OXOID Salmonella Latex Test Cdigo: FT0203 Introduccin La Salmonella Oxoid prueba de ltex es una prueba de aglutinacin para

la identificacin presuntiva de Salmonella spp. aisladas por la prueba de Salmonella Oxoid Rpida (FT0201). Las investigaciones adicionales han demostrado que se puede utilizar para detectar presuntas colonias de Salmonella aisladas en placas de agar selectivo, tanto de los alimentos y muestras clnicas. La prueba permite al usuario identificar presuntivamente y confirmar la presencia de Salmonella spp. Al mismo tiempo, otras especies como Citrobacter spp. y Proteus spp. pueden ser ms rpidamente eliminados. Principio . Una gran variedad de antgenos de Salmonella flagelos se han utilizado para producir antisueros polivalentes en conejos anticuerpos de Salmonella presentes en el antisuero se incluyen: 1 a, b, c, d, eh, Fg, gp, gms, gq, gst, i, k, lv, LW, mt, r, y, z, Senz 15, enx, 1.2, 1.5, 1.6, 1.7, z 4, 6 z, z 10, 23 z, z 24, 29 z, z 38 y la GPU. Los anticuerpos purificados se utilizan para sensibilizar a las partculas de ltex. Un asa de material es tomado de la parte superior de un tubo indicador positivo en la prueba de Salmonella rpido y se mezcla con una gota del reactivo de la prueba del ltex. Si la aglutinacin del reactivo de la prueba de ltex se produce, entonces Salmonella est presente en el material. Del mismo modo, las colonias presuntivas de Salmonella pueden ser tomadas de una placa de agar, se mezcla con el reactivo de la prueba del ltex y la aglutinacin se produce si la Salmonella est presente. Los componentes del Kit Prueba de ltex (FT0204) las partculas de ltex sensibilizadas con anticuerpos de Salmonella polivalente (IgG de conejo).. Control de ltex (FT0205) partculas de ltex sensibilizadas con globulinas de suero de conejo normal. Suspensin de control positivo (FT0206) una suspensin de no viables Salmonella preservada con formol al 1% (0,5 ml). NB: La suspensin ha sido revisada por un procedimiento estndar para garantizar que no estn presentes organismos viables. Tarjetas de prueba (DR500G) Diez tarjetas de prueba se proporcionan. Cada tarjeta tiene seis crculos de prueba. Si slo hay dos crculos de prueba se utiliza, la tarjeta se puede cortar y guardar la parte no utilizada para su uso posterior. Folleto de instrucciones Material necesario pero no suministrado Temporizador Lazo microbiolgicos Desinfectante - solucin de hipoclorito de sodio (> 1,3% w / w) o un desinfectante adecuado propio que se utiliza en los fabricantes de la concentracin adecuada.

Recogida de muestras y preparacin El kit de Salmonella Latex Test puede ser usado en conjuncin con la prueba de Salmonella Oxoid Rpida (FT0201). Sin embargo, otras investigaciones han demostrado que tambin puede ser utilizado como una pantalla para una rpida presuntiva las colonias positivas. Cuando se utiliza la prueba de Salmonella rpido Oxoid (FT0201) tomar una muestra del material de los medios de comunicacin indicador superior de los tubos de un resultado presuntamente positivo, con un asa microbiolgica. Si un tubo es un indicador positivo, realizar la prueba de ltex en eso. Sin embargo, si los dos tubos de dar una reaccin indicador positivo, entonces el tubo de ensayo un principio. Slo el uso del tubo B para comprobar si el tubo A es negativo ltex. Cuando se utiliza la prueba de ltex con las colonias sospechosas se cultivan en medios de cultivo selectivos, se recomienda que las colonias sospechosas son sembradas en primera a un nuevo mximo no selectivo de la placa con el fin de obtener un cultivo puro. Material suficiente se pueden tomar para realizar la prueba (es decir, una sola colonia aislada, tanto para la prueba de ltex y ltex control.). Procedimiento 1. Atemperar los reactivos de ltex a la temperatura ambiente. Mezcla de las suspensiones de ltex por agitacin vigorosa. Expulsar a cualquier exceso de ltex de las pipetas cuentagotas para asegurar una mezcla completa. 2. Dispense una cada libre cada del ltex de prueba en uno de los crculos de prueba en la carta de reaccin. 3. Dispense una cada libre cada del ltex de control en una trayectoria circular al lado de la tarjeta de prueba. 4. (A) de Oxoid Salmonella prueba rpida Mezcla de un asa de material de los medios de comunicacin indicador superior del tubo presunto positivo de la prueba rpida de Salmonella, y mezclar con la gota de ltex de prueba. Contine mezclando con el bucle de 10.15 segundos, mientras que la difusin de la cada de cubrir la mayor parte de la zona de reaccin. Mezcla de un asa de material de los medios de comunicacin indicador superior del tubo presunto positivo de la prueba rpida de Salmonella, y mezclar con la gota de ltex de prueba. Contine mezclando con el bucle de 10.15 segundos, mientras que la difusin de la cada de cubrir la mayor parte de la zona de reaccin. Las llamas y enfriar el lazo (o utilizar un nuevo lazo de plstico estril) y la mezcla de un asa de material de segunda del mismo tubo con la cada de ltex control. Contine mezclando con el bucle de 10.15 segundos, mientras que la difusin de la cada de cubrir la mayor parte de la zona de reaccin. (B) Las colonias Tomado de una placa de agar selectivo Tomar una colonia sospechosa de la placa de agar selectivo y raya a un nuevo mnimo no selectivo de la placa (por ejemplo, agar sangre) e incubar a obtener un cultivo puro. Mezcle una colonia en una trayectoria circular con una gota de ltex de prueba. Utilizando un asa fresca, mezcla de una segunda colonia en un crculo segunda prueba con una gota de ltex control. Contine mezclando durante 10 -15 segundos. 5. Agite con cuidado las cartas en un movimiento circular hasta por 2 minutos y observar la aglutinacin. (No mueva la tarjeta durante ms de 2 minutos y no utilizar una lupa para facilitar la lectura) 6. Devuelva el kit de ltex para el refrigerador despus de su uso.

