UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS Escuela de Ciencias Qumicas-Programa de Qumica de Alimentos Laboratorio de Bioqumica I

Anglica Mara Garca T, Oscar Hernando Pardo C. 5. PROPIEDADES QUMICAS DE LAS PROTENAS
Fecha: 20 de Septiembre de 2011 Material a traer por parte del estudiante: huevos (2 por grupo), guantes y tapabocas, cinta para rotular. MATERIALES Y REACTIVOS Materiales: 10 tubos de ensayo, pipetas de 1 y 5 mL, estufa, gradilla, vasos de precipitados de 400 mL y dos de 100 mL, probeta de 10 y 50 mL, esptula, pinzas para tubos de ensayo, bao de agua. Reactivos: NaOH 2.5N, TCA al 10%, NaOH al 40% y al 20%, sacarosa, acetona, acetato de plomo 0.2M, reactivo Biuret, cido actico al 5%, cido ntrico, cido clorhdrico casena, solucin de aminocidos, solucin desconocida, hidrxido de bario al 4.5%, sulfato de zinc al 5%, agua destilada. CONSULTA NECESARIA PREVIO A LA PRCTICA Fundamento qumico de las diferentes pruebas para el reconocimiento cualitativo y propiedades de protenas (pruebas indicadas en la prctica), estructura primaria de protenas, el enlace peptdico. PROCEDIMIENTO 1. Desnaturalizacin o coagulacin de protenas: Preparar el siguiente set de tubos teniendo en cuenta las especificaciones dadas: Tubos 1 2 3 4 5 Reactivos (mL) (mL) (mL) (mL) (mL) Clara de huevo 1 1 1 1 1 cido actico al 5% 1 NaOH 2.5N 1 Acetona 2 Acetato de plomo 1 Para el tubo 1: coloque la muestra en un bao mara por unos minutos. Para el tubo 2: adicinele el cido actico gota a gota, agite y eventualmente caliente. Para el tubo 3: adicione el hidrxido gota a gota. Para el tubo 4: adicione la acetona gota a gota y agite Para el tubo 5: adicione el acetato de plomo gota a gota, agite. Realizar el respectivo anlisis cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido y que efecto es el que genera la desnaturalizacin; indique otros factores fsicos y qumicos que pueden ser causantes de la precipitacin de protenas. 2. Reaccin Xantoproteica Tome entre 2-3 mL de clara de huevo y adicinele 1 mL de HNO3 concentrado. Caliente en agua hirviendo, enfre en agua y adicione gota a gota con NaOH al 40%. Realizar el respectivo anlisis cualitativo, indicando que tipo de sustancias tiene la clara de huevo y la reaccin qumica ocurrida con este reactivo.

3. Reaccin de Biuret Tome un tubo de ensayo y coloque 3 mL de clara de huevo, adicione 2 mL de reactivo Biuret. La aparicin de una coloracin violeta-roscea es indicador positivo de la prueba. Realizar el respectivo anlisis cualitativo, indicando que tipo de sustancias tiene la clara de huevo y la reaccin qumica ocurrida con este reactivo. 4. Reaccin de los aminocidos azufrados Tome 2 mL de clara de huevo y adicinele 1 mL de NaOH al 40%, adale 5 gotas de acetato de plomo 0.2M. Caliente el tubo hasta ebullicin. Realizar el respectivo anlisis cualitativo, indicando que tipo de sustancias tiene la clara de huevo y la reaccin qumica ocurrida en este proceso. 5. Solucin libre de protenas Preparar el siguiente set de tubos: Tubos 1 2 3 4 Reactivos (mL) (mL) (mL) (mL) Casena 1 Solucin de aminocidos 1 Solucin clara de huevo 1 Solucin desconocida 1 Hidrxido de bario al 4.5% 4.5 4.5 4.5 4.5 Sulfato de zinc al 5%. 4.5 4.5 4.5 4.5 Agite muy bien cada tubo preparado. Filtre el contenido de cada tubo y describa el aspecto de cada uno de ellos. Adicione 1 mL del reactivo Biuret. Realizar el respectivo anlisis cualitativo, indicando lo ocurrido en cada parte del proceso. 6. Prueba de Lieberman Tome 2 mL de la clara de huevo y agrguele unos pocos cristales de sacarosa y 5 mL de HCl concentrado. Caliente a ebullicin durante aproximadamente 7 minutos. Realizar el respectivo anlisis cualitativo, indicando que tipo de sustancias tiene la clara de huevo y la reaccin qumica ocurrida en este proceso. BIBLIOGRAFIA BOHINSKI Bioqumica. Editorial Pearson. 1995 GARZON, Guillermo. Fundamentos de Qumica General. Editorial McGraw Hil. 2000. CAMPBELL, Mary y FARREL, Shawn . Bioqumica. Editorial Thomson. Mxico. 2004 PACHECO LEAL, Daniel. Bioqumica Medica. Editorial Limusa. Mxico. 2005