrio.

Agradecimentos
Agradecemos aos alunos de doutoramento do Programa de Ps-Graduao em Hidrulica e Saneamento da EESC-USP Carlos M.,de Souza Vidal e Renata Cristina Moretti pelas amostras fornecidas. s agncias de fomento FAPESP CNPq/PRONEX e , CAPES pelos recursos obtidos em projetos de pesquisa e bolsas de estudo.

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