www.scielo.br/eq www.ecletica.iq.unesp.

br

Volume 33, nmero 4, 2008

Degradao hidroltica e fotoqumica da amoxicilina na presena de -ciclodextrina

R. A. Bariccatti*, C. Silva, M. L. Souza, C. A. Lindino, M. F. Rosa Centro de Engenharias e Cincias Exatas Universidade Estadual do Oeste do Paran CEP85903-000 Toledo Pr Brasil
*reinaldo0207@brturbo.com.br

Resumo: Este trabalho tem como propsito monitorar a degradao do frmaco amoxicilina na presena e ausncia de -ciclodextrina atravs de tcnicas espectroscpicas. Para isto, foi acompanhada a hidrlise do frmaco protegido da luz por cerca de 400 horas. Os resultados obtidos indicam que, inicialmente, a ciclodextrina no altera a hidrlise da amoxicilina, entretanto, aps 250 horas de monitoramento h um aumento acentuado na hidrlise da amoxicilina quando presente a ciclodextrina. Ao irradiar a amostra com radiao UV, verificamos que as solues contendo -ciclodextrina sofrem uma fototransformao mais lenta (26,8%) que as solues sem -ciclodextrina.. Palavras-chave: Amoxicilina; -ciclodextrina; fotodegradao.

Introduo As ciclodextrinas (CDs) so maltooligossacardeos cclicos constitudos por um nmero varivel de unidades de glucose (geralmente de 6 a 8), unidos por ligaes -1,4. As mais comuns so: -CD (ciclohexamilose), -CD (cicloheptamilose) e -CD (ciclooctamilose). As CDs tm forma de cone truncado com uma cavidade interna cujo tamanho e a forma so determinados pelo nmero de unidades de glucose[1]. Esse interior relativamente apolar, comparado com a gua, formando complexos de incluso com vrias substncias orgnicas[2]. A incluso em CD pode aumentar a estabilidade da molcula hospedeira inviabilizando mecanismo de quebra molecular, por exemplo, frente ao calor, levando a uma reduo na volatilidade ou aumento da resistncia trmica. Para princpios ativos relativamente insolveis em
Ecl. Qum., So Paulo, 33(4): 79-84, 2008

gua, a incluso pode melhorar sua solubilidade ou sua cintica de dissoluo. Uma elevada constante de estabilidade do complexo favorece a passagem do princpio ativo atravs da membrana celular, aumentando sua atividade biolgica[3]. As CDs so capazes de complexar e de estabilizar um largo espectro de substncias, essa caracterstica, associada s outras propriedades das CDs j citadas, faz delas uma grande atrao para um variado nmero de aplicaes industriais. As vantagens em potencial do uso e da disponibilidade das CDs tm tido papel decisivo no crescente interesse pelas mesmas, podendo ser usadas em frmacos, alimentos, cosmticos, etc, para estabilizar frente radiao UV[4], temperatura, oxidao e hidrlise; aumentar a solubilidade em gua[5]; mudanas de propriedades reolgicas; liberao controlada de ingredientes ativos; mascarar odores e gostos desagradveis; aumentar a biodisponibilidade; modelo de enzi79

ma[6]; extrao seletiva, adsoro de poluentes[7] e reatores moleculares[8]. A amoxicilina (Am) um antibitico semisinttico com estrutura bsica da penicilina G que atua em bactrias gram positivas e gram negativas. Formam vrios complexos com ons metlicos[9], tais como Fe(II), Ni(II), Zn(II) etc. Estes ons atuam como catalisadores, degradando a amoxicilina por meio de um processo de solvlise. Ela tambm rapidamente degradada sob condies cidas por causa do anel -lactmico que sucessvel a degradao hidroltica quando o pH desvia significativamente do ponto isoeltrico (pH 4,8). Devido portanto a esta baixa estabilidade propese estudar o efeito da adio de ciclodextrina na degradao da amoxicilina em meio aquoso protegido da luz e sob irradiao UV.

aumento da intensidade devido ao efeito da concentrao (Lei de Beer), as absorbncias molares em 228 e 273nm so 7.440180 e 87011 mol1.L.cm-1 (Figura 1), respectivamente.

