Insulina Humana Recombinante A tecnologia desenvolvida pela Biomm permite a produo em larga escala de insulina recombinante com padres

de qualidade que atende s exigncias da Organizao Mundial de Sade, US Food and Drug Administration, e outras renomadas autoridades regulatrias. As principais etapas so descritas a seguir:

Em um microorganismo (E.coli) foi inserido um fragmento de DNA com instrues para expressar uma protena, o precursor de insulina (pr-insulina). Esse microorganismo colocado em um fermentador para reproduzir e, sob determinadas condies, expressar a protena de interesse. A pr-insulina se precipita na forma de corpos de incluso dentro da clula, que posteriormente rompida. A pr-insulina, uma vez separada dos resduos celulares, ser transformada em insulina e purificada em diversas etapas. Primeiramente, ligaes intra-moleculares, pontes de di-sulfeto, sero desfeitas para que novamente se liguem nas posies corretas na renaturao. Em seguida, a pr-insulina renaturada purificada e convertida em insulina, atravs de reaes qumico-enzimticas, e submetida a novas etapas de purificao por troca-inica, RP-HPLC e cristalizao, obtendo-se assim o cristal de insulina, que posteriormente formulado.

Etapa 1 Fermentao da E.Coli

Etapa 2 Corpos de Incluso

Etapa 3 Sulfitlise

Etapa 4 Purificao da Pr-insulina ( cromatografia de afinidade)

Etapa 5 Renaturao da Pr-insulina

Etapa 6 Converso da Pr- Insulina

Etapa 7 Purificao da Insulina

Etapa 8 Formao da Insulina

Referencia desse material: http://www.biomm.com/pt/index.php?p=3,2 acesso em 09 de Feveriro de 2012. Insulina Artificial

Um novo mtodo para produzir insulina artificial que utiliza tecnologia de DNA recombinante foi desenvolvido por pesquisadores do Departamento de Biologia Molecular da Universidade de Braslia (UnB) em parceria com a empresa Bioqumica do Brasil (Biobrs). Os pesquisadores modificaram geneticamente a bactria Escherichia coli, comum na flora intestinal humana, para torn-la capaz de sintetizar o hormnio. O processo permite fabricar insulina em apenas 30 dias, um tero do tempo necessrio para obt-la pelo mtodo tradicional. Somente quatro empresas no mundo, incluindo a Biobrs, tm tecnologia de produo industrial de insulina recombinante. BIOHULIN uma insulina humana altamente purificada com um grau de pureza equivalente a menos de 1 ppm (partes por milho) de pr-insulina. A insulina um hormnio produzido pelas clulas beta do pncreas. Sua ausncia ou deficincia no organismo, quando no tratada, manifesta-se sob a forma de diabetes. Para suprir essa falta, o medicamento essencial para tratar a doena a insulina artificial, que pode ser produzida industrialmente a partir do pncreas suno ou de microorganismos modificados geneticamente, como o caso da E. coli. Patenteada em 2000 nos Estados Unidos sob nmero US6068993 (no Brasil a lei vetava a patenteabilidade de produtos frmacos ou qumicos), a nova tcnica consiste em introduzir na bactria o gene da pr-insulina humana, precursor da insulina ativa, de forma que esta passe a produzir o hormnio em grandes quantidades. Segundo Beatriz Lima, biloga e professora da UnB envolvida na pesquisa, esse gene foi 'montado' a partir da informao da seqncia de aminocidos da pr-insulina. "A bactria agora capaz de produzir o hormnio humano", explica Lima. A etapa seguinte do processo a produo da insulina em escala industrial, em que o precursor fermentado, processado e purificado para a obteno da insulina recombinante ativa. "Aps esse processo, ele se transforma em insulina humana por meio de reaes enzimticas", explica Luciano Vilela, pesquisador da Biobrs. "Nesse estgio, usamos tcnicas cromatogrficas para purificarmos novamente o hormnio." Ao final dessas etapas, o produto est adequado para o consumo e sem alteraes sensveis para o usurio. A tecnologia do DNA recombinante permitiu a expresso de protenas heterlogas em microrganismos e outras clulas hospedeiras. Um vetor contendo o material gentico, dirigindo a clula hospedeira a produzir a protena codificada por parte da seqncia heterloga do DNA introduzido no hospedeiro. Assim a clula transformada pode ser fermentada e submetida s condies que facilitem a expresso do DNA heterlogo, levando formao de grandes quantidades da protena desejada. Alm da diminuio do tempo de produo do hormnio, a nova tcnica alcana altos ndices de expresso do gene da pr-insulina na bactria - um diferencial em relao a outras formas de produzir insulina artificial. O pncreas suno no uma matria-prima abundante, e grandes quantidades so necessrias para a produo de insulina. "Precisamos aproximadamente de 2 mil toneladas de pncreas por ano, que so coletados em frigorficos brasileiros e americanos. E cada pncreas pesa em mdia 100 gramas", diz

