ESCUELA POLITECNICA DEL EJRCITO INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA QUIMICA AMBIENTAL PRCTICA No.

1 Nombre: Karina De La Cruz PROCEDIMIENTOS DE TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS AMBIENTALES; Y DETERMINACIN DEL OXGENO DISUELTO La confiabilidad del resultado de cualquier prueba inicia con la confiabilidad en el muestreo 1. OBJETIVOS. 1.1 Conocer los aspectos ms importantes de un programa de muestreo. 1.2 Conocer las fuentes de informacin tcnica sobre procedimientos de muestreo 1.3 Determinar la concentracin de oxgeno disuelto en una muestra de agua, mediante el mtodo de Wrinkler MATERIALES Y REACTIVOS. 2.1 Equipos y/o Materiales. Medidor de pH Medidor de conductividad Turbidmetro Botellas Winckler de 300 mL Pipetas graduadas de 1 ml Probeta Bureta Miscelneos: guantes , balde, recipientes para recoleccin de muestras 2.2 Reactivos. Todos los reactivos deben ser grado analtico. El agua a utilizar es destilada. Solucin de sulfato manganoso. Solucin indicadora de almidn Solucin lcali-yoduro cido sulfrico concentrado Solucin valorada de tiosulfato de sodio (0.025 N) 3. PROCEDIMIENTO. 3.1 Toma y preservacin de muestras Se proceder de acuerdo a lo establecido en los Mtodos Estndares para Anlisis de Agua y Agua Residual. 3.2 Determinacin de oxgeno disuelto En la botella Winckler que contiene la muestra a ser analizada agregar 1 mL sulfato manganoso y 1 mL del reactivo lcali-yoduro-nitruro. Ambas adiciones se deben hacer por debajo de la superficie del lquido.

Colocar el tapn, con cuidado para evitar burbujas dentro del frasco, y agitar por inversin varias veces el frasco (aproximadamente por espacio de 20 seg). Espere a que se sedimente el precipitado hasta aproximadamente dos tercios de la altura del frasco. Destapar el frasco y agregar 1 ml de cido sulfrico concentrado, dejando que ste escurra por el cuello del frasco. Tapar y agitar hasta homogenizacin. Dejar reposar 5 minutos, retirar de la botella 97ml de muestra y titular con la solucin de tiosulfato de sodio 0.025 N (previamente colocada en la bureta ) hasta un viraje de color amarillo paja. Adicionar 1 a 2 ml de solucin indicadora de almidn (se produce un color azul) y continuar titulacin hasta el viraje del color azul a transparente.

4. ANLISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS Para la determinacin de calidad de agua, existen lmites de varios parmetros de indicadores de contaminacin que varan en nmero, naturaleza y valor segn la utilizacin a la que vaya a ser destinada el agua; por ejemplo: Agua para consumo humano y uso domstico, agua para preservacin de flora y fauna, agrcola, pecuario, recreativo, industrial, transporte y esttico. En nuestro caso el destino del agua es para consumo humano y uso domstico. (TULAS) En esta prctica se tomaron dos muestras: muestra del rio y muestra de agua potable. La muestra de ro fue tomada en la planta de tratamiento de aguas residuales de la Escuela Politcnica del Ejrcito en el punto 4 (lodos) y otra muestra fue tomada directamente del grifo de agua potable. Estas muestras fueron analizadas posteriormente para establecer su calidad y los parmetros de contaminacin de las mismas. A los resultados obtenidos se los ha comparado con los lmites mximos permisibles para aguas de consumo humano y uso domstico, que nicamente requieren tratamiento convencional, de la NORMA DE CALIDAD AMBIENTAL Y DE DESCARGA DE EFLUENTES: RECURSO AGUA LIBRO VI. (Anexo 1). Existen diversos parmetros para establecer la calidad del agua; los Aspectos FsicosQumicos y los Aspectos Orgnicos. Entre los aspectos Fsico-Qumicos se encuentran: Temperatura del agua, que es un aspecto muy importante por estar relacionado con el oxgeno disuelto; ya que a mayor temperatura menos oxgeno disuelto. La temperatura de las muestras fue de 15C y la temperatura ambiente era de 18C que comparndolo con el lmite de parmetro segn TULAS que es de + o 3 grados de la temperatura ambiente, nos ndica que la temperatura de la muestra de rio es un poco baja de -5C con lo cual nos puede dar una cantidad de oxgeno disuelto alta en la muestra del rio y una cantidad de oxgeno disuelto por debajo de los lmites para la muestra del agua de la llave que estaba a temperatura de aproximadamente 20C. (TULAS) Potencial de Hidrgeno, El pH es un factor muy importante de la calidad del agua, debido a que el pH es un indicador de la acidez de una sustancia. Cuando el nmero de protones iguala al nmero de iones hidroxilo, el agua es neutra. En la acidez el agua disuelve casi todos los iones. El pH sirve como un indicador que compara algunos de los iones ms solubles en agua. El pH del agua puede variar entre 0 y 14. El pH se determina potencio mtricamente mediante la medida del potencial elctrico que se crea en la membrana de un