Procedimento Foram preparadas solues no pH 7,3 utilizando solues de Na2HPO4 e KH2PO4 0,1 mol/L segundo Morita[10].A amoxicilina foi obtida junto empresa farmacutica Prati-Donadutti. Para os estudos de concentrao foram preparadas solues me de amoxicilina em gua destilada e por diluio obteve-se a concentrao desejada. No estudo de fotodegradao foi preparada uma soluo conforme procedimento anterior, sendo que, antes de se completar o volume com gua foi adicionado um volume de soluo aquosa de ciclodextrina, que em seguida foi exposta irradiao proveniente de uma lmpada de mercrio de 80W de potncia.

Figura 1. Grfico com as absorbncias, em 230 nm (") e 273 nm (#), das solues de amoxicilina em vrias concentraes.

Os resultados de estabilidade da amoxicilina, na ausncia de irradiao UV, em funo do tempo, em soluo aquosa so apresentados na Figura 2. Observa-se o surgimento de uma nova banda de absoro centrada em 350nm que aumenta em funo do tempo. Os estudos da alterao espectral, no comprimento de onda de 350nm, em funo do tempo (de 15 a 20 dias) foram feitos em triplicata e em

Resultados e Discusso Inicialmente, alterou-se a concentrao da amoxicilina para se determinar o coeficiente de absoro molar e verificar a formao de agregados. No foram verificadas alteraes no formato e posio das bandas de absoro com a variao na concentrao do frmaco, indicando que na faixa de concentrao de interesse (1,0x10-5 at 4,0x10-4 mol L-1) no houve formao de agregados ou excmeros do frmaco e sim apenas
80

Figura 2. Grfico com as absorbncias da soluo de amoxicilina pura em funo do tempo (horas), [Am]= 2,0x10-3 mol L-1.
Ecl. Qum., So Paulo, 33(4): 79-84, 2008

trs perodos distintos sem o controle de temperatura, representando o que normalmente ocorreria ao frmaco caso o mesmo fosse estocada em soluo aquosa na prateleira e so mostrados na Figura 3. Observa-se um aumento inicial que segue um comportamento linear nas 150 horas iniciais com a equao da reta de y=0,34t. Aps este perodo temos um comportamento linear com equao de y=-175+1,10t, onde y a relao entre a absorbncia e a concentrao da amoxicilina e t o tempo em horas.

Figura 3. Grfico com as absorbncias em 350nm, normalizada pela concentrao das solues de amoxicilina puras em funo do tempo (horas), realizadas em triplicata (2,0; 2,1 e 3,6.10-3 mol L-1).

Navarro[11] estudou o efeito da temperatura na solvlise da amoxicilina catalisada por ons metlicos em metanol e verificou o surgimento de um produto fluorescente com mximo de excitao em 362nm e de emisso em 442nm que sofre catlise pelos ons Cd2+, Zn2+ e Co2+. Segundo este autor o on que fornece a menor energia de ativao o on Zn2+, cujo valor 34,6kJ mol-1, e na ausncia deste on a energia de ativao de 114,6 kJ mol-1. Em outro artigo o mesmo autor[12] estuda a formao de complexo de 1:1 e 2:1 de (ampilicilina/cdmio) e a constante de velocidade de degradao do complexo 1:1. Alm disto, o autor estuda as alteraes estruturais por meio de RMN e verifica o surgimento de grupamento ster e quebra do anel -lactmico. Pelo espectro de massas de impacto de eltron verifica a formao
Ecl. Qum., So Paulo, 33(4): 79-84, 2008

