Laporan Praktikum Farmakokinetika

Analisa Obat Dalam Darah

Disusun oleh:

Kelompok 2 1. 2. 3. 4. Alip Mutakim Arikadia Noviani Eka Irmawati Achmad Wahyu Astuti 0606029164 0606070535 0606070661 0606071033

DEPARTEMEN FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS INDONESIA DEPOK 2009 I. Tujuan a. Mahasiswa mengetahui data yang diperlukan untuk perhitungan pemberian dosis. b. Mahasiswa mampu menganalisis data yang diperoleh dengan menggunakan persamaan farmakokinetik untuk pemberian IV dosis berganda.

II.

Teori Dasar Absorbsi sistemik suatu obat yang diberikan secara peroral dari saluran cerna atau tempat ekstravaskular yang lain bergantung pada bentuk sediaan, anatomi dan fisiologi tempat absorbsi. Factor-faktor seperti luas permukaan dinding usus, kecepatan pengosongan lambung, pergerakan saluran cerna dan alira darah ke tempat absorbsi, semuanya mempengaruhi laju dan jumlah absorbsi obat. Laju perubahan jumlah obat dalam tubuh, dDB/dt, bergantung pada laju absorbsi dan eliminasi obat. Laju perubahan obat dalam tubuh pada setiap waktu sama dengan laju absorbsi obat dikurangi laju eliminasi obat. dDB/dt = dDGI/dt dDe/dt Pada waktu konsentrasi obat puncak dalam plasma, yang dapat disamakan dengan laju eliminasi obat dan tidak ada perubahan jumlah obat dalam tubuh. Segera setelah waktu absorbsi obat mencapai puncak, beberapa obat masih berada pada tempat absorbsi (saluran cerna). Laju eliminasi obat pada saat ini lebih cepat daripada laju absorbsi obat, seperti diperlihatkan oleh fase pasca absorbsi. dDGI/dt < dDe/dt Ketika obat pasca tempat absorbsi makin berkurang, laju absorbsi obat mendekati nol, atau dDGI/dt = 0, fase eliminasi dari kurva kemudian hanya menyatakan eliminasi obat dari tubuh, biasanya suatu proses orde satu. Oleh karena laju perubahan jumlah obat dalam tubuh digambarkan sebagai proses orde satu selama proses eliminasi. dDB/dt = -k DB obat yang diberikan secara peroral akan dieliminasi oleh ginjal sebagai klirens obat. Klirens obat adalah suatu ukuran eliminasi obat dari tubuh tanpa mempermasalahkan mekanisme prosesnya. Umumnya jaringan tubuh atau organ dianggap sebagai suatu kompartemen cairan dengan volume yang terbatas (volume distribusi) dimana obat terlarut di dalamnya. Dari konsep tersebut, klirens dapat diartikan sebagai volume cairan yang mengandung obat yang dibersihkan dari obat persatuan waktu. Klirens juga dapat diartikan sebagai laju eliminasi obat dibagi konsentrasi obat plasma pada waktu tersebut. Klirens = Laju ekskresi

Konsentrasi plasma

Cl = dDu/dt

Cp

Cl = K . Vd

Faktor-faktor penentu dalam proses farmakokinetik adalah: 1. Sistem kompartemen dalam cairan tubuh, seperti: cairan intrasel, eksternal (plasma darah, cairan interstisial, cairan cerebrospinal) dan berbagai fasa lipofil dalam tubuh. 2. Protein plasma, protein jaringan dan berbagai senyawa biologis yang mungkin dapat mengikat obat. 3. Distribusi obat dalam berbagai sistem kompartemen biologis, terutama hubungan waktu dan kadar obat dalam berbagai sistem tersebut, yang sangat menentukan kinetika obat. 4. Dosis sediaan obat, transport antar kompartemen seperti proses absorbs, bioaktivasi, biodegradasi dan ekskresi yang menentukan lama obat dalam tubuh (Siswandono, 1998). Tetapan laju eliminasi k, dapat dihitung dari data ekskresi urin. Dalam perhitungan ini, laju ekskresi obat dianggap sebagai orde satu. ke adalah tetapan laju ekskresi ginjal dan Du adalah jumlah obat yang diekskresi dalam urin. dDu/dt = ke . DB persamaan disubstitusi dengan DB0 e-kt , menjadi: dDu/dt = ke . DB0 e-kt ke dan k dapat ditentukan dengan k ke = knr Eliminasi obat biasanya dipengaruhi oleh ekskresi ginjal atau metabolisme (biotransformasi), maka: knr = km Dengan mensubstitusikan km untuk knr dalam persamaan, diperoleh: k = km + ke

Karena rute utama eliminasi untuk sebagian besar obat melalui ekskresi ginjal dan metabolisme (biotransformasi), maka knr kurang lebih sama dengan km. Laju ekskresi obat lewat urin (dDu/dt) tidak dapat ditentukan melalui percobaan segera setelah pemberian obat. Dalam praktek, urin dikumpulkan dalam waktu tertentu dan konsentrasi obat dianalisis. Kemudian laju ekskresi urin rata-rata dihitung untuk setiap waktu pengumpulan. Harga dDu/dt rata-rata digambar pada suatu skala semilogaritmik terhadap waktu yang merupakan harga tengah waktu pengumpulan.

