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Instituto de Cincias Biomdicas Abel Salazar

Microbiologia Geral

Instituto de Cincias Biomdicas Abel Salazar 2008-2009

Autor(a) Desonhecido(a), passada a computador por Maria Morais

Bacteriologia
Estrutura da clula procaritica

Forma: - Esfrica: cocos; - Bastonete ou cilindro: bacilos; - Espiral: espirilos (rgidos), espiroquetas (flexveis); - Vrgula: vibries; - Pleomrfica (varivel).

A forma da bactria determinada pela parede celular.

Diviso celular e forma:

Cocos: 1 plano de diviso

diplococos

Bacilos: diplobacilos estreptobacilos Palissadas

Estreptococos

2 planos de diviso

ttradas

3 planos de diviso

Sarcina Estafilococos

As bactrias variam em tamanho tanto quanto em forma: as mais pequenas tm aproximadamente 0,3 m de (ex: Mycoplasma, nanobactrias e ultramicobactrias) e as maiores podem chegar aos 500 m. _______________________________________________________________________________________ 2 Sebenta de Microbiologia
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E. coli 1,1 a 1,5 m largura x 2 a 6 m comprimento Poucas bactrias so maiores que a mdia das clulas eucariticas (10 a 15 m ).

Estrutura da clula bacteriana - Invlucro celular: parede celular + membrana plasmtica. - Citoplasma: nucleide (sem invlucro) Ribossomas Incluses Estruturas membranares - Apndices: flagelos e fmbrias Cpsulas

Composio do citoplasma de Escherichia coli - HO: 70% - Massa seca: C (50%), O (20%), N (14%), H (8%), P (3%), K (2%), S (1%), Ca, Mg e Cl (0,05% cada) e Fe (0,2%). - 95% so macromolculas: RNA (20%), protenas (50%) peptidoglicano (2,5%)

S eubactrias que o possuem: Responsvel parede pela estrutura da

Membrana - Fosfolpidos: - Fosfatidil-etanolamina; - Fosfatidil-glicerol;


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- Fosfatidil-serina; - Cardiolipina. - No tem: - Fosfatidil-colina; - Esfingomielina; - Glicolpidos. - Colesterol (no sintetizado pelas bactrias) - Mycoplasma no tem parede adquiriu o colesterol do hospedeiro. - Hopanides So molculas semelhantes ao colesterol, sintetizados a partir do mesmo precursor; provavelmente sintetizam a mesma bactria. - Protenas Perifricas (20 a 30%) e integrais (70 a 80%).

Funes da membrana: - Permeabilidade selectiva barreira fsica; sistemas de transporte; - Respirao cadeia respiratria + ATPase; - Transporte de nutrientes sistema simporte e antiporte; - Secreo sistema secreo; - Locomoo (quimiotaxia) motor do flagelo; - Diviso ligao ao cromossoma; - Sntese da parede celular PBP, bactoprenol (molcula carregadora de precursores do peptidoglicano; altamente hidrofbica). Normalmente as membranas plasmticas tm maior proporo de protenas do que as membranas eucariticas.

Transporte - Transporte com translocao de grupo; - Transporte ABC (cassette que liga ATP). _______________________________________________________________________________________ 4 Sebenta de Microbiologia
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Respirao

Sistemas de secreo de protenas em bactrias: - Tipo I, II, III, IV, V.

Mesossomas So invaginaes da membrana plasmtica com forma de vesculas, tbulos ou lamelas. Actualmente cr-se que os mesossomas so apenas artefactos formados durante a fixao das bactrias para a microscopia electrnica.

Nucleide - Local onde se encontra o cromossoma procaritico e cuja principal caracterstica (que os difere dos eucariotas) a ausncia de invlucro nuclear. - Constitudo por DNA circular (60%), RNA (30%), protenas (10%). - As protenas do nucleide no so histonas. - DNA girase a enzima que provoca o enrolamento do DNA, enrolamento esse que necessrio para a replicao. A enzima inibida pelas quinolonas. - Plasmdeos - Molculas de DNA circulares mais pequenas que tambm podem estar presentes.

Corpos de incluso grnulos de armazenamento de: - Lpidos (grnulos de poli--hidroxibutirato. : 0,2 a 0,7 m)
reservatrios de carbono, So

- Polissacardeos (glicognio)
energia

providenciando material p/ e biossntese.

- Polifosfatos: grnulos de votulina ou metacromticos. So incluses inorgnicas que funcionam como reservas de fosfatos, um importante componente dos cidos nucleicos (ex: Corynebacterium diphteriae).

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fotossintticas.

Enxofre

Outra

incluso

inorgnica,

presente

nas

bactrias aspartato.

- Pptidos Carboxissomas: contm a

Grnulos de cianoficinas: arginina + enzima ribulose 1,5 difosfato carboxilase.

- Magnetossomas So incluses que contm ferro e magnetite. Servem para algumas bactrias se orientarem no campo magntico da Terra.

Vesculas (vacolos) de gs - Presente em muitas cianobactrias; - So agregados de um grande nmero de pequenas vesculas de gs; - As paredes das vesculas no possuem lpidos e so constitudas apenas por uma pequena protena. - As bactrias com estes vacolos podem regular o seu grau de flutuamento e a profundidade necessria para terem intensidade de luz apropriada, concentrao de O2 e nveis adequados de nutrientes. Ex: cianobactrias

Ribossomas: - Podem localizar-se: Na matriz citoplasmtica sintetizam protenas destinadas a ficarem na clula transportarem Na membrana plasmtica Sintetizam protenas para para o exterior.

Parede Celular
a camada, normalmente rgida, que se localiza por fora da membrana plasmtica. uma das partes mais importantes das clulas procariticas por vrias razes: do _______________________________________________________________________________________ 6 Sebenta de Microbiologia
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forma, protegem da lise osmtica, protegem a clula das substncias txicas e so stio de aco de vrios antibiticos.

Colorao de Gram - importante na prtica clnica Fixador: calor Corante primria (violeta de cristal) Mordente (iodo) Acetona Contrastante

As bactrias Gram + coram com o 1 corante , ficando com uma colorao azulvioleta. Enquanto que as bactrias Gram- coram com o 2 corante adquirindo uma colorao rosa-avermelhada. Essas diferenas devem-se presena do peptidoglicano, quantidades e disposies nas bactrias Gram+ e Gram-. em diferentes

O peptidoglicano em sim no corado, no entanto, actua como uma barreira de permeabilidade que impede a perda do corante violeta de cristal.

Durante o procedimento da colorao, as bactrias so primeiro coradas com o violeta de cristal e depois tratadas com iodo para promover a reteno, Quando as bactrias Gram+ so depois descoloridas com acetona, pensa-se que esta diminui os poros da grossa camada de peptidoglicano. Como tal, o complexo do corante + iodo retido durante a rpida descolorao e as bactrias permanecem arroxeadas. Em contraste, o peptidoglicano das Gram bastante fino, sem grandes ligaes e tem poros largos. A acetona ainda aumenta mais a sua porosidade ao remover o complexo corante iodo das bactrias Gram-.

Invlucro das bactrias Gram + A sua parede celular consiste numa camada homognea de peptidoglicano ou murena, de espessura entre 20 a 80 nm.

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Tambm contm grandes quantidades de cidos teicicos (polmeros de glicerol ou ribitol juntos por grupos fosfato), estes encontram-se ligados ou ao peptidoglicano ou aos lpidos da membrana plasmtica. Como esto carregados negativamente, ajudam a dar parede celular Gram+ a sua carga negativa. Ajudam a manter a estrutura da parede. Os cidos teicicos no esto presentes nas Gram-. Contm um polmero que forma uma rede: peptidoglicano ou murena. O invlucro das bactrias Gram- possui membrana citoplasmtica, um polmero de peptidoglicano (mas mais fino) e um folheto externo com lipopolissacardeo.

Invlucro de bactrias GramA fina camada de peptidoglicano, nestas bactrias, apenas representa entre 5 a 10% do peso da parede. Existe uma protena: lipoprotena de Brauns que liga firmemente a membrana externa e o peptidoglicano. A membrana externa constituda por lipopolissacardeos (cobrem todo o exterior da bactria), largas e complexas molculas que contm lpidos e carbohidratos. Uma das suas funes evitar as defesas do hospedeiro. A membrana externa serve como barreira de proteco, ao prevenir ou demorar a entrada de sais biliares, antibiticos ou outras substncias txicas. Apesar de tudo, a membrana externa mais permevel que a membrana plasmtica. O espao periplasmtico (quase no existe em meios de baixa osmolaridade, porque a hipermolaridade do interior empurra a membrana plasmtica para junto da parede celular) contm o periplasma, rico em protenas que participam na aquisio de nutrientes, bem como em enzimas envolvidas na sntese do peptidoglicano. As bactrias Gram+ podem no ter um espao periplasmtico visvel e no tm tantas protenas periplsmicas.

Bactrias sem parede celular

Mycoplasma Pleomrficas; incapazes de sintetizar o peptidoglicano (resistentes penicilina); contm colesterol obtido do organismo que infectam. Formas L Bactrias que deixaram de sintetizar o peptidoglicano por presso antibitica em meias hiper-osmolares. Arquibactrias As suas paredes no tm peptidoglicano. _______________________________________________________________________________________ 8 Sebenta de Microbiologia
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Fmbrias ou pili No so estruturas de locomoo. Tm 3-10 nm de dimetro e vrios m de comprimento. Pili de conjugao passagem de material gentico de uma clula para outra. Fmbrias ou pili de ligao (adsoro)

Flagelos (completamente do flagelo eucaritico) A maior parte das bactrias com motilidade move-se atravs do uso de flagelos: (o flagelo procaritico muito diferente do eucaritico).