Lectura e Interpretacin Un positivo resultado es positivo si la aglutinacin de la prueba de ltex se produce dentro de 2 minutos, y no de aglutinacin del ltex de control se produce en 2 minutos. Un resultado negativo es negativo si no hay aglutinacin de cualquiera de la prueba de ltex o el ltex de control se produce en 2 minutos. Reacciones que se producen despus de 2 minutos debe ser ignorado. NB: En algunos casos, la aglutinacin de las dos de la prueba de ltex y ltex de control se pueden observar. Estos resultados deben ser considerados como no-interpretables, y en estos casos, la cultura debe ser restreaked y comprueba mediante mtodos bioqumicos y serolgicos. La identificacin ms Una reaccin de aglutinacin positiva debe ser considerada como presuntamente positivo a Salmonella spp. La identificacin debe ser confirmado mediante otras tcnicas estndar de cultivo, bioqumicos y serolgicos. Suspensin de control positivo La suspensin del control positivo se debe utilizar peridicamente para comprobar el correcto funcionamiento de los reactivos de ltex. Use un asa de la suspensin de control no viables positivos como la muestra de prueba. El ltex de prueba debe dar una reaccin positiva en 30 segundos. El ltex de control no deben mostrar signos de aglutinacin durante los 2 minutos de la mecedora. Limitaciones La prueba de Salmonella ltex puede ser utilizado como una pantalla eficaz para distinguir entre Salmonella spp. y otros organismos. Sin embargo, cabe sealar que cuando se utiliza junto con la Salmonella Oxoid prueba rpida (FT201A), el mtodo no es apropiado para la deteccin de los no mviles cepas de Salmonella spp. (Incidencia <0,1%) 2. La prueba de Salmonella ltex puede ser utilizado como una pantalla de confirmacin rpida de Salmonella spp presunto. de las placas de agar selectivo, siempre y confirmacin y el trabajo de identificacin se lleva a cabo en los organismos con una reaccin positiva al ltex. Las pruebas se pueden hacer directamente desde la placa selectiva, pero un resultado negativo, tambin deber ser confirmado, despus de rayas sobre una placa no selectivos (por ejemplo, agar sangre) y se confirm una vez ms el uso del ltex como se indica. Algunos serotipos slo puede dar una reaccin dbil. En este caso, un barrido de las colonias de un cultivo puro debe ser probado con el ltex. Reacciones granular o fibrosa En ocasiones, las reacciones granular o fibroso puede ser visto debido a la naturaleza de partculas del material de ensayo. Cuando se producen tales reacciones, que deben interpretarse segn los siguientes criterios: El resultado se considera positivo, cuando un claro mayor del fondo azul se produce con el reactivo de la prueba en comparacin con la reaccin del reactivo de control. El resultado se considera negativo, cuando no hay cambios significativos en la limpieza del fondo azul cuando se utiliza la prueba y los reactivos de control.

Precauciones Este producto es para uso diagnstico in vitro solamente. No congele. Utilice siempre los reactivos con mismo nmero de lote. Los reactivos contienen 0,1% de azida de sodio como conservante. La azida sdica puede reaccionar con caeras de plomo o de cobre para producir azidas metlicas que son explosivos por la detonacin de contacto. Para evitar la acumulacin de azidas en las caeