CAPTULO 2 O SISTEMA IMUNOLGICO

Neste captulo ser feita uma reviso sobre o sistema imunolgico dos animais vertebrados visando fundamentar os aspectos biolgicos necessrios ao desenvolvimento e formalizao da engenharia imunolgica como um novo paradigma de computao. A nfase dada a uma viso sistmica da imunologia, tentando apresentar uma perspectiva de processamento de informao, como arquitetura, mecanismos e princpios imunolgicos incorporados. Particular ateno ser dada ao princpio da seleo clonal e aos mecanismos de maturao de afinidade, alm da teoria da rede imunolgica.
Mente e sade . . . O homem o nico ser vivo capaz de ser seu prprio agente agressor, atravs de seus pensamentos, angstias e inseguranas diante da vida L. V. Bonamin

2.1.

Introduo

A palavra imunologia derivada do Latim immunis ou immunitas cujo significado isento de carga, sendo que a carga pode referir-se a uma taxa monetria imposta ao cidado, uma regra ou lei de restrio de direitos e liberdade, ou uma enfermidade. Indivduos que no sucumbem a uma doena quando infectados so ditos imunes e o status de uma resistncia especfica a uma determinada doena chamado de imunidade. Definio 2.1: A imunologia o ramo da biologia responsvel pelo estudo das reaes de defesa que conferem resistncia s doenas (Klein, 1990). Definio 2.2: O sistema que defende o animal contra o ataque constante de microorganismos chamado de sistema imunolgico (Tizard, 1995). O sistema imunolgico fundamental para a sobrevivncia do animal e, por isso, precisa atuar de forma eficiente. Existe uma grande quantidade de componentes e mecanismos distintos atuando no sistema imunolgico. Alguns destes elementos so otimizados para defender contra um nico invasor enquanto outros so direcionados contra uma grande variedade de agentes infecciosos. Existe uma redundncia considervel no sistema imunolgico, de forma que vrios mecanismos de defesa sejam ativados contra um nico invasor. Sob o ponto de vista tanto biolgico quanto de engenharia, a presena de mecanismos de aprendizagem e memria so caractersticas fundamentais do sistema imunolgico. Ele possui a capacidade de extrair

Cap. 2: O Sistema Imunolgico

informaes dos agentes infecciosos e disponibiliz-las para uso futuro em casos de novas infeces pelos mesmos agentes ou agentes similares. Este captulo visa introduzir no apenas aqueles conceitos do sistema imunolgico utilizados no desenvolvimento da engenharia imunolgica, mas tambm apresentar uma viso genrica dos principais elementos e processos envolvidos em uma resposta imune, de forma que o leitor adquira subsdios para compreender outras abordagens de sistemas imunolgicos artificiais. O captulo inicia com um breve histrico da pesquisa em imunologia, seguido de uma viso geral dos princpios e mecanismos de defesa do sistema imune, enfatizando o sistema adaptativo. O captulo concludo com um estudo sobre a teoria da rede imunolgica.

2.2.

Breve Histrico da Pesquisa em Imunologia

A imunologia uma cincia relativamente nova. Sua origem atribuda Edward Jenner, que descobriu, h aproximadamente 200 anos, em 1796, que a vacnia (ou cowpox), induzia proteo contra a varola, uma doena freqentemente fatal. Jenner batizou seu processo de vacinao, uma expresso ainda utilizada para descrever a inoculao de indivduos sos, com amostras atenuadas ou mortas de agentes causadores de doenas, objetivando a proteo futura contra a enfermidade (Janeway et al., 2000). Quando Jenner introduziu a vacinao, ele nada sabia sobre os agentes infecciosos que causam as doenas. No sculo XIX, Robert Koch provou que as doenas infecciosas eram causadas por microorganismos patognicos, cada qual responsvel por uma determinada enfermidade ou patologia. Atualmente, existem quatro grandes categorias de microorganismos causadores de doena ou patgenos: os vrus, as bactrias, os fungos e os parasitas. As descobertas de Koch e outros pesquisadores do sculo XIX possibilitaram o desenvolvimento da imunologia, estendendo a vacinao para outras doenas. Por volta de 1880, Louis Pasteur projetou com sucesso uma vacina contra a clera aviria e desenvolveu uma vacina anti-rbica tambm bem sucedida na inoculao de uma criana mordida por um co raivoso. Tantos triunfos prticos resultaram na busca pelos mecanismos de proteo imunolgica. Pasteur, embora bem sucedido no desenvolvimento de vacinas, possua muito pouco conhecimento sobre os mecanismos envolvidos no processo de imunizao. Ele sugeriu que organismos na vacina eram capazes de remover nutrientes essenciais do corpo e, assim, evitar o crescimento e proliferao dos agentes causadores de doena. Aproximadamente dez anos mais tarde, em 1890, Emil von Behring e Shibasaburo Kitasato demonstraram que a proteo induzida pelos processos de vacinao no se devia a remoo de nutrientes, mas estavam associadas ao surgimento de fatores de proteo no soro dos indivduos vacinados. Estas substncias foram denominadas de anticorpos, as quais se ligavam especificamente e eram capazes de neutralizar os agentes infecciosos. Emil von Behring recebeu, em 1901, o primeiro prmio Nobel em medicina pelo seu trabalho sobre a produo de anticorpos (Tizard, 1995).
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A primeira grande controvrsia em imunologia surgiu quando Elie Metchnikoff demonstrou em 1882, primeiro em animais invertebrados e depois nos mamferos, que algumas clulas eram capazes de comer microorganismos. Estas clulas foram denominadas de fagcitos, e ele props que elas compunham o principal mecanismo de defesa contra estes microorganismos. Ele sugeriu que os anticorpos apresentavam pouca importncia no sistema imunolgico. O conflito quanto relevncia dos fagcitos e anticorpos foi resolvido em 1904 quando Almroth Wright e Joseph Denys demonstraram que os anticorpos eram capazes de se ligar a bactrias e promover a sua destruio pelos fagcitos (Tizard, 1995). Ainda na ltima dcada do sculo XIX, Paul Ehrlich formulou uma teoria denominada de teoria da cadeia lateral (side-chain theory). A principal premissa desta teoria era a de que a superfcie dos glbulos brancos ou leuccitos (clulas mediadoras do sistema imunolgico) est coberta com diversas cadeias laterais, ou receptores, que formam ligaes qumicas com os antgenos encontrados (Cziko, 1995). De forma ampla, antgenos correspondem a quaisquer molculas capazes de serem reconhecidas pelo sistema imune (URL 1; Dreher, 1995; Timmis, 2000; Janeway et al., 2001). Dado qualquer antgeno, pelo menos um destes receptores seria capaz de reconhecer e se ligar a ele. A informao essencial para a produo de todos os anticorpos necessrios seria providenciada pelos genes do animal. Por esta razo, esta teoria tambm conhecida como germinal (ou providencial), referindose ao conjunto total de genes (genoma) que transmitido de um organismo ou par de organismos para seus descendentes. Ele tambm verificou um crescimento explosivo na produo de anticorpos aps a exposio a um dado antgeno e desenvolveu uma tcnica para estimar a quantidade de anticorpos no sangue. Em sua teoria, o contato com um dado antgeno seria responsvel por selecionar e estimular uma clula a sintetizar aqueles receptores particulares, que seriam posteriormente secretados para a corrente sangnea sob a forma de anticorpos. Estas caractersticas de seleo e estimulao celulares tambm permitem a caracterizao da teoria de Ehrlich como seletivista, uma vez que os antgenos seriam os responsveis pela seleo de clulas pr-existentes cujos receptores apresentam uma alta afinidade ao estmulo antignico (Silverstein, 1985). A afinidade corresponde fora de ligao entre molculas como, por exemplo, um antgeno e um anticorpo. O prmio Nobel de 1908 foi dividido por Ehrlich e Metchnikoff. No perodo entre 1910 e 1930, experimentos desenvolvidos por Obermayer, Pick e principalmente por Jules Bordet e Karl Landsteiner com haptenos artificiais (antgenos inexistentes na natureza, ou seja, artificialmente sintetizados), levaram ao abandono, por mais de meio sculo, da teoria seletivista de Ehrlich. Jules Bordet recebeu o prmio Nobel em 1919 pelo descobrimento de um conjunto de protenas que atuam juntas no ataque a formas extracelulares de agentes patognicos. Este conjunto de protenas foi denominado de sistema complemento, ou simplesmente complemento. Em 1930, Karl Landsteiner recebeu o prmio Nobel pela identificao dos diferentes tipos sangneos, resultando no sucesso dos procedimentos de transfuso de sangue. Entre 1914 e 1955 predominava o ponto de vista de que era inconcebvel que qualquer teoria seletivista sobre a formao de anticorpos estivesse correta (Piattelli-Palmarini, 1986). As propostas tericas originadas no perodo de 1930 a 1950 foram principalmente de

