CLULA II

Prctica 4

Separacin de aminocidos

Presentan: Antor Rodrguez Lizeth Calva Cano Julio Camilo Franco Soto Lucero Liliana Moreno Prez Norma Anglica Toxqui Sandoval Stephania

Profesor: Rojas Lara Pablo Claudio Fecha de entrega 05 de marzo de 2012

RESUMEN: En esta prctica se realiz una de las tcnicas ms sencillas para identificacin de aminocidos. La combinacin de la cromatografa en capa fina con la reaccin de la ninhidrina, la cual ayuda a identificar los aminocidos, por tincin color morado o

magenta que se presenta en ellos, Los objetivos principales de esta prctica fueron identificar y Observar el corrimiento de los aminocidos en un cromatofolio. Se concluyo que el factor de

retencin obtenido se deba dependiendo de las caractersticas de cada aminocido.

INTRODUCCIN

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS 2 Cromatofilios de 9x 10 cm , 1 Frasco con boca ancha con tapa, 6 tubos capilares o pipetas pasteur con bulbo, regla, lpiz, cinta adhesiva y calculadora, 1 piceta con agua destilada, 1 parrilla, 200 ml de un disolucin de butanol, cido actico, agua en una

proporcin de 4;1;5( 80,20, 100 ml respectivamente). Atomizador con ninhidrina el .1% en etanol, 10 ml de soluciones independientes de aminocidos a una concentracin de .01M, 5 ml de refresco de dieta, chicle de dieta clorets y trident).

OBJETIVOS Observar el corrimiento de los aminocidos en un cromatofolio HIPTESIS Se espera que se logren identificar la presencia de aminocidos en 3 muestras y el corrimiento de algunos aminocidos METODOLOGA Para poder llevar a cabo la prctica de separacin de aminocido, primero fue necesario disolver

chicles de dieta en cada vaso de precipitado con agua destilada, y el tercer vaso se le agrego un poco de refresco marca H2O. (Ver. Imagen 2). Despus se utilizaron 2 cromatofolios estos se fueron marcando con una letra (A o B ), se fueron tomando algunas mediada y se dividieron en 4 partes as los aminocidos no se combinaran y se podran tomar la medida de distancia que haban recorrido. Con la ayuda de los tubos capilares se agregaron 4 aminocidos en el primer cromatofolio (A), estos aminocidos
Imagen 2: fueron: Leu, Pro, Val, Glu, mientras que el segundo cromatofolio (B), se agrego una gota el primer v

contiene de chicle clorets, trident , una gato de refresco H20 y una aminocido el cual era Gli.( ver un chicle clo

imagen 3) MATERIAL

trident y el tercero co H2O

2 cromatofolios de 9x 10 cm , 1 Frasco con boca ancha con tapa, 6 tubos capilares o pipetas Pasteur con bulbo, regla, lpiz, cinta adhesiva y calculadora, 1 piceta con agua destilada, 1 parrilla, 200 ml de un disolucin de butanol, cido actico, agua en una

proporcin de 4;1;5 (80,20,100ml) respectivamente. Atomizador con 100ml de ninhidrina el .1% en etanol, 10 ml de soluciones independientes de aminocidos a una concentracin de .01M, 5 ml de refresco de dieta, chicle de dieta (clorets y trident).

Imagen 3: colocacin de aminocidos en el cromatofolio

Cuando termino de subir la disolucin se saco el cromatofolio del frasco y se dejo secar por unos cuantos minutos, despus se le agrego ninhidrina (sirve para revelar hasta donde corren los aminocidos) con un atomizador, en seguida se coloco el cromatofolio en una parrilla para que este se calentara moderadamente hasta que salieran manchas color

violeta) esto nos indicara la posicin en la que los aminocidos haban corrido sobre la

placa. (Ver imagen 5) Posteriormente se le coloco un pedazo de cinta adhesiva en la parte de atrs y se coloco en un frasco de vidrio que tenia 200 ml de disolucin de butanol, acido actico, y agua en una proporcin de 4;1;5, este frasco se tapo y se espero unos 45 min o mas hasta que la disolucin subiera en el cromatofolio. (Ver imagen 4)

Imagen 4: se muestra como la disolucin de de butanol, acido actico y agua destilada con una proporcin de 4, 1; 5 avanza asa la parte superior del cromatofolio.

Hay que pegar las placas en los resultados aun as te adjunto la foto

RESULTADOS Resultados de la prctica de clula. Resultados de las distancias de los reactivos, del corrimiento sobre los cromatofolios. Tabla .1 leu 3.4cm 3.4/7.5= 0.4533 pro 1.4cm 1.4/7.5= 0.18666 val 2.1cm 2.1/7.5= 2.8 glu 1.4cm 1.4/7.5= 0.18666

Tabla .2 clorets 1.4cm 1.4/8.3= 0.16867 trident 0cm 0/8.3= 0 H2O 3.5cm 3.5/8.3= 0.421686 glisina 1.4cm 1.4/8.3=0.168674

CUESTIONARIO

1.- De acuerdo a su clasificacin Cmo seria el patrn de separacin de los diferentes aminocidos? 2.- Explique en que consiste la reccin de ninhidrina 3.-Por qu se presentan aminocidos en la saliva? 4.- Qu significa el factor de corrimiento? 5.- Qu son las fases estacionaria y mvil en un sistema cromatogrfico? 6.- Cmo se puede modificar la fase mvil en un sistema cromatogrfico? 7.- Realice una investigacin sobre el uso actual del aspartame. Anote sus beneficios y perjuicios del uso de tal producto.

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