III.

Alat dan Bahan Alat 1. Labu takar 100 ml 2. Pipet volume 1 ml, 2 ml 3. Tabung reaksi 4. Stop watch 5. Vortex 6. Sentrifuse 7. Spektrofotometer

Bahan 1. Urine 2. Asam trikloroasetat (TCA) 10 % 3. Na nitrit 0,1 % (dibuat baru) 4. Ammonium sulfamat 0,5% 5. Sulfadiazine baku 6. N (1-naftil) etilendiamin 0,1%

IV.

Prosedur Pelaksanaan a. Penyiapan sampel

Sehari sebelum melakukan praktikum salah seorang praktikan diharuskan menjadi volunteer. 1. Satu jam sebelum minum obat volunteer uji terlebih dahulu diberi air 400 ml, kemudian 200 ml pada saat minum obat, dan 4 kali setiap 1 jam sebanyak 200 ml untuk setiap jam berikutnya. 2. Sebelum minum obat, kandung kemih dikosongkan secara sempurna. Ambil urine secukupnya untuk blanko. 3. Setiap waktu interval pengambilan cuplikan, volume urine yang diekskresikan harus dicatat. 4. Jika urine tidak segera dianalisis, simpan dalam lemari es sampai analisis dikerjakan. Untuk keperluaan ini urine dapat diberi toluene 0,5 1 ml. 5. Jaga jangan sampai ada cuplikan urine yang hilang. 6. Pengumpilan urin dikerjakan sampai seluruh obat tidak berubah praktis setelah diekskresikan seluruhnya didalam urine ( 7-10 x t1/2 ). 7. Usahakan pengosongan kandung kemih setiap interval waktu pengambilan dikerjakan dengan sempurna.

b.

Prosedur Pengerjaan 1. Tetapkan volunteer uji. 2 hari sebelum praktikum volunteer uji sudah

mulai minum obat. Satu minggu sebelum praktikum jangan minum obat yang sejenis dengan sulfadiazin. 2. Sebelum minum obat, tetapkan dahulu interval waktu pengambilan

cuplikan (t1/2 sulfadiazin kurang lebih 10-17jam) 3. Minum obat sulfadiazin tablet (500mg). Perhatikan sistem water loading.

Jangan lupa ambil urin blanko sebelum saudara minum obat. 4. Kumpulkan cuplikan urin pada sederetan interval waktu pengambilan

cuplikan yang saudara peroleh. Ambil kurang lebih 10ml, masukkan flakon dan simpan dalam lemari es.

5.

Tetapkan kadar sulfadiazin tak berubah dalam cuplikan urin.

c.

Pembuatan Larutan stok Sulfadiazin Timbang dengan seksama Sulfadiazin baku, larutkan dalam NaOH 1N, encerkan dengan aquadest ad 100,0ml. Encerkan larutan tersebut sehingga diperoleh kadar Sulfadiazin: 25, 50, 100, 200 dan 400ppm. d. Pembuatan kurva baku internal : Kedalam urin blanko (250l) ditambahkan 250l larutan stok Sulfadiazin sehingga diperoleh kadar Sulfadiazin : 0, 25, 50, 200 dan 400ppm, dan aduk dengan vortex hingga homogen. e. Penanganan sampel urin 1. Ke dalam 1,0ml urin ditambahkan TCA 10% (1,0ml), segera aduk hingga

homogen dengan menggunakan vortex. 2. Larutan tersebut disentrifugasi pada 4000rpm selama 10menit. Pindahkan

supernatan yang jernih ke dalam tabung reaksi lain. 3. Ke dalam tabung tambahkan larutan NaNO2 0,1% (1,0ml), dan diamkan

selama 3menit. 4. Tambahkan larutan Ammonium sulfanat 0,5% (2,0ml), aduk hingga

homogen dan diamkan selama 2menit 5. Tambahkan larutan N(1-naftil)etilendiamin 0,1% (2,0ml). Campur baik-baik

diamkan 5 menit di tempat gelap. 6. 7. Ukur serapannya pada panjang gelombang 545nm. Lakukan prosedur yang sama terhadap blanko urin.

V.

Hasil Data Dan Pengamatan Kurva Kalibrasi Stok Larutan Induk Sulfadiazine = 1000 ppm

1000 ppm

Pipet 2,0 mL tambahkan aquades ad 25,0 mL

100 ppm

Pipet 1,0mL ad 10,0mL Pipet 2,0 mL ad 10,0 mL Pipet 3,0mL ad 10,0 mL

Pipet 4,0mL ad 10,0 mL

Pipet 5,0mL ad 10,0 mL

10,0 ppm ppm

20,0 ppm

30,0 ppm

40,0

ppm

50,0

Gambar 1. Skema pengenceran larutan standar sulfadiazin

Konsentrasi (ppm) 10 20 30 11. 12.

