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31/05/2011 Jaferson dos santos BIOMEDICINA

CURSO: BIOMEDICINA TURMA: 2011. 1 TURNO: MATUTINO DISCIPLINA: Biologia DOCENTE: Marcio DISCENTE: Jaferson dos Santos

RELATORIO DE BIOLOGIA

SALVADOR, MAIO DE 2011.

. BIOLOGIA MITOSE OBJETIVO: Observar e identificar as diferentes fases da mitose em que se encontravam as clulas do meristema da cebola (Allium cepa). INTRODUO A continuidade de uma espcie depende

fundamentalmente do processo de multiplicao celular. No caso dos organismos unicelulares, a diviso da clula leva a um aumento do numero de indivduos (reproduo assexuada) Nos organismos pluricelulares, a diviso celular produz um crescimento dos indivduos pelo aumento dos nmeros de clulas em seu corpo, ou os conduz a reparao de clulas perdidas, ou ainda, os capacita reproduo da sua espcie atravs da formao de clulas reprodutoras (esporos e gametas). Essa multiplicao se deve ao diversos eventos sofridos pela clula, o qual denominamos ciclo celular e detalharemos a seguir, dando nfase apenas sobre o que acontece com os cromossomos em cada fase, sem preocupao com os demais orgnulos. No ciclo de vida das clulas, chamado ciclo celular, devemos considerar dois momentos: a interfase e a mitose. Tanto a mitose quanto a interfase apresentam-se subdivididas em fases ou perodos, apenas por finalidade didtica, porque todos os processos so contnuos. A fase mittica a fase do ciclo celular onde ocorrem duas divises, a diviso do ncleo mitose - e do citoplasma citocinese. A mitose integra 4 subfases: prfase, metfase,anf ase e telfase. A mitose consiste numa diviso dos cromossomos para uma diviso da clula, isto , uma clula com certo numero de cromossomos se divide dando origem a duas clulas-filhas cujo material gentico idntico ao da clula inicial. Todas estas fases se caracterizam por uns dados conjuntos de fenmenos: Interfase na interfase que ocorre a duplicao dos cromossomos, antes de se iniciar a diviso celular. A interfase compreende trs subfases: G1:

o perodo que se segue a diviso celular e antecede a duplicao do DNA (G tem como significado Gap e o traduzimos como intervalo) S ou Sinttico: fase da duplicao (sntese do DNA) G2: etapa final da interfase em que existe o dobro de material nuclear de G1, mas o numero de cromossomos ainda o mesmo. Prfase (pro = antes) A prfase a primeira fase da mitose. Nessa etapa, os cromossomos j duplicados comeam a se espessar, tornando-se visveis, os centrolos duplicados afastam-se, aparecendo entre eles as fibras do fuso mittico; a carioteca se desintegra, e os cromossomos ficam livres no citoplasma. Cada cromossomo formado apresenta-se formado por duas cromtides, unidas pelo centrmero. Metfase (meta = depois) No citoplasma, durante a prfase, formam-se fibras de um sistema chamado mittico. Cada cromossomo duplicado prende-se s fibras do fuso pelo centrmero. a metfase. Nessa fase os cromossomos chegaram ao mximo de seu espessamento e visibilidade; cada cromossomo prende-se a fibra do fuso, pelo seu centrmero, na regio mediana da clula. Anfase (Ana = para cima) Os centrmeros duplicam-se; as fibras do fuso se encurtam, levando cada cromtide a um dos polos da clula. As duas cromtides separadas passam a ser chamadas cromossomos irmos. Telfase (telo = final). Nesta fase os cromossomos tornam-se menos visveis; formam-se as cariotecas em volta dos dois lotes de cromossomos; aparecem novamente os nuclolos; o citoplasma se divide por estrangulamento, nas clulas vegetais, aparecem algumas vesculas na regio mediana da clula (fragmoplasto), nas quais se acumula o material que formar a parede celular. Citocinese Terminada a mitose, vai ocorrer ento a citocinese, que consiste na separao do citoplasma da clula-me, em duas partes iguais, originando assim as duas novas clulas.