de um produto que a unio de dois fragmentos da molcula de ampilicilina. Estudos realizados por Ngele e Moritz[13] fornecem resultados semelhantes do espectro de massas para a degradao da amoxicilina em meio cido e em dimetil sulfxido. Segundo os autores, inicialmente, h formao de dois produtos, cido penicilico amoxicilnico e 4hidroxifeniglil amoxicilina. O cido penicilico amoxicilnico origina mais duas outras substncias, cido penilico amoxicilnico e a amoxicilina dicetopiperazina. Segundo estes autores, a solvlise da amoxicilina leva formao de um ster ou cido da amoxicilina, dependendo do solvente, e a formao de um produto que se origina de dois fragmentos da amoxicilina. Assim, as modificaes espectrais observadas nas Figuras 2 e 3 podem ser atribudas a estas modificaes estruturais, onde h formao de um produto final que absorve em 350nm. O efeito da adio de -CD na soluo de amoxicilina mostrado na Figura 4. Segundo os resultados a ciclodextrina causa um aumento considervel na absorbncia aps um perodo de incubao de cerca de 250 horas. Yannakopoulou[14], estudando a hidrlise da ampilicilina e amoxicilina, no verificou a alterao da velocidade de hidrlise dos antibiticos na presena de ciclodextrina. Aki[15], em estudos calorimtricos, no verificou alterao na velocidade de hidrlise na presena de derivados da ciclodextrina em pH 6, mas em pH 2 verificou alterao significativa na velocidade de hidrlise. Os resultados mostrados na Figura 4 concordam com os resultados dos ambos os autores, j que estes estudaram a hidrlise em uma faixa de tempo inferior observada neste trabalho. Entretanto, o forte aumento observado em 350nm aps um perodo de cerca de 250 h. no foi relatado por estes autores e est sendo associado a uma autocatlise cida tambm observada para a soluo de amoxicilina pura (Figura 3), na qual, a -CD favorece este processo acentuadamente. A estrutura da amoxicilina permite o encapsulamento por ambos os lados da molcula, o que poderia influenciar a degradao de cada um dos cromforos de forma diferente. Assim, caso o encapsulamento ocorresse apenas no anel benznico este seria protegido da degradao ao passo que o segundo cromforo no o seria, bem como, o
81

Figura 4. Grfico com a absorbncia em 350nm das solues de amoxicilina sem -CD ($) e amocixilina com -CD (") em funo do tempo (horas).

oposto tambm poderia ocorrer. As transies associada ao anel benznico (-*) fornece bandas mais intensas e em comprimento prximo de 200nm, j a carbonila ocorrem em comprimento de onda superior a 250nm e so bandas de baixa intensidades, assim, monitorando os diferentes comprimentos de onda podemos verificar a transformao de diferentes cromforos. A Figura 5 apresenta o efeito da radiao UV nas solues de amoxicilina e amoxicilina/CD, dentre outras alteraes, observa-se mudanas na intensidade de absoro nas regies de 195 e 225 nm. Para a regio de 195nm, ocorre uma reduo contnua da absoro para as solues com amoxicilina e amoxicilina/-CD, esta reduo foi de 45,2% na soluo de amoxicilina (absorbncia de 1,99-1,09) e na soluo amoxicilina/-CD foi de 36,3% (absorbncia de 2,04?1,30), aps 120 minutos de irradiao. Em valores absolutos, houve uma reduo na degradao do cromforo que absorve em 195nm de 9%. Possivelmente, nesta regio espectral ocorre a absoro de luz dos derivados benznicos que so encapsulados e estabilizados pela ciclodextrina. Para a regio de 225nm (Figura 5) observa-se um aumento na absorbncia nos primeiros 30 minutos de irradiao para em seguida ocorrer uma reduo contnua da absorbncia desta regio, tanto na soluo de amoxicilina e amoxicilina/-CD. Para registrar este aumento de absorbncia foi monitorado o aumento da
82

Figura 5. Grficos mostrando as absorbncias das solues de amoxicilina com diferentes tempos de irradiao. Grfico principal, solues contendo amoxicilina sem -CD e grfico inserido solues de amoxicilina com -CD, [Am]=5,0x10-5 mol L-1 e [-CD]=4,0x10-3 mol L-1. absorbncia em 228 nm com irradiao de 3 em 3 minutos durante 21 minutos iniciais, este resultados so apresentados na Figura 6. As retas ajustadas para estes valores possuem inclinaes diferentes, indicando diferentes velocidades de formao desta banda. A inclinao da reta para a soluo de amoxicilina de 0,00410,0003 unidades de absorbncia por minuto, para a soluo de amoxicilina/-CD a inclinao de 0,00300,0001 unidades de absorbncia por minuto, ou seja, h uma reduo na velocidade de