Vilela. "Outra vantagem que essa tecnologia tambm pode ser aplicada produo de outras protenas teraputicas, como a do hormnio do crescimento." Tanto a insulina recombinante como a obtida de sunos apresenta menos de 1 parte por milho (ppm) de contaminantes (enzimas e outras substancias), abaixo dos 3 ppm exigidos pelas normas internacionais. A qualidade das duas a mesma. A diferena o preo. Enquanto a de origem animal sai por R$14, a insulina recombinante custa R$22. As duas garantiram Biobras a fatia de 65% das compras feitas por farmcias brasileiras em 2000. A Biobrs uma empresa bio-farmacutica, localizada em Montes Claros (MG) Minas Gerais, engajada em pesquisa e desenvolvimento, fabricao e comercializao de uma srie de produtos farmacuticos. A empresa foi fundada em 1971 e comeou como produtora de enzimas em 1976. Hoje, a insulina sua principal fonte de renda. O bioqumico Carlos Ribeiro Diniz e Mares-Guia especialista em enzimologia, com apoio do BNDE montaram na UFMG um laboratrio com a mais avanada tecnologia da poca, com equipamentos para fazer anlise de aminocidos, ultracentrifugao e outras coisas bsicas para a qumica de protena. Junto com alunos da Escola de Engenharia este ncleo serviu de base para a criao da Biobrs. Marcos Luiz dos Mares Guia, por influncia do pai mdico e pela admirao ao av que fora formado pela Escola de Farmcia de Ouro Preto em 1897 e que possua uma farmcia de manipulao, acabou ingressando na Escola de Medicina, hoje UFMG em 1957. Pioneiro em bioqumica em Minas Gerais, doutorou-se nos EUA em 1964, com uma bolsa da Fundao Rockefeller, com uma tese sobre cintica de enzimas. Retornou a Belo Horizonte e com apoio de Wilson Beraldo, um dos descobridores da bradicinina, integrou o excelente grupo de bioqumicos formado na UFMG.No incio de sua carreira, em funo dos baixos salrios da universidade, envolveu-se com o seu irmo Walfrido na criao de um curso pr-vestibular, o famoso curso Pitgoras. Em 1968 comeou a implantar de novo com o irmo e outros scios, a empresa Biobrs, para a fabricao de enzimas com o apoio da Sudene. A empresa cresceu graas a uma fecunda interao com a universidade e o aproveitamento de ps-graduados, tornando-se pioneira na produo de insulina. Oskar Klingl (Repict 1998) "Eu me recordo muito bem que o Dr. Marcos Mares Guia, quando resolveu construir a Biobrs, em Minas Gerais, foi quase apedrejado, na universidade, porque ele cometia o pecado imperdovel de querer ganhar dinheiro com o conhecimento. " Marcos Mares Guia chefiava nos ltimos anos o Laboratrio de Enzimologia e Fsico-Qumica de Protenas ao lado de Marcelo Matos Santoro e Marcelo Porto Bemquerer, professores do Depto. de Bioqumica e Imunologia da UFMG e veio a falecer em junho de 2003. Mares Guia explica as bases da fundao da Biobrs: "como trabalhvamos com enzimas no laboratrio e havamos organizado a ps-graduao [na UFMG], por influncia do Carlos Ribeiro Diniz e demais professores, ns comeamos a cogitar sobre a criao de uma empresa para fabricar alguns produtos. Foi assim que concebemos a Biobrs, que se transformou numa pequena experincia em 1968. Um dos entusiastas foi meu irmo, o Walfrido, que tambm trabalhou muito no projeto. Com o xito dessa experincia inicial, surgiu a idia de montar uma fbrica, e para tanto contamos com o engenheiro Guilherme Emrich, que hoje est na presidncia da Biobrs. Como no tnhamos capital, fomos buscar recursos na Sudene, que estava oferecendo a possibilidade de custear at 75% do total do projeto, caso o mesmo fosse considerado de grande relevncia. Nosso projeto foi considerado - muito relevante - porque ningum fabricava enzimas, a no ser a partir do coalho do queijo. Montamos uma empresa piloto em Montes Claros e comeamos a produzir em 1976. Mares Guia conta como se deu a produo de insulina: "No caso da insulina, por volta de 1979, ns comeamos a produzi-la em associao com Lilly, que nos transferiu a tecnologia de produo de insulina bovina. Em 1982 ns nos separamos e comeamos um processo de desenvolvimento tecnolgico violento na rea de insulina, que continua at hoje. A tecnologia de produo de insulina bovina era muito boa na poca em que foi concebida mas era necssrio moderniz-la. Quando terminamos esse acordo comercial com a Lilly, que estava a ponto de lanar a recobinante, tivemos de fazer um programa intenso na Biobrs, em termos de recursos humanos e financeiros e a curto prazo para atingir a tecnologia de insulinas de porco e de boi altamente purificadas. Em 1990 quando transformamos a insulina de porco em humana por via qumica, ganhamos o prmio IBM de Desenvolvimento Tecnolgico. Conseguimos desenvolver a tecnologia por via enzimtica com muita eficincia e a partir da fazer a gentica recombinante. Quem atuou foi a equipe da Biobrs, eu fui o general, quem trabalhou foi o Luciano Vilela e o Josef Thiemann, ambos chefiando os respectivos grupos de pesquisa". A Biobrs teve o processo da insulina recombinante patenteado nos Estados Unidos. A pesquisa teve uma parte feita na Biobrs com a colaborao de grupos bioqumicos da UFMG e do professor Lewis Greene, de Ribeiro Preto, alm de contar com consultores externos de outros pases. O empresrio mineiro Guilherme Emerich fala da criao da Biobrs"Fundei a empresa, e durante 20 anos fui seu principal executivo. A Biobras nasceu praticamente incubada na Escola de Medicina da Universidade Federal de Minas Gerais; ela se tornou, depois, a quarta maior produtora de insulina para diabete no mundo. H dois anos, resolvi, por uma questo estratgica, vender a fbrica da Biobras, em Montes Claros, no Brasil. Tnhamos uma fabrica de matria prima farmacutica, de questal de insulina em Minas Gerais, e tnhamos formulao no Brasil, na Coria e na ndia. Competamos com os trs maiores fabricantes mundiais de insulina; no Brasil, historicamente,