MATERIAIS Microscpio ptico

Preparao definitiva com clulas de um meristema cebola (Allium cepa) Papel toalha REAGENTE leo de imerso METODOLOGIA Liga-se o microscpio e higienizam-se com papel toalha as lentes e objetivas Se pega uma lamina com preparao de clulas da cebola Higieniza-se a lamina com papel toalha Observa-se a lamina definitiva ao microscpio ptico. Se necessrio recorre- se a objetiva de imerso. Coloca-se uma gota de leo de imerso Observa-se a anota-se os resultados Fases da mitose em desenho e microscpio ptico respectivamente Prfase Metfase Anfase Telfase .

DISCUSSO DOS RESULTADOS A descrio do processo mittico indireta, baseando-se na observao de clulas mortas, convenientemente preparadas, mas a mitose tem durao varivel de uma h algumas horas dependendo da espcie da clula e das condies do ambiente, podendo chegar mesmo a 24 horas de durao. Sendo que a temperatura ambiental pode acelerar, retardar ou mesmo bloquear o processo mittico. A mitose caracteriza-se por: modificaes nucleares (cariodierse) e por alternaes citoplasmticas (citodierse) (que ocorrem simultaneamente).

A mitose em clulas animais astral (h centrolos) e nos vegetais superiores anastral (no se observa centrolos). Em tecidos que esto em crescimento verificam-se mitoses sucessivas. Ao analisarmos a preparao definitiva com clulas do meristema da cebola (Allium cepa) foi possvel observar os diversos eventos ocorridos na mitose. Interfase: Na interfase no foi possvel observar, mas nesta fase possvel observar o destaque do ncleo da clula com a cromatina dispersa. Prfase: nesta fase utilizando a objetiva 100x com leo de imerso foi possvel distinguir os seus cromossomos, apesar de ainda se encontrarem enrolados. O desaparecimento do nuclolo est relacionado ao fato de cessar a sntese de DNA nos cromossomos compensados. Sendo o nuclolo um local de sntese de RNAr, com a condensao dos cromossomos essa sntese cessa e o nuclolo desaparece. Metfase: quando a clula encontrava-se em metfase foi possvel identificar a placa equatorial formada pelo fuso ligado ao fuso acromtico. Durante a metfase, nas clulas vegetais os cromossomos se dispem em toda a regio equatorial formando uma coroa. Anfase: nesta fase foi possvel observar os cromossomos ligados ao fuso acromtico na sua ascenso aos polos da clula, semelhantes aos dedos da mo. Telfase: nesta ultima fase da mitose foi possvel observar 2 ncleos, com a cromatina dispersa de novo, de maneira que os cromossomos no eram perceptveis. Citocinese: (vegetal) a citocinese no foi possvel observar, mas algumas clulas encontravam-se na interfase, onde apenas se destacava o ncleo da clula com a cromatina dispersa. Na citocinese das clulas vegetais no ocorre invaginaro da membrana plasmtica, e sim a formao centrifuga de uma placa celular, originada a partir de pequenas vesculas diferenciadas do complexo de Golgi, ricas em pectina. O conjunto dessas vesculas denominado fragmoplasto. Essas vesculas se fundem e seu contedo d origem a lamela mdia, a seguir inicia-se a formao da parede celular.

CONCLUSO A partir desta prtica experimental foi possvel identificar as diferentes fases da mitose das clulas eucariticas, que um processo de extrema importncia para os vegetais e animais, uma vez que lhe possibilita o seu crescimento e desenvolvimento. Repetindo-se desde o aparecimento da primeira clula eucaritica, e que permite a continuidade da vida na Terra, garantindo a estabilidade quantitativa e qualitativa do cdigo gentico dos eucariontes. De uma forma geral, podemos concluir que a mitose um processo de diviso celular em que uma clula d origem a duas clulas-filhas, geneticamente idnticas, que recebem o mesmo numero e tipo de cromossomos devido ao processo de replicao semiconservativa do DNA que ocorre durante a interfase e as demais fases da mitose. Em relao planta analisada podemos observar que o meristema de fato uma zona celular com uma invulgar frequncia de divises celulares, visto que uma zona de intenso crescimento da planta.

ESTRUTURA DO DNA Durante a evoluo da clula formou-se uma molcula, que hoje sabemos ser o cido desoxirribonucleico (DNA ou ADN): molcula longa, formada pela juno de um grande nmero de nucleotdeos, e que contm a informao gentica codificada. O DNA constitui uma espcie de cdigo que determina o que uma clula tem. Alm disso, o DNA capaz de produzir uma cpia dele mesmo. Antes de entrarmos no estudo do DNA propriamente dito, faz-se necessria a compreenso de alguns conceitos sobre relao entre cromossomos e DNA. Os cromossomos contm os genes que por sua vez so formados por DNA (cido desoxirribonucleico). Estes genes permitem a transmisso das informaes genticas de gerao a gerao. O material responsvel pelo comando e coordenao de toda a atividade celular e pelas divises celulares e transmisses das caractersticas hereditrias est representado nas clulas pelos cromossomos. Nas clulas procariticas, o cromossomo uma nica molcula de um cido nuclico, denominado cido desoxirribonucleico, o DNA. Nas clulas procariticas, os cromossomos encontram-se imersos no prprio citoplasma formando uma estrutura denominada nuclide. Nas clulas eucariticas os cromossomos encontram-se separados do citoplasma pela membrana nuclear ou carioteca, em uma estrutura denominada ncleo. A presena de carioteca uma caracterstica tpica das clulas eucariticas, que as distingue das procariticas. Alm disso, as clulas procariticas no apresentam organelas membranosas, como ocorre com as eucariticas.

Nas clulas eucariticas, o cromossomo formado por DNA associado a molculas de histona, que so protenas bsicas. So na molcula de DNA que esto contidos os genes, responsveis pelo comando da atividade celular e pelas caractersticas hereditrias. Cada molcula de DNA contm vrios genes dispostos linearmente ao longo da molcula. Cada gene, quando em atividade, transcrito em molculas de outros cidos nuclicos denominados ribonucleicos, que comandaro a sntese de protenas.

Estrutura do DNA
A molcula de DNA constituda por uma sequncia de nucleotdeos, que por sua vez formado molculas: um acar (pentose) um grupo fosfato uma base nitrogenada O Nucleotdeo: A orientao das ligaes entre as trs molculas dos essencial o determinar constituintes nucleotdeos para DNA. se por trs diferentes tipos de

sentido da dupla fita de

ligao

entre

base feita

nitrogenada e a pentose Esta uma ligao ligao covalentemente atravs de N-glicosdica com a hidroxila ligada ao carbono-1 da pentose.

ligao

entre

grupo

fosfato e a pentose Esta ligao feita atravs de uma ligao fosfoster com a hidroxila ligada ao carbono-5 da pentose.

Para a formao da molcula de DNA necessrio que ocorra a ligao entre os nucleotdeos. Os nucleotdeos esto ligados covalentemente por ligaes fosfodister formando entre si pontes de fosfato. O grupo hidroxila do carbono-3 da pentose do primeiro nucleotdeo se liga ao grupo fosfato ligado hidroxila do carbono-5 da pentose do segundo nucleotdeo atravs de uma ligao fosfodister.

Devido a esta formao a cadeia de DNA fica com uma direo determinada, isto , em uma extremidade temos livre a hidroxila do carbono-5 da primeira pentose e na outra temos livre a hidroxila do carbono-3 da ltima pentose. Isto determina que o crescimento do DNA se faa na direo de 5' para 3'

Sabendo-se como so feitas as ligaes entre os nucleotdeos, formando assim a fita de DNA, podemos analisar a estrutura tridimensional do DNA. James Watson e Francis Crick postularam um modelo tridimensional para a estrutura do DNA baseando-se em estudos de difrao de raio-X. O DNA consiste de duas cadeias helicoidais de DNA, enroladas ao longo de um mesmo eixo, formando uma dupla hlice de sentido rotacional

direita.

Ainda com base nestes estudos, concluiu-se que na dupla hlice as duas fitas de DNA esto em direo opostas, isto significa que so antiparalelas. O termo antiparalelas deve-se ao fato de que uma das fitas tem a direo exata da sua sntese (5'---3') enquanto que a outra est invertida (3'----5'). Esta conformao em fitas antiparalelas levar necessidade de mecanismos especiais para a replicao do DNA.

Com base na estrutura de dupla hlice do DNA e nas caractersticas de hidrofobicidade das molculas, a estrutura do DNA fica da seguinte forma: O grupo fosfato e o acar (parte hidroflica) - esto localizados na parte externa da molcula. As bases nitrogenadas (parte hidrofbica) - esto localizadas na parte interna da molcula. A relao espacial entre as duas fitas cria um sulco principal e um sulco secundrio.

O pareamento das bases de cada fita se d de maneira padronizada, sempre uma purina com uma pirimidina, especificamente: adenina com timina e citosina com guanina. A proximidade destas bases possibilita a formao de pontes de hidrognio, sendo que adenina forma duas pontes de hidrognio com a timina e a citosina forma trs pontes com a guanina. A dupla hlice mantida unida por duas foras: Por pontes de hidrognio formadas pelas bases complementares Por interaes hidrofbicas, que foram as bases a se "esconderem" dentro da dupla hlice. Estudos recentes mostram que existem duas formas de DNA com a hlice girando para a direita, chamadas A-DNA e B-DNA, e uma forma que gira para a esquerda chamada Z-DNA. A diferena entre as duas formas que giram para a direita est na distncia necessria para fazer uma volta completa da hlice e no ngulo que as bases fazem com o eixo da hlice.

B-DNA: Tem a dupla hlice mais longa e mais fina. Para completar uma volta na hlice so necessrios 10 pares de bases. A-DNA: Tem a forma mais curta e mais grossa. Para completar uma volta na hlice so necessrios 11 pares de bases.

Em soluo, geralmente o DNA assume a conformao B. Quando h pouca gua disponvel para interagir com a dupla hlice, o DNA assume a conformao A-DNA.

Existe uma terceira forma de DNA que difere das duas anteriores, pois seu sentido de rotao para a esquerda, este tipo de DNA chamado de ZDNA,. Esta conformao mais alongada e mais fina do que o B-DNA. Para completar uma volta na hlice so necessrios 12 pares de bases. O DNA, em soluo com altas concentraes de ctions, assume a conformao Z-DNA. Em eucariotos o DNA tende a assumir a conformao Z-DNA devido metilao do DNA.

Propriedades fsicas e qumicas do DNA


viscosas;

Solues de DNA, em pH = 7,0 e temperatura ambiente, so altamente A altas temperaturas ou pH extremos o DNA sofre desnaturao, isto porque ocorre ruptura das pontes de hidrognio entre os pares de bases. Esta desnaturao faz com que diminua a viscosidade da soluo de DNA; Durante a desnaturao nenhuma ligao covalente desfeita, ficando, portanto as duas fitas de DNA separadas; Quando o pH e a temperatura voltam ao normal, as duas fitas de DNA espontaneamente se enrolam formando novamente o DNA dupla fita. Este processo envolve duas etapas:

A primeira mais lenta, pois envolve o encontro casual das fitas complementares de DNA, formando um curto segmento de dupla hlice.

A segunda etapa mais rpida e envolve a formao das pontes de hidrognio entre as bases complementares reconstruindo a conformao tridimensional.

Duplicao do DNA

Replicao do DNA o processo de autoduplicao do material gentico mantendo assim o padro de herana ao longo das geraes.

