Acta zoológica lilloana 50 (1–2): 25–30, 2006 25

Estudio cromosómico y de la meiosis de dos especies

de la subfamilia Phaneropterinae (Orthoptera,
Tettigoniidae)

R. de Bigliardo, Graciela 1-2; Ana María Frías de Fernández 2

y Mabel Romero Sueldo 2

1 Facultad de Cs. Naturales e Instituto Miguel Lillo, UNT, Miguel Lillo 205, (4000) Tucumán, Argentina.
2 Fundación Miguel Lillo, Miguel Lillo 251 (4000), Tucumán. Argentina.

RESUMEN — “Estudio cromosómico y de la meiosis de dos especies de la subfamilia Phaneropterinae

(Orthoptera, Tettigoniidae)”. Se analizaron los cariotipos y la meiosis en machos de Stilpnochlora incisa Brunner
y Microcentrum lanceolatum (Burm.) de la subfamilia Phaneropterinae que no habían sido previamente estudiados.
Todos los cromosomas son acrocéntricos, los machos de S. incisa presentan 2n = 31 y los de M. lanceolatum
2n = 23. Los ejemplares pertenecientes a las poblaciones de M. lanceolatum presentan una meiosis irregular
con distintas anomalías que probablemente afecten la viabilidad de las espermátides. S. incisa se caracteriza
por presentar una meiosis regular. Las irregularidades meióticas en las poblaciones de M. lanceolatum están
relacionadas con la formación de puentes y fragmentos libres. Las rupturas espontáneas y fallas en el crossing-
over originarían estas anomalías que habrían determinado disminución de la fertilidad o fallas en la reproducción.
P ALABRAS CLAVE : Cariotipo, meiosis, Microcentrum lanceolatum, Stilpnochlora incisa, Tettigoniidae, Phane-
ropterinae, Orthoptera.

A B S T R A C T — ”A Chromosomic study of two species of the Phaneropterinae subfamily (Orthoptera,

Tettigoniidae)”. Karyotypes and meiosis in males of Stilpnochlora incisa Brunner and Microcentrum lanceolatum
(Burm.) were analysed, belonging to Phaneropterinae subfamily, which had not been previously studied. All the
chromosomes are acrocentric and S. incisa presents 2n = 31 and M. lanceolatum 2n = 23 in males, respectively.
The specimens belonging to the M. lanceolatum population show an irregular meiosis with different anomalies
which probably affect the viability of the spermatides; the studied specimens of S. incisa are caracterized by
an irregular meiosis. The meiotic irregularities in populations of M. lanceolatum are related to the formation of
bridges and free fragments. The spontaneous breakages and faults in the crossing-over would cause these
anomalies which would have produced less fertility or reproduction failures.
K EYWORDS : Karyotype, meiosis, Microcentrum lanceolatun, Stilpnochlora incisa, Tettigoniidae, Phaneropteri-
nae, Orthoptera.

