Universidade de So Paulo Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo Nutrio e Metabolismo Alceu Afonso Jordo Jnior

Avaliao do efeito de uma dieta tendo a gelatina como nica fonte protica em ratos Wistar

Alunas: Ana Lcia Silva Jamile Gonalves Costa Mariana de Oliveira Lino Sheila Toledo Pinto Sofia Miranda de Figueiredo Ribeiro

Avaliao do efeito de uma dieta com gelatina como nica fonte protica em ratos Wistar

Ana Lcia Silva* Jamile Gonalves Costa* Mariana de Oliveira Lino* Sheila Toledo Pinto* Sofia Miranda de Figueiredo Ribeiro* * Alunas do terceiro ano do curso de Nutrio e Metabolismo da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - Universidade de So Paulo Guilherme Vannucchi Portari** **Farmacutico bioqumico Tcnico da disciplina de Bromatologia do curso de Nutrio e Metabolismo da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - Universidade de So Paulo Alceu Afonso Jordo Jnior *** *** Departamento de Clnica Mdica Faculdade de Medicina de Ribeiro Universidade de So Paulo Docente do curso de Nutrio e Metabolismo da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - Universidade de So Paulo

Introduo: A protena essencial para manter a estrutura animal, as atividades dirias de nosso organismo, combater as infeces e outros processos fisiolgicos importantes. Esta tambm pode ser usada como uma fonte de energia, em 4Kcal/g, removendo-se o nitrognio e oxidando o esqueleto de carbono. Esta consiste de cadeias lineares de

aminocido que so precisamente ligadas de acordo com as regies de codificao de protenas no DNA das clulas1. A configurao final das protenas depende das interaes entre os grupos R dos aminocidos. Os aminocidos so carboidratos com um grupo amino (NH2), um grupo carboxila (COOH) e um radical (R). Existem na natureza vinte tipos de aminocidos, sendo nove essenciais e o restante no essenciais. Os aminocidos essenciais possuem esqueletos de carbonos que o organismo no pode fabricar, podendo obter apenas a partir da dieta, so eles treonina, triptofano, histidina, lisina, leucina, isoleucina, metionina, valina e fenilalanina. J os no essenciais so aqueles que so produzidos a partir de esqueletos de carbono que podem ser sintetizados pelo organismo, por exemplo, a partir de intermedirios nas vias metablicas, como o piruvato formado durante a gliclise, que adicionado de um grupo amino se torna alanina1. A qualidade nutricional de uma protena depende de seu perfil de aminocidos, e seu valor biolgico determinado pelo aminocido essencial presente em menor concentrao comparada s necessidades humanas. corpo1. Atualmente recomendado para um adulto saudvel a ingesto de 0,8 g de protena por Kg de peso, que deve corresponder de 10 a 15% da ingesto total de energia. As necessidades de protenas so aumentadas durante perodos de estresse, doena e atividade fsica. Os alimentos ricos em protena so obtidos primariamente da carne ou de produtos animais tais como ovos, leite e derivados. A maioria dos alimentos vegetais so fontes relativamente pobres em protena, com exceo das leguminosas e feijes1. A gelatina extrada a partir do colgeno, uma das principais protenas estruturais dos tecidos conectivos e ossos e responsvel pela cicatrizao e regenerao de tecidos. As propriedades fsicas da gelatina variam em funo da composio molecular, dependendo dos tipos de matria prima usada e do mtodo de fabricao. A gelatina misturada com gua forma um gel coloidal, funde com o calor e solidifica quando este cessa2. A gelatina muito rica em protenas, porm estas so de baixo valor biolgico, pois ela rica em aminocidos no essenciais, como glicina e prolina, mas deficiente em aminocidos essenciais, como triptofano; a metionina e a tirosina esto presente apenas em pequenas quantidades. A tabela 1 mostra a porcentagem de aminocidos Este aminocido essencial o aminocido mais limitante e sua ausncia restringe o nvel de sntese de protena no

presentes na gelatina. No entanto estes valores podem variar de acordo com as matrias primas e tcnica de processamento3. Tabela 1: Composio da gelatina3
Aminocido Alanina Arginina cido asprtico cido glutmico Glicina Histidina Hidroxilisina Hidroxiprolina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Prolina Serina Treonina Tirosina Valina Porcentagem presente na gelatina 8.90% 7.80% 6.00% 10.00% 21.40% 0.80% 1.00% 11.90% 1.50% 3.30% 3.50% 0.70% 2.40% 12.40% 3.60% 2.10% 0.50% 2.20% 100%

O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito em ratos de uma dieta contendo como fonte exclusiva de protena a gelatina. Metodologia Para o experimento utilizaram-se ratos Wistar machos. Foram formados aleatoriamente dois grupos, um controle (GC), com seis ratos jovens, acompanhados por quatro semanas, e um gelatina (GG), com oito ratos jovens, acompanhados quatro duas semanas. Na terceira semana os ratos do grupo gelatina morreram e foi formado um terceiro grupo, o gelatina II (GGII), com seis ratos, com pesos equivalentes aos dos ratos do grupo controle, que foram acompanhados durante as duas semanas seguintes. Os ratos ficaram em salas climatizadas, com perodos definidos de claro e escuro, em gaiolas individuais com comida e gua a vontade. No ltimo dia, antes do sacrifcio, os ratos foram colocados em gaiolas metablicas por um dia para recolher a urina de vinte e quatro horas. As medidas do peso dos ratos e da rao ingerida foram feitas duas vezes por semana. Cada grupo recebeu uma dieta especfica, o grupo controle recebeu a dieta AIN-

93 que contm 20% de casena, o grupo gelatina recebeu uma dieta com 20% de gelatina e o grupo gelatina II recebeu uma dieta com 17,5% de gelatina e 2,5% de casena. Tabela 1: Composio das dietas
Nutrientes Controle Protenas (g) 200 Lipdeos (g) 70 Carboidratos (qsp) (g) 635 Fibras (g) 50 Mix de vitaminas (g) 10 Mix de minerais (g) 35 Colina (g) 2,5 Gelatina Gelatina II 200 175 + 25 de casena 70 70 635 635 50 50 10 10 35 35 2,5 2,5

Para a realizao dos exames bioqumicos foram coletadas amostras de sangue, urina e fgado. A albumina plasmtica foi determinada colorimetricamente por kit comercial (Albumina, Labtest Diagnstica), os triglicrides sricos totais por meio de kit comercial enzimtico-colorimtrico (Triglicrides GPO-ANA, Labtest Diagnstica), o colesterol srico por meio de kit comercial enzimtico-colorimtrico (Colesterol Liquiform, Labtest Diagnstica), a uria srica e urinria por meio de kit comercial enzimticocolorimtrico (Uria CE, Labtest Diagnstica), as glicemias dos animais por meio de glicosmetro (Precisin QID, Abbott) em uma gota de sangue e a gordura heptica total pelo mtodo de Bligh-Dyer. Para a determinao do colesterol heptico, a gordura extrada foi ressuspendida em 5 mL de isopropanol e uma alquota foi utilizada para a determinao como no colesterol srico. A anlise estatstica foi realizada utilizando o programa GraphPad InStat 3. Resultados e Discusso Durante as semanas que os ratos foram acompanhados, os GG apresentaram diarria, isto pode ser explicado pelo fato da falta de aminocidos essenciais para a
Variao de Peso (g)

sntese de protenas necessrias para a renovao da mucosa intestinal.

60 40 20

80

Durante as pesagens observou-se que os ratos do grupo GG (p= 0,0034) e GGII

C GG alimentar de ambos os grupos gelatinas ser maior do que o do grupo controle. GGII 0 -20 -40 1 Semana 2 Semana 3 Semana 4 Semana

(p= 0,0001) tiveram uma perda de peso extremamente significativa, apesar do consumo

Figura 1: Variao de peso (g) semanal A variao de peso pode ser explicada pelo fato de a gelatina no possuir triptofano e seus derivados (treonina, fenilalanina, cistina, metionina), que so responsveis pela formao de niacina, vitamina essencial para a liberao de energia para a sntese de protenas, lipdeos e carboidratos4, contribuindo tambm para a perda de peso.
5, 6

. Outra explicao que sua

reserva protica foi utilizada para a manuteno dos nveis sricos de protenas,

140 120 100 CONSUMO (g) 80 60 40 20 0 1 Semana 2 Semana 3 Semana 4 Semana TEMPO EM SEMANAS C GG GGII