electrodo de vidrio, que es funcin de la actividad de los iones hidrgeno a ambos lados de la membrana. (Sawyer, 2001) Un pH menor a 4 o mayor a 10 indica la presencia de contaminacin de la aguas debido a cidos y bases fuertes. El lmite del potencial de hidrgeno segn TULAS es de 6 a 9 que al compararlo con el pH de las muestras de ro y del agua de la llave que fue de 7.33 y 7.31 respectivamente, nos indica que las muestras cumplen con esta normativa de consumo humano y uso domstico que requieren nicamente un tratamiento convencional. (TULAS) Conductividad elctrica, Es una medida de su capacidad para transportar una corriente elctrica para variar el tipo y nmero de iones que contiene la solucin; esta depende de la concentracin total de iones, movilidad, balance y temperatura, las soluciones compuestas son buenos conductores. (Sawyer, 2001) La medida de conductividad depende principalmente de la temperatura, debiendo realizarse las mediciones a 20C, si las medidas se realizan a otras temperaturas, se debe corregir el error de conductividad, utilizando un factor F. (Cueva, 2007) La determinacin de conductividad es de gran importancia ya que da una idea del grado de mineralizacin del agua; nuestro valor de conductividad fue de 106 S/cm lo que nos indica que existe un alto contenidos de sales en el agua que necesitan de un tratamiento convencional para poder ser utilizadas para el consumo humano y domstico. Turbidez, La turbidez del agua se genera por la presencia de partculas en suspensin; las cuales sedimentan en diferentes intervalos de tiempo dependiendo de su tamao y es necesario realizar un tratamiento para la eliminacin de las mismas. La turbidez tiene una gran importancia sanitaria, ya que refleja una aproximacin del contenido de materias coloidales, minerales u orgnicas, por lo que puede ser indicio de contaminacin. (Sawyer, 2001) La turbidez no fue medida debido al mal funcionamiento de los aparatos necesarios para su medicin. Y su valor lmite segn TULAS es de 100 UTN. (TULAS) Entre los Aspectos Orgnicos se encuentran: O.D (Oxgeno Disuelto en el agua), el O.D. es la cantidad de oxgeno libre en el agua que no se encuentra combinado ni con el hidrgeno, ni con los slidos existentes en el agua. Los niveles de Oxgeno Disuelto (OD) en aguas naturales y residuales dependen de la actividad fsica, qumica y bioqumica del sistema de aguas. El anlisis de OD es una prueba clave de la contaminacin en la muestra y control del proceso de tratamiento en aguas residuales. (Cueva, 2007) En la muestra del agua de llave se determino que el valor de O.D es de 3.8 mg/l, lo que nos indica que incumple a la norma del TULAS (mayor a 6 mg/L) dando lugar a que esta muestra no es para el consumo humano ni domstico; y que necesito de un tratamiento diferente a uno convencional para poder ser categorizada como agua de consumo humano y domstico; esto se pudo deber a una demora en el anlisis de la muestra y a la mala manipulacin del recipiente as como la mala interpretacin de la titulacin.; otro factor que podra influenciar es la temperatura a la cual se encontraba la muestra; ya que a temperaturas altas como 20C el O.D es bajo. (TULAS) En la muestra de ro se determin que el valor de O.D es de 8.1 mg/L, lo que nos ndica que si cumple con la norma antes mencionada y esta muestra si es aceptable para el consumo

humano y domstico, que nicamente requieren tratamiento convencional. (TULAS) 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Entre los principales factores que influyen sobre los resultados al momento de tomar incorrectamente la muestra, se encuentra la presencia de materia suspendida, la turbidez, el mtodo elegido para la recoleccin y los cambios fsicos y qumicos producidos por la conservacin o la aireacin.