A (serapan) 0,122 0,273 0,396

8. Persamaan Regresi Linier: 9. a= - 0,01033 10. 0,0137 b= r = 0,9982640721 y= -0,01033+0,0137

Data Sampel Urin Do = 500 mg F=1 Du = obat yang keluar dari urin Du = C x V T1/2 sulfadiazin 10 jam Waktu pemberian obat 17:00 WIB
Waktu Pengambi

Vol (ml)

Serapan (A)

Cu (g/ml)

Du (g)

t (mnt)

dt (mnt)

dDu/dt (g/mnt)

t mid (mnt)

lan Sampel

17.00 17.55 18.55

200 450 420

0,003 0,093 0,166

0,973 7,542 12,871

194,6 3393,9 5405,8 2

0 55 115 55 60 61,707 90,097 27,5 85

19.50

365

0,274

20,754

7575,2 1

170

55

137,73 1

142,5

20.55

340

0,365

27,396

9314,6 4

235

65

143,30 2

202,5

22.25

255

0,567

42,141

10745, 96

325

90

119,40 0

280

04.20

590

0,735

54,404

32098, 36

680

355

90,418

502,5

05.20

245

0,610

45,280

11093, 6

740

60

184,89 3

710

06.20

305

0,288

21,776

6641,6 8

800

60

110,69 5

770

07.25

220

0,287

21,703

4774,6 6

865

65

73,456

832,5

Du ~

91238, 43

Perhitungan Dari gambar diputuskan untuk menggunakan data pada t-4 hingga t-6 k eliminasi =

= ln 143,302 ln 90,418 502,5 - 202,5 = 1,535x10-3/ menit

t1/2
= = 0,693
1,535x10-3/ menit

= 451,455 menit

k ekskresi

= 172552,59 g x 1,535 . 10-3/ menit 500000 g = 0,530 x 10-3 / menit

k metabolisme = k eliminasi k ekskresi = 1,535 x 10-3 0,530 x 10-3 = 1,005 x 10-3 /menit

% obat yang di metabolisme = = 1,005 x 10-3 /menit x 100% 1,535 x 10-3 = 65,47%

% obat yang diekskresi = = 0,530 x 10-3 /menit x 100% 1,535 x 10-3 = 34,53%

VI.

Pembahasan

Ginjal merupakan organ yang penting dalam pengaturan kadar cairan tubuh, keseimbangan elektrolit dan pembuangan metabolit-metabolit sisa dan obat dari tubuh. Kerusakan atau degenerasi fungsi ginjal akan mempunyai pengaruh pada farmakokinetika obat. Beberapa penyebab yang umum dari kegagalan ginjal yaitu penyakit, cidera dan intoksikasi obat. Percobaan kali ini untuk menganalisa kadar obat dalam urine. Obat yang digunakan untuk analisa kadarnya adalah sulfadiazine. Penetapan kadar dilakukan dengan cara mengambil sample urine dalam waktu

yang berbeda, kemudian dilakukan prosedur penetapan kadar berdasarkan cara kerja yang telah ditetapkan. Prosedur penetapan kadar sulfadiazine ini mengikuti proses laju orde kesatu. Konsentrasi awal dari sample diketahui melalui pengukuran pada alat spektrofotometer dengan panjang gelombang maksimum 545 nm, kemudian diperoleh konsentrasi hasil analisis dengan cara memplot pada persamaan garis yang didapat dari hasil pengukuran kurva kalibrasi baku sulfadiazine. Setelah konsentrasi diketahui melalui persamaan garis linier. Konsentrasi awal sample cukup besar kemudian meningkat seiring dengan bertambahnya waktu kemudian secara drastis. Hal ini disebabkan bahwa obat mengalami proses eliminasi, sehingga prosesnya dapat digambarkan dalam kurva hubungan antara waktu dengan konsentrasi sample. Dalam percobaan kali ini, praktikan juga mendapatkan data persentase metabolisme obat lebih besar daripada data persentase ekskresi dari obat. Hal ini dapat menjelaskan bahwa obat yang dimetabolisme di dalam hati lebih besar dibandingkan dengan obat yang diekskresi melalui ginjal. Dari praktikum kali, diperoleh hasil data konstanta eliminasi (ke), k ekskresi, k metabolisme, waktu paruh (t1/2), % obat yang diekskresi, % obat yang dimetabolisme yaitu :
1. t1/2 2. k eks 3. k met

= 350 menit = 6,83 x 10-4 menit-1 = 1,297 x 10-3 menit-1 = 65,51 % = 34,49 %

4. % Obat yang dimetabolisme 5. % obat yang diekskresi

VII.

Kesimpulan 6. t1/2 7. k 8. k
eks

= = =

menit menit-1 menit-1 = = % %

met

9. % Obat yang dimetabolisme 10.% obat yang diekskresi

VIII.

Daftar Pustaka Shargel, Leon, Andrew B.C.Yu. Biofarmasetika dan Farmakokinetika Terapan, edisi kedua. Surabaya: Airlangga University Press. 1988. Hal 45-62.