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w.bittner@uandresbello.edu
Periodontitis
Gingivitis
Dependiente slo de la placa Modificada por factores sistmicos Modificada por medicamentos Modificada por la desnutricin De origen bacteriano especfico De origen viral (herpes) De origen fngico (eritema lineal) De origen gentico (fibromatosis) Manifestaciones de enf. sistmicas Lesiones traumticas
Enfermedad periodontal
Se clasifican de acuerdo a: El grado de progresin de la enfermedad (crnica, agresiva) La distribucin de la lesin (localizada, generalizada) Grupo atareo (juvenil, adulta) En asociacin con desrdenes sistmicos o del desarrollo
Enfermedad periodontal
Sano Gingivitis
Periodontitis
Socransky postul las siguientes modificaciones para determinar los patgenos periodontales:
i) La mayora de las bacterias blanco deben estar asociados a la periodontitis. ii) La eliminacin de las bacterias blanco resulta en la detencin de la progresin de la enfermedad. iii) Debe ser posible determinar la respuesta del hospedero frente a las bacterias blanco. iv) Si es posible, la patogenicidad debera ser demostrada en un modelo animal adecuado. v) Debera ser determinado un nico mecanismo de patogenicidad.
Se han descrito ms de 100 especies presentes en la microflora subgingival que no son cultivables Se estima que existen unas 300 especies desconocidas
Actinomyces spp.
C. matruchotii
iii) No adherida o flotante: Se dispone entre la placa adherida al diente y la adherida al epitelio. No necesitan adherirse, slo establecen uniones dbiles. Microflora similar a la de la placa adherida al epitelio. Compuesta principalmente por Gram negativos y bacilos mviles. Porphyromonas, Prevotella spp., Fusobacterium, Selenomonas, Aggregatibacter, Eikenella y Treponema denticola (hacia el fondo donde al Eh es ms negativo). Inducen y aceleran el proceso inflamatorio.
Fusobacterium
Capnocytophaga
Progresin de la enfermedad
i) Inicialmente la enfermedad periodontal se manejaba eliminando la placa bacteriana. ii) Posteriormente se determin que microorganismos como bacterias eran responsables de la patologa. iii) En un comienzo la estrategia para determinar el o los agentes etiolgicos consista en comparar la composicin microbiana de la placa subgingival entre sitios sanos, gingivitis y periodontitis. iv) En la actualidad, con el desarrollo de la biologa molecular, las metodologas de diagnstico, tratamiento y estimacin de riesgo futuro se basan en el seguimiento y cuantificacin de factores de virulencia.
Hoy en da es posible determinar el nmero de ciertos patgenos periodontales, as como las propiedades de toxinas y enzimas destructoras de tejidos.
Progresin de la enfermedad
Enzimas proteolticas extracelulares: i) Pueden degradar protenas de la matriz extracelular. ii) Pueden degradar inhibidores de proteinasas de la matriz del hospedero. iii) Pueden activar metaloproteinasas de la matriz del hospedero. iv) Pueden inducir citoquinas pro-inflamatorias involucradas en la destruccin tisular y reabsorcin sea. v) Pueden alterar las defensas del hospedero: a) degradando receptores celulares b) degradando protenas del complemento c) degradando anticuerpos y ciertas citoquinas
Progresin de la enfermedad
Utilizacin de:
a) genmica: secuenciacin de genomas completos y estudios de la regulacin gentica de potenciales factores de virulencia.
C. gracilis
C. rectus P. intermedia P. nigrescens M. micros F. nuc. nucleatum F. nuc. polymorphum F. nuc. vincentii F. periodonticum E. nodatum S. noxia
C. showae
Punto isoelctrico
A. actinomycetemcomitans b
Prevotella intermedia/nigrescens, Eikenella corrodens, Campylobacter rectus, Eubacterium nodatum, Fusobacterium nucleatum, Micromonas micros y Streptococcus intermedius
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Cocobacilo Gram negativo, No formador de esporas, Inmvil, Anaerobio facultativo Microaeroflico y Capnoflico
Protena EmaA
i) Adherencia a colgeno
Citoquinas: IL-8 IL-1 TNF (Factor de necrosis tumoral ) PGE2 (Prostaglandina E2)
Aa estimula TH1
A. actinomycetemcomitans posee: i) serina proteasas ii) proteasas que degradan IgG (todas), IgA e IgM Desregulacin de la respuesta inmune Degradacin de fibringeno y colgeno
RANKL
Enfermedad periodontal
Sano Gingivitis
Periodontitis
Treponema denticola
Treponema denticola
Factores de adherencia e invasin: Protena Msp (major surface protein)
i) (53 KDa): se une a fibringeno, fibronectina y laminina unin de la bacteria a clulas del hospedero. Promueve la destruccin de clulas epiteliales (mecanismo desconocido), formacin de poros? ii) (64 KDa): se une a complejos de quimiotripsinas y a fibroblastos gingivales. a) Poseen efecto citotxico sobre: Fibroblastos gingivales Linfocitos Clulas epiteliales Eritrocitos
Treponema denticola
Factores de adherencia e invasin: Flagelo
Permite un movimiento tipo atornillador. Esto le permite moverse en microambientes muy viscosos (FCG), penetrar el epitelio gingival y tejido conectivo.
b) Aumentan la respuesta inflamatoria: Promueven la desgranulacin de PMN (colagenasas, gelatinasas) y metaloproteinasas de la matriz (MMP-8 y MMP-9)
El flagelo est compuesto por tres filamentos: FlaA (38 KDa) FlaB1 (35KDa) FlaB2 (35 KDa) FlaB3 (34 KDa)
Treponema denticola
Factores que modulan el sistema inmune: Enzimas proteolticas extracelulares. Trepolisina o Dentilisina
i) hidroliza: fibringeno, transferrina, gelatina, colgeno tipo IV, IgG e IgA. ii) degrada: bradiquinina, sustancia P y angiotensinas I y II. iii) degrada: inhibidores de proteasas como 1-antitripsina, antitrombina III, etc. iv) induce: apoptosis en clulas epiteliales.