nossa participao no mercado privado era da ordem de 80%. Estvamos presentes em 12 paises; a Unio Sovitica, enquanto existiu, foi o maior mercado individual nosso; depois na Rssia, Polnia, Alemanha, Coria, ndia, Argentina, Uruguai. E competindo com marca prpria, o que uma novidade no caso Brasil. Resolvemos vender a fbrica porque chegamos concluso que deveramos adotar como modelo ser uma Nike das protenas recombinantes. A competitividade a nvel do negcio mais importante. Ou seja, concentrar desenvolvimento tecnolgico de um lado; em comercializao internacional do outro; e licenciar terceiros que quisessem fazer produo. Esses terceiros so pases que gostam de produzir; que no tm a opo de se concentrar na rea nobre do processo, que o desenvolvimento tecnolgico e a comercializao internacional. Infelizmente, por questes legais no Brasil, o nome Biobras teve que ir junto com a fbrica; antes de vender, fizemos uma ciso: tiramos tudo que Biobras tinha de patentes a Biobras tinha, e a sucessora dela, a Biomm, deve ter ai mais de uma dzia de patentes internacionais na rea de protenas recombinantes e principalmente de insulina. Tiramos tambm toda a parte de pesquisa: dois laboratrios de pesquisa, um no Brasil e outro em Miami, tiramos toda a parte de conexo internacional, e vendemos a fbrica". "Em 2000, a Biobras recebeu a primeira patente internacional de insulina, uma das quatro que existem no mundo. Voc tem patentes de uma empresa americana, uma dinamarquesa, uma alem e uma empresa no Brasil. Ns nos tornamos um ofertante de tecnologia, para garantir produo em terceiros pases. Para a Biobras conseguir esta patente, ela fez um negcio interessante -- usou no s pessoal prprio, mas estabeleceu cooperao muito intensa com a Universidade Federal de Minas Gerais, com a Universidade de Braslia, com a USP de Ribeiro Preto, e com Universidades e centros de pesquisa no exterior. A Universidade de Miami, que tem um grande centro de pesquisa de diabete; Southampton, na Inglaterra, Chemiac, em Moscou, Karolinska na Sucia -- enfim, procuramos levantar onde havia qualificaes, para no reinventar a roda, e fazer um processo de desenvolvimento integrado. Temos que pensar mais sobre essa capacidade de desenvolvimento em rede, em termos de Brasil. Com cooperao l fora voc pode alavancar o processo. " "O processo de levar a Biobras a deixar de ser uma empresa de fbrica para ser uma empresa sem fbrica demorou um pouco mais do que espervamos. No Brasil, quando voc vende uma planta para um comprador que tem um volume mnimo de vendas, a operao tem que ser aprovada pelo CADE; a aprovao demorou um ano e onze meses. Fomos obrigados a assinar um acordo de reversibilidade: se o CADE no aprovasse a operao, deveramos poder revert-la. Ficamos todo esse tempo esperando, sem poder fazer nada que impedisse depois uma reverso. A Biomm a sucessora da Biobras: tem a mesma estrutura acionria que a Biobras tinha, os mesmos acionistas, uma empresa de capital aberto, do mesmo jeito que a Biobras era, registrada na Bolsa de So Paulo. Biobras sempre teve mais acionistas, do que funcionrios. No auge de nossa operao, tnhamos 500 funcionrios e 600 acionistas. Na dcada de 90, os acionistas tiveram um retorno, na Bolsa de So Paulo, de 4.444% na dcada. Descontando a inflao, d uma mdia de 46% ao ano. A imprensa fala muitas vezes que a Biobras foi vendida. No, a fbrica da Biobras foi vendida; mas o conceito bsico, o grupo pesquisador, todas as patentes, todas as conexes internacionais, todos os acionistas continuam juntos no mesmo processo." Vendida a Biobrs para uma indstria estrangeira, nasceu uma sucessora, a Biomm, e com o dinheiro apurado seus fundadores criaram o fundo FIR Capital. A Biomm uma empresa especializada em P&D e comercializao internacional, com foco em biotecnologia e tecnologia da informao, reas em que o FIR tem investido. fato notrio que a insulina humana recombinante, alm de ter sido o primeiro produto da moderna biotecnologia a ser comercializado no mundo, pode ser hoje considerado um produto consolidado no mercado, dado que alcanou nveis de substituio que chegam a 100% em vrios pases da Europa e cerca de 85% nos Estados Unidos. A tendncia substituio incontestvel mesmo no Brasil, onde as insulinas humanas (recombinante e semi-sinttica) j ocupam aproximadamente 40% do mercado. Sob concorrncia no mercado nacional, com a empresa dinarmaquesa Nova Nordisks, a Biobrs acabou no final de 2001, sendo adquirida por US$ 31 milhes. A holding controladora Biopart deve reter o laboratrio de pesquisa, os 15 pesquisadores de ponta alm da patente de processo de uso do DNA recombinante, dedicando-se apenas as atividades de pesquisa. Fonte: http://www.uol.com.br/cienciahoje/chdia/n341.htm http://www.unb.br/informativos/insulina.htm http://www.finep.gov.br/premio/biobras.htm http://www.venturecapital.com.br/ShowItem.asp?ContentId=939 http://www.finep.gov.br/caso_de_sucesso/insulina.htm acesso em janeiro de 2002 http://www.biobras.com.br/produtos_template.php3?pagina=biohulin acesso em novembro de 2002 http://www.jornaldaciencia.org.br/Detalhe.jsp?id=10491 http://www.redetec.org.br/repict/download/anais1998.zip acesso em agosto de 2003 VII Encontro sobre Propriedade Intelectual Cientistas do Brasil, SBPC, 1998, pgina 575 Patentes onde o Brasil perde, set/93, Sindicato da Indstria de artefatos de Papel, papelo e cortia no Esatdo de So Paulo, pg 27.

Livro: 50 anos do CNPq contados pelos seus presidentes, de Shozo Motoyama, Ed. FAPESP, 2002, pginas 450 e 454 http://www.desafios.org.br/index.php?Edicao=9&pagina=noticias&idNoticia=63&secao=&inicio=15&limite=18 acesso em julho de 2005 http://www.inovacao.unicamp.br/report/news-viicon-guilherme.shtml acesso em outubro de 2005 envie seus comentrios para otimistarj@gmail.com. Esta pgina no uma publicao oficial da Rede de Tecnologia do Rio de Janeiro, seu contedo no foi examinado e/ou editado por esta instituio, tampouco foi realizada qualquer anlise de mrito ou tcnica nas invenes descritas. A responsabilidade por seu contedo exclusivamente do autor. .

Fonte - http://www.redetec.org.br/inventabrasil/biobras.htm acesso em 09 de Fevereiro de 2012.

Como produzir a insulina recombinante? Yahoo respostas !!

Resposta 1 - O gene que coordena a produo de insulina em seres humanos faz o mesmo dentro de uma bactria, assim como o gene que codifica uma toxina contra lagartas numa bactria vai fazer o mesmo num p de milho. Nasceram, ento, os organismos geneticamente modificados. Issa uma tecnica para produzir insulina recombinante utiliza-se de todos os mtodos modernos de clonagem e expresso gnica via microrganismos modificados, podendo produzir um peptdeo recombinante ou vrios deles simultaneamente. A grande maioria dos laboratrios utiliza como sistemas de expresso as bactrias, pois estas so desprovidas do aparato biolgico necessrio introduo de modificaes ps-traduo nas seqncias peptdicas recm-produzidas, de modo que so gerados peptdeos contendo apenas os aminocidos proteinognicos no modificados. Como exemplo, a clonagem de genes humanos em Escherichia coli pode ser usada na produo de Insulina para pacientes com Diabetes. A partir do isolamento do RNA mensageiro do gene que codifica a Insulina, obtm-se o DNA complementar, o qual inserido num plasmdeo, que, por sua vez, introjetado na E.coli. Estas bactrias reproduzem-se em elevadas quantidades e produzem elevado nmero de protenas que, aps serem extradas e purificadas, podem ser administradas aos portadores de Diabetes. Atualmente, o protocolo de produo de Insulina base de DNA recombinante bastante difundido, oferecendo sociedade uma alternativa vivel no controle da Diabetes.

Resposta 2 - A tecnologia do DNA recombinante permitiu a expresso de protenas heterlogas em microrganismos e outras clulas hospedeiras. Um vetor contendo o material gentico, dirigindo a clula hospedeira a produzir a protena codificada por parte da seqncia heterloga do DNA introduzido no hospedeiro. Assim a clula transformada pode ser fermentada e submetida s condies que facilitem a expresso do DNA heterlogo, levando formao de grandes quantidades da protena desejada. Alm da diminuio do tempo de produo do hormnio, a nova tcnica alcana altos ndices de expresso do gene da pr-insulina na bactria - um diferencial em relao a outras formas de produzir insulina artificial. O pncreas suno no uma matria-prima abundante, e grandes quantidades so necessrias para a produo de insulina. "Precisamos aproximadamente de 2 mil toneladas de pncreas por ano, que so coletados em frigorficos brasileiros e americanos. E cada pncreas pesa em mdia 100 gramas", diz Vilela. "Outra vantagem que essa tecnologia tambm pode ser aplicada produo de outras protenas teraputicas, como a do hormnio do crescimento." Tanto a insulina recombinante como a obtida de sunos apresenta menos de 1 parte por milho (ppm) de contaminantes (enzimas e outras substancias), abaixo dos 3 ppm exigidos pelas normas internacionais. A qualidade das duas a mesma. A diferena o preo. Enquanto a de origem animal sai por R$14, a insulina recombinante custa R$22. As duas garantiram Biobras a fatia de 65% das compras feitas por farmcias brasileiras em 2000.

Fonte: http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio23/producao.pdf acesso em 09 de fevereiro

de 2012-02-09 Material PDF A produo de insulina humana por Engenharia Gentica

7.2. A utilizao da tecnologia do DNA recombinante no conhecimento de receptores de membrana Para informaes especficas em clonagem de receptores de superfcie celular, incluindo abordagens que visam descobrir ou projetar novas drogas efetivas direcionadas a esses receptores, consulte a reviso de Luyten & Leysen (1993). Estes autores enfatizam que a expresso heterloga de receptores clonados proporciona uma fonte rica, reprodutvel, inexaurvel e barata de subtipos de receptores humanos. Esses receptores expressos podem ser utilizados no "screening" de drogas e tambm para o "design" de novas drogas atravs de um melhor entendimento da relao estrutura-funo, visto que a clonagem molecular desses receptores revelou uma abundncia de subtipos, bem como modelos estruturais dos mesmos (Figura 43)

Figura 42 Estratgia para detectar protenas ligantes utilizando o sistema de dois hbridos.

Agora, uma nova era pode ter lugar, em que as drogas comeam a ser projetadas e construdas com base na estrutura de seu alvo no organismo (Bugg et al., 1994). Exemplos da utilizao da tecnologia do DNA recombinante neste caso incluem a expresso heterloga de receptores acoplados a protena G nos fungosSaccharomyces cerevisae, Schizosaccharomyces pombe e Pichia pastoris, visando estudos estruturais e funcionais. Clulas de S. cerevisiae expressando o receptor de somatostatina de rato foram usadas com sucesso no "screening" de anlogos de somatostatina e bibliotecas combinatoriais para identificar agonistas e antagonistas seletivos para subtipos com potentes efeitos in vivo (M. H. Pausch, 1997).

Figura 43- Modelos estruturais de famlias de receptores de superfcie celular. Os domnios trans-membrana e alguns domnios funcionais so representados. O enrolamento da cadeia proteica hipottico, pois o nico que teve sua estrutura determinada por cristalografia at o momento foi o domnio extracelular do receptor de hormnio de crescimento.

7.3. Expresso de protenas para interveno teraputica

Podemos dizer que h duas maneiras gerais de se fazer teraputica por expresso de protenas: a) a expresso heterloga de uma protena humana em bactria ou clula eucaritica para a produo em grande escala, purificao e utilizao desta para injeo em

pacientes: o exemplo mais conhecido provavelmente o da insulina (Bristow, 1993), a qual foi o primeiro produto comercial obtido pela tecnologia do DNA recombinante e aprovado para uso em humanos em 1982 pela U. S. FDA (Food and Drug Administration). A Figura 44 mostra as estratgias empregadas para a produo de insulina para fins teraputicos; a bovina e a suna sem modificaes qumicas so menos eficientes. A insulina produzida pela tecnologia do DNA recombinante apresenta a vantagem de eliminar a possibilidade de contaminantes ou agentes infecciosos que podem estar presentes nas protenas purificadas de animais. Uma das maiores expectativas neste campo a possibilidade de se obter mutantes com atividade muito superior ao da protena nativa e sem certos efeitos adversos. Outros exemplos de produtos obtidos pela tecnologia do DNA recombinante e utilizados com finalidade teraputica so o anticoagulante TPA (ativador de plasminognio tipo tecidual), o fator VIII de coagulao e a eritropoietina (hormnio que estimula a produo de eritrcitos). A determinao e caracterizao refinada da estrutura de protenas comea a ganhar maior impacto pela possibilidade de expresso/purificao de protena em larga escala e mutagenisadas. Alm de nos proporcionar a satisfao de se conhecer uma nova estrutura, esse conhecimento nos permite projetar drogas e pensar em outras estratgias teraputicas, tais como, expressar apenas um domnio ativo da protena.

Figura 44- Representao esquemtica de estratgias usadas para produzir insulina para fins teraputicos.

Por exemplo, os domnios variveis de anticorpos podem ser expressos como uma nica cadeia polipeptdica ativa. Pode-se pensar tambm na expresso de receptores solveis (ou domnios ativos destes) para um dado vrus, no sentido de inibir a sua interao com o receptor da clula; um exemplo seria a expresso do receptor CD4 para o vrus da AIDS. Uma idia espetacular que comea a emergir a partir do nosso

conhecimento da estrutura atmica e funo de fatores de transcrio, a possibilidade da sntese de drogas que inibiriam ou ativariam especificamente um dado fator de transcrio (Figura 45).

Figura 45: Modelos hipotticos da ao de drogas que poderiam ser efetivas em teraputica atuando sobre um fator de transcrio
Um outro exemplo da potencial aplicao da expresso de protenas heterlogas em interveno teraputica seria a produo de grandes quantidades de anticorpos em plantas, visando seu uso em imunoterapia. As plantas so capazes de sintetizar e

montar virtualmente qualquer tipo de molcula de anticorpo, desde fragmentos at cadeias completas e mesmo anticorpos multimricos. Ma & Ben (1995) descreveram a expresso e montagem em plantas da molcula de IgA, que a forma predominante de imunoglobulina em secrees de superfcies mucosas como o trato grastrointestinal. At ento a produo de IgA em sistemas heterlogos tinha sido frustante devido a complexidade desta molcula. Anticorpos produzidos em plantas podem vir a ser particularmente teis para imunoterapia tpica. No caso, por exemplo, de cries, Ma et al. (1990) mostraram que a aplicao tpica de anticorpos monoclonais contra uma protena da superfcie (de adeso) doStreptococcus mutans em dentes humanos conferiu proteo a longo prazo contra esse microrganismo em adultos. b) a terapia gnica por transfeco de clulas retiradas do prprio paciente com retrovrus, ou outros tipos de vrus, com o intuito de repor um gene mutante ou para o tratamento de doenas multi-fatoriais como cncer e doenas cardacas. A primeira terapia gnica realizada para substituir um gene mutante nico, iniciada em 1990, foi a terapia para a deficincia da adenosina desaminase (ADA), a qual consiste em implantar linfcitos T transfectados com retrovrus expressando a protena ausente nos portadores desta doena. Esta tem sido considerada o prottipo das terapias gnicas e tem sido bem sucedida (ver o artigo de F. Watson, 1993).

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

Bristow, A.F. Recombinant-DNA-derived insulin analogues as potentially useful therapeutic agents. Trends in Biotechnology 11: 301-305, 1993. Bugg, C.E., Carson, W.M., and Montgomery, J.A. Drugs by Design. Scientific American 269: 60-66, 1994. Felici, F., Castagnoli, L., Musacchio, A., Jappelli, R. and Cesareni, G. J. Mol. Biol. 222: 301-310, 1991. Fields, S., and Song, O. Novel genetic system to detect protein-protein interactions. Nature 340: 245-246, 1989. Little, M., Fuchs, P., Breitling, F., and Dbel, S. Bacterial surface presentation of proteins and peptides: an alternative to phage technology? Trends in Biotechnology 11: 3-5, 1993. Luyten, W.H.M.L., and Leysen, J.E. Receptor cloning and heterologous expression--towards a new tool for drug discovery. Trends in Biotechnology, 11:247-254, 1993. Ma, J. K-C., and Hein, M. B. Immunotherapeutic potential of antibodies produced in plants. Trends in Biotechnology 13: 522-527, 1995. Ma, J. K-C., Hunjan, M., Smith, R., Kelly, C., and Lehner, T. An investigation into the mechanism of protection by local passive immunization with monoclonal antibodies against Streptococcus mutans. Infection and Immunity 58: 3407-3414, 1990.

Monaco, A.P. AND Larin, Z. YACS, BACs, PACs and MACs: artificial chromosomes as research tools. Trends in Biotechnology 12: 280-86, 1994 Pausch, M. H. G-protein-coupled receptors in S. cerevisae: high-throughput screening assays for drug discovery. Trends in Biotechnology 15: 487-494, 1997. Sambrook, J.; E.F.Fritsh and T. Maniatis - Molecular cloning. A laboratory manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. Watson, F. Human gene therapy-progress on all fronts. Trends in Biotechnology 11: 114-117, 1993.
Fonte: http://www.morpheus.fmrp.usp.br/td/apostila/apost12.htm acesso em 09 de fevereiro de 2012-02-09

ENGENHARIA GENTICA TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINANTE Aula do Professor Prof. Jos Vagner Gomes
Fonte - http://www.libertaria.pro.br/tdna_recombinante_intro.htm acesso em 09 de fevereiro de 2012.

Acordo para produo de insulina apresenta os primeiros resultados

Denise Monteiro

Chegou ao Rio de Janeiro a primeira remessa composta por 504 mil frascos de insulina recombinante importada da Ucrnia, parte do acordo de transferncia de tecnologia firmado entre o Instituto de Tecnologia em Frmacos (Farmanguinhos) da Fiocruz e o Instituto Indar para a produo de insulina brasileira. A insulina ser distribuda, de acordo com demanda informada pelo Ministrio da Sade, entre 13 estados brasileiros e recebida pelos pacientes por meio do Sistema nico de Sade. Os primeiros estados a serem atendidos sero o Rio Grande do Sul e o Esprito Santo.

Em 40 meses, Farmanguinhos estar pronto para produzir cristais de insulina em territrio nacional

Um intercmbio tecnolgico com o Indar vai permitir que Farmanguinhos produza 50 milhes de doses de insulina humana por ano, a partir de 2010. Atualmente, o Brasil importa 170 milhes de doses do medicamento, dedicado ao tratamento da diabete. A tecnologia da produo ser a da insulina recombinante, que gera um produto final mais barato e eficaz. Como o preo foi reduzido de R$ 17,35 para R$ 9,18 por frasco, calculamos uma economia anual na casa dos R$ 80 milhes, diz o diretor de Farmanguinhos, Eduardo Costa. Pelo acordo a Fiocruz vai importar do Indar as doses necessrias para abastecer o mercado brasileiro at que Farmanguinhos comece a produzir a insulina. Os entendimentos preliminares com o Indar incluram,alm da transferncia da tecnologia recombinante de produo da insulina, o desenvolvimento conjunto de aprimoramentos e cooperao para desenvolvimento e produo de outros medicamentos em ambas as direes, inclusive de anti-retrovirais; entendimentos esses formalizados por protocolo firmado entre a Fiocruz e o Indar. O acordo inclua o pleno licenciamento para a Fundao, inclusive para exportao na Amrica Latina e frica. A tecnologia do Indar envolve a utilizao por expresso da insulina Escherichia colitransgnica. A incorporao da tecnologia recombinante seria til para a Fiocruz no s para suprir o pas, e regular o mercado, mas principalmente para abrir um captulo de desenvolvimento tecnolgico associado visando outros biofrmacos. A transferncia tecnolgica se dar em um perodo de 40 meses, quando Farmanguinhos estar pronto para produzir cristais de insulina em territrio nacional. Estima-se que existam 500 mil diabticos no Brasil que dependem de insulina - uma pessoa diagnosticada a cada dois minutos e 18 segundos no pas.

Fonte - http://www.fiocruz.br/ccs/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?infoid=1371&sid=9 acesso em 09 de Fevereiro de 2012.

Sites com outros aritgos 1 - http://scholar.google.com.br/scholar?q=produ %C3%A7%C3%A3o+de+insulina+recombinante&hl=ptBR&as_sdt=0&as_vis=1&oi=scholart&sa=X&ei=WpwzT6qaEJDqtgeZ_fG2Ag&sqi=2&ved=0CB oQgQMwAA 2 - https://www.google.com.br/search?q=produ %C3%A7%C3%A3o+de+insulina+recombinante&hl=ptBR&prmd=imvns&tbs=clir:1,clirtl:en,clirt:en+recombinant+insulin+production&sa=X&ei=Wp

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