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carter sub-celular. As atenes se concentraram na biosntese de molculas de anticorpos produzidas pelas clulas. A concluso foi de que o antgeno deveria trazer para a clula as informaes referentes estrutura complementar da molcula de anticorpo, introduzindo uma teoria chamada de instrucionista (template instruction theory). Os primeiros trabalhos conhecidos na linha instrucionista foram executados por Breinl e Haurowitz, e posteriormente desenvolvidos e defendidos pelo ganhador do prmio Nobel Linus Pauling (Jerne, 1974a; Cziko, 1995). Pauling postulou que todos os anticorpos possuem a mesma seqncia de aminocidos, mas que sua conformao tridimensional seria determinada durante a sntese por contato direto com o antgeno, que serviria como um padro ou molde (template). As teorias seletivistas da formao de anticorpos foram reavivadas por Niels K. Jerne logo em seguida, nos anos 50. Jerne assumiu que uma populao diversa de anticorpos naturais surge durante o desenvolvimento, mesmo na ausncia de antgenos. O antgeno se combinaria atravs da seleo de anticorpos circulantes contendo estruturas complementares a este antgeno. A qualidade de uma resposta a um dado antgeno dependeria da concentrao dos anticorpos circulantes e poderia ser melhorada pela exposio prvia ao antgeno. Restou a McFarlane Burnet (e tambm a Talmage) assumir que cada clula produz e expressa em sua superfcie um nico tipo de molcula de anticorpo, e que o evento seletivo o estmulo dado pelo antgeno, sendo que aquelas clulas que produzem anticorpos complementares a ele iro se proliferar (expanso clonal) e secretar anticorpos. Nesta teoria da seleo (ou expanso) clonal, Burnet (1959) assumiu que a diversidade dos anticorpos era gerada por processos aleatrios, como mutao somtica, durante o perodo pr-natal, de forma que logo aps o nascimento, o animal teria um repertrio fixo de anticorpos. Alm disso, ele postulou a morte de qualquer clula portadora de anticorpos capazes de reconhecer antgenos prprios, denominadas clulas auto-reativas, durante este perodo de gerao de diversidade (Bell & Perelson, 1978). Peter Medawar confirmou experimentalmente a teoria da seleo clonal proposta por Burnet. Estes estudos sobre como o organismo reage aos agentes externos e apresentam tolerncia (ausncia de reao) s clulas do prprio organismo, resultaram em mais um prmio Nobel na imunologia para Medawar e Burnet. Em 1971, Jerne argumentou que a eliminao de clulas auto-reativas fornecia um mecanismo poderoso de seleo negativa favorecendo a diversidade celular frente possibilidade de reconhecer antgenos muito parecidos com o prprio. Consideraes sobre como os antgenos prprios, particularmente aqueles das molculas de anticorpo, denominados de idiotopos, poderiam afetar a gerao de diversidade e a regulao das respostas imunes, levaram Jerne a propor sua teoria da rede imunolgica (Jerne, 1973, 1974a,b, 1984, 1985), que lhe rendeu um prmio Nobel em 1984. Mais recentemente, Susumo Tonegawa (1983) formalizou seu estudo sobre estrutura e gerao da diversidade das molculas de anticorpo, propondo que no genoma de uma clula germinal est contida, em mltiplos segmentos gnicos ao longo de um cromossomo, a informao gentica para codificar uma molcula de anticorpo. Ele demonstrou como os anticorpos so gerados e como eles se combinam a uma grande variedade de molculas.
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Dessa forma, ele contribuiu para resolver um importante dilema da imunologia: Como, partindo de um genoma finito, possvel sintetizar uma diversidade de receptores capaz de reconhecer uma variedade praticamente infinita de agentes patognicos?. Este trabalho garantiu mais um prmio Nobel para a imunologia no ano de 1987. Nos ltimos anos, grande parte dos estudos em imunologia tem se concentrado nos problemas da apoptose celular, apresentao de antgenos, citocinas, regulao e maturao da resposta imune, memria imunolgica, doenas auto-imunes, vacinas de DNA e sinalizao intra- e intercelular. Dentre os principais desafios da imunologia para o sculo XXI, Abbas & Janeway (2000) destacam o aumento da compreenso dos mecanismos de controle da resposta imune adaptativa, de forma que seja possvel convert-la de um estado agressivo para um estado benigno em situaes como resposta a alrgenos, antgenos prprios (doenas auto-imunes) e tecidos transplantados. Alm disso, um aumento na eficcia das respostas a certos vrus como do HIV, malria, tuberculose e a alguns tumores tambm poderia ser alcanado atravs da manipulao da resposta imune adaptativa. A Tabela 2.1 resume as principais tendncias e seus respectivos pesquisadores no campo da imunologia at o incio dos anos 90.

Tabela 2.1.

Perodos da histria da imunologia (adaptado de Jerne, 1974a).

Tendncias

Perodo Jenner E 1796-1870 Koch R

Pioneiros

Noes Imunizao Patologia Imunizao Fagocitose Anticorpos Receptores celulares Especificidade/Complemento Haptenos/Tipos sangneos Sntese de anticorpos Instrucionismo Seleo clonal Rede e interao celular Estrutura e diversidade de receptores de antgenos

Aplicao

Pasteur L 1870-1890 Metchnikoff E von Behring E & Kitasato S 1890-1910 Ehrlich P

Descrio

Bordet J 1910-1930 Landsteiner K Breinl & Haurowitz 1930-1950 Pauling L Mecanismos (Sistema) 1950-1980 Burnet J & Talmage Jerne N Molecular 1980-1990 Tonegawa S

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2.3.

Princpios Fundamentais e Elementos Constituintes

O sistema imunolgico representa a principal barreira do hospedeiro contra as infeces, e tem a capacidade de realizar uma resposta rpida e efetiva contra os patgenos invasores. Alm disso, pode elaborar um outro tipo de resposta igualmente eficaz, porm mais lenta e duradoura. Estes dois tipos de respostas so efetuadas pelos sistemas imune inato e adaptativo, respectivamente. Ambos os sistemas (inato e adaptativo) dependem da atividade das clulas brancas, ou leuccitos. A imunidade inata mediada principalmente pelos macrfagos e granulcitos, enquanto a imunidade adaptativa mediada pelos linfcitos, como ilustrado na Figura 2.1. As clulas do sistema imune inato esto imediatamente disponveis para o combate contra uma ampla variedade de patgenos, sem exigir prvia exposio aos mesmos, e atuam do mesmo modo em todos os indivduos normais. Os macrfagos e neutrfilos possuem a capacidade de ingerir e digerir vrios microorganismos e partculas antignicas. O macrfago tambm possui a habilidade de apresentar antgenos a outras clulas, sendo portanto denominado de clula apresentadora de antgeno (APC antigen presenting cells). Os granulcitos, ou leuccitos polimorfonucleares, constituem um grupo de clulas com ncleos multilobulados contendo grnulos citoplasmticos preenchidos com elementos qumicos (enzimas), como ilustrado na Figura 2.2. Os neutrfilos so os elementos celulares mais numerosos e importantes da resposta imune inata, e tambm tm a capacidade de ingerir patgenos. Os eosinfilos so importantes principalmente na defesa contra infeces por parasitas, e a funo dos basfilos ainda no bem conhecida (Janeway et al., 2000). Uma resposta imune especfica, como a produo de anticorpos a um determinado agente infeccioso, conhecida como uma resposta imune adaptativa. Os anticorpos so produzidos pelos linfcitos B (ou clulas B) em resposta a infeces, e sua presena em um indivduo reflete as infeces s quais o mesmo j foi exposto. Os linfcitos so capazes de desenvolver uma memria imunolgica, ou seja, reconhecer o mesmo estmulo antignico caso ele entre novamente em contato com o organismo, evitando assim o reestabelecimento da doena (Sprent, 1994; Ahmed & Sprent, 1999). Assim, a resposta imune adaptativa aperfeioa-se a cada encontro com um antgeno.

Imunidade

Inata

Adaptativa

Granulcitos

Macrfagos

Linfcitos

Neutrfilos

Eosinfilos

Basfilos

Clula B

Clula T

Figura 2.1.

Mecanismos de defesa e seus principais mediadores.

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Neutrfilo

Eosinfilo

Basfilo

Figura 2.2.

Grnulos preenchendo os granulcitos ou leuccitos polimorfonucleares.

Os linfcitos que medeiam uma resposta imune adaptativa so responsveis por reconhecer e eliminar os agentes patognicos, proporcionando a imunidade duradoura, a qual pode ocorrer aps a exposio a uma doena ou vacinao. A grande maioria dos linfcitos encontra-se em estado inativo, e possuiro atividade quando houver algum tipo de interao com um estmulo antignico, necessrio para a ativao e proliferao linfocitria. Existem dois tipos principais de linfcitos: linfcitos B (ou clulas B) e linfcitos T (ou clulas T), como ilustrado na Figura 2.1. As clulas B e T expressam, em suas superfcies, receptores de antgeno altamente especficos para um dado determinante antignico (Seo 2.7). Enquanto a resposta imune adaptativa resulta na imunidade contra a re-infeco ao mesmo agente infectante, a resposta imune inata permanece constante ao longo da vida de um indivduo, independente da exposio ao antgeno (Scroferneker & Pohlmann, 1998). Esta uma importante diferena entre a resposta adaptativa e a resposta inata. Em conjunto, os sistemas inato e adaptativo contribuem para uma defesa notavelmente eficaz, garantindo que, embora passemos nossas vidas cercados por germes potencialmente patognicos, apresentemos resistncia s enfermidades. Devido grande importncia do sistema imune adaptativo, ele ser estudado em maiores detalhes na Seo 2.6.

2.4.

Mecanismos Bsicos de Defesa do Sistema Imunolgico

Nosso corpo protegido por uma grande variedade de clulas e molculas que operam em harmonia, sendo que o alvo principal de uma resposta imunolgica o antgeno (Ag). A Figura 2.3 apresenta um esquema simplificado dos principais mecanismos de reconhecimento e ativao do sistema imunolgico. Clulas apresentadoras de antgeno (APCs) especializadas, como macrfagos, circulam pelo corpo ingerindo e digerindo os patgenos encontrados, fragmentando-os em peptdeos antignicos (Nossal, 1993) (I). Partes destes peptdeos se ligam a molculas do complexo de histocompatibilidade principal (MHC major histocompatibility complex) e so apresentados na superfcie celular (II) sob a forma de um complexo MHC/peptdeo (Seo 2.7.2). As clulas T possuem receptores de superfcie (Figura 2.6(b)) que tm a funo de reconhecer diferentes complexos MHC/peptdeo (III). Uma vez ativados pelo reconhecimento MHC/peptdeo, as clulas T se dividem e secretam linfocinas (sinais qumicos) que mobilizam outros componentes do sistema imunolgico (IV). Diferente dos receptores das clulas T, entretanto, os receptores das clulas B so capazes de reconhecer partes livres solveis dos antgenos, sem as molculas do MHC (V). As clulas B, que tambm possuem molculas receptoras de especificidade nica em suas superfcies, respondem a estes sinais.