La habilidad de degradar protenas de la matriz, protenas regulatorias de proteasas y de la respuesta inmune contribuye a la destruccin incontrolada del tejido periodontal y progresin de la enfermedad"
Treponema denticola
Factores que modulan el sistema inmune: Enzimas proteolticas extracelulares. Cistalisina
Hidroliza protenas y libera: i) piruvato: utilizado como fuente de energa ii) NH3: alcaliniza el medio. iii) H2S: es txico para glbulos rojos y otras clulas presente en el epitelio (mal olor).
La cistalisina hidroliza puentes dislfuro, por lo tanto, inactiva inmunoglobulinas, citoquinas, etc, desregulando la respuesta inmune. "
Tannerella forsythia
Factores de virulencia:
Se sabe muy poco de sus factores de virulencia porque es muy difcil de cultivar en el laboratorio. LPS Parecido al de P. gingivalis (reacciones cruzadas en ensayos de ELISA) Enzimas proteolticas extracelulares Enzimas tipo tripsina: Serina proteasas (70 KDa y (81 KDa) Cistena proteasa hemoltica PrtH (48KDa)
Bacilo fusiforme Gram negativo, Sacaroltico, Anaerobio estricto, Requiere cido N-acetilmurmico
Otros antgenos
Protena tipo GroEL BspA (protena de superficie). Ttulo elevado de anticuerpos en pacientes con periodontitis crnica. Se unira a CD14 y TLR-4?! y a fibringeno.
La invasin estimulara la expresin de receptores ICAM-1, VCAM-1, Selectinas P y E. Reclutamiento de linfocitos aumentando la inflamacin.
La inmunizacin con pptidos fimbriales protege de la prdida de hueso en un modelo murino.
Antgeno O: tetrasacridos fosforilados i) Rha-P (1-3) Gal-P (1-3) Glc-P (1-4) GlcNAc-P ii) Glc-P (1-4) Rha-P (1-3) GalNAc-P (1-3) Gal-P
El LPS de P. gingivalis induce la reabsorcin sea estimulando clulas mieloides (macrfagos) y no-mieloides (fibroblastos). Adems bloquea la inmunidad adquirida estimulando clulas de la lnea linfoide (Th2)
kgp
Gingipains
Estimulacin de la sntesis de MMP por los fibroblastos gingivales (aumento local de la actividad proteoltica)
Degradacin de pptidos antibacterianos (evasin de la Des-regulacin de la coagulacin actividad antibacteriana) y las vas fibrinolticas (liberacin de trombina, reabsorcin sea y tendencia al sangramiento)
Prevotella intermedia/nigrescens
Fusobacterium nucleatum
Fusobacterium nucleatum: subsp. nucleatum subsp. vicentii subsp. polymorphum
F. nucleatum mejora la unin de P. gingivalis en clulas del hospedero. Agrava la prdida de hueso alveolar e induce una mayor respuesta inflamatoria en comparacin con la mono infeccin en modelo murino. Efecto sinrgico en la destruccin de tejido blando en un modelo murino.
Bacilo Gram negativo, Anaerobio estricto, Algunas especies presentan pigmentos negros
Reduccin de la placa
Los microorganismos son necesarios, pero no suficientes para el desarrollo de la Enfermedad Periodontal. El rol de la respuesta inflamatoria del hospedero es un determinante crtico de la susceptibilidad y severidad de la Enfermedad Periodontal.
Medios de cultivo
1.- AGAR SANGRE HEMINA-MENADIONA: Tripticasa sangre de cordero hemina menadiona (Factor X) Flora anaerbica total del surco
2.- AGAR TSBV: Tripticasa levadura - suero de Caballo bacitracina - vancomicina Especies de Aggregatibacter (AA) 3.- AGAR BRUCELLA BACTEROIDES : Agar cristal violeta sangre de caballo eritrocitos humanos hemolizados Especies de Bacteroides (Tannerella) 4.- AGAR COLUMBIA : Agar casena digerida pancretica extracto de levadura extracto de carne almidn de maz cloruro de sodio hemina menadiona Especies de Porphyromonas y Prevotella, adems de flora anaerbica total
Agar TSBV
Microflora subgingival total
Monitoreo Periodontal
ndice de hidrgeno sulfurado
Como la microflora periodontal es eminentemente proteoltica, se detecta un sub producto del metabolismo proteico que es el hidrgeno sulfurado. Se utilizan trozos de papel filtro embebidos en sub acetato de plomo.
Test de BANA
Detecta hidrlisis del sustrato N-BENZOIL-DL-ARGININA-2-NAFTILAMIDA (BANA) Esta hidrlisis la realizan slo las bacterias que poseen TLE (proteasas tipo tripsina) Treponema denticola Porphyromonas gingivalis Tannerella forsythia Se realiza con tarjetas (perioscan) que contienen los reactivos en las cuales se coloca la muestra subgingival o de saco periodontal.