Tomando en cuenta el valor obtenido de oxgeno disuelto de la muestra que se tom del punto 4, la cual se encontraba dentro de los parmetros sealados por el TULAS, esta muestra de agua puede ser de consumo humano y domstico con un tratamiento convencional. Las medidas de pH, alcalinidad, turbidez, temperatura, O.D deben ser medidas in situ para tener datos ms precisos.
Se debe tener cuidado al realizar la toma de la muestra ya que el nivel de oxgeno disuelto es bajo y la exposicin del aire puede llevar a resultados errneos por este motivo se utilizan frascos Winkler. Las muestras se deben analizar lo antes posible una vez llegadas al laboratorio caso contrario se recomienda conservarlas a 4C

6.1 CUESTIONARIO 6.1 Complete la siguiente tabla 1, de Procedimientos oficiales aplicables en Ecuador, para recoleccin y preservacin de muestras instantneas de agua segn lo establecido por las Normas Ecuatorianas (Normas INEN), la EPA (Environmental Protection Angency), as como los SM (Mtodos Estndares para Anlisis de Agua y Agua Residual). Presente sus resultados en forma de tabla comparativa Parmetro Cloruros Nombre y nmero del procedimiento INEN EPA SM Agua potable. D Determination of Determination of eterminacin de Inorganic Anions in Anions by Ion cloruros Drinking Water by Chromatography NTE INEN Ion Chromatography SM 4110 0976:84 EPA Method 300.1 ** Alkalinity Alkalinity Titration (Titrimetric, pH 4.5) 20th Ed. EPA Method 310.1 SM 2320 B Hexavalent Chromium in Drinking Water by Ion Chromatography EPA Method 218.6 Dissolved oxygen EPA Method 360.1 Chromium (2001) by Ion Chromatography(C) SM 3500-Cr-C Oxygen (Dissolved) Membrane Electrode Method (G) SM 4500-O-G

Alcalinidad

Cromo hexavalente Agua Potable: Determinacin de cromo hexavalente NTE INEN 0983:84 Oxgeno disuelto Determinacin del oxgeno disuelto. NTE INEN

Coliformes fecales

1106:84 Determinacin del nmero total de bacterias en placas. NTE INEN 1205:85

Fecal Coliforms in Sewage Sludge (Biosolids) by Multiple-Tube Fermentation using Lauryl Tryptose Broth (LTB) and EC Medium EPA Method 1680 Oil And Grease (Gravimetric, Separatory Funnel Extraction) EPA Method 413.1

Multiple-Tube Fermentation Technique Members of Coliform Group SM 9221

for the

Aceites y grasas (gravimtrico)

**

Oil and Grease Liquid-Liquid, Partition-Gravimetric Method SM 5520B Organochlorine Pesticides SM 6630 Phenols LiquidLiquid Extraction Gas Chromatographic/Mas s Spectrometric Method SM 6420C

Pesticidas rgano clorados Fenoles

** **

Organochlorine Pesticides and PCBs EPA Method 608 Determination of Phenols in Drinking Water by Solid Phase Extraction and Capillary Column Gas Chromatography/Mas s Spectrometry (GC/MS) EPA Method 528

** No estn establecidos los procedimientos.

6.2 Complemente la siguiente tabla comparativa de los procedimientos para recoleccin y preservacin de muestras instantneas de agua. Nomenclatura: P= Recipiente de plstico V= Recipiente de vidrio **= No aplica o no estn establecidos. Parmetro
Tipo de recipiente Mtodo de preservacin Tiempo mximo de preservacin INEN
1 mes

Observaciones generales al procedimiento de muestreo

**

INEN

EPA
PoV

SM
PoV

INEN
Filtracin en el lugar de muestreo y acidificaci n del filtrado a pH <2

EPA
Filtracin a travs de una membrana con dimetro de poro de 0.45 um. Acidificaci n con acido