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Protena de MHC APC

Patgeno (I) Peptdeo

( II ) Clula T ( III ) Clula B (V)

( IV ) Clula T ativa Linfocinas ( VI )

Clula B ativa (plasmcito)

( VII )

Figura 2.3.

Esquema simplificado dos mecanismos de reconhecimento e ativao do sistema imunolgico.

Quando ativadas, as clulas B se dividem e se diferenciam em plasmcitos, secretando anticorpos em altas taxas, que so formas solveis dos seus receptores (VI). A ligao dos anticorpos aos antgenos encontrados faz com que o patgeno seja neutralizado (VII), levando sua destruio pelas enzimas do sistema complemento ou por fagcitos. Algumas clulas B e T se transformam em clulas de memria, as quais permanecem na circulao garantindo uma resposta rpida e eficaz contra uma futura exposio quele antgeno.

2.5.

Anatomia do Sistema Imunolgico

Os tecidos e rgos que compem o sistema imunolgico esto distribudos por todo o nosso corpo. So conhecidos como rgos linfides, uma vez que esto relacionados com a produo, crescimento e desenvolvimento dos linfcitos. Nos rgos linfides, os linfcitos interagem com diversos tipos de clulas, seja durante seu processo de maturao, seja durante o incio de uma resposta imune adaptativa. Os rgos linfides podem ser divididos em primrios (ou centrais), responsveis pela produo e maturao de linfcitos, e secundrios (ou perifricos) nos quais os linfcitos encontram os estmulos antignicos, iniciando as respostas adaptativas.

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rgos linfides primrios

rgos linfides secundrios Amgdalas e adenides

Timo Bao

Placas de Peyer Apndice Medula ssea Linfonodos Vasos linfticos

Figura 2.4.

Anatomia do sistema imunolgico (rgos linfides).

Os rgos linfides (Figura 2.4) e suas principais funes incluem: 1. rgos linfides primrios: Medula ssea: o local da hematopoese, ou seja, a gerao dos elementos celulares do sangue, incluindo as hemcias, os moncitos, os leuccitos polimorfonucleares (granulcitos), os linfcitos B e as plaquetas. Nos mamferos, a medula ssea tambm o stio de desenvolvimento das clulas B e a fonte de clulas-tronco que do origem aos linfcitos T aps a migrao para o timo; Timo: rgo localizado na poro superior do trax onde ocorre o desenvolvimento das clulas T. Algumas clulas migram para o timo a partir da medula ssea, e l se multiplicam e amadurecem, transformando-se em clulas T. 2. rgos linfides secundrios: Amgdalas e Adenides: constituem grandes agregados de clulas linfides organizadas como parte do sistema imune associado a mucosas ou ao intestino; Linfonodos: atuam como regies de convergncia de um extenso sistema de vasos que coletam o fluido extracelular dos tecidos, fazendo-o retornar para o sangue. Este fluido celular produzido continuamente por filtragem do sangue e denominado de linfa. tambm o ambiente onde ocorre a resposta imune adaptativa; Apndice e Placas de Peyer: linfonodos especializados contendo clulas imunolgicas destinadas a proteo do sistema gastrointestinal; Bao: o maior rgo linfide secundrio. tambm o nico rgo linfide entreposto na corrente sangnea constituindo-se, portanto, no local onde os linfcitos combatem os organismos que invadem a corrente sangnea. Contm uma polpa vermelha responsvel pela remoo de clulas sangneas envelhecidas, e uma polpa branca de clulas linfides que responde aos antgenos levados ao bao pelo sangue;

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Patgenos

Pele Barreiras bioqumicas Fagcito Resposta imune inata Linfcitos Resposta imune adaptativa

Figura 2.5.

Estrutura multicamadas do sistema imunolgico.

Vasos linfticos: rede de canais que transporta a linfa para o sangue e rgos linfides. Os vasos aferentes drenam o lquido dos tecidos e carregam as clulas portadoras dos antgenos dos locais de infeco para os rgos linfticos (linfonodos). Nos linfonodos, as clulas apresentam o antgeno aos linfcitos que esto recirculando, os quais elas ajudam a ativar. Uma vez que estes linfcitos especficos passaram por um processo de proliferao e diferenciao, eles deixam os linfonodos como clulas efetoras atravs dos vasos linfticos eferentes.

O sistema imunolgico possui uma arquitetura de mltiplas camadas, com mecanismos de regulao e defesa espalhados em vrios nveis (Figura 2.5). As camadas de proteo podem ser divididas como a seguir (Janeway et al., 2000; URL 1; Rensberger, 1996; Hofmeyr; 1997, 2000): Barreiras fsicas: a pele funciona como uma espcie de escudo protetor contra os invasores, sejam estes malficos ou no. O sistema respiratrio tambm ajuda na manuteno dos antgenos distantes. Seus mecanismos de defesa incluem a apreenso de pequenas partculas nos plos e mucosas nasais e a remoo de elementos via tosse e espirros. A pele e as membranas que fazem parte do sistema respiratrio e digestivo tambm contm macrfagos e anticorpos; Barreiras bioqumicas: fluidos como a saliva, o suor e as lgrimas contm enzimas como a lisozima. Os cidos estomacais eliminam grande parte dos microorganismos ingeridos junto com a comida e a gua. O pH e a temperatura corporais podem apresentar condies de vida desfavorveis para alguns microorganismos invasores; Sistema imune inato: a primeira linha de defesa contra muitos microorganismos comuns. Ele formado por clulas fagocitrias, como os macrfagos e os neutrfilos (Figura 2.1), alm de fatores solveis como o complemento e algumas enzimas. As clulas do sistema imune inato desempenham um papel crucial na iniciao e posterior direcionamento das respostas imunes adaptativas, principalmente devido ao fato de que as respostas adaptativas demoram um certo

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perodo de tempo (da ordem de dias) para exercer seus efeitos. Portanto, a resposta inata apresenta um papel muito importante no controle das infeces durante esse tempo; Sistema imune adaptativo: Devido grande importncia deste sistema, ele ser discutido separadamente a seguir.

2.6.

Sistema Imune Adaptativo

Todos os organismos vivos so capazes de apresentar algum tipo de resistncia a patgenos, mas a natureza desta resistncia difere basicamente de acordo com o tipo de organismo. Tradicionalmente, a imunologia aborda, quase exclusivamente, as reaes de defesa dos vertebrados (animais contendo ossos) e, em particular, dos mamferos exemplificados pelos camundongos e humanos (Klein, 1990). Os animais vertebrados desenvolveram um sistema de defesa com a caracterstica principal de ser preventivo, ou seja, o sistema imune dos vertebrados capaz de se prevenir contra qualquer tipo de antgeno que pode ser encontrado (ou sintetizado). Os linfcitos so as principais clulas do sistema imune adaptativo, presentes apenas nos animais vertebrados, evoluram para proporcionar meios de defesa mais versteis e um maior nvel de proteo face s novas infeces pelo mesmo agente, do que os apresentados pelo sistema imune inato. Entretanto, as clulas do sistema imune inato desempenham um papel crucial no desencadeamento e posterior regulao das respostas imunes adaptativas. Cada linfcito virgem que penetra na corrente circulatria portador de receptores de antgeno com uma nica especificidade. A especificidade destes receptores, contudo, determinada por um mecanismo de rearranjo gnico especial que atua durante o desenvolvimento linfocitrio na medula ssea e no timo, a fim de gerar centenas de diferentes variantes dos genes codificadores das molculas receptoras. Assim, embora um linfcito individual seja portador de um receptor de especificidade nica, a especificidade de cada linfcito diferente, e os milhes de linfcitos do organismo podem apresentar milhes de especificidades distintas. Os linfcitos sofrem, ento, um processo parecido com a seleo natural durante a vida do indivduo (Lederberg, 1988; Klein, 1995): somente aqueles que encontram um antgeno com o qual seu receptor pode interagir sero ativados para proliferar e se diferenciar em clulas efetoras. No Captulo 4, discutiremos brevemente a teoria da evoluo natural que deu origem a computao evolutiva, relacionando a evoluo das clulas imunolgicas com a evoluo do indivduo. Este aspecto particularmente importante para o desenvolvimento e caracterizao da engenharia imunolgica, a ser proposta no prximo captulo. O mecanismo seletivo atualmente aceito foi proposto por McFarlane Burnet (1959) para explicar por que os anticorpos, que podem ser produzidos em resposta a virtualmente qualquer antgeno, so produzidos em cada indivduo apenas contra aqueles antgenos aos quais ele foi exposto. O autor postulou a existncia, no hospedeiro, de muitas clulas potencialmente produtoras de anticorpos diferentes, cada uma tendo a capacidade de sintetizar um anticorpo de especificidade distinta e exibindo, em sua superfcie, o mesmo

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

tipo de anticorpo ligado membrana e atuando como receptor de antgeno. Aps a ligao do anticorpo de superfcie ao antgeno, a clula ativada para proliferar e produzir uma numerosa prole, conhecida como clone. Essas clulas secretam anticorpos com uma especificidade idntica do receptor de superfcie. Este princpio recebeu o nome de teoria da seleo clonal, e constitui a parte central da imunidade adaptativa. Suas implicaes para o processo de aprendizagem e memria imunolgica so muitas, razo pela qual a seleo clonal ser estudada separadamente na Seo 2.8.

2.7.