INTRODUCCIÓN

La familia Tettigoniidae pertenece a los cribimos irregularidades observadas en

Ortópteros que se caracterizan por presen-
tar un gran rango de variación en el nú-
mero cromosómico, como así también en
el tipo de mecanismos de determinación
del sexo. En nuestro país, la subfamilia
Phaneropterinae es la más estudiada den-
tro de los Tettigoniidae y el complemento
cromosómico diploide se encuentra entre
2n = 9 y 2n = 39 en los machos (Ferrei-
ra, 1969; Aswathanarayana, 1998).
En este trabajo presentamos observa-
ciones citogenéticas de dos poblaciones de
la subfamilia Phaneropterinae: Stilpnochlo-
ra incisa Brunner, 1878 y Microcentrum
lanceolatum (Burm. 1838), de las cuales
no se conocen antecedentes. También des-
una de estas poblaciones que nos harían
pensar en la existencia de ejemplares hí-
bridos en las poblaciones de M. lanceola-
tum. Este estudio contribuiría a ampliar el
conocimiento de la estructura y evolución
de este grupo.
M AT E R I A L E S Y M É T O D O S
Para este estudio se utilizaron ejempla-
res machos coleccionados en el Parque
Nacional Calilegua ubicado en la provin-
cia de Jujuy (Argentina) entre el Trópico
de Capricornio y los 24º de latitud Sur y
los 64º30’ y 65º W. Los muestreos se rea-
lizaron en los meses de noviembre-di-
26 G. R. de Bigliardo et al.:
Fig. 1. Cariotipo del complemento haploide de una metafase espermatogonial de un ejemplar macho de Stilp-
nochlora incisa. La barra representa 10 µ.
ciembre de 2000-2001. La captura se rea-
lizó con trampa de luz mezcladora (160
Wts) colocadas desde el atardecer y du-
rante 6 horas, a diferentes alturas (Aguas
Negras, 600 m; Mesadas Las Colmenas,
1150 m y Abra las Cabras, 1700 m).
Se coleccionaron 32 ejemplares ma-
chos adultos de S. incisa (n = 15+X) y 8
de M. lanceolatum (n = 11+X). Para el
estudio de la meiosis a los testículos se
los sometió a un choque hipotónico con
ClK 75 mM durante 30’, fijados en meta-
nol-ácido acético (3:1) y la coloración uti-
lizada fue Feulguen, con una hidrólisis
previa con HCl 1N durante 20’ a 60 ºC.
Los folículos se aplastaron con ácido acé-
tico al 45% usándose un medio de mon-
taje neutro para realizar las preparaciones
definitivas. Para la descripción de la mor-
fología de los cromosomas se usó la no-
Fig. 2. Cariotipo del complemento haploide de una metafase espermatogonial de un ejemplar macho de Mi-
crocentrum lanceolatum. La barra representa 10 µ.
Estudio cromosómico y de meiosis en Phaneropterinae
menclatura de Levan et al. (1964). Los
cariotipos se confeccionaron en base a
células gonadales en metafase.
R E S U LTA D O S
Las observaciones realizadas han re-
velado en S. incisa un complemento cro-
mosómico de 2n = 31 (30 + X) en los
machos, formado por cromosomas acro-
céntricos y un sistema de determinación
del sexo del tipo XX: XO. Los cromosomas
autosómicos se diferencian en: dos pares
largos (L1-L2); ocho pares medianos (M3-
M10) y cinco pares pequeños (S11-S15).
El cromosoma sexual X es también acro-
céntrico (Fig. 1).
M. lanceolatum tiene un complemento
cromosómico constituido por 2n = 23
(22A + X0) en los machos. Todos los cro-
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mosomas son acrocéntricos y de acuerdo

a su tamaño se agrupan en tres pares lar-
gos (L1-L3); cinco pares medianos (M4-
M8); tres pares pequeños (S9-S11) y el
cromosoma sexual X se ubica entre los
cromosomas de tamaño mediano (M)
(Fig. 2).
En el análisis de la meiosis en S. in-
cisa no se han detectado irregularidades
en el comportamiento cromosómico en los
distintos estadíos. Observamos paquine-
mas con bloques heterocromáticos gran-
des y fuertemente heteropicnóticos (Fig.
3a); diplonemas con el cromosoma sexual
claramente diferenciado de los autosomas
(Fig. 3b) o bien metafases donde el cro-
mosoma sexual X se aleja de la placa
medial, como ocurre normalmente en los
Ortópteros (Fig. 3c). Nuestras observacio-
nes realizadas en el 100% de los indivi-
duos colectados, evidenciaron comporta-
miento meiótico regular, formando 15 bi-
valentes más el cromosoma sexual X.
Del total de ejemplares colectados de
M. lanceolatum el 66,66% han mostrado
anomalías en diferentes etapas de la divi-
sión celular meiótica. En un elevado núme-
ro de células interfásicas (54%) no se ob-
servaron nucleolos. En cigonemas y paqui-
nemas, donde la cromatina muestra una
condensación normal, el nucleolo se halla
ubicado distante de la masa nuclear (Fig.
4a). En diplonemas y diacinesis se han
observado hasta 3 univalentes con una fre-
cuencia del 70%. En el 70% de las células
en metafase I (Fig. 4b) se evidenciaron
Fig. 3. Meiosis en S. incisa 2 n = 31 (30 A + X) en
cromosomas bivalentes rezagados. Al ana- machos: a) paquitenes con bloque heterocromáticos
lizar la anafase I se detectaron cromoso- (flecha curva), b) diplotene con el cromosoma sexual
mas rezagados en el 75% de las mismas diferenciado del resto de los autosomas (punta de fle-
(Fig. 4e-f) y un 15% de células con puen- cha), c) metafase I: la flecha indica el cromosoma
sexual X. Escala: 10 µ.
tes (Fig. 4c-d) que no llevarían a la forma-
ción de fragmentos en una misma propor-
ción en la telofase I (Fig. 4g). La frecuen- americano; se extienden desde el Sur de
cia de fragmentos libres fue solamente del Estados Unidos hasta Argentina. En nues-
8%, la que es sensiblemente menor que la tro país predominan en el Noroeste, sien-
frecuencia de puentes observados. No he- do abundantes durante los meses de pri-
mos detectado diferencias en el tamaño de mavera y verano. Las observaciones reali-
los fragmentos. Las observaciones de las zadas durante las campañas de recolec-
células en telofase II, también muestran ción indicaron grandes diferencias en el
cromosomas rezagados (Fig. 4h). tamaño de ambas poblaciones. En el caso
Las dos especies estudiadas tienen de M. lanceolatum son escasos los ejem-
una amplia distribución en el continente plares en contraste con S. incisa que se
28 G. R. de Bigliardo et al.: Estudio
Fig. 4a-d. Meiosis en M. lanceolatum 2 n = 23 (22 A + X) en machos: a) cigotene con el nucleolo separado
de la masa cromatínica, b) metafase I con cromosomas rezagados (flechas), c-d) anafase I donde se observan
puentes (triángulo blanco) y fragmentos (triángulo negro).
presentan como una población con un
número elevado de individuos.
No hemos observado significativas di-
ferencias en el comportamiento meiótico
de las especies colectadas a diferentes al-
turas.
DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos nos muestran
una clara diferencia en el comportamien-
to meiótico de ambas especies, que po-
drían correlacionarse con la baja frecuen-
cia poblacional encontrada en una de las
especies (M. lanceolatum). La existencia
en M. lanceolatum de células donde el
nucleolo está ausente en algunos casos o
se encuentra muy alejado de la masa nu-
clear en otros, hace suponer la existencia
cromosómico y de meiosis en Phaneropterinae
de un desequilibrio genético que lleva a
la posibilidad de su eliminación durante
el curso de la división.
La presencia de puentes y fragmentos
sería el resultado de rupturas cromosómi-
cas espontáneas como han sugerido dis-
tintos autores (Lewis y John, 1966; Go-
zálvez y López Fernández, 1981). La fal-
ta de correlación entre el número de
puentes en anafase I y los fragmentos li-
bres en telofase I, se deberían principal-
mente a que cuando los puentes experi-
mentan el proceso de estiramiento, las
cromátidas se separan sin producir ruptu-
ras. Las rupturas que se producen pueden
considerarse consecuencia de errores en
el mecanismo de formación de quiasmas
(Lewis y John, 1966; John y Hewitt,
1968; John, 1987; Camacho, 1985). La
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Fig. 4e-h. Meiosis en M. lanceolatum 2 n = 23 (22 A + X) en machos: e-f) anafase I donde se observan
cromosomas rezagados (flechas) y fragmentos (triángulos negro), g) telofase I: la flecha indica el cromosoma
rezagado y el triángulo negro un fragmento, h) telofase II con cromosomas rezagados (flechas). Las barras
representan 10 µ.