SM
Acidificar la muestra con acido ntrico a pH <2. Filtrar la muestra y refrigerar a 4C

EP A
6 meses

SM
6meses

Metales

PoV

DBO

PoV

PoV

PoV

Conductividad DQO

PoV PoV

P,V 100 ml PoV

P,V PoV

Grasas y aceites Oxgeno disuelto Pesticidas

Vidrio lavado con solvente PoV

P,V 25 ml V 300 ml

PoV

PoV

PoV

Refrigerar entre 2C y 5C. Guardar en la obscuridad Refrigerar entre 2C y 5C Acidificar con pH < 2 con H2SO4, refrigerar entre 2C y 5C, guardar en la obscuridad Extraer in situ y refrigerar 2-5C Fijar oxgeno in situ y guardar en la obscuridad Refrigerar a 2C-5C

ntrico a pH <2 Refrigerar 4C

Refrigerar

24h

48 h

**

Debe ser de preferencia en frascos de vidrio para concentraciones bajas

Refrigerar 4C H2SO4 pH por debajo del 2. Refrigera r 4C

** Analizar lo ms pronto posible, refrigerar

24 h. 5 das

28 das 28 das

28 das 28 das

Anlisis in situ, con mayor precisin en el laboratorio. Agregar H2SO4hasta pH<2; preferiblemente envase de vidrio para contenidos bajos.

Refrigerar 4C Mantener la muestra a 10C -20C. en la oscuridad Refrigerar la muestra a 4C

Agregar HCl hasta pH<2, refrigerar a 4C **

24h

28 das

28 das

Adicionar agente de extraccin luego de recoger la muestra. O realizar la extraccin in situ. Se debe llenar la botella completamente sin dejar espacio alguno.

4 das

4-8 horas

Anlisis Inmediato

Turbidez Cianuros

PoV

PoV

PoV

Refrigerar entre 2C y 5C Refrigerar las muestras de 2 5C

Refrigerar a 4C. Las muestras deben ser preservadas con hidrxido de sodio a un pH mayor o igual a 12. Y refrigerado a 4C Conservar la muestra a una temperatura 4C 2C

PoV

PoV

PoV

Mantener la muestra a pH 5 hasta 9 con hidrxido de potasio y acido sulfrico Agitar la muestra y refrigerar a 4C Preservar con 2ml de H2SO4 por cada litro para mantener un pH=4

48 horas

7 das

72 horas

Frascos mbar para proteccin contra la luz. Si existe cloro residual se agrega 80 mg de tiosulfato de sodio por litro de muestra antes del muestreo.

24 h.

48 horas 14 das

48 horas

Las celdas utilizadas para la medicin debe estar limpias y claras., medicin in situ. Existen algunas interferencias como agentes oxidantes, sulfuros, cidos grasos, carbonatos, aldehdos, nitratos, azufre, etc. Es donde se necesitan destilar las muestras

48 horas

14 das

Coliformes fecales y totales

PoV Estril

PoV Estril

PoV Estri l

Refrigerar entre 2C y 5C

CONSERV AR A MENOR A 10C

8h

24 30 h

8H

Nitratos

PoV

PoV

PoV

Refrigerar la muestra a 2C-5C

Refrigerar la muestra a 4C

Refrigerar la muestra a 4C

24 horas

48 horas

48 horas

En aguas con cloro o bromo, la muestra se debe recoger en frasco con tiosulfato de sodio. Aguas con concentraciones de metales pesados > 0.01 mg/L, adicionar EDTA (15%) al recipiente antes de esterilizar. 0.3mL por cada 500 mL de muestra. Los recipientes de la muestra deben ser lavados y enjuagados con el agua de la muestra

6.3 En un muestreo es importante que la muestra sea representativa, explicar el significado de este trmino. La muestra representativa es aquella que asegura que los resultados analticos obtenidos representen la composicin actual de la misma. Las muestras representativas se pueden obtener slo colectando muestras compuestas en periodos de tiempo predeterminados o en diferentes puntos de muestreo; las condiciones de recoleccin varan con las localidades y no existen recomendaciones especficas que puedan ser aplicables en forma general.