Reconhecimento de Padres

Do ponto de vista de reconhecimento de padres no sistema imunolgico, a caracterstica mais importante das clulas B e T que ambas possuem molculas receptoras (reconhecedoras) em suas superfcies capazes de reconhecer antgenos. Os receptores das clulas B e T reconhecem antgenos com caractersticas distintas. O receptor da clula B pode interagir com molculas antignicas livres em soluo, enquanto o receptor das clulas T reconhece antgenos processados e ligados uma molcula de superfcie denominada de complexo de histocompatibilidade principal (ver Figura 2.3). O receptor de antgeno da clula B (BCR B cell receptor) o anticorpo ligado membrana, e que ser secretado quando a clula for ativada. As principais funes da clula B, cujo nome provem do fato de que sua maturao ocorre na medula ssea (bone marrow), incluem a produo e secreo de anticorpos como resposta aos agentes patognicos. Cada clula B produz um tipo especfico de anticorpo, capaz de reconhecer e se ligar a uma determinada protena. A secreo e ligao de anticorpos a antgenos constituem formas de sinalizar outras clulas para que estas faam a ingesto, processamento e/ou remoo da substncia ligada. A Figura 2.6(a) ilustra uma clula B com destaque para a molcula de anticorpo. O reconhecimento imunolgico ocorre em nvel molecular e baseado na complementaridade entre a regio de ligao do receptor e uma poro do antgeno chamada eptopo. Enquanto os anticorpos possuem um nico tipo de receptor, os antgenos podem possuir mltiplos eptopos, significando que um nico antgeno pode ser reconhecido por diferentes molculas de anticorpo, como ilustrado na Figura 2.6(b). Devido sua grande importncia tanto para o sistema biolgico quanto para os sistemas artificiais, a Seo 2.7.1 ser dedicada exclusivamente molcula de anticorpo. A clula T assim chamada devido ao fato de que sua maturao ocorre no timo (Dreher, 1995). Suas funes incluem a regulao das aes de outras clulas e o ataque direto s clulas infectadas do organismo hospedeiro. Os linfcitos T podem ser divididos em dois grandes subgrupos: clulas T auxiliares (TH T helper) e clulas T citotxicas (TK T killer ou T citotoxic). O receptor de antgeno da clula T (TCR T cell receptor) possui algumas diferenas estruturais em relao aos receptores das clulas B (Figura 2.7(a)), como ser discutido na Seo 2.7.2. Enquanto o BCR capaz de reconhecer antgenos livres, o TCR reconhece apenas antgenos processados (fragmentados sob a forma de peptdeos) e ligados uma molcula de superfcie chamada complexo de histocompatibilidade principal, ou MHC. A Figura 2.7(b) ilustra o TCR e sua ligao ao complexo MHC/peptdeo.

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BCR ou Anticorpo

Receptor de clula B (Ab) Eptopos Antgeno

Clula B

Figura 2.6.

(a) (b) Linfcito B. (a) Clula B com destaque para a molcula de anticorpo em sua superfcie (Seo 2.7.1). (b) A poro de um antgeno que reconhecida por um anticorpo chamada eptopo. Enquanto os anticorpos so monoespecficos, os antgenos podem apresentar vrios eptopos distintos.

Existem duas grandes classes de molculas de MHC (Germain, 1994, 1995), chamados de MHC classe I (MHC-I) e MHC classe II (MHC-II). As molculas de classe I so encontradas em todas as clulas, enquanto as molculas de classe II so encontradas em um conjunto de clulas chamadas clulas apresentadoras de antgeno (APC), como por exemplo as clulas B, os macrfagos e as clulas dendrticas (Banchereau & Steinman, 1998). As clulas T citotxicas reconhecem antgenos ligados a molculas de MHC-I, permitindo a deteco de clulas infectadas por vrus. As clulas T auxiliares interagem com antgenos ligados ao MHC-II. As clulas apresentadoras de antgeno capturam uma protena antignica do ambiente e a processam (ingesto e digesto) de forma a cort-la em pequenos fragmentos chamados peptdeos. Alguns destes peptdeos ou fragmentos peptdicos ligam-se a uma molcula de MHC-II e o complexo MHC/peptdeo transportado para a superfcie da APC, onde ele pode interagir com uma clula T auxiliar (TH). Este processo est ilustrado na Figura 2.7.
TCR
Protena de MHC-II APC Peptdeo Patgeno

Clula T

Clula TH

Complexo MHC/peptdeo

(a)
Figura 2.7.

(b)

Linfcito T. (a) Clula T com destaque para o TCR (Seo 2.7.2). (b) O receptor de clula T (TCR) se liga ao complexo formado por uma molcula de MHC prprio mais um peptdeo antignico.

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

Ambos os sistemas apresentam peptdeos de molculas prprias e tambm de molculas exgenas ou no-prprias. As clulas T, portanto, precisam discriminar entre o que prprio e o que no-prprio, assunto que ser abordado na Seo 2.9.

2.7.1.

A Molcula de Anticorpo e a Diversidade Imunolgica

O anticorpo, ou imunoglobulina, uma glicoprotena composta por quatro cadeias polipeptdicas: duas cadeias leves (L) idnticas e duas cadeias pesadas (H) tambm idnticas (Tonegawa, 1983, 1985; Janeway et al., 2000; Perelson & Weisbuch, 1997), como ilustrado na Figura 2.8. Extensivas anlises de cadeias polipeptdicas das molculas de imunoglobulina revelaram que elas so compostas por uma regio aminoterminal altamente varivel (regio varivel) e uma regio carboxiterminal (regio constante) com poucos tipos distintos. A regio varivel, ou regio-V, responsvel pelo reconhecimento antignico. Estas subregies so usualmente chamadas de regies determinadas por complementaridade (CDR complementarity-determining regions). A regio constante, ou regio-C, responsvel por uma variedade de funes efetoras, como fixao do complemento e ligao a outros receptores celulares do sistema imune. Portanto, a molcula de anticorpo bifuncional, podendo ligar-se a um antgeno e exercer uma atividade biolgica (efetora).

VH VL

Regies de ligao ao antgeno

VH VL

CH Fab CL

CH CL Fab

CH

CH Fc

Figura 2.8.

Esquema da molcula de anticorpo. A regio varivel (regio-V) responsvel pelo reconhecimento e ligao ao antgeno, e a regio constante (regio-C) responsvel por uma variedade de funes efetoras, tais como a fixao do complemento. A molcula simtrica possuindo dois stios idnticos de ligao ao antgeno (Fab) e um stio (Fc) que se liga aos receptores em clulas efetoras, ou interagem com as protenas do complemento. Os subndices L e H referem-se as cadeias leves e pesadas, respectivamente.

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...

D ...

J ...

Rearranjo gnico V D J C

DNA rearranjado Transcrio V D J C

RNA Splicing V D J C

mRNA Translao Cadeia pesada da imunoglobulina

Figura 2.9.

O processo de rearranjo gnico que leva formao da cadeia pesada de uma molcula de anticorpo. Fragmentos gnicos (exatamente um de cada biblioteca) so concatenados de forma ordenada. Cada cadeia recebe em sua extremidade um fragmento constante C. Um processo de transcrio une C a V(D)J e o splicing do RNA junta as seqncias reunidas da regio-V s seqncias que codificam a regioC, resultando na cadeia pesada da molcula de anticorpo (adaptado de Oprea, 1999).

Uma caracterstica importante da molcula de anticorpo (e tambm do TCR a ser estudado posteriormente) o fato de que no genoma de cada indivduo existem mltiplos segmentos gnicos, com seqncias relativamente distintas, que codificam uma parte do receptor, ou seja, existem bibliotecas de fragmentos gnicos. Estes segmentos gnicos devem ser colocados juntos para formar uma molcula completa de imunoglobulina ativa nos linfcitos B. Alm disso, mutaes somticas com taxas elevadas (hipermutao) podem ser introduzidas em um gene de imunoglobulina. Tanto a recombinao gentica quanto a mutao somtica contribuem para o crescimento da diversidade da informao gentica codificada no genoma. De forma simplificada, os rearranjos de DNA que renem o material gentico que codifica as regies V e C de uma molcula de imunoglobulina unem segmentos separados do DNA da regio-V, um dos quais adjacente ao DNA que codifica a regio-C. Na cadeia leve, estes segmentos recebem a denominao de V (varivel) e J (juno). A juno de um segmento V com um segmento J cria um segmento contnuo de DNA que codifica toda a regio-V da cadeia leve. A regio-V da cadeia pesada codificada por 3 segmentos

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

gnicos. Alm dos segmentos gnicos V e J, um terceiro segmento denominado D (diversidade) encontrado entre os segmentos V e J da cadeia pesada. A Figura 2.9 ilustra o processo de sntese da cadeia pesada de uma molcula de imunoglobulina. A presena dos mecanismos de recombinao gentica e mutao somtica como formas de gerao da diversidade populacional dos anticorpos intrigante (Tonegawa, 1985). Por que dois sistemas distintos teriam evoludo para exercer a mesma funo? Os dois mecanismos esto sob um controle estrito durante o desenvolvimento das clulas B. A recombinao dos segmentos gnicos das imunoglobulinas ocorre primeiro, e est completa no momento em que as clulas so expostas pela primeira vez ao estmulo antignico. Isto gera uma populao celular com ampla variedade em sua especificidade, permitindo que algumas delas sejam compatveis com um dado estmulo antignico. O mecanismo de mutao somtica , ento, chamado para operar durante a proliferao (ou clonagem) das clulas selecionadas, onde um clone uma clula ou conjunto de clulas descendentes de uma mesma clula me. Atravs da troca das bases nucleotdicas, a hipermutao somtica permite refinar a resposta imunolgica ao antgeno reconhecido, criando genes de molculas de imunoglobulina cujos produtos so capazes de reconhecer com maior afinidade aquele antgeno. A atuao conjunta destes mecanismos de gerao e diversificao dos anticorpos faz com que o sistema imunolgico seja capaz de produzir uma quantidade quase infinita de receptores celulares distintos partindo de um genoma finito. A Seo 2.8.2 discute a maturao de afinidade dos anticorpos, ou seja, os processos de hipermutao somtica e edio de receptores (ou recombinao V(D)J), responsveis por um aumento da diversidade populacional e pela melhoria na capacidade de reconhecimento antignico pelos receptores linfocitrios.

2.7.2.