Duas teorias tentaram explicar a replicao do DNA: Teoria conservativa: Cada fita do DNA sofre duplicao e as fitas formadas sofrem pareamento resultando num novo DNA dupla fita, sem a participao das fitas "parentais" (fitas novas com fita nova formam uma dupla hlice e fita velha com fita velha forma a outra dupla fita). Teoria semiconservativa: Cada fita do DNA duplicada formando uma fita hbrida, isto , a fita velha pareia com a fita nova formando um novo DNA; de uma molcula de DNA formam-se duas outras iguais a ela. Todos os DNA recm-formado possui uma das cadeias da molcula me, por isso o nome semiconservativo. A molcula do DNA vai-se abrindo ao meio, por ao de uma enzima chamada DNA de polimerase. pontes de entre Essa enzima quebra as ligaes hidrognio as duas das existentes bases

nitrogenadas

cadeias complementares de nucleotdeos. Ao mesmo tempo em que o DNA polimerase vai abrindo a molcula de DNA, outra enzima de chamada que DNA se os molcula de ligasse vai ligando um grupo nucleotdeos com da pareiam nucleotdeos me. Alm da capacidade duplicao o DNA tambm responsvel pela sntese de outro cido nuclico muito importante para a clula: o

cido ribonucleico ou RNA. Da mesma molcula forma que o DNA, o RNA tambm uma grande formada por vrias Partes menores chamadas nucleotdeos. Por isso diz-se que tanto DNA como RNA so poli nucleotdeos. NUTAO GENETICAS Em 1941, os pesquisadores Beadle e Tatum, fazendo experincias com um tipo de bolor de po, a Neurospora sp, observaram que nem sempre a autoduplicao do DNA ocorria de modo perfeito. O bolor crescia num meio de cultura contendo acar e diversos sais inorgnicos. Seus esporos eram submetidos a raios X e alguns deles passavam depois a produzir bolores com novas caractersticas. Por exemplo, alguns perdiam a capacidade de fabricar lisina e s conseguiam sobreviver quando aquele aminocido era acrescentado ao meio de cultura. Essa incapacidade foi relaciona com a falta de uma enzima necessria para a sntese de lisina. Concluram, ento, que os raios X teriam danificado a formao daquele tipo especfico de enzima. Como a produo de uma enzima depende de informao codificada no DNA, a concluso daqueles pesquisadores ficou conhecida como a relao "um gene - uma enzima". Atualmente, fala-se, com maior preciso, na relao "um gene - uma cadeia polipeptdica". A modificao gentica induzida atravs dos raios X conhecida como mutao. As mutaes podem resultar de uma alterao na sequncia dos nucleotdeos, ou de quebras e mudanas de posio dos fragmentos da molcula de DNA. Portanto so mutaes as alteraes numricas e estruturais dos cromossomos, que persistem atravs das autoduplicaes, transmitindo-se s clulas-filhas. Existem tambm erros que ocorrem no RNA, no momento das transcries ou das tradues, e afetam somente a prpria clula. As mutaes so produzidas por agentes mutagnicos, que compreendem

principalmente vrios tipos de radiao, dentre os quais os raios ultravioleta, os raios X e substncias que interferem na autoduplicao do DNA ou na transcrio do RNAm, determinando erros nas sequncias dos nucleotdeos. A lista das substncias mutagnicas tem aumentado muito nos ltimos anos, sendo bastante conhecido o gs mostarda, o cido nitroso, a bromo uracila, o formaldedo, a nicotina. Vrios tipos de cncer podem ser produzidos por alteraes ocorridas nos cido nuclicos; por isso os mesmos agentes mutagnicos podem ser tambm cancergenos.

SINTESE O RNA (cido ribonuclico) o cido nuclico formado a partir de um modelo de DNA. O DNA no molde direto da sntese de protenas. Os moldes para sntese de protenas so molculas de RNA. Os vrios tipos de RNA transcritos do DNA so responsveis pela sntese de protenas no citoplasma. Existem trs tipos de RNAs: RNA mensageiro: Contm a informao para a sntese de protenas.

Os RNAm representam cerca de 4% do RNA celular total. RNA transportador: Transporta aminocidos para que ocorra a sntese de protenas.

Os RNAt correspondem a 10% do RNA total da clula, e so denominados de adaptadores. RNA ribossmico: Componentes da maquinaria de sntese de protenas presente nos ribossomos.