6.4 Explique los tipos de muestra que se pueden tomar.

1.

Muestra simple o puntual: Una muestra recogida en un lugar y momento determinados. Slo puede representar la composicin de la fuente en ese momento y lugar. Cuando la fuente es bastante constante en su composicin, pueden estar bien representadas por una muestra simple. Como en el caso de algunas aguas de suministro, aguas superficiales, pocas veces, efluentes residuales.

2. Muestras compuestas: Conjunto de muestras sencillas recogidas en el mismo punto en distinto momento por ejemplo, cada hora para ver como evoluciona el vertido. . La mayor parte de las muestras compuestas en el tiempo se emplean para observar concentraciones promedio, usadas para calcular las respectivas cargas o la eficiencia de una planta de tratamiento de aguas residuales. El uso de muestras compuestas representa un ahorro sustancial en costo y esfuerzo del laboratorio comparativamente con el anlisis por separado de un gran nmero de muestras y su consecuente clculo de promedios. No se debe emplear muestras compuestas para la determinacin de componentes o caractersticas sujetas a cambios significativos e inevitables durante el almacenamiento; sino hacer tales determinaciones en muestras individuales lo ms pronto posible despus de la toma y preferiblemente en el sitio de muestreo. Ejemplos de este tipo de determinaciones son: gases disueltos, cloro residual, sulfuros solubles, temperatura y pH. Los cambios en componentes como oxgeno o dixido de carbono disueltos, pH, o temperatura, pueden producir cambios secundarios en determinados constituyentes inorgnicos tales como hierro, manganeso, alcalinidad, o dureza. Las muestras compuestas en el tiempo se pueden usar para determinar solamente los componentes que permanecen sin alteraciones bajo las condiciones de toma de muestra, preservacin y almacenamiento. 3. Muestras integradas: Conjunto de muestras individuales recogidas en distintos puntos al mismo tiempo o con la menor separacin temporal posible. Un ejemplo de la necesidad de muestreo integrado ocurre en ros o corrientes que varan en composicin a lo ancho y profundo de su cauce. Para evaluar la composicin promedio o la carga total, se usa una mezcla de muestras que representan varios puntos de la seccin transversal, en proporcin a sus flujos relativos. La preparacin de muestras integradas requiere generalmente de equipos diseados para tomar muestras de una profundidad determinada sin que se contaminen con la columna de agua superior. Generalmente se requiere conocer el volumen, movimiento, y composicin de varias partes del cuerpo de agua a ser estudiado. La toma de muestras integradas es un proceso complicado y especializado que se debe describir adecuadamente en el plan de muestreo. 6.5 De manera general que precauciones se tienen que tomar en cuenta en el muestreo para el anlisis de compuestos orgnicos

La muestra debe de ser homognea y representativa y no modificar las caractersticas fsicoqumicas del agua (gases disueltos, materias en suspensin etc.) La obtencin de una muestra y su manipulacin implica que esta no debe deteriorarse o contaminarse antes de llegar al laboratorio; Los envases deben estar perfectamente limpios y

preferentemente ser de vidrio ya que los recipientes de plstico pueden provocar escape de algunos compuestos orgnicos voltiles (COV).

El tiempo que se tarda desde la recogida de muestra hasta la entrega en el laboratorio ha de ser mnimo y siempre se ha de transportar en condiciones de refrigeracin ( para evitar la proliferacin bacteriana que puede causar alteraciones en los parmetros a medir) Se debe etiquetar al envase adecuadamente para prevenir confusiones en la identificacin de las muestras Las muestras deben ser selladas para evitar o detectar adulteraciones. Las muestras se deben entregar en el laboratorio lo ms pronto que sea posible despus del muestreo.

7. BIBLIOGRAFA.
1. 2.

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3.

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RODIER, J. Anlisis de Aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Omega, Barcelona, 1981. SAWYER, C.; McCARTY, P. Chemistry for Environmental Engineering. McGraw Hill, New York, 1996

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ANEXO 1 TABLAS DE LOS LMITES MAXIMOS PERMISIBLES PARA AGUAS DE CONSUMO HUMANO Y USO DOMSTICO