O Receptor de Clula T (TCR) e a Diversidade Imunolgica

Existem quatro cadeias polipeptdicas que podem formar dois tipos de TCR, cada qual contendo duas destas quatro cadeias. Duas cadeias polipeptdicas esto ligadas por uma ponte dissulfdrica, numa estrutura semelhante a um fragmento Fab de imunoglobulina, como ilustrado na Figura 2.10. A diversidade da regio-V de um TCR gerada de forma similar diversidade das molculas de imunoglobulina, porm com algumas caractersticas distintas (Tizard, 1995). As quatro cadeias polipeptdicas de um TCR esto codificadas por quatro bibliotecas distintas de genes (, , e ) que se assemelham aos segmentos gnicos que codificam as cadeias leve e pesada de uma molcula de imunoglobulina. Todas as quatro bibliotecas contm segmentos gnicos V, J e C, e as bibliotecas e tambm contm segmentos D. Outra diferena das bibliotecas gnicas das molculas de imunoglobulina que cada biblioteca gnica do TCR apresenta dois genes de regio-C. Nas bibliotecas / estes dois genes da regio-C so funcionalmente e estruturalmente diferentes, de forma que um codifica a regio constante (C) e outro codifica a regio constante (C). Todas as clulas TH e TK rearranjam e expressam genes e , enquanto uma pequena subpopulao utiliza genes e (Tizard, 1995).
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Regio-V

Regio-C

Clula T

Figura 2.10. Um TCR formado por duas das quatro cadeias polipeptdicas , , e , sendo que cada cadeia contm uma poro semelhante ao domnio constante e uma poro semelhante ao domnio varivel da molcula de imunoglobulina.

Alm de apresentarem formas distintas de reconhecimento antignico, a molcula de imunoglobulina possui dois stios idnticos de ligao ao antgeno (Figura 2.6) e pode ser secretada, enquanto o TCR possui um nico stio e sempre uma molcula de superfcie celular (Figura 2.7). A ativao das clulas T necessita mais do que a ligao do TCR ao complexo MHC/peptdeo. So necessrios sinais co-estimulatrios. A ausncia ou presena dos sinais co-estimulatrios tambm importante para determinar se a interao do TCR com o complexo MHC/peptdeo ir levar ativao ou induo de tolerncia (Seo 2.9).

2.8.

Princpio da Seleo Clonal

Uma vez que cada clula apresenta um padro (forma) distinto de receptor antignico, o nmero de linfcitos que pode se ligar a um determinado antgeno restrito. A fim de produzir clulas efetoras especficas em quantidade suficiente para combater uma infeco, um linfcito ativado deve se proliferar antes que sua prole se diferencie em clulas efetoras. O princpio (ou teoria) da seleo (ou expanso) clonal est associado s caractersticas bsicas de uma resposta imune adaptativa a um estmulo antignico. Ele estabelece que apenas aquela clula capaz de reconhecer um determinado estmulo antignico ir se proliferar, sendo, portanto, selecionada em detrimento das outras. Quando um animal exposto a um antgeno, uma subpopulao de linfcitos (clulas B) responde atravs da produo de anticorpos. Cada clula secreta um nico tipo de anticorpo, que relativamente especfico para o antgeno. Atravs da ligao do antgeno com o receptor da clula B e, dado um segundo sinal (ou sinal co-estimulatrio) de clulas acessrias como a clula TH, um antgeno estimula a clula B a se proliferar (dividir) e transformar-se em uma clula terminal capaz de secretar anticorpos em altas taxas. Estas clulas so chamadas de plasmcitos. As clulas B, alm de se proliferar e diferenciar em plasmcitos, tambm podem se diferenciar em clulas B de memria, caracterizadas por longos perodos de vida. As

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

clulas de memria circulam pelo sangue, vasos linfticos e tecidos, provavelmente no produzem anticorpos (Perelson et al., 1978), mas quando re-expostas ao mesmo estmulo antignico comeam a se diferenciar em plasmcitos capazes de produzir anticorpos prselecionados pelo antgeno especfico que estimulou a resposta primria. Alm disso, linfcitos em desenvolvimento e que se apresentam como potencialmente auto-reativos so removidos do repertrio antes de seu amadurecimento (Seo 2.9.2). A Figura 2.11 ilustra o princpio da seleo clonal. A seleo clonal ocorre tanto no caso dos linfcitos B quanto no caso das clulas T. As clulas T no secretam anticorpos, mas so muito importantes na regulao da resposta das clulas B, sendo preeminentes nas respostas imunes mediadas por clulas (Figura 2.3, Seo 2.4).

Deleo clonal (seleo negativa)

Antgeno prprio Proliferao

M

Anticorpo Seleo Diferenciao Plasmcitos Clulas de memria

Antgenos estranhos

Antgeno prprio

Deleo clonal (seleo negativa)

Figura 2.11. Esquema do princpio da seleo clonal. Os formatos distintos dos receptores celulares (anticorpos) correspondem a representaes pictricas distintas. Durante o processo de gerao do repertrio linfocitrio, algumas clulas so portadoras de receptores que se ligam a antgenos prprios sendo, portanto, eliminadas precocemente no desenvolvimento, antes que sejam capazes de responder, assegurando uma tolerncia aos antgenos prprios. Quando o antgeno interage com o receptor num linfcito maduro, tal clula ativada e comea a se dividir. Originase um clone de prognie idntica, que ir se diferenciar em clulas efetoras (plasmcitos) e de memria.

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Em resumo, as principais caractersticas da teoria da seleo clonal so (Burnet, 1978): Eliminao ou inativao dos novos linfcitos diferenciados capazes de reagir com padres antignicos expressos por elementos do prprio organismo, denominados antgenos prprios (Seo 2.9.2). Esta caracterstica assegura uma tolerncia, ou ausncia de resposta, ao prprio; A interao de uma molcula estranha com um receptor de linfcito capaz de ligarse a essa molcula leva ativao linfocitria; Restrio fenotpica de um padro para cada clula diferenciada e reteno deste padro pelos descendentes clonais; e Gerao de variaes genticas aleatrias, atravs de um mecanismo de hipermutao somtica, expressas sob a forma de diversos tipos de anticorpos.

2.8.1.

Aprendizagem por Reforo e Memria Imunolgica

Para que o sistema imunolgico seja capaz de proteger nosso organismo, o reconhecimento antignico no suficiente: tambm preciso que haja recursos suficientes para montar uma resposta imunolgica efetiva contra os agentes patognicos. Como em situaes presapredador tpicas, o tamanho da subpopulao de linfcitos, ou seja, o tamanho do clone especfico para o antgeno, em relao ao tamanho da populao de antgenos, crucial na determinao do resultado da infeco. A aprendizagem imunolgica envolve o aumento do tamanho da populao e afinidade Ag-Ab (antgeno-anticorpo) de linfcitos que reconheceram determinado antgeno. Como o nmero total de linfcitos do sistema imunolgico regulado, um aumento no tamanho de alguns clones especficos resulta na reduo do tamanho de outros clones. Entretanto, o nmero total de linfcitos no permanece absolutamente constante. Se o sistema imunolgico aprendesse apenas pelo crescimento populacional de alguns clones especficos, ele deveria esquecer alguns antgenos aprendidos previamente, aumentar o tamanho global do sistema ou constantemente reduzir a quantidade de clulas geradas aleatoriamente e responsveis pela introduo e manuteno da diversidade populacional (Perelson & Weisbuch, 1997). Durante a evoluo do sistema imunolgico, um organismo encontra um dado antgeno repetidas vezes. Uma resposta imune adaptativa exposio inicial de um dado antgeno composta por um conjunto pequeno de clones de clulas B, cada um produzindo anticorpos de diferentes especificidades (afinidades). A eficincia da resposta adaptativa a encontros secundrios poderia ser consideravelmente aumentada atravs do armazenamento de clulas produtoras de anticorpos com alta afinidade quele antgeno, denominadas de clulas de memria, de forma que se tenha um grande clone inicial nos encontros subsequentes (Ada & Nossal, 1987). Ao invs de partir do comeo toda vez que um dado estmulo antignico apresentado, essa estratgia garante que a velocidade e eficcia da resposta imunolgica se aperfeioe aps cada infeco (Perelson et al., 1978, Farmer et al., 1986). Este esquema caracterstico de uma estratgia de aprendizagem por reforo (Sutton & Barto, 1998), onde o sistema est continuamente melhorando a capacidade de executar sua tarefa (Seo 4.2.1.2.3). Para ilustrar a resposta (memria) imunolgica, considere que um antgeno Ag1 introduzido em um animal em um tempo 0. Poucos anticorpos especficos a Ag1 estaro

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

presentes no soro e, aps uma fase de latncia, os anticorpos contra o antgeno Ag1 comeam a aumentar em concentrao e afinidade at um certo nvel e, assim que a infeco eliminada sua concentrao comea a cair (resposta primria). Quando outro antgeno Ag2 (diferente de Ag1) introduzido, o mesmo padro de resposta apresentado, mas para um tipo de anticorpo de especificidade distinta daquela apresentada pelos anticorpos que reconheceram Ag1, demonstrando a especificidade da resposta imune adaptativa. Por outro lado, uma caracterstica importante da memria imunolgica sua associatividade: clulas B adaptadas a um certo tipo de antgeno Ag1 apresentam uma resposta secundria mais rpida e eficiente no somente a Ag1, mas tambm a um antgeno estruturalmente relacionado como, por exemplo, Ag1. Este fenmeno chamado de reao imunolgica cruzada, ou resposta reativa cruzada (cross-reactive response) (Hoffmann, 1986; Ada & Nossal, 1987; Sprent, 1994; Smith et al., 1997; Hodgkin, 1998; Mason, 1998). Esta memria associativa chamada de capacidade de generalizao, ou simplesmente generalizao, na literatura de redes neurais artificiais (Haykin, 1999). A Figura 2.12 ilustra as respostas primria, secundria e reativa cruzada. Comparando-se a resposta primria com a secundria, esta ltima caracterizada por uma fase de latncia menor, e uma maior e mais prolongada taxa de produo de anticorpos. Alm disso, uma dose de antgenos substancialmente menor do que a requerida para iniciar uma resposta primria pode desencadear uma resposta secundria.

Resposta Primria

Resposta Secundria

Resposta Reativa Cruzada

Concentrao de Anticorpos

Latncia Latncia

Latncia

Resposta a Ag1 Resposta a Ag1

...
Resposta a Ag2

Resposta a Ag1

... ...
Antgeno Ag1 Antgenos Ag1, Ag2

...
Antgeno Ag1 Tempo

Figura 2.12. Resposta imunolgica primria, secundria e reativa cruzada. Depois que um antgeno Ag1 visto uma vez (resposta primria), encontros subsequentes com o mesmo antgeno, ou um antgeno similar Ag1 (reao cruzada), provocar uma resposta mais rpida e eficiente (resposta secundria), no apenas a Ag1, mas tambm a Ag1. As respostas primrias a antgenos distintos (Ag1 e Ag2) so similares.

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Alguns autores sugerem que as clulas de memria permanecem em um estado de repouso antes de atuar numa resposta secundria (Allen et al., 1987; Coutinho, 1989). Estas clulas de memria seriam funcionalmente independentes das outras clulas, sendo a memria uma propriedade do clone, pelo menos no contexto de respostas secundrias. Sprent (1994) sugeriu que clulas de memria tpicas esto semi-ativadas, agindo em respostas pequenas a estmulos persistentes. Essa discusso sobre o estado funcional das clulas de memria importante, pois em duas das ferramentas computacionais a serem propostas nesta tese um conjunto de clulas de memria considerado funcionalmente independente dos outros membros do repertrio imunolgico. Isso se deve ao fato de que, sob uma perspectiva de engenharia e baseado em evidncias estatsticas, clulas com maiores afinidades devem ser preservadas como candidatas de alta qualidade ao reconhecimento de antgenos, e no devem ser substitudas por candidatas de qualidade inferior. Em resumo, a aprendizagem e memria imunolgica podem ser adquiridas atravs dos seguintes mecanismos (Ahmed & Sprent, 1999; Janeway et al., 2000): Aprendizagem: Exposio repetida ao estmulo antignico; Aumento do tamanho de clones especficos; e Maturao de afinidade do receptor. Memria: Existncia de linfcitos com perodos prolongados de vida que persistem em um estado de repouso at um segundo encontro antignico; Exposio repetida ao antgeno mesmo na ausncia de infeco, ou em infeces crnicas; e Reatividade cruzada. Alm da teoria da seleo clonal, a teoria da rede idiotpica (ou teoria da rede imunolgica), a ser discutida na Seo 2.10, apresenta uma abordagem conceitualmente diferente para explicar fenmenos como aprendizagem e memria imunolgica.

2.8.2.

Maturao de Afinidade

Em uma resposta imunolgica auxiliada pelas clulas T, o repertrio de clulas B ativadas por antgenos diversificado basicamente por dois mecanismos: hipermutao somtica e edio de receptores (Tonegawa, 1983, 1985; Berek & Ziegner, 1993; Nussenzweig, 1998; George & Gray, 1999). Somente os descendentes com alta afinidade antignica so selecionados para fazerem parte do conjunto de clulas de memria. Os anticorpos presentes em uma resposta de memria (resposta secundria) possuem, em mdia, maiores afinidades do que aqueles das respostas primrias. Este fenmeno, que restrito s respostas dependentes das clulas T, chamado de maturao de afinidade. Esta maturao, ou amadurecimento, requer que a regio de ligao ao antgeno, regio-V (Seo 2.7), na resposta secundria, seja estruturalmente diferente (contenha diferentes

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

seqncias gnicas) daquelas apresentadas nas respostas primrias. Trs mecanismos distintos de mutao podem ser observados na regio-V dos anticorpos (Allen et al., 1987): Mutaes pontuais; Pequenas delees; e Troca no recproca de sequncias, seguindo uma converso gentica.

Mutaes aleatrias so introduzidas nos genes da regio-V durante a expanso clonal dos linfcitos B e ocasionalmente uma dessas mudanas ir provocar um aumento da afinidade do anticorpo ao estmulo antignico que o selecionou. Estes descendentes com alta afinidade antignica so ento selecionados para fazerem parte do conjunto de memria. No somente um mecanismo de mutao utilizado para diversificar o repertrio de anticorpos, mas tambm algum mecanismo deve existir tal que clulas B raras com receptores mutantes de alta afinidade sejam selecionadas e predominem nas respostas futuras. Devido natureza aleatria do processo de mutao somtica, uma grande parcela dos genes mutantes torna-se no funcional, ou desenvolve receptores auto-reativos (Storb, 1998). Estas clulas com receptores de baixa afinidade, ou as clulas auto-reativas, devem ser eficientemente eliminadas (ou tornarem-se anrgicas) de forma que elas no contribuam significativamente para o conjunto de memria (Berek & Ziegner, 1993; Adams, 1996; Nussensweig, 1998; George & Gray, 1999). A forma com que as clulas B contendo receptores de baixa afinidade, ou auto-reativos, so eliminadas ainda no muito bem compreendida, mas provavelmente ocorre apoptose no centro germinativo (Coutinho, 1989; Nossal, 1992). A apoptose um processo de morte celular programada, onde uma cascata de eventos intracelulares resultam na condensao e fragmentao do DNA, morte e fagocitose dos resduos celulares (McConkey et al., 1990; Cohen, 1993; Schwartz & Banchereau, 1996). A anlise do desenvolvimento do repertrio de anticorpos expresso pelas clulas B nos centros germinativos demonstra claramente o papel que a mutao seguida de seleo exerce na maturao da resposta imunolgica. Ambos os processos so vitais na maturao da resposta imune. O aumento da afinidade dos anticorpos da resposta primria para a secundria, e assim sucessivamente, demonstra que a maturao da resposta imunolgica um processo contnuo, como ilustrado na Figura 2.13. Existem trs aspectos essenciais de uma resposta imune adaptativa: diversidade suficiente para combater um universo antignico, distino prprio/no-prprio, e memria imunolgica. Na teoria da seleo clonal originalmente proposta por Burnet (1959), a memria seria fornecida pela expanso do tamanho de um determinado clone especfico ao estmulo antignico, e a mutao aleatria seguida de seleo permitiria o aumento da afinidade deste clone. Alm disso, clulas auto-reativas seriam deletadas durante seu desenvolvimento. Resultados recentes sugerem que o sistema imunolgico pratica no somente a seleo clonal de linfcitos, mas tambm uma seleo molecular de receptores (Nussenzweig, 1998). Ao invs da deleo clonal esperada de todas as clulas auto-reativas, ocasionalmente alguns linfcitos B sofrem uma edio de receptores: estas clulas B deletam seus receptores auto-reativos e desenvolvem receptores completamente novos atravs da recombinao gentica dos elementos componentes das bibliotecas V(D)J.

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Afinidade (log)

1a

2a

3a

Resposta

Figura 2.13. Esboo do processo de maturao de afinidade durante sucessivas respostas imunes adaptativas.

Embora a edio e seleo de receptores no faam parte do modelo proposto por Burnet, a teoria de seleo clonal pode certamente acomodar a edio de receptores caso a seleo de receptores ocorra antes da seleo celular. Qualquer clone com alta afinidade desenvolvido por hipermutao somtica ou edio de receptores seria preferencialmente expandido, mas algumas clulas de baixa afinidade tambm poderiam fazer parte do repertrio mantendo, assim, a diversidade populacional. George & Gray (1999) defenderam a existncia do mecanismo de edio de receptores durante a maturao de afinidade como uma estratgia capaz de permitir que um receptor saia de uma regio de timo local em uma superfcie de afinidade. A Figura 2.14 ilustra esta idia considerando todas as possveis regies de ligao ao antgeno no eixo x, onde as regies adjacentes esto mais prximas entre si. A afinidade antgeno-anticorpo (Ag-Ab) mostrada no eixo y. Se um dado anticorpo Ab1 selecionado durante uma resposta primria, ento pequenas mutaes seguidas de seleo permitem que o sistema imunolgico explore regies locais em torno de Ab1 tomando pequenos passos na direo de um anticorpo com maior afinidade, levando um timo local Ab1*. Como os mutantes de baixa afinidade so descartados, os anticorpos no podem descer a montanha. A edio de receptores permite que um anticorpo execute grandes passos atravs da superfcie, caindo em posies onde a afinidade pode ser inferior anterior (Ab2). Entretanto, ocasionalmente o salto resultar em um anticorpo numa posio da montanha onde a regio de escalada mais promissora (Ab3). Partindo deste ponto, mutaes somticas seguidas de seleo permitem a determinao do timo global das regies de ligao, Ab3*. Em resumo, pequenas mutaes so teis para a explorao local do espao de regies de ligao, enquanto a edio de receptores permite que a resposta imunolgica saia de timos locais insatisfatrios. Assim, os dois processos executam funes complementares no processo de maturao de afinidade. Somando-se aos mecanismos de mutao somtica e edio de receptores, uma frao de novas clulas constantemente gerada pela medula ssea e adicionada ao repertrio de linfcitos, mantendo a diversidade populacional.

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

Ab3* Ab1* Afinidade Ab2* Ab1 Ab2 Ab3

Regies de ligao ao antgeno

Figura 2.14. Representao esquemtica de um espao de formas para as regies de ligao ao antgeno. Mutaes somticas seguidas de seleo permitem a determinao de timos locais, enquanto a edio de receptores pode introduzir modificaes mais expressivas, permitindo que novos candidatos sejam posicionados em regies do espao que levaro obteno do timo global.

2.8.2.1.