Os RNAr correspondem a 85 % do RNA total da clula, e so encontrados nos ribossomos (local onde ocorre a sntese proteica). Todas as formas de RNA so sintetizadas por enzimas (RNA polimerases) que obtm informaes em moldes de DNA. O RNAr produzido pelo DNA da regio organizadora do nuclolo e, associado a protenas, vai constituir os nuclolos. Depois passa ao citoplasma para formar os ribossomos. O RNAm leva para o citoplasma as informaes para a sntese das protenas. Existe um tipo de RNAm para cada tipo de cadeia polipeptdica, que vai constituir uma protena. O RNAm transporta a informao gentica na forma de cdons, copiados do DNA; um cdon consiste em uma seqncia de trs nucleotdeos. O RNAt move-se do ncleo para o citoplasma, onde se liga a aminocidos, e deslocando-se at os ribossomos. Apresenta regies com pareamento de bases, que lhe conferem um aspecto de "trevo de trs folhas". Cada molcula de RNAt apresenta uma extremidade que se liga a diferentes tipos de aminocidos e uma regio com uma seqncia de trs nucleotdeos, o anticdon, que pode parear com um dos cdons do RNAm.

Biossntese das protenas Os vrios tipos de RNA, transcritos do DNA, que vo participar da sntese de protenas, deslocam-se do ncleo para o citoplasma.

O RNAr, inicialmente armazenado nos nuclolos, passa para o citoplasma e , associado a protenas, forma os ribossomos, que se prendem s membranas do retculo endoplasmtico. Os ribossomos dispem-se enfileirados, constituindo os polirribossomos ou polissomos, junto dos quais as protenas vo ser sintetizadas. Cada polissomo tambm denominado unidade de traduo, pois permite a sntese de um tipo de polipeptdio. O RNAm move-se para o citoplasma e vai ligar-se aos polirribossomos. Ele formado por uma sequncia de trios de nucleotdeos, que correspondem a diferentes aminocidos. Cada trio um cdon, e os diferentes cdons determinam o tipo, o nmero e a posio dos aminocidos na cadeia polipeptdica.

O RNAt desloca-se para o citoplasma, onde se liga a aminocidos, deslocando-os at pontos de sntese proteica. Numa determinada regio, a molcula de RNAt apresenta um trio especial de nucleotdeos, o

anticdon, correspondente a um cdon do RNAm. Uma das extremidades da molcula de RNAt s se liga a um tipo de aminocido.

Tecidos
Observao microscpica de preparaes histolgicas definitivas de diferentes tipos de tecido epitelial. Objetivos: O aluno dever saber identificar os diversos tipos de tecido epitelial atravs de exame histolgico, bem como de esquemas, diapositivos ou imagens. Os diversos tipos de tecido epitelial a estudar sero: 1) Epitlio simples cbico 2) Epitlio estratificado pavimentoso com ou sem queratinizaro 3) Epitlio simples colunar 4) Epitlio pseudo-estratificado 5) Epitlio simples pavimentoso 6) Epitlio de transio Material e Mtodos: Preparaes histolgicas da pele, estmago, esfago, duodeno, ureter, rim, traqueia. As preparaes sero visualizadas ao microscpio ptico, estudadas com auxilio de esquemas e imagens, por consulta a Atlas de Histologia. Esfago: notar o aspecto do epitlio de revestimento constitudo por diversas camadas de clulas, com aspecto achatado. Exemplo de epitlio estratificado pavimentoso; Pele: este tambm um exemplo de epitlio estratificado pavimentoso com queratinizaro; Duodeno e Estmago: so exemplos de epitlios cilndricos ou colunares simples;

Rim: observe os tbulos renais os quais so revestidos por epitlio simples cbico (outro exemplo ser o endotlio, epitlio dos vasos sanguneos e o epitlio de revestimento do ovrio); Ureter: o epitlio de revestimento apresenta clulas dispostas em vrias camadas, com as superficiais arredondadas e maiores que as clulas das camadas mais profundas, sendo um exemplo de epitlio de transio. (outro exemplo o epitlio da bexiga urinria); Traqueia: ao observar o epitlio da traqueia verificar que todas as suas clulas constatam com a lmina basal, todavia apenas as mais altas chegam at superfcie e os seus ncleos encontram-se a alturas diferentes. Este um exemplo de epitlio pseudo-estratificado (outro exemplo, o epitlio de revestimento do testculo)