Figura 2: Consumo semanal Analisando estatisticamente o consumo alimentar tanto do GG quanto do GGII comparados com o GC, os primeiros apresentaram um consumo maior (p=0,0001). O

estudo de Blokland et al cita que a diminuio da ingesto de triptofano resulta em diminuio dos nveis de serotonina, que influencia a supresso de apetite, podendo explicar o por qu do aumento de consumo8, 9. Os resultados dos exames bioqumicos e de p esto apresentados na Tabela 2. Tabela 2: Resultados bioqumicos
Exames bioqumicos Colesterol srico (mg/dL) Gordura heptica (mg/g tecido) Triglicerides (mg/dL) Glicemia (g/dL) Albumina srica (g/dL) Uria plasmtica (mg/dL) Uria Urinria 24 h (mg/24h) GC 69,62 16,5 4,72 1,62 500,95 111,07 134,83 17,55 3,78 1,37 39,04 9,68 247,7 50,8 GG II 96,9 4,31 3,063 1,353 324,2 125,8 70 17,13 2,75 1,01 31,2 14,7 107,57 66,8 p 0,0134 0,0969 0,0472 0,0002 0,2355 0,3658 0,0147

Segundo Ratnayake et al os nveis extremamente altos de glicina na gelatina podem ser responsveis por atividade hipocolesterolmica10, ao contrrio do que foi observado no presente estudo, neste os nveis de colesterol srico apresentaram um aumento significativo (p=0,0134). Com relao aos triglicerdeos, estes apresentaram uma diminuio significativa (p=0,0472), pois possvel que a arginina, aminocido abundante na gelatina, interfira no metabolismo essencial de cidos graxos10. Como os ratos receberam uma dieta com protena de baixo valor biolgico, provavelmente no havia aminocidos disponveis pra a sntese de protenas responsveis pelo transporte de gordura do fgado para os tecidos, havendo acmulo de gordura neste. Porm isto no foi observado no estudo, onde a gordura heptica no apresentou alterao estatisticamente significante (p=0,0969). A albumina no apresentou nenhuma mudana significativa (p=0,2355), porque os seus nveis de protenas plasmticas eram mantidos normais atravs da utilizao de suas protenas musculares. Os nveis de glicemia apresentaram uma diminuio estatisticamente significante (p=0,0002), possivelmente isto ocorreu porque todo o metabolismo energtico estava alterado pela falta de aminocidos essenciais, ou a glicose poderia estar sendo utilizada para outros fins. Porm, Blokland et al citou em seu estudo que o triptofano responsvel tambm pela estimulao da secreo de insulina, ento conseqentemente os nveis de glicemia deveriam estar altos8. A uria plasmtica no apresentou mudana significativa (p=0,3658), enquanto que atravs da anlise da urina, verificou-se que a uria apresentou uma diminuio

significativa (p= 0,0147). No foi encontrado nenhum dado bibliogrfico que explique esta alterao. Concluso A gelatina no uma boa fonte protica, pois no contm aminocidos essenciais como o triptofano, alm de ser rica em glicina, que em excesso txica. O triptofano fundamental para o crescimento normal e sntese protica, tambm tem influncia sobre o sono, comportamento, fadiga e ingesto de outros alimentos, estimula a secreo de insulina e hormnio do crescimento e funciona como um precursor do neurotransmissor serotonina e vitamina B3 (niacina)9. Assim a gelatina no deve ser usada como nica fonte protica. necessrio que se realizem mais estudos para comprovar quais so os benefcios e malefcios deste tipo de dieta, j que a gelatina amplamente utilizada como sobremesa e como suplemento esportivo.

Bibliografia
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8 BLOKLAND, A., LIEBEN, C., DEUTZ, N. E. P. e SCHIMITT, J. Acute tryptophan depletion: comparing the effects of an amino acid mixture with a gelatin-based protein in man and rats. Current Topics Nutricional Research Vol.2, No. 3, pp XXX-XXX, 2004. 9 ROSSI, Luciana e TIRAPEGUI, Julio. Implicaes do sistema serotoninrgico no exerccio fsico. Arq Bras Endocrinol Metab, abr. 2004, vol.48, no. 2, p.227-233. ISSN 0004-2730. 10 RATNAYAKE, W. M. N., GHULAM, S., LAFFEY, P. Influence of dietary protein and fat on serum lipids and metabolism of essential fatty acid in rats. British Journal of Nutrition (1997), 78, 459-477.