Regulao do Mecanismo de Hipermutao

O mecanismo de hipermutao opera seletivamente durante a proliferao celular a uma taxa prxima a 1 10-3 por par-base das regies variveis. Uma vez que o comprimento combinado destas regies variveis de aproximadamente 700 pares-base, em mdia uma mutao a cada diviso celular introduzida (Allen et al., 1987; Berek & Ziegner, 1993; Perelson & Weigel, 1998). Um rpido acmulo de mutaes necessrio para uma rpida maturao da resposta imunolgica, mas a maioria das mudanas introduzidas resultaro em anticorpos autoreativos ou de baixa afinidade. Se uma clula que acabou de sofrer uma mutao capaz de aumentar sua afinidade antignica continuar sendo mutada mesma taxa durante as respostas imunolgicas seguintes, ento o acmulo de variaes indesejadas pode causar a perda das variaes que levaram ao aumento da afinidade. Dessa forma, um curto pico de hipermutao somtica, seguido de um intervalo para seleo e expanso clonal devem formar a base do processo de maturao. O mecanismo de seleo deve fornecer uma regulao do processo de hipermutao, que dependente da afinidade do receptor. Clulas com receptores de baixa afinidade permanecem sendo mutadas, enquanto clulas com altas afinidades devem ter suas taxas de mutao controladas, e at inativadas (Kepler & Perelson, 1993a,b).

2.9.

Distino Prprio/No-Prprio

Para cada um dos dois tipos principais de linfcitos, B e T, possvel considerar trs classes de repertrios celulares (Jerne, 1974; Coutinho et al., 1984; de Boer & Perelson, 1991; Perelson & Weisbuch, 1997; Storb, 1998):

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Repertrio potencial: determinado pela quantidade, estrutura e mecanismos de expresso dos genes que codificam os BCRs ou TCRs, mais os possveis variantes somticos derivados deles; Repertrio disponvel (ou expresso): definido como o conjunto de molculas que est disponvel para ser utilizado como receptores celulares, ou seja, todos aqueles receptores que podem, mas no necessariamente esto sendo utilizados; Repertrio ativo: em uso pelas clulas ativas e que participam diretamente na resposta imunolgica.

O sistema imunolgico em sua capacidade de reconhecer antgenos completo. As molculas de anticorpo e os receptores de linfcitos T podem, em essncia, reconhecer qualquer molcula prpria ou no-prpria, at mesmo aquelas artificialmente sintetizadas. As molculas de anticorpo possuem idiotopos imunognicos, ou seja, elas possuem eptopos que podem ser reconhecidos por outros anticorpos. O axioma da completude imunolgica prope que estes anticorpos sero reconhecidos por outros anticorpos. Este argumento leva ao conceito da rede imunolgica, que ser discutido na prxima seo. Os principais fatores que resultam na completude imunolgica dos repertrios linfocitrios so: a diversidade obtida por mutao, edio e rearranjo gentico, a reatividade cruzada e a multi-especificidade (Inman, 1978; Perelson & Oster, 1979; Tonegawa, 1983; Coutinho et al., 1984; Jerne, 1985; Varela et al., 1988). A reatividade cruzada e a multi-especificidade so algumas das principais razes pelas quais um repertrio linfocitrio menor que um possvel conjunto de antgenos pode ser capaz de reconhecer todos os elementos deste conjunto antignico (Inman, 1978; Hodgkin, 1998; Mason, 1998). A idia por trs da multiespecificidade a de que um anticorpo especfico capaz de reconhecer antgenos com formas relativamente distintas, desde que uma quantidade mnima de interaes complementares ocorram entre um eptopo deste antgeno e a regio-V da molcula de anticorpo (Inman, 1978; Perelson & Weisbuch, 1997). A completude do repertrio linfocitrio representa um paradoxo, pois qualquer molcula pode ser reconhecida, inclusive as prprias, que tambm passam a ser vistas como antgenos, ou antgenos prprios. Para que o sistema imunolgico funcione apropriadamente, preciso que ele seja capaz de distinguir as clulas e molculas do prprio organismo, chamadas de prprio, e molculas estranhas, chamadas no-prprio, que so, em princpio, indistinguveis (Perelson & Weisbuch, 1997). Se o sistema imunolgico no for capaz de fazer esta distino, ento uma resposta imunolgica ser desencadeada contra os antgenos prprios, causando doenas auto-imunes. A ausncia de resposta contra um antgeno prprio chamada de tolerncia ao prprio (Tizard, 1995; Kruisbeek, 1995; Schwartz & Banchereau, 1996). Alm da caracterstica aleatria na produo dos receptores linfocitrios, um encontro entre um receptor e um antgeno no resulta inevitavelmente na ativao do linfcito, mas pode casualmente provocar a morte ou inativao (anergia) celular. Assim, existe um mecanismo de seleo negativa que evita que os linfcitos auto-especficos (auto-reativos) se tornem auto-agressivos. Por outro lado, uma pequena porcentagem de clulas sofre uma seleo positiva tornando-se clulas capazes de montar uma resposta imunolgica, chamadas de clulas imunocompetentes, para constituir o repertrio linfocitrio disponvel.

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

Antgenos no-prprios Antgeno prprio Seleo Clonal Seleo Negativa

Ignorncia Clonal

Clula inalterada

Deleo clonal

Anergia

OU Edio de receptores Clulas de memria Plasmcitos

Figura 2.15. Esquema das principais interaes entre antgenos e linfcitos.

Alguns dos principais resultados do encontro de um antgeno com um receptor linfocitrio esto ilustrados na Figura 2.15, e podem ser listados juntamente com suas principais causas (Parijs & Abbas, 1998; Manni, 1999): Expanso Clonal (Seo 2.8): reconhecimento antignico na presena de sinais coestimulatrios; Seleo Positiva (Seo 2.9.1): reconhecimento de um complexo MHCprprio/peptdeo; Seleo Negativa (Seo 2.9.2): reconhecimento de antgenos prprios nos rgos linfides centrais, ou reconhecimento de antgenos prprios na periferia na ausncia de sinais co-estimulatrios; e Ignorncia Clonal: todas as circunstncias nas quais uma clula imunocompetente falha na resposta a um antgeno como, por exemplo, se a concentrao antignica for muito baixa.

2.9.1.

Seleo Positiva

A seleo positiva dos linfcitos B e T tem como objetivo principal selecionar aqueles linfcitos capazes de operar como clulas imunocompetentes, ou seja, atuar em uma resposta imune adaptativa. Para isso, preciso que os linfcitos sejam capazes de reconhecer os seus ligantes (von Boehmer, 1994). 2.9.1.1. Seleo Positiva de Clulas T

Todas as clulas T devem reconhecer antgenos associados a molculas de MHC-prprio que formam os complexos MHC/peptdeo, ou MHC-prprio/peptdeo. Sendo assim, primeiramente necessrio selecionar aquelas clulas T cujos receptores so capazes de
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reconhecer e se ligar s molculas de MHC-prprio. Este processo denominado seleo positiva. Figurativamente, diz-se que a seleo positiva dos linfcitos T permite que o sistema imunolgico seja capaz de reconhecer o prprio. A seleo positiva visa assegurar que as clulas T maduras sejam capazes de reconhecer, preferencialmente, antgenos estranhos (no-prprios) no contexto de molculas do MHCprprio (Anderson et al., 1999; von Boehmer, 1994). Dentre as principais conseqncias da seleo positiva das clulas T, que ocorre no timo, destacam-se: as clulas T so selecionadas para posterior desenvolvimento em clulas imunocompetentes; trmino do processo de rearranjo gentico do TCR; e alterao do perodo de vida da clula. 2.9.1.2. Seleo Positiva das Clulas B

A seleo positiva das clulas B maduras envolve o resgate da morte celular. Como resultado do reconhecimento e ligao ao antgeno, e auxlio da clula TH, os linfcitos B em proliferao sofrem hipermutaes. Aquelas clulas filhas mutantes que se ligam mais eficientemente ao antgeno so selecionadas para expanso e, portanto, resgatadas da morte celular. Comparando-se com as clulas T, a seleo positiva das clulas B maduras se assemelha a seleo positiva das clulas T imaturas. No caso das clulas T imaturas, elas so resgatadas da morte celular devido ao reconhecimento de uma molcula de MHC-prprio, enquanto as clulas B maduras so resgatadas da morte celular devido ao reconhecimento de um antgeno no-prprio.

2.9.2.

Seleo Negativa

O conceito de seleo negativa, seguindo o reconhecimento de um ligante por um receptor celular, permite o controle dos linfcitos que possuem receptores anti-prprios. A seleo negativa descreve o processo no qual a interao do linfcito com o antgeno resulta na morte (deleo clonal) ou anergia (anergia clonal) deste linfcito, como ilustrado na Figura 2.15. A clula B ou T simplesmente eliminada do repertrio ou inativada (Nossal, 1994). A seleo negativa pode ser central ou perifrica. Os rgos linfides primrios (centrais) so projetados para no permitir a entrada de antgenos externos e preservar os antgenos prprios, enquanto os rgos linfides secundrios (perifricos) so projetados para filtrar e concentrar os elementos no-prprios, promovendo reaes co-estimulatrias a uma resposta imunolgica (Zinkernagel & Kelly, 1997). 2.9.2.1. Seleo Negativa das Clulas T

O processo de seleo tmica (dentro do timo) baseado nas seguintes consideraes. O timo composto por uma grande quantidade de clulas apresentadoras de antgenos, incluindo macrfagos, clulas dendrticas e clulas epiteliais especializadas. O timo protegido por uma barreira sangnea que faz com que estas APCs primariamente apresentem complexos MHC-prprio/peptdeo ao repertrio de clulas T que est sendo

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

formado. A seleo tmica resulta da interao das clulas T imaturas (timcitos) com os ligantes MHC-prprio em clulas APCs dentro do timo, resultando na morte (deleo clonal) daquelas clulas T que forem auto-reativas. O tempo e a extenso deste processo de deleo depende da afinidade da ligao do TCR ao antgeno prprio. Clulas T que se ligam aos antgenos prprios com alta afinidade so deletadas precocemente e de forma mais efetiva do que aquelas que se ligam com baixas afinidades. A seleo tmica no perfeita, e algumas clulas T auto-reativas podem escapar para a periferia como clulas imunocompetentes, causando o risco de uma doena auto-imune. O sinal para a ativao de uma clula T requer mais do que a simples ligao do complexo MHC/peptdeo ao TCR: vrios processos adjuntos, como a ligao de molculas de adeso, so necessrios para a ativao celular. Na ausncia de atividade co-estimulatria, a unio do TCR ao complexo MHC/peptdeo pode levar inativao (anergia) deste linfcito. O sistema imune inato responsvel pela liberao de uma grande quantidade de sinais coestimulatrios para a resposta imune adaptativa. 2.9.2.2. Seleo Negativa das Clulas B