Figura 6. Grfico com a absorbncia em 228nm da soluo de amoxicilina sem -CD (") e com -CD (#), [Amox.]= 9,8x10-5 mol L-1 e [CD]=4,0x10-3 mol L-1.
Ecl. Qum., So Paulo, 33(4): 79-84, 2008

formao desta banda de cerca de 26,8%, quando comparada com a soluo sem -CD. Ou seja, ao irradiar a amoxicilina ocorre uma fototransformao nos primeiros 21 minutos que induz um aumento de absorbncia em 228nm, entretanto, este aumento ocorre de maneira mais lenta na soluo contendo -CD.

Concluso Nestes estudos observaram-se dois efeitos distintos. Na ausncia de irradiao a amoxicilina no estabilizada pela -CD, no alterando o comportamento da absorbncia em 350 nm num perodo de 250 horas, aps este perodo verifi-

cou-se um aumento da absorbncia em 350nm que intensificado pela adio de -CD. Na presena de irradiao UV, verificouse que a -CD causa uma estabilizao na amoxicilina de aproximadamente 26,8%, reduzindo a velocidade de transformao desta substncia em um fotoproduto, que possui uma banda mais intensa em 228nm. Para a parte aromtica da amoxicilina ocorre um processo de degradao fotoqumica contnua, reduzindo sua absorbncia na regio de 190 nm, entretanto, a -CD possui um efeito estabilizador neste cromforo na ordem de 9%.

Recebido em 23 de maio de 2008 Aceito em 05 de novembro de 2008

R. A. Bariccatti, C. Silva, M. L. Souza, C. A. Lindino, M. F. Rosa. Hydrolytic and photochemistry degradation of the amoxicillin in -cyclodextrin.

Abstract: This work has like purpose monitors the degradation of the drug amoxicillin in the presence and absence of -cyclodextrin, through techniques spectroscopy. For this, there was accompanied the hydrolysis of the drug protected of the light for around 400 hours. The results indicate that, initially, the cyclodextrin does not alter the hydrolysis of the amoxicillin, however, after 250 hours there is an increase of the hydrolysis of the amoxicillin when present at cyclodextrin. Another variable was the irradiation of the sample with radiation in the region of the UV, we see that the solutions containing cyclodextrin suffer a slower phototransformation (26,8%) than the solutions without -cyclodextrin, when irradiated by UV radiation. Keywords: Amoxicillin; -cyclodextrin; photodegradation.

Referncias
[1] Y. D. Lee, H. S. Kim, Biotechnology and Bioengineering 37 (1991) 795801. [2] Szejtli, J.; Cyclodextrin Technology, Kluwer Academic Publishers, 1988. [3] D. Duchne, C. Vaution, F. Glomot, Drug Dev. Ind. Pharm. 12(1113) (1986) 21932215. [4] R. A. Bariccatti, et al., Acta Scientiarum Health Science 27 (2005) 171-175. [5] K. Uekama, Journal Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry 44 (2002) 3-7. [6] M. L. Bender, Journal American Chemistry Society 89 (1967) 3242-3253. [7] G. Crini, et al., Separation and Purification Tecnology 53

(2007) 97-110. [8] L. Barr, et al., J. Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry 50 (2004) 19-24. [9] M. A. Zayed, S. M. Abdallah, Spectrochimica Acta Part A 61 (2005) 2231-2238. [10] R. M. V. Assumpo, T. Morita, Manual de solues, reagentes e solventes, Edgard Blucher, So Paulo, 1968. [11] P. G. Navarro, et al., Analyst 123 (1998) 2263-2266. [12] P. G. Navarro, et al., Talanta 46 (1998) 101-109. [13] E. Ngele, R. Moritz, J. Am. Mass. Spectrom. 16 (2005) 1670-1676. [14] K. Yannakopoulou, et al., Organic & Biomolecular Chemistry 4 (2006) 1297-1304. [15] H. Aki, et al., J. Thermal Analysis and Calorimetry 77 (2004) 423-435.

Ecl. Qum., So Paulo, 33(4): 79-84, 2008

83