Filamento: 20 nm de dimetro At 15-20m de comprimento Constitudo por flagelina (protena) Geralmente sem membrana Ultra-estrutura flagelar: 1) Filamento 2) Corpo basal 3) Gancho Gram -: no corpo basal existem anis que se associam a zonas diversas do invlucro bacteriano: M (contacta com a membrana plasmtica), S (no espao periplasmtico), P (contacta com o peptidoglicano), L (contacta com a membrana externa ou LPS).

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Gram +: Antel interno (ligado membrana plasmtica) e anel externo (ligado ao peptidoglicano)

Movimentao bacteriana

Sentido anti-horrio: empurram a bactria para a frente. Sentido horrio: andam aos tombos (tumble).

Ex: Treponema pallidum (agente da sfilis) - grupo das espiroquetas - O corpo celular envolve-se em torno dos flagelos; - Movimento tipo saca-rolhas; - Gram anaerbica facultativa.

Invlucros externos parede celular: - Glicoclice: designao genrica para uma rede de polissacardeos que se estendem a partir da superfcie da bactria e de outras clulas. - Cpsula: estrutura bem definida envolvendo cada bactria. - Slime layers (camada de limo) no associado a bactrias individualmente importncia no estabelecimento de biofilmes (ex: placa dentria) -> camada de limo + bactrias.

Cpsulas: muito HO e pouca molcula orgnica (Ex: Streptococcus, Enterobacter) Composio: Quase sempre polissacardea, mas h excepes: Bacillus anthracis, que polipeptdica.

Biofilmes e agentes bacterianos: aumentam bacterianos; dificultam a aco dos anti-spticos.

resistncia

de

agentes

http://www.erc.montana.edu

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Protena M em Streptococcus pyogenes (amigdalites com pus). um dmero que se estende para a periferia da clula. Este permite adeso da bactria a clulas e inibe a fagocitose. Possui variao antignica e inibe a activao do complemento

Estrutura da parede celular e peptidoglicano

Gram-negativas Todo o exterior da bactria coberto pelos lipopolissacardeos. OMP protenas da membrana externa. O espao periplasmtico quase no existe em meios de osmolaridade baixa, porque a membrana plasmtica fica muito junto parede. Peptidoglicano Rede/malha que envolve toda a bactria. Cadeias em 2D: num sentido constitudas por acares e no outro sentido por pptidos (que variam entre as Gram- e as Gram+). Possuem 2 derivados de acares; cido N-acetilmurmico e N-acetilglucosamina (NAM e NAG) e vrios aminocidos, dos quais D- -glutamato, D-alanina e cido mesodiaminopimlico. Estes aminocidos no so encontrados nas protenas. Nas protenas s existem formas L, a presena de aminocidos D neste polmero protege-o do ataque da maioria das peptidases. O esqueleto deste polmero composto por NAG e NAM alternadamente. Depois uma cadeia peptdica de 4 aminocidos D alternados est ligada ao grupo carboxlico do cido N-acetilmurmico. Cadeias de subunidades de peptidoglicanos ligados so unidas por ligaes cruzadas entre os pptidos.

Substncias que actuam sobre o peptidoglicano: -lactmicos (ex: penicilina) - Bloqueiam a ligao peptdica (inibem as transpeptidases), falhando a formao da 2 dimenso. Tambm provocam o descontrolo das autolisinas. Autolisinas quebram as ligaes entre o NAM e o NAG permitindo a insero de mais monmeros. Transpepsinas - Fazem a ligao interpeptdica com a energia da libertao da alanina extra. Hidrolases do peptidoglicano Degradam o peptidoglicano.
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Autolisinas: amidases; glicosidases. Lisozima (glicosidases) destri as ligaes entre o NAM e o NAG. Lisinas dos bacterifagos (utilidade teraputica ?).

Polmeros acessrios

cidos teicicos Polmeros de glicerol ou ribitol unidos por grupos fosfatos. Regulam a actividade de vrias enzimas. No existem nas Gram- . Esto ligados ao peptidoglicano. Aparentemente estendem a superfcie do peptidoglicano e uma vez que esto carregados negativamente, conferem s bactrias Gram+ a sua carga negativa. Mantm a estrutura da parede celular. cidos lipoteicoicos: ligados aos lpidos da membrana plasmtica.

Lipopolissacardeo (ou endotoxina) Cobre todo o exterior da membrana externa das bactrias Gram-. Tem carga negativa, e ajuda na defesa contra o sistema imune. Participa na estabilizao da parede e tem resistncia aos sais biliares. Consiste em 3 partes: Lpido A contm 2 derivados de acares glucosamicos, cada um com 3 cidos gordos e 1 fosfato ligado a si; Polissacardeo central (core) ligado ao lpido A, constituido por vrios acares; Antignio O cadeia polissacardea que se estende para fora do core relacionado com a virulncia. Quanto maior for, mais virulenta a bactria.

Micobactria no coram pelo mtodo de Gram (ex: M. tuberculosis, M. leprae). Tm uma parede mais complexa: membrana plasmtica; peptidoglicano; polmero de acares; cidos gordos (cidos miclicos + glicolpidos) formam camada espessa. No so sensveis penicilina (?!).

Esporos (endosporos) - Estruturas que no coram; - Esporngio zona da clula onde se forma o esporo. - Constitudo por membrana, parede celular (rodeia o protoplasma) , crtex (composto de peptidoglicano, mas menos cruzado), tnica externa (constituda por vrias camadas de protenas impermevel), exosprio e ncleo germinativo.

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Um nmero de bactrias Gram+ formam uma estrutura especial, muito resistente chamada de endosporo. Esto presentes apenas nas bactrias Gram-positivas. Tm uma forma resistente a factores qumicos e fsicos adversos. Esta deve-se ao cido dipicolnico que forma complexos com o Ca, baixa concentrao de HO, protenas nucleares e enzimas reparadoras. O esporngio destri-se depois da libertao do esporo. Ao encontrar HO e nutrientes, o esporo germina.

Respirao versus Fermentao

O metabolismo em microrganismos , portanto, muito varivel. Respirao Rendimento energtico da oxidao da glucose: 38 ATP. Fermentao Rendimento: 2 ATP. O O tem algumas caractersticas que o tornam o aceitador final preferido de muitos microrganismos: - A sua abundncia, etc.

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Num meio onde haja O muito perigoso haver Fe, por isso que as clulas tm uma maquinaria enzimtica especfica para degradar o HO (ex: catalase, glutationa).

Factores que afectam o crescimento

Radiaes - Radiao ionizante: leso do DNA, mutagnese; (h muitos microrganismos extremamente resistentes radiao) - Ultravioleta: leso do DNA, mutagnese; - Visvel: em alta intensidade, oxignio singleto (muito reactivo).

Nutrio: classificao

1- Fonte de energia: Luz fototrofismo; Substncia qumica quimiotrofismo.

2- Fontes de potencial redutor (H, e): Substncias inorgnicas litotrofismo; Substncias orgnicas organotropismo. _______________________________________________________________________________________ 14 Sebenta de Microbiologia
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3- Fontes de carbono: CO - autotrofismo; Substncias orgnicas heterotrofismo.

Metabolismo conjunto de todas as reaces qumicas que ocorrem na clula. Catabolismo: quando as molculas maiores e mais complexas so degradadas a molculas mais pequenas e simples com libertao de energia (esta energia vai ser utilizada para produzir trabalho, ou dissipada como calor). Anabolismo: a sntese de molculas complexas a partir de mais simples, com gasto de energia.

Os organismos usam 3 fontes de energia: Os fosfatos capturam a radiao solar; Os quimiorganotrofos energia; Os quimiolitotrofos utilizam nutrientes inorgnicos como fontes de energia. Os microrganismos variam no s nas fontes de energia, como tambm nos aceitadores de electres usados pelos quimiotrofos. Trs grandes tipos de aceitadores so utilizados. Na fermentao a energia do substrato oxidada e degradada sem a participao de aceitadores exgenos ou externos. Normalmente a via catablica produz intermedirios, como o piruvato, que actua como aceitador de electres. Na respirao utilizam-se aceitadores de electres exgenos. Na respirao aerbia o aceitador final de electres o O2. Na respirao anaerbia o aceitador final no o O2, mas sim outros aceitadores exgenos. Ex: ,... oxidam molculas orgnicas para libertar

Quimiotrofismo Existe um grupo de bactrias com capacidade de obter energia atravs de molculas inorgnicas (em vez de orgnicas).
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Cada espcie tem as suas preferncias especficas para os dadores e aceitadores de electres. O aceitador normalmente o O2, mas o utilizados. Os dadores mais comuns so o H2, o Podem ser autotrficas ou heterotrficas. Mas importante salientar que a oxidao de molculas inorgnicas liberta muito menos energia que a oxidao de molculas orgnicas (como por exemplo a glucose). No entanto, isto compensado com a oxidao de enormes quantidades de matria inorgnica para o crescimento, reproduo, o que amplifica o seu impacto ambiental. Ex: Bactrias nitrificantes que oxidam o azoto para obteno de energia. , Fe2+, etc. e o tambm so

Fotossntese Os microrganismos no s so capazes de obter energia atravs da oxidao de compostos orgnicos e inorgnicos, como tambm so capazes de capturar a energia luminosa e us-la para sintetizar APT, NADH, ou NADPH, num processo denominado de fotossntese. Normalmente um organismo fotossinttico reduz e incorpora CO2. um processo muito importante porque a maior parte da nossa energia derivada da energia solar, que fornece o ATP e o NADPH necessrio para o crescimento dos microrganismos. responsvel pela produo de O2 (cerca de da fotossntese na terra feita por microrganismos).

(Quimiorganoheterotrficos)

Fotossntese oxignica eucariotas e cianobactrias. Fotossntese anoxignica todas as outras.

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- Ciclo do azoto; - Ciclo do enxofre; Os microrganismos, durante o seu crescimento e metabolismo, interagem entre si, originando ciclos de nutrientes como o azoto, enxofre, fsforo, etc.

Ciclo do azoto

- Ciclo do fsforo (muito pouco solvel)

Eutrofizao crescimento dos microrganismo quando se lhes dado um nutriente que lhes faltava. Mucosa Nasal Staphylococcus epidermis M. prototrficas: - Auxotrficas muitas coisas para poder crescer; - Fastidiosas; - Que so parasitas intracelulares obrigatrios.

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Tipos de meios - Meios complexos peptona.

Crescimento Bacteriano
O crescimento pode ser definido como um aumento dos constituintes celulares, o que leva a um aumento no nmero de clulas quando os microrganismos se reproduzem atravs de processos como: Fisso binria Clulas individuais crescem e dividem-se originando duas clulas-filhas com aproximadamente o mesmo tamanho.

Curva de crescimento (logaritmo do n de clulas viveis pelo tempo de incubao) O crescimento da populao estudado atravs da anlise da curva de crescimento de uma cultura microbiana. Normalmente, quando os organismos so cultivados em meios lquidos, crescem em sistema fechado. Isto significa que, como no se vai acrescentando meio fresco, durante a incubao, a concentrao de nutrientes diminui e a de resduos aumenta. Esta curva tem 4 fases distintas:

Fase de latncia Quando os microrganismos so introduzidos num meio de cultura fresco, no ocorre um aumento imediato do nmero de clulas. No entanto, as clulas vo sintetizando novos componentes. Este perodo de latncia pode ser necessrio por vrias razes: - A clulas podem ser velhas, sem ATP, cofactores e ribossomas, tendo estes que ser sintetizados para que as clulas se possam dividir. - O novo meio pode ser diferente daquele a que as clulas estavam habituadas e precisam de algum tempo para se adaptarem. Esta fase varia consideravelmente em durao, dependendo da condio dos microrganismos e a natureza do meio. _______________________________________________________________________________________ 18 Sebenta de Microbiologia
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Fase exponencial (ou de crescimento logartmico) Os microrganismos dividem-se taxa mxima possvel tendo em conta o seu potencial gentico, a natureza do meio e as condies a que se efectua o crescimento. A taxa de crescimento constante: os microrganismos dividem-se e duplicam o seu nmero em intervalos de tempo regulares. A populao mais uniforme em termos de propriedades qumicas e fisiolgicas. um crescimento balanceado, porque todos os componentes celulares so produzidos a taxas constantes uns em relao aos outros. Se as condies do meio mudam, nomeadamente os nveis de nutrientes, o crescimento deixa de ser balanceado. O crescimento microbiano est sob controlo preciso e coordenado, respondendo rapidamente a alteraes nas condies ambientais.

Fase estacionria Num determinado momento o crescimento da populao cessa e a curva de crescimento torna-se horizontal (o que ocorre quando temos uma populao com aproximadamente 109 clulas/mL. O tamanho final da populao vai depender: - Disponibilidade de nutrientes e outros factores; - Tipo de microrganismos. Nesta fase o nmero total de microrganismos viveis permanece constante porque: - O nmero de nascimentos est balanceado com o nmero de mortes ou - A populao pra de se dividir mas permanece metabolicamente activa. Esta fase ocorre por vrios motivos: - Limitao de nutrientes (ex: O2) - Acumulao de produtos de excreo txicos (ex: cido lctico, etc.) - Ou porque se atingiu um determinado nvel crtico

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Fase de morte Caracteriza-se por um declnio do nmero de clulas viveis. A morte (define-se como a perda irreversvel da capacidade reprodutiva), como o crescimento tambm exponencial. A taxa de morte pode reduzir-se quando a populao diminuiu drasticamente, o que se deve sobrevivncia de clulas particularmente resistentes. H formao de esporos.

Ateno! O crescimento bacteriano, numa escala aritmtica exponencial, se utilizarmos uma escala logartmica representa-se como uma recta.

Quantificao do Crescimento Bacteriano


Directa a maneira mais bvia. A utilizao de uma cmara de contagem fcil, barata e relativamente rpida. Cmara de Neubauer O nmero de microrganismos numa amostra pode ser calculado tendo em conta o volume da cmara e o nmero de diluies necessrias. Desvantagens: difcil distingui entre clulas vivas e mortas sem recorrer a tcnicas especiais. Contador de partculas utilizam-se instrumentos em que, de cada vez que um microrganismo passa atravs de um orifcio a resistncia elctrica aumenta e a clula contada.

Contagem de clulas viveis Especficas para clulas com capacidade de crescimento e reproduo. Plaqueamento de diluies Uma soluo diluda de bactrias espalhada num meio slido de agar. Cada microrganismo ou grupo desenvolve-se numa colnia distinta. O nmero original de clulas viveis na amostra pode ser calculado atravs do nmero de colnias formadas e da diluio da amostra. Filtrao em membranas Uma pequena amostra filtrada atravs de um filtro membranar especial. O filtro depois colocado num meio de agar e incubado at que cada clula origine uma colnia. O nmero de colnias d-nos o nmero de microrganismos na amostra filtrada.

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Medidas da massa celular Baseia-se no princpio de que o aumento da massa total da clula, assim como do nmero de clulas, acompanha o crescimento da populao. Determinao do peso seco As clulas que crescem num meio lquido so recolhidas por centrifugao, lavadas e secas e depois pesadas (no um mtodo muito sensvel e bastante demorado). Turbidimetria Utiliza a propriedade que as clulas microbianas apresentam de reflectir a luz que sobre elas incide. Assim como numa populao as clulas microbianas so todas aproximadamente do mesmo tamanho, a quantidade de reflexo (medida num espectrofotmetro) directamente proporcional biomassa de clulas presentes e indirectamente relacionada com o nmero de clulas. ATP, DNA Se a quantidade de uma substncia em cada clula constante, a quantidade total desse constituinte celular est directamente relacionada com a massa celular microbiana total. Assim, por exemplo, a quantidade de ATP pode ser usada para estimar a quantidade de massa microbiana viva.

Tempo de gerao ou de duplicao Quanto maior o tempo de gerao, mais lentamente a bactria se replica e viceversa. Num meio muito diludo, estamos a diminuir a replicao das bactrias. Aumentando a concentrao de nutrientes no meio, aumentamos a replicao das bactrias mas s at um dado valor K, dado que as bactrias apresentam um limite mximo a partir do qual deixam de se replicar nvel crtico.

Factores que afectam o crescimento bacteriano A habilidade que alguns microrganismos apresentam de se adaptar a meios externos e inspitos muito grande. Desta forma os procariotas esto presentes em todos s stios onde exista vida. Extremfilos adversas. microrganismos que crescem em condies terrivelmente

Actividade da gua (aw) = gua disponvel Uma vez que os microrganismos so rodeados por uma membrana plasmtica selectivamente permevel, podem ser afectados por variaes nas concentraes osmticas do meio envolvente. Uma maneira de diminuir a concentrao osmtica do citoplasma foi o uso de corpos de incluso. Os procariotas tambm tm canais sensveis presso que abrem
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permitindo a sada de soluto quando a osmolaridade do meio se torna muito menor que a do citoplasma. Muitos microrganismos mantm a sua concentrao osmtica acima da do seu habitat atravs da utilizao de solutos compatveis (solutos que necessrio acumular para manter o turgor quando a osmolaridade do meio aumenta; so solutos que so compatveis com o metabolismo e crescimento quando em concentraes intracelulares elevadas), de modo que a membrana celular est sempre firmemente pressionada contra a parede celular. A actividade da gua (aw) inversamente relacionada com a presso osmtica. Se uma soluo tem uma presso osmtica elevada, a sua aw baixa. Os microrganismos variam bastante na sua capacidade para se adaptarem a habitats com baixo aw (hiperosmticos). Num meio com baixo aw os microrganismos tm que despender um esforo extra para manter uma concentrao de solutos interna elevada, de forma a conseguirem reter a gua. Este tipo de microrganismos denominam-se osmotolerantes porque so capazes de crescer em meios com grandes variaes de aw ou concentrao osmtica (ex: estafilococos). Haloflicos Esto completamente adaptados a condies salinas e hipertnicas de modo que necessitam de altos nveis de NaCl para crescer.

pH a medida da actividade do io hidrognio numa soluo. Os habitats nos quais os microrganismos crescem variam grandemente no pH, da que este possa afectar dramaticamente o crescimento microbiano. Cada espcie tem a sua prpria gama de pH na qual se processa o crescimento, bem como um valor de pH ptimo de crescimento. Microrganismos: acidfilo (0 < pH < 5,5) fungos e algas; neutrfilos (5,5 < pH < 8,0) a maior parte das bactrias e protozorios; alcalfilos (8,5 < pH < 11,5) Em geral cada grupo microbiano tem preferncias de pH caractersticas. Apesar dos microrganismos poderem crescer numa gama alargada de pH, afastada do seu pH ptimo, existem limites para a sua tolerncia. Variaes drsticas no pH citoplasmtico podem destruir a membrana celular, inibir a actividade enzimtica e inibir as protenas de transporte da membrana. Mecanismos para a manuteno de um pH citoplasmtico neutro:

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- A membrana citoplasmtica pode ser relativamente impermevel aos protes; - Possuem sistemas de antiporte K+/H+ e Na+/H+; - Tambm modificam o pH do seu habitat ao produzirem produtos de excreo metablica cidos ou bsicos.

Temperatura Afecta os microrganismos tal como afecta os outros seres vivos. Os microrganismos so at particularmente susceptveis porque so, a maioria, unicelulares e a sua temperatura varia com a temperatura do meio externo. A temperaturas baixas, um aumento de temperatura aumenta a taxa de crescimento, porque a velocidade das reaces enzimticas tambm aumenta. A partir de um certo ponto, no entanto, mais aumentos diminuem o crescimento e temperaturas suficientemente altas so letais. As altas temperaturas danificam as clulas ao: Desnaturarem enzimas, transportadores e outras protenas; Destroem membranas (desintegrao dos lpidos). Normalmente provocam danos irreversveis e irrecuperveis. A baixas temperaturas As membranas gelificam; O transporte e a actividade enzimtica muito lenta. Afectam as funes celulares, mas no necessariamente a composio qumica e a estrutura da clula. O crescimento varia consoante a temperatura e tem um mximo, um mnimo e uma temperatura ptima. Claramente, os organismos procariticos conseguem crescer a temperaturas muito mais elevadas que os eucariotas.

Concentrao de O2 Tempos vrios tipos de organismos consoante a sua relao com o O2: Aerbios Organismos capazes de crescer na presena de O2 atmosfrico;
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Anaerbios Aqueles que so capazes de crescer na sua ausncia; Aerbios obrigatrios Aqueles que so completamente dependentes do O 2 para crescerem (o O2 o aceitador final de e- na cadeia respiratria) Anaerbios facultativos No necessitam de O2 para crescerem, mas crescem melhor na sua presena (quando utilizam a respirao aerbica). Anaerbios aerotolerantes* Ignoram o O2 e crescem igualmente quer na sua presena, quer na sua ausncia. Anaerbios obrigatrios* - No toleram o O2 e morrem na sua presena. Microaerfilos So lesados pelo nvel atmosfrico normal de O2 (20%) e necessitam de nveis mais baixos (2-10%) para crescerem. *- No conseguem obter energia atravs da respirao, tendo que utilizar a fermentao ou a respirao anaerbica para esse objectivo.

O O2 aceita electres e rapidamente reduzido porque tem 2 orbitais externas desemparelhadas. Portanto, o O2 pode reagir com determinadas molculas que so externamente txicas porque so poderosos agentes oxidantes e rapidamente destroem os componentes celulares: (radical superxido) (perxido de hidrognio) (radical hiroxilo)

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Portanto, um microrganismo tem que ser capaz de se proteger destes produtos do O2 ou ento acaba por ser morto. Assim, a maior parte dos microrganismos possui enzimas que os protegem dos produtos, nomeadamente: Superxido dismutase (SOD) Catalase Peroxidase

Radiao O nosso mundo bombardeado com radiao electromagntica de vrios tipos. medida que o comprimento de onda de uma radiao diminui, a sua energia aumenta. Muitas formas de radiao electromagntica so perigosas para os microrganismos. Radiao ionizante: Raios X e raios gama. Tem um comprimento de onda muito curto e muita energia. Provocam leses do DNA, mutagnese, podendo causar morte directa ou indirectamente. Isto acontece ao quebrarem as ligaes de hidrognio, oxidarem as duplas ligaes, destruirem estruturas em anel e polimerizarem algumas molculas. Radiao UV: Mata todos os tipos de microrganismos devido tambm ao seu curto comprimento de onda e elevada energia. Actuam formando dmeros de timina no DNA, que se unem por ligaes covalentes em cadeias adjacentes, impedindo a replicao e funo do DNA leso do DNA. Luz visvel: Apesar de ser fundamental porque a fonte de energia para a fotossntese, quando presente em alta intensidade pode lesar ou matar clulas microbianas, nomeadamente porque leva formao do oxignio singleto (1 O2: um agente oxidante muito reactivo e poderoso que rapidamente destri a clula).

Metabolismo Bacteriano
Anabolismo Catabolismo

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Diversidade de vias que as bactrias (quimiorganotrficas) tm para obter energias.

Biossntese sntese de compostos orgnicos Ciclo de Calvin - fixao do carbono atmosfrico 6CO2 + 18ATP + 12NADPH + 12H + 12HO + 12 NADP Consome muita energia Gasta poder redutor Importante para os organismos autotrficos. Para os organismos heterotrficos j no necessrio o ciclo de Calvin: - Gluconeogenese Glucose sntese dos aminocidos glucose + 18 ADP + 18 Pi

- Vias de assimilao da amnia

Enzima glutamato desidrogenase (muita amnia); Enzima glutamina sintetase (pouca amnia); Enzima glutamato sintetase. Gasto de ATP

Vias anaplerticas: Fosfoenolpiruvato OAA

Ciclo do glioxilato Serve para repor os nveis de OAA. Evitam-se os passos de descarboxilao do ciclo de Krebs. - Isocitrato liase. Permite a uma bactria sobreviver e crescer num meio de cultura cujo nico meio de carbono o acetato ou cidos gordos. As leveduras em contacto com macrfagos estimulam o ciclo do glioxilato, o que significa que estas leveduras adaptam-se melhor aos hospedeiros se este ciclo ocorrer (estudo importante). Persistence of Mycobacterium tuberculosis macrophages and mice requires the glyoxylate shunt enzyme isocitrate lyase. in

Regulao das vias metablicas _______________________________________________________________________________________ 26 Sebenta de Microbiologia


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Pode-se fazer a vrios nveis: - Controlo alostrico: ex: retroinibio pelo produto; - Controlo covalente: ex: fosforilao/desfosforilao; - Regulao dos genes que codificam as enzimas transcrio.

Diferenas entre organizao dos genes entre procariotas e eucariotas:

- um processo mais simples Em cada sequncia podem existir vrios genes que codificam varas protenas e no apenas 1 (como nos eucariotas). A regulao das vrias enzimas faz-se em conjunto.

Opero Conjunto dos vrios genes + regio promotora. Ex: Opero da lactose na E. coli: um opero indutivo que funciona no catabolismo. induzido quando um determinado substrato est presente no meio (lactose, neste caso). inibido por um repressor quando no existe lactose no meio. Precisa tambm de uma protena CAP, que para estar activa precisa de AMPc. Quando h pouca glicose h muito pouco AMPc, que activa a CAP e esta faz com que a RNA polimerase se posa ligar ao promotor iniciando a transcrio.

- Envolvidos na biossntese so diferentes


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Operes repressveis reprimidos quando a molcula que vo sintetizar est presente (ex: opero do triptofano).

No opero do triptofano existe outro tipo de regulao (apenas presente nos procariotas). - Mesmo que o mecanismo anterior (represso pelo produto) falhe, a transcrio pra quando se formam ansas (entre as regies 3 e 4). - Quando no existe triptofano no meio, forma-se outra ansa, entre 2 e 3 e a transcrio continua. S pode ocorrer nos procariotas porque a transcrio e a traduo ocorrem simultaneamente.

Eclipse O fago injectou o seu DNA na bactria mas ainda no se replicou, portanto deixa de existir.

Replicao fgica

Ciclo ltico (destruio das bactrias) replicao dos fagos

- Injeco do genoma. - Replicao do DNA. Traduo dos mensageiros em protenas, formao de nucleocpside. - Lise da bactria e libertao de novos fagos.

Penetrao

- Landing; - Attachment; - Tail contraction; - Penetrating and unplugging; - DNA injection.

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- A cauda tem um mecanismo de contraco (diminui de tamanho) e de injeco. - O fago PRD1 possui uma actividade muraltica (enzimas que destroem o peptidoglicano)

Replicao

- Processos precoces: - Sntese dos mRNA precoces e das enzimas de replicao e protenas reguladoras. - Processos tardios: - Sntese da nucleocpside, etc.

Progenia

Ciclo lisognico (fagos temperados) fagos que no causam a lise da bactria. O genoma pode integrar-se no genoma bacteriano e permanecer durante muito tempo. Profago fago que no est a replicar mas est inserido no cromossoma bacteriano.

Virologia
1- Introduo 2- Bacterifagos 3- Virides e pries Vrus

- Agentes infecciosos acelulares;


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- Filtrveis (filtros de Chamberland); - Necessitam de uma clula hospedeira para se poderem replicar; - Sem sistemas de gerao de energia.

Vrus: entidade biolgica.

Virio: partcula viral.

Cpside: invlucro proteico no interior do qual se encontra o genoma.

Nucleocpside: cpside + genoma.

Virio: uma partcula viral completa. Contem uma ou mais molculas de DNA ou RNA. Pode possuir vrias camadas (ex: uma membrana).

Bacterifagos ou fagos (h muitos diferentes)

- Vrus que infectam bactrias. Estrutura: nucleocpside no cimo de uma estrutura complexa.

Resultado da infeco: placas fgicas (muito variveis) locais onde no existem bactrias porque foram destrudas. _______________________________________________________________________________________ 30 Sebenta de Microbiologia
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Morfologia: - Estruturas filiformes; - Estruturas cilndricas; - Fagos de tamanhos variveis; - Estrutura icosadrica.

A presena de nutrientes, etc. condiciona a utilizao do ciclo ltico ou do ciclo lisognico.

Protenas CRO e C1 a taxa de transcrio do Cro e do C1 determinam a utilizao do ciclo ltico ou lisognico.

Repressor produo do gene cl.

Protena Cro Implicada na regulao dos genes do ciclo ltico. Se est em muita quantidade inibe o repressor levando ao ciclo ltico.

Transcrio precoce imediata Transcrio precoce tardia Transcrio tardia: Deciso: lisogenia (c1 ganha). Deciso: ciclo ltio (cro ganha bloqueia a produo do repressor, promove a promoo da protena Q).

Ciclo lisognico

Fago Emparelhamento de bases permite que o DNA do fago se integre no cromossoma bacteriano profago. Exciso do genoma do fago inicia o ciclo ltico.

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Consequncias da infeco fgica: - Lise bacteriana; - Alteraes do genoma bacteriano; - Alteraes da virulncia bacteriana.

Traduo generalizada Algumas cpsides englobam bocados de cromossomas bacterianos, o que depois pode levar alterao da bactria (se esse fago injectar o seu material numa bactria da mesma espcie).

Traduo especializada Ocorre com fagos temperados. O DNA cromossmico transferido localiza-se no local de insero do profago.

Fagos e virulncia

Factores de virulncia podem ser transferidos para transduo (ex: toxina de Shiga). - Toxinas codificadas por fagos lisognicos: Toxinas diftricas, botulnica, pertssica, de Shiga, eritrognica, da clera, enterotoxina, estafiloccica e TSST.

- Outros Factores reguladores da virulncia, enzimas

Fagos abundam onde h bactrias (ex: no solo).

Vrus que infectam clulas eucariticas

Virides Agentes infecciosos (de plantas) constitudos apenas por RNA de cadeia simples. No tm protenas. So muito pequenos e contm muito pouca informao. _______________________________________________________________________________________ 32 Sebenta de Microbiologia
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Pries Agentes infecciosos constitudos apenas por uma protena (PrP) sem cidos nucleicos. - Scrapie doena das ovelhas; - BSE; - Doena de Kreutzfeldt-Jakob (DCJ) - Kuru. Sem genoma de cido nucleico.

PrPc Molcula homloga normal presente nos indivduos. A protena anormal (resistente protease K), quando se liga protena anormal, altera a sua conformao e esta vai, por sua vez, modificar a conformao de outras molculas normais.

Replicao Resumo

Vrus + receptor entra de vrias maneiras.

HIV libertado constantemente sem destruio da clula (budding).

Replicao do HIV (vrus de 2 cadeias de RNA ligadas por RNAt)

- Cpside com protenas; - S infecta clulas especficas: CD4 linfcitos T e macrfagos. Tropismo dos vrus. S existe nos

- Protena GP120 do vrus liga-se CD4 das clulas. - Receptor CXCR4 e CCR5 Ligam quimiocinases e atraem leuccitos. Tambm so importantes para a ligao do vrus e entrada na clula. - cDNA transcrito do RNA do vrus. integrado no cromossoma provrus. Os vrus vo se libertando sem destruio da clula
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Leso da clula infectada (em geral) - Inibio dos processos biossintticos. - DNA, RNA, protenas. - Leso dos lisossomas. - Autlise. - Alterao da membrana citoplasmtica. - Alteraes antignicas; fuso celular. - Acumulao de material viral. - Corpos de incluso. - Transformao neoplsica.

Tudo isto provoca doena.

Consequncias da infeco viral

- Lise celular (inflamao); - Infeco crnica; - Persistncia (ex: herpes, HIV); - Latncia. - Transformao neoplsica.

Efeito citoptico

Sinccios resultado da fuso de clulas infectadas.

Corpos de Incluso

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Oncognese viral - Herpesvrus: EBV (linfoma de Bukitt; carcinoma nasofarngeo), HHV8 (Sarcoma de Kaposi); - Adenovrus; - Retrovrus: HTCV 1 e 2 (leucemias); - Papovavrus: papilomavrus (carcinoma do colo do tero); - Hepadnavrus: HBV (carcinoma heptico) - Flavivrus: HVC (carcinoma heptico hepatite B;

hepatite C.

Oncognese por papilomavrus

Normal: equilbrio entre protenas que promovem e inibem a replicao celular. Anormal: mais protenas que promovem a replicao, que se torna descontrolada.

Oncogenes Virais

V. Sarcoma felino (fms, kit); V. Sarcoma murino (fos, mos, raf); V. Leucemia murino (abl); V. Sarcoma rato (ras).

Oncogenes Celulares

- Receptores para factores de crescimento; - Protenas que fazem transduo do sinal; - Factores de crescimento.

Interferncia no Ciclo Celular


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Vrus podem produzir protenas que: - levam a produo de factores de proliferao celular.

Infeces Crnicas (estratgia dos vrus para permanecerem nos hospedeiros)

Herpes: Latncia (replicao ) em neurnios, leuccitos, glndulas salivares, rim. Sarampo: Pan-encefalite esclerosante sub-aguda. Hepatite B: Infeco persistente (replicao contnua). HIV: SIDA (exibe de fenmenos de persistncia e latncia). Pries: Scrapie, s. de Kreutzfeldt-Jakob, BSE.

Infeces latentes

Vrus varicela-zoster (infeco neurotrpica). Zona Apenas em determinados locais.

Frmacos anti-virais (tem que ser selectivo: ser antimicrobiano mas no atacar o hospedeiro) -Dificuldade de encontrar alvos selectivos; - Toxicidade; - Design molecular.

Alvos dos frmacos anti-virais - Bloqueio dos receptores de entrada do vrus; - Bloqueio da descorticao (ex: amantadina); - Inibio da replicao (maior parte dos frmacos disponveis no momento); _______________________________________________________________________________________ 36 Sebenta de Microbiologia
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- Inibio da traduo/modificaes ps-traducionais (ex: inibidores de proteases); - Bloqueio na montagem e libertao dos viries; - Interferes.

Frmacos anti-influenza (gripe)

Frmacos anti-herpticos Ex: aciclovir (anlogo da guanosina).

Frmacos antivirais de largo espectro Alvos: Papovavrus; Adenovrus; Herpesvrus; Iridovrus; Poxvrus.

Inibidores da cadeia

Induzem uma terminao prematura da cadeia. Ex: AZT (tem um N em vez de um OH).

Frmacos anti-HIV

Inibidores de proteases. Ex: a poliprotena GAG no consegue ser clivada porque as proteases esto inibidas.
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Gentica Bacteriana
Mecanismos de alterao gentica

Mutao - Mutaes pontuais; - Deleces; - Inseres.

Transferncia gentica horizontal De um organismo para outro, entre bactrias da mesma espcie ou de espcies diferentes. - Transformao; - Transduo; - Conjugao Transferncia de genes de um organismo (dador) a outro. Exogenonte DNA que transferido ao receptor. (?) Endogenonte genoma do receptor. (?) Merozigoto clula receptora com exogenonte. (?)

Conjugao

1946, Lederberg and Tatum. Bactrias auxotrficas (incapazes de sintetizar certos produtos)- tornaram-se prototrficas. _______________________________________________________________________________________ 38 Sebenta de Microbiologia
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A mistura de duas bactrias pode levar sua recombinao. U-tube experiment duas. por isso que necessrio haver contacto fsico entre as

F clulas bacterianas capazes de transferir marcadores (possuem um factor de fertilidade: factor F (plasmdeo). F bactrias que no possuem factor F; aps o receberem o factor F tornam-se elas prprias F.

O que acontece se o factor F se inserir no cromossoma? O plasmdeo integra-se no cromossoma e transfere todos os marcadores do cromossoma do dador.

F clulas bacterianas capazes de transferir marcadores preferenciais com uma frequncia muito superior.

Plasmdeos - F; - R conferem resistncia a antibiticos; Genes que conferem resistncia a muitos antibiticos; - Colicinas conferem tambm resistncia a antibiticos; - Virulncia codificam genes de produtos que permitem a aderncia, internalizao, produo de substncias. - Metablicos codificam genes de metabolismos estranhos. Resistncia a metais pesados.

Integrao dos plasmdeos (por ex: factor F)

Regies (sequncias de insero IS) do plasmdeo semelhantes a regies do cromossoma, permitindo o emparelhamento e recombinao.
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Capazes de promover a sua prpria replicao; Codificam uma enzima de transposases (transposio de genes de um genoma para outro).

Transposes transpem de um genoma para outro.

Plasmdeo R1 - RTF: resistance transfer factor; - + alguns transposes.

Transformao

DNA libertado de bactrias mortas. Bactrias vivas adquirem esse DNA ou plasmdeos e destroem-no, integram-no no seu DNA (alterao do genoma dessa bactria). 1- ligao de protenas da parede ligando o DNA. 2- degradao de uma das cadeias de DNA por enzimas. 3- A outra das cadeias internalizada.

Ciclos Fgicos - Ciclo ltico; - Ciclo lisognico.

Transduo Generalizada (qualquer fragmento de cromossoma pode ser traduzido) - Durante a infeco h degradao do cromossoma; - O genoma viral replica-se; - O empacotamento do DNA pode no ser do fago, mas da bactria esse bocado pode ser _______________________________________________________________________________________ 40 Sebenta de Microbiologia
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Transduo Especializada Como os fagos se inserem sempre nos mesmos locais do cromossoma so sempre as regies adjacentes que so integradas no genoma viral.

BQ de recombinao de DNA: recombinao geral.

Recombinao geral no recproca (transformao) S uma cadeia entra na clula

Recombinao Site-specific Recombinao site-specific versus homloga.

Fungos

- Caractersticas gerais dos fungos - Classes importantes: Zygomycota, Ascomycota, Basidiomycota.

Basidiomicetes - Considerada a classe dos fungos superiores tal como os ascomicetes; - A estrutura somtica miceliana; cordes - Miclio bem desenvolvido, as hifas podem agregar-se e formar rizomorfas.

- O miclio septado com septos dolispricos (no existe continuidade protplasmtica ao longo de todo o miclio); - Existem espcies com estrutura somtica leveduriforme; - O ciclo assexual leva produo de condios, artrosporos ou ;
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- O ciclo sexual conduz formao de uma clula onde ocorre a fuso de dois ncleos haplides cariogamia - e a meiose com formao de basidisporos, em geral em numero de 4, que ficam exteriores clula; - Ausncia de diferenciao de rgos sexuais. A plasmogamia ocorre entre hifas vegetativas; - Podem ser saprbios ou parasitas. A maior parte so parasitas de plantas; - Grande importncia econmica (ex: cogumelos): espcies comestveis, espcies parasitas de rvores em p e de madeiras. Ex: Agaricus campestris. Puccinia graminis (fungo das videiras).

Deuteromycetes - Tambm so fungos superiores, no se conhece o ciclo sexual; - Recebem a designao especfica baseada na sua forma assexual, principalmente pelo tipo de condios que formam. Ex: Algumas espcies de Penicillium e Aspergillus, Candida albicans.

Fungos como alimentos Das espcies comestveis, algumas dificilmente se confundem com as txicas. Outras so facilmente confundveis.

Fungos em alimentos - A aco dos fungos nos alimentos principalmente fermentadora. - As espcies utilizadas, ou as variedades, dependem do tipo de aco pretendida dos microrganismos e do sabor que se pretenda dar ao alimento. - Outros alimentos em cuja preparao intervm fungos: Sake aguardente de arroz; Shyu molho de soja.

Toxicidade dos fungos

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- Os princpios txicos produzidos so de natureza diversa, conforme a espcie: alcalides, resinas, pptidos. - As espcies mais perigosas so amanitas (suas toxinas so ciclopptidos)

Fungos e metabolitos txicos - H imensos fungos que produzem micotoxinas.

Fungos como agentes patognicos - A maior parte existe na natureza como saprfito.

- Ciclo de vida da neurospora.

- A designao da espcie tem a ver com o tipo de esporos formados no ciclo reprodutivo. Ex: Basidiomicetes basidiosporos.

Fungos

Agentes recompositores de matria orgnica. Miclio ramificado. Esporos do colorao cultura.

Penicillium

Aspergillus substrato.

Agentes de contaminao. Frutificao (?): miclio eleva-se do

Fungos: crescimento apical e centrfugo.

Quimioterpicos

Actuam sobre: - Peptidoglicano (porque s existem nas bactrias);


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Penicilinas (-lactmicos); Cefalosporinas (-lactmicos); Vancomicina; Cicloserina; Menos utilizados Bacitracina.

-lactmicos grupo de antibiticos mais usados (anel -lactmico fundamental para ter a aco param a produo de peptidoglicano e induzem mecanismos auto-lticos). Penicilina Anel extra de 5 tomos. Cefalosporinas Anel extra de 6 tomos Como que actuam? - Actuam nos ltimos passos de sntese de peptidoglicano (ligaes peptdicas); - Ligam-se s transpeptidases e evitam as ligaes peptdicas peptidoglicano (inibem a sntese de peptidoglicano de novo); resistncia ao

- As bactrias tm que estar em crescimento para serem susceptveis aos lactmicos; - No se pode combinar os -lactmicos com bacteriostticos (deixam de fazer efeito); - Penicillin-binding proteins (PBP) da membrana citoplasmtica; - Os -lactmicos actuam na membrana interna atravessando os poros das Gram-negativas e ligam--se s PBP e inibem a sntese de peptidoglicano bem como activam enzimas auto-lticas; As primeiras bactrias com
resistncia a aparecer Stafilococcus aureus.

- Resistncia penicilina: 1- Enzimas que destroem a penicilina -lactamases (cortam o anel). - Evitar a resistncia: - Adicionar inibidores de -lactamases (ex: cido clavulmico). Augmentin 2 Partes antibitico; 1 Parte de cido clavulmico.

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2- Modificaes nas porinas fazem com que haja menos entrada dos antibiticos; 3- As prprias PBP so modificadas pelas bactrias (no h forma de ultrapassar esta resistncia), no se ligando aos -lactmicos.

- Desvantagem da primeira penicilina (protena G): - Sensvel ao pH cido (da que a penicilina tem que se dar por via intravenosa ou intramuscular para chegar rapidamente ao sangue); Tm surgido vrios derivados de penicilina com vantagens, nomeadamente poderem ser administrados por via oral e actuarem em Gram-negativas.

Antibiticos que actuam na sntese proteica (so bacteriostticas excepto a estreptomicina) - Os ribossomas dos procariontes so um bom alvo para antibiticos. Ex: Cloranfenicol muito txico, evita a ligao dos aminocidos; Eritromicina previne a adio de novos aminocidos; Tetraciclina liga-se subunidade menor do ribossoma; Estreptomicina (bactericidas) distorce a estrutura do ribossoma e adiciona aminocidos errados protena no actua normamente; previne a adio de novos aminocidos (?); faz parte da famlia dos aminoglicosdeos; actividade contra o Mycobacterium tuberculosis. Resistncia por: - Modificao da molcula de aminoglicosdeos por adio de grupos fosfato, acetilo, etc., deixando a molcula de ser activa.

Tetraciclinas (3 a ser descoberto) - So antibiticos de largo espectro; - Toxicidade baixa so muito usadas; - Ligam o Ca (tornam o antibitico inactivo e pode provocar deficincia do tecido sseo, especialmente em crianas) - No se pode tomar com alimentos ricos em Ca (ex: leite). - Resistncia:
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- As bactrias tm mecanismos de excretar o antibitico (bombeiam activamente) e no s so resistentes s tetraciclinas, como tambm a outros antibiticos.

Macrlitos (no so muito usados) Eritromicina Legionella; Claritromicina Legionella.

Outros alvos para os antibiticos

DNA Quinolonas (molculas sintticas) ligam-se girase e inibem o crescimento das bactrias.

Sntese de cido flico (precursor da sntese de purinas e aminocidos importante nos procariotas) PABA precursor do cido flico. As sulfa inibem as enzimas envolvidas na transformao de PABA em cido flico (inibem o crescimento bacteriano); Resistncia s sulfa: Internalizam cido flico (no precisam de o sintetizar).

Mecanismos de resistncia a antibiticos

- Reduzem a permeabilidade da membrana, causando menor penetrao do antibitico; - Inactivam o antibitico; - Alteram o alvo de actuao dos antibiticos (ex: PBP); - Desenvolvem mecanismos metablicos alternativos (ex: sulfas); - Expulsam o antibitico activamente (ex: tetraciclinas) Formas de desenvolver esses mecanismos

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- Mutaes; - Internalizao de material gentico estranho (ex: conjugao transferncia de material gentico entre bactrias).

Presso do antibitico que exercida sobre uma populao de microrganismos para adquirir resistncia importante para o predomnio de estirpes resistentes sobre as sensveis.

Causadores do desenvolvimento de mecanismos de resistncia

- Quando que se toma um antibitico quando no h infeco bacteriana pode levar a resistncias; - No tomar o antibitico at ao fim; - Uso em animais.

NIB- Concentrao inibitria mnima (pode no ser bactericida). MBC- Concentrao bacteriocitica mnima.

Quanto menor o halo (?) (mtodo de) maior a resistncia mtodo quantitativo.

Interaco Microganismo-Hospedeiro (IMP)


Mecanismos de defesa Grande parte dos microrganismos no prolifera no nosso organismo, mas h bastantes que o fazem.

Sistemas que controlam a infeco:


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- Barreiras fsicas; - Sistemas de defesa Imunidade inata;

Imunidade adquirida/adaptativa sistema linftico.

Barreiras
Barreiras muco-cutneas - Tudo o que est entre a pele e as mucosas; - Lmen que est em contacto directo com o exterior; - Mecanismos: secrees, enzimas, pH, outros microrganismos (comensalismo), movimentos mecnicos (lacrimejar, movimentos peristlticos e de deglutio, etc).

Pele - Epitlio queratinizado; - Descamao; - Secrees (suor e sebo cidos gordos ou triglicridos so importantes); - Flora residente: baixam o pH da pele impedindo o desenvolvimento de outros microrganismos; Fermentao cido propinico baixam o pH, tambm so antimicrobianos; Como ultrapassar esta barreira? - Leso (Clostridium perfringens gangrena); - Picada de vector o prprio vector est infectado; - Por injeco; - Por entrada directa (raro): Schistosoma helminta que fura a pele.

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Mucosa Respiratria - Epitlio com clios que batem no sentido de empurrar de dentro para fora; - Destruio do epitlio ciliado durante a infeco por Mycoplasma pneumoniae; - Ciliostase (paragem do batimento ciliar) por Bordetella pertussis Tosse convulsa (somos vacinados). - O epitlio produz muco apanha os microrganismos; - Tem clios (o que faz com que o fluxo seja empurrado para fora do organismo); - Lisozima (existe em muitas secrees): Cliva as ligaes peptdicas no peptidoglicano; Actividade anti-bacteriana porque destri.

Mucosa Intestinal - Clulas de Paneth que secretam pptidos no antimicrobianos; - Bactrias resistem por: - Proteases; - Excreo activa; - Neutralizao; - Reduo da carga negativa; - Modificao do LPS.; - Flora intestinal comensal: - Tem muitas bactrias inofensivas que protegem contra a invaso de patognios; - Estmago poucas bactrias porque muito cido; - Intestino grosso Tem muitas enterobactrias anaerbias estritas, etc.

Flora microbiana comensal - Narinas.


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Papel protector da flora comensal - Competio por nutrientes e receptores; - Produo de bacteriocinas (colicina pela E. coli); - Produo de metabolitos secundrios (AG, propionato).

Infeco - Adeso s superfcies mucosas: - Estruturas: adesinas (pili ou fmbrias). - Invaso das mucosas: - Ex: Helycobacter pylori destri a mucosa; - Salmonella entrica injecta invasinas que promovem a sua entrada nos entercitos por endocitose e replica-se em vesculas. - Shigella sp Induzem a sua entrada e destroem o vacolo onde estavam e replicam-se no citosol, destruindo toda a mucosa intestinal.

Factores Humorais e Celulares


Rapidamente recrutados (imunidade inata)

O sistema do complemento

Bactria com antigenes - anticorpos Ligao ao C1 enzimas que actuam em C4 clivado 1 fragmento maior que fica superfcie. - Cb + Cb Convertase de C (cliva o C) a Cb liga-se superfcie activadora; - Cb + Cb + C - Activa C (clivado) - Cb recruta C, C, C e C polimerizao de C que faz um canal na membrana destruindo a capacidade permevel selectiva da membrana. _______________________________________________________________________________________ 50 Sebenta de Microbiologia
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Activao do complemento via clssica - So recrutados por anticorpos; - Convertases de CS produzidas pela via clssica e pela via alternativa (properdina) onde no intervm anticorpos; - Formao do complexo de ataque da membrana (MAC); - Tudo isto est regulado: - Inibidores de C; - Inibidores de Cb; - O complemento: - As clulas fagocticas tm receptores para clulas com fragmentos de complementos opsoninas (substncias que favorecem a fagocitose); - Fragmentos mais pequenos, ex: Ca Promove vasodilatao inflamao; - O complemento pode ser activado sem anticorpos. Activao lipopolissacardeo, etc.; por estruturas microbianas: cidos teicicos,

- Ligao de lectinas. Via comum: - Produo de convertases poros) Ataque membrana (formao de

Mecanismos dos micrbios para resistirem ao complemento: - Resistncia ao complexo de ataque da membrana (s eficaz sobre uma membrana biolgica): Ex: Bactrias Gram-negativas: LPS com cadeia O longa, MAC liga OMP (protenas da membrana externa) em vez da membrana; Bactrias Gram-positivas: extensa parede de peptidoglicano, activao do complemento em locais remotos da clula bacteriana evitam que o complexo se ligue prpria membrana; Inibio directa.
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- Estimulao ou mimetismo de inibidores endgenos do complemento: Streptococcus: Activao dos factores H, I, FHL-I e C4BP; E. coli e Neisseria meningitidis B: promovem a ligao de factor H ao Cb; Vrus: codifica homlogos (estruturais ou apenas funcionais) de inibidores do complemento; incorporam inibidores endgenos no virio; Candida albicans; Trypanosoma cruzi; Leishmania major.

- Destruio de factores do complemento: Pseudomonas: elastase destri as anafilotoxinas Ca e Ca; Streptococcus: peptidase.

- Bloqueio de receptores de complemento;

- Escape resposta humoral: - Maior falta de activao do complemento; - Cpsulas e mimetismo molecular; - Variao antignica.

Sistema do complemento e entrada nas clulas - Utilizam receptores para os factores do complemento, promovendo a sua entrada nas clulas.

Deficincias no sistema do complemento e infeco - Deficincia de C: infeces piognicas (infeces controladas por neutrfilos pus) ex: pneumonia; _______________________________________________________________________________________ 52 Sebenta de Microbiologia
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- Deficincia de MBL (lectinas) idem (?); - Deficincia de C a C (ex: meningite bacteriana)

Interfero (outro dos factores humorais) - Regulador do sistema imunolgico; - Famlia de protenas agrupadas em tipo 1 e 2; Tipo 1 produzido por todas as clulas nucleadas em resposta a infeces virais; Tipo 2 produzido por clulas do sistema imunolgico activador celular.

O que faz o tipo 1? - Infeco viral nas clulas infectadas. transcrio de genes produo de interfero que actua

1 Sistema

2 Sistema

Oligoadenilato sintetase
Formao

Activao de 1 protena cinase Activao de PKR responde ao

DNA Oligoadenilato activa um RNA (?)

de prot.

Resposta da clula Destruio do RNA viral

Fosforilaes em cadeia

STOP sntese de protenas virais.

Interferindo com o interfero


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- Inibem as cinases, etc.

Leuccitos (clulas brancas do sangue) - Granulcitos Neutrfilos (fagcito profissional); Eosinfilo; Basfilo ( aos mastcitos no sangue) - Moncitos e macrfagos (fagcitos profissionais); - Linfcitos (T, B, NK); - Clulas dendrticas (apresentadoras profissionais de antignios).

Os leuccitos tm origem na medula ssea.

Sistema fagoctico mononuclear - SNC clulas da microglia; - Pulmo macrfagos alveolares; - Fgado clulas de Kupffer; - Bao macrfagos; - Sangue moncitos; - Glomrulo renal tambm tem macrfagos (clulas mesangiais); - rgos linfides; - Articulaes clulas sinoviais tipo I; - Osso osteoclastos.

Ontogenia - Clulas pluripotenciais moncitos. precursores mielides (clulas dendrticas)

Inflamao _______________________________________________________________________________________ 54 Sebenta de Microbiologia


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Leuccitos em movimento - Uropdio (vo frente) (ex: plectina). Adeso de neutrfilos ao endotlio via interaces entre selectinas endoteliais e (?). Selectinas (E, P e L) ligam-se a acares. Ligao fraca = rolling (rolamento) Com molculas prprias do citosqueleto

Inflamao:

Adeso (rolling) Adeso forte via integrinas (reconhecem as imunoglobulinas) diapedese migrao.

Quimiotaxia Neutrfilos so atrados a produtos qumicos bacterianos como o FMLP.

O sistema do complemento e a migrao leucocitria e fagocitose. - Quimiotoxinas (C5a); - Anafilotoxinas (C5a); - Opsoninas (C3b).

Fagocitose

Inicia-se de diferentes maneiras, depois da emisso de pseudopodes (opsoninas) vacolo internizado, amadurece, funde com lisossomas e h hidrlise dos componentes. Os mil patognicos interferem com este processo. Mecanismo de zipper entre o pseudopode e o microrganismo (aderncia aos receptores a toda a volta)
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A e B: modelo zipper (fecho de correr). C: modelo coiling (por enrolamento) os pseudpodes enrolamse volta da legionella.

1 Acidificao do fagossoma ( das coisas mais precoces que ocorrem) (menor pH = menor intensidade luminosa a 485 nm, a partcula deixa de brilhar).

2 Trnsito vacuolar - Fagocitose formao de vacolo (fagossoma), mas a sua membrana modifica-se quando interage com os endossomas (formados por pinocitose), fundindose depois com os lisossomas (s possvel essa fuso depois de todas as alteraes transitrias do fagossoma).

3 Fuso fagossoma lisossoma (isto acontece com bactrias no patognicas)

Grnulos no neutrfilo ( a clula mais assassina que h) - azurfilos (parecidos com os lisossomas, ex: mieloperoxidase, hidrolases); - especficos (lactofenilina).

Pptidos antimicrobianos: PMN; Precursores de PMN; Clulas de Paneth com criptidina.

Exploso respiratria (quando a clula ingere uma partcula estranha d-se uma exploso respiratria elevada produo de radicais de O) - Macrfagos e neutrfilos produzem muitos radicais de O;

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- Tm um sistema de cyt que produz HO (OH + OH), que utilizado para matar as bactrias; - Mieloperoxidase: HO microrganismos que so fagocitados).
Cl

HOCl (lixvia; utilizado para destruir os

- Catalase utilizada pelos microrganismos para se livrar do HO.

Os neutrfilos so muito mais armados que os macrfagos.

Escape aos fagcitos - Escape ingesto (cpsulas, paralizao, escape psonizao); - Invaso de clulas no fagocticas; - Penetrao activa (Toxoplasma gondii); - Utilizao de receptores do complemento; - Subverso da fisiologia dos fagcitos (alterao do trnsito intracelular dos vacolos); - Lise do vacolo fagoctico; - Resistncia aos mecanismos antimicrobianos.

Sobrevivncia intracelular - Inibio da fuso fagossoma-lisossoma (ex: mycobacterium, legionella, toxoplasma); - Escape do fagossoma (listeria induz a polimerizao da actina, de forma a passar de clula a clula sem passar pelo espao intersticial; cometas de actina , tripanossoma, shigella)

Toxoplasma - Se entrar sem ser por fagocitose passa a residir num vacolo que no acidifica.

M. tuberculosis
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- A clula fagoctica no controla a infeco.

M. avium (doente com SIDA)

Imunidade Adquirida 1- Imunidade humoral (anticorpos); 2- Imunidade celular.

Sistema linfide Linfcitos B produzem anticorpos (so especficos por causa dos antignios); Linfcitos T amadurecem no timo. Tm receptores das clulas T (da mesma famlia das imunoglobulinas); Diferenciam-se em CD4 ou CD8 reconhecem antignios ligados ao MHC (complexo maior de histocompatibilidade que se liga a pptidos, processa-os e entrega-os aos linfcitos T).

Funes principais - no produzem anticorpos, activam clulas fagocticas,

Anticorpos (Imunoglobulinas) - 4 cadeias (2 leves unidas por pontes S S - e 2 pesadas) - Fc fragmento cristalizado no varia dentro da mesma classe de imunoglobulinas. - Regio varivel reconhece que estranho. Regies hipervariveis esto na zona de contacto com o antignio.

Produo de anticorpos 1 Expresso dos anticorpos superfcies: cada clula tem o seu anticorpo especfico superfcie. 2 Interaco anticorpo-antignio * Clulas B de memria

Plasmcitos _______________________________________________________________________________________ 58 Sebenta de Microbiologia


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Diferenciao das clulas B Linfcito em repouso grande ncleo que ocupa quase toda a clula. Plasmcito (linfcito activado) rico em RER (para produzir muitas protenas).

Actividade dos anticorpos 1- Neutralizao de toxinas anticorpos ligam-se toxina e impedem que estas se liguem clula-alvo. 2- Neutralizao de vrus o vrus tem molculas superfcie que ligam a receptores das clulas, os antignios ligam-se a essas molculas e neutralizam o vrus. 3- Formao de complexos imunes. 4- Opsonizao anticorpo tem uma poro reconhecida por um receptor na clula fagoctica e esta depois remove os microrganismos. 5- Activao do complemento e lise.

Escape imunidade humoral: estratgias anti-lg Protenas A e G (estafilococos). - ligam fragmento Fc das IgG. Proteases de IgA (Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenza). - destroem os anticorpos (IgA)

Escape : Tripanossomase africana (doena do sono) - Muitos picos de parasita; - A glicoprotena superfcie do microrganimo varia conforme a fase da doena, por isso h vrias variantes mantm-se a infeco. - Este glicoprotena VSG codificada no genoma do parasita e todas as variantes j esto pr-codificadas (a sequncia de formas antignicas , no entanto, sempre a mesma).

Vrus da gripe (influenza)

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- Todos os anos tempos gripe, mas apesar dos anticorpos ficarem l, j no reconhecem os novos vrus. - Os vrus em geral variam a expresso de molculas: - Neuramidade - Hemaglutinina contra estas protenas que se formam anticorpos.

No ano seguinte estas molculas j so diferentes produo de novos anticorpos. Porque que isto acontece?: - Recombinao de segmentos de RNA codificando novas protenas: antigenic shift. - Ou por mutaes mais subtis:: antigenic drift. mutaes. Mutaes ocorrem nas zonas mais distais, mais expostas aos anticorpos, mas no ocorrem no seu interior. As pandemias so provocadas por grandes

O reconhecimento pelo linfcito T: Tem superfcie receptores da clula T no ligam a tudo, s vm peptdeos (MHC - major histocompatibility complex); reconhece peptdeos encaixados no MHC de uma dada clula. O MHC constitudo por 2 tipos de molculas: Classe I Cadeia grande ( + pequena) e classe II 2 cadeias intermdias existem vrios genes a codificar cadeias diferentes > combinao de MHC muito variada num mesmo indivduo > Porqu? Importante para distinguir indivduos. A variabilidade existe porque MHC foram seleccionadas por agentes infecciosos.

Imunidade Celular - O que que os linfcitos T fazem? - Gerem o sistema imunolgico: MHC TH1 Ajudam a diferenciar outros linfcitos.

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Classe II

TH2 Ajudam linfcitos B a produzir anticorpos.

- Activam macrfagos; - Podem ser citotxicos MHC classe 1 sentinelas para o que se est a passar no organismo.

Linfcitos T MHC classe I CD8 Linfcitos T MHC classe II CD4 so estas que so infectadas pelo HIV.

Citotoxidade - Clulas com muitos grnulos que so libertados e formam poros nas membranas da clula alvo morte programada da clula alvo.

Activao dos macrfagos (pelos linfcitos T organiza os macrfagos num conjunto de clulas granuloma (com clulas infectadas no interior) impedindo o crescimento do microrganismo).

Interfero gama: a citocina Th1 - muito importante, sem ele o animal morre mesmo se inoculado com microrganismos incuos.

TH (CD4) TH1 As citoquinas (ex: interfero gama) que libertam so diferentes; Regulam-se e inibem- TH2 -se mutuamente. As citoquinas so Importantes para activar linfcitos B, macrfagos, ou Tc.

As citoquinas so diferentes: Linfcitos B Mastcitos Eosinfilos

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TH1 actividade IL2 IFN TNF

TH2 actividade IL4 IL5 IL10

Schistosomase Cercariae (alojam-se no plexo nervoso) Formas mais pequenas do schistosoma cobrem-se com protenas do prprio hospedeiro e o sistema imunolgico no o reconhece; os seus ovos ficam nos tecidos e provocam sua volta a fibrose do tecido. A fibrose leva estenose/compresso dos vasos, que por sua vez leva a insuficincia biliar.

Estratgias de Escape aos Mecanismos de Defesa Antimicrobianos


- Factores de virulncia; - Toxinas; - Imuno-modulao.

Toxinas Bacterianas - Quase sempre protenas secretadas pelos microrganismos. Exotoxinas so secretadas; Endotoxinas lipopolissacardeo (pertencem prpria bactria). _______________________________________________________________________________________ 62 Sebenta de Microbiologia
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- Actuam ao ligar a um receptor resposta celular; - Destruir a membrana celular (formam poros); - Sistemas enzimticos que ligam a receptores, entram na clula e actuam em diferentes alvos; - Sistemas de injeco de substncias no citoplasma celular.

Toxinas que actuam em reconhecimento de superfcie: 1- LPS 2- Superantignios.

Toxicidade do LPS - Liga a receptores nos macrfagos e este secreta muitas citoquinas que induzem resposta nas clulas, se esta for um neutrfilo e este liberta o contedo lisossomal. - Porque que o hospedeiro tem um receptor para o LPS: - Porque em quantidades pequenas este pode provocar respostas protectoras (ex: coagulao, activao do complemento, etc.); - Mas quantidades grandes de LPS induzem uma resposta txica; - As respostas, que eram dantes protectoras, em grande quantidade provocam uma grande coagulao e leses no endotlio dos vasos sanguneos choque sptico (as respostas so as mesmas, mas neste caso muito exageradas, o que perigoso). (O LPS em si no txico!)

Superantignios - H microrganismos que produzem estas protenas que ligam o TCR e MHC juntando as 2 clulas produo de quantidade exagerada de citoquinas.

Toxinas que destroem as membranas 1- Formadoras de poros Lise celular.


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- A Poros grandes - B Poros pequenos 2- Fosfolipase Destroem a membrana Lise celular.

Toxinas que destroem as clulas fagocticas - Leucocidina de Panlon e Valentine: - Destri neutrfilos (produzida por S. aureus) - Factor letal: - Induz apoptose de macrfagos; - Produzida por B. anthracis.

Hemolisinas estreptoccicas - So toxinas; - Hemlise ; - Hemlise - causa a amigdalite.

Toxinas A/B B liga a 1 receptor na clula (acidifica o endossoma) e permite a entrada na clula e depois faz com que entre o componente A no citoplasma alteram diferentes funes celulares.

Neurotoxinas botulnica e tetnica - Actuam no sistema nervoso; - Fazem ambas a mesma coisa: so proteases que clivam as protena responsveis pela fuso das vesculas com a membrana no terminal pr-sinptico. - Ttano: por contraco contnua dos msculos (impedindo por isso a respirao); - Botulismo: paralisia flcida. _______________________________________________________________________________________ 64 Sebenta de Microbiologia
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Botulismo - A toxina entra no motoneurnio, impede a fuso das vesculas no h contraco muscular. Paralisia flcida.

Ttano - A toxina bloqueia a libertao do neurnio inibitrio est sempre excitado a libertar acetilcolina contraco contnua; paralisia espstica.

Escarlatina (devida toxina eritrognica de S. pyogenes)

Antraz (carbnculo) - A sua toxina do grupo A/B; - Factor letal; - Factor de edema.

Neutralizao das toxinas - Os anticorpos evitam que estas toxinas se liguem ao receptor.

Sistemas de secreo - Sistemas 3 e 4 so como agulhas (parecida com flagelos) que injectam no citoplasma da clula protenas.

- Shigella flexneri (disenteria bacteriana) - Secreo de protenas para o citoplasma de clulas do hospedeiro; - Essas protenas alteram funes celulares diversas nas clulas do hospedeiro; - S presentes em bactrias de Gram- patognicas; - Patogneos intestinais;
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- Outros patogneos.

Sistema tipo III Yersinia inibe a fagocitose por sistemas de secreo do tipo III. E. coli enteropatognica (EPEC) No entram dentro da clula; substituiu a ausncia de receptores da clula hospedeira por uma protena por ela produzida.

Ilhas de patogenicidade - Zonas do genoma de grande dimenso; - Possuem contedos em G + C S do resto do genoma; - Codificam factores de virulncia, nomeadamente os sistemas de secreo de tipo III; - Resultam da transferncia horizontal de genes entre espcies diferentes.

Cpsulas (no s em bactrias, como tambm em fungos (ex: neoformans)

Cryptococcus

- Inibe a fagocitose porque esconde os fragmentos de complemento que fariam a opsonizao; - Inibe a produo de anticorpos.

Mecanismos de controlo da infeco pelo Streptococcus pyogenes (amigdalites)


- Activao do complemento; - Produo de anticorpos e activao do complemento; - Recrutamento de PMN; - Opsonizao e fagocitose por PMN; - Morte por mecanismos oxidativos? Por defensinas? _______________________________________________________________________________________ 66 Sebenta de Microbiologia
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Adesinas: Termo genrico - Fmbrias ou pili ligao de bactrias s clulas epiteliais; - Protenas do invlucro interagem com receptores; - cidos lipoteicicos dos Gram+.

Parasitismo intracelular Os microrganismos tm que se adaptar ao ambiente intracelular e impedir a morte dessa clula. - Capacidade de invadir clulas no fagocticas.

Bactrias Estrutura parede; nomenclatura bsica. Vrus Formas; DNA, RNA. IMP Herpes latncia HIV Plasmdio Malria Metabolismo (aulas prticas) protozorios (Nutrio, Ciclos de vida no preciso detalhar dos fungos sexualidade, etc. e Aspectos fundamentais

Microbiologia Estudo dos organismos demasiado pequenos para serem claramente visualizados a olho nu. Inclui: Vrus, bactrias, protozorios, algas, fungos.

Existem 2 tipos fundamentais de clulas:

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Procariticas Com uma morfologia mais simples que as eucariotas e sem membrana a delimitar o ncleo. Todas as bactrias so procariticas. Eucariticas - Tm um ncleo delimitado por membrana. Como tal o Mundo Microbiano tambm constitudo por esses dois tipos de clulas: - Procariticas Bactrias

Arqueobactrias - Eucariticas Algas Fungos Plantas Animais Protozorios

Actualmente os organismos esto divididos em 3 domnios: - BACTERIA (verdadeiras bactrias ou eubactrias) - ARCHAE - EUCARIA (todos os organismos eucariticos)

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