A tolerncia promovida pelas clulas T seria insuficiente para a proteo contra doenas auto-imunes. Clulas B imaturas dentro da medula ssea tambm so sensveis a uma induo de tolerncia por seleo negativa, caso elas encontrem um antgeno na ausncia dos sinais co-estimulatrios liberados principalmente pelas clulas T. Da mesma forma que as clulas T, linfcitos B auto-reativos tambm podem escapar da seleo negativa centralizada. Neste caso, a ativao ou tolerncia da clula B ser resultado da quantidade, avidez, tempo e de quais sinais co-estimulatrios estaro presentes. Uma ligao brusca e repentina (caracterstica de antgenos estranhos) do receptor ao antgeno geralmente induz uma resposta clonal, enquanto uma estimulao constante e relativamente fraca leva inibio e posterior apoptose (Schwartz & Banchereau, 1996). Este mecanismo de tolerncia perifrica serve tanto para as clulas B quanto para as clulas T e est ilustrado na Figura 2.16.
Produo de anticorpos Muito baixa Moderada Tolerncia

Muito alta

Dose antignica

Figura 2.16. Altas e baixas doses antignicas induzem tolerncia, enquanto uma dose moderada resulta em uma produo de anticorpos (adaptado de Tizard, 1995).
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2.10. Teoria da Rede Imunolgica

Nesta seo, objetivamos apresentar os conceitos bsicos da teoria da rede imunolgica, originalmente proposta por Niels Kaj Jerne (1974a). Alguns modelos especficos de rede imunolgica sero apresentados e discutidos na Seo 3.4.3.5 e um novo modelo ser proposto na Seo 5.5. Referncias sobre conceitos e modelos de rede imunolgica podem ser encontrados em Hoffmann (1975); Richter (1975, 1978); Bonna & Kohler (1983); Coutinho et al. (1984); Jerne (1984); Langman & Cohn (1986); Farmer et al. (1986); Segel & Perelson (1988); Perelson (1988, 1989); Coutinho (1989, 1995); Varela & Stewart (1990a,b); Stewart & Varela (1991); de Boer & Perelson (1991); Calenbuhr et al. (1995); Detours et al. (1996); Bernardes & dos Santos (1997); Perelson & Weisbuch (1997). Ao invs de explicar os processos de sinalizao celular e a interao de anticorpos, clulas e seus mecanismos efetores, a teoria de rede inicialmente proposta (Jerne, 1974a) apresentava um novo ponto de vista sobre a atividade linfocitria, a produo de anticorpos, a seleo do repertrio pr-imune, a distino prprio/no-prprio e a tolerncia imunolgica, a memria e a evoluo do sistema imunolgico (Varela & Coutinho, 1991). Foi sugerido que o sistema imunolgico composto por uma rede regulada de clulas e molculas que se reconhecem mesmo na ausncia de antgenos. Este ponto de vista estava em conflito com a teoria da seleo clonal (ver Seo 2.8) j existente naquela poca, que assumia que o sistema imunolgico era composto por um conjunto discreto de clones celulares originalmente em repouso, sendo que a atividade apenas existiria quando um estmulo externo se apresentasse ao organismo. As Sees 2.7 e 2.8.2 discutiram a aleatoriedade nos processo de gerao e maturao das molculas de anticorpo. Esta aleatoriedade leva idia de que novas molculas (anticorpos) podem ser vistos como elementos invasores ao organismo, sendo tratados como antgenos. Na nova proposta da rede imunolgica, o termo regio de ligao do anticorpo (regio-V) foi mudado para paratopo, e determinante antignico substitudo por eptopo. Os eptopos e os paratopos so considerados ento como as duas caractersticas essenciais para o reconhecimento imunolgico. Foi demonstrado experimentalmente que as molculas de anticorpo tambm apresentavam eptopos, que poderiam exercer alguma funcionalidade. Um idiotipo foi definido como o conjunto de eptopos apresentados pela regio-V de um conjunto de molculas de anticorpo, e um idiotopo era cada eptopo idiotpico. Os padres de idiotopos eram determinados pelas mesmas regies variveis das cadeias polipeptdicas dos anticorpos que determinavam os paratopos (ver Figura 2.8). Foi proposta uma definio formal para o sistema imunolgico: Definio 2.3: O sistema imunolgico constitudo por uma rede enorme e complexa de paratopos que reconhecem conjuntos de idiotopos, e de idiotopos que so reconhecidos por conjuntos de paratopos, assim, cada elemento pode reconhecer e ser reconhecido (Jerne, 1974a).

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

Paratopo

Supress o Resposta negativa Ag 1 Idiotopo 2 3

Anticorpo Ativa o Resposta positiva

(a)

(b)

Figura 2.17. Teoria da rede imunolgica. (a) Molcula de anticorpo destacando o paratopo e idiotopo. (b) Respostas positiva e negativa resultantes da interao de um paratopo com um idiotopo ou um eptopo.

Os linfcitos poderiam responder positivamente ou negativamente ao sinal de reconhecimento. Uma resposta positiva levaria proliferao e ativao celular, resultando na secreo de anticorpos, enquanto uma resposta negativa levaria tolerncia e supresso. A Figura 2.17 ilustra a molcula de anticorpo com destaque para o idiotopo, o paratopo, e as respostas positiva e negativa. O comportamento da rede imunolgica, ou rede idiotpica, ilustrado na Figura 2.18, pode ser explicado como a seguir (Jerne, 1974a). Quando um dado antgeno invade o nosso organismo, seu eptopo reconhecido (com vrios graus de especificidade) por um conjunto de diferentes paratopos, chamado p1. Estes paratopos do conjunto p1 esto associados a um conjunto de idiotopos i1. O smbolo p1i1 denota o conjunto total de molculas de anticorpo e linfcitos B capazes de reconhecer este antgeno. Dentro da teoria da rede imunolgica, cada paratopo do conjunto p1 reconhece um conjunto de idiotopos, e todo o conjunto p1 reconhece um conjunto ainda maior de idiotopos. Este conjunto i2 de idiotopos chamado de imagem interna do eptopo (ou antgeno), pois ele reconhecido pelo mesmo conjunto p1 que reconhece o antgeno. O conjunto i2 est associado a um conjunto p2 de paratopos expresso por molculas e receptores celulares do conjunto p2i2. Alm disso, cada idiotopo do conjunto p1i1 reconhecido por um conjunto de paratopos, de forma que todo o conjunto i1 reconhecido por um conjunto p3 ainda maior de paratopos que esto associados aos idiotopos i3 de anticorpos e linfcitos pertencentes a um conjunto p3 i3 chamado de conjunto anti-idiotpico. Seguindo este esquema, possvel chegar a conjuntos cada vez maiores de receptores que reconhecem e so reconhecidos por conjuntos previamente definidos na rede. Alm do conjunto p1i1, existe um conjunto paralelo pxi1 de molculas e receptores que apresentam idiotopos do conjunto i1 associados a paratopos que no reconhecem o antgeno dado. As setas indicam um efeito estimulatrio quando os idiotopos so reconhecidos por paratopos em receptores celulares e um efeito supressivo quando os paratopos reconhecem os idiotopos em receptores celulares.

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Dinmica do sistema imunolgico p2 Estmulo externo i2 Ag (eptopo) p1 i1 Reconhecimento p3 i3 i1 Conjunto anti-idiotpico px Conjunto no-especfico Imagem interna

Figura 2.18. Viso detalhada da rede idiotpica (adaptado de Jerne, 1974a).

A teoria de rede particularmente interessante para o desenvolvimento de ferramentas computacionais, pois ela fornece uma medida aproximada de propriedades emergentes como aprendizagem e memria, tolerncia ao prprio, tamanho e diversidade de populaes celulares. Estas propriedades no podem ser compreendidas partindo-se de uma anlise de componentes isolados e sero exploradas no Captulo 5 para o desenvolvimento de um modelo de rede imunolgica artificial a ser aplicada a problemas de compresso de dados e clusterizao. possvel destacar trs caractersticas das redes imunolgicas (Varela et al., 1988; Bersini & Varela, 1990; Varela & Coutinho, 1991): Estrutura: responsvel pela descrio dos padres de interconexo entre seus componentes celulares e moleculares, desconsiderando as conseqncias destas interaes. Os eventos importantes so os prprios elementos do sistema e no suas interaes; Dinmica: a dinmica da rede imunolgica trata as interaes entre os diversos componentes do sistema: as variaes das regies-V como resultado das interaes mtuas e aes recprocas entre as clulas e molculas da rede; Metadinmica: uma propriedade nica do sistema imunolgico, que vai alm da dinmica de rede, a contnua produo de novos anticorpos. Como mencionado anteriormente, qualquer novo elemento possvel, mesmo que sintetizado artificialmente, pode interagir com o sistema imunolgico. Existe uma constante renovao do repertrio linfocitrio e, conseqentemente, da estrutura da rede via o recrutamento destes novos linfcitos e a morte de elementos no estimulados ou auto-reativos. A metadinmica representa o potencial que o sistema imunolgico possui de introduzir diversidade, garantindo sua capacidade de combater novos antgenos.

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Cap. 2: O Sistema Imunolgico

Em resumo, a caracterstica central da teoria da rede imunolgica a definio da identidade molecular do indivduo, pois a tolerncia uma propriedade global que no pode ser reduzida existncia ou atividade de um clone especfico. Ela surge de uma estrutura em forma de rede que se expressa no incio da evoluo do sistema imunolgico e seguida pela aprendizagem ontognica da composio molecular do ambiente no qual o sistema imunolgico se desenvolve. A organizao em rede impe um padro de dinmica para os anticorpos que distinto das respostas imunolgicas a antgenos externos. Estes padres de dinmica so perfeitamente compatveis com a manuteno da memria que no est localizada em clulas de memria, mas distribuda pela rede.

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