ausencia de una verdadera asociación en- conducir a una no-disyunción, en donde

tre los homólogos, probablemente produc-
to de un rearreglo cromosómico, sería un
impedimento en la resolución de un
quiasma normal. La ocurrencia de una
inversión paracéntrica heterocigótica de-
terminaría la carencia de homología entre
las cromátidas, afectando la frecuencia de
quiasmas y la recombinación, como resul-
tado de un incremento significativo de la
interferencia. Los rearreglos cromosómicos
se correlacionan negativamente con la re-
combinación y la frecuencia de quiasmas.
Las rupturas en la molécula de ADN
son normalmente restituidas por un meca-
nismo de reparación, pero si los factores
que provocan las rupturas persisten, el
mecanismo no opera convenientemente
para reparar el daño y se produce un ele-
vado número de células aberrantes. Por
otra parte si el puente persiste podría
ambos bivalentes se dirigirían al mismo
polo y formarían gametas no funcionales.
Las inversiones son muy comunes en
las poblaciones naturales y bien conocidas
en híbridos interespecíficos (Barton y
Hewitt, 1981, 1985, 1989; Camacho,
1985). Al analizar las aberraciones estruc-
turales dentro de las poblaciones de M.
lanceolatum encontramos una marcada
incidencia de las inversiones. Esto nos
permite sugerir que las mismas son las
responsables del origen de la formación
de ejemplares híbridos.
La falta de homología cromosómica y
la baja frecuencia de recombinación redu-
ce el flujo génico y afectan cualitativa-
mente a las poblaciones estudiadas. Por
otro lado, factores tales, como los rearre-
glos cromosómicos y la no-disyunción, al
originar gametas inviables, inciden cuanti-
30 G. R. de Bigliardo et al.: Estudio
tativamente sobre la población de M. lan-
ceolatum disminuyendo el número de in-
dividuos en la misma.
Los mecanismos meióticos regulares
determinan en los organismos diploides
un perfecto apareamiento y distribución
equitativa de los cromosomas homólogos.
La existencia de mecanismos que modifi-
quen el comportamiento meiótico incidi-
rían en una disminución de la fertilidad
como sugerimos que ha ocurrido en M.
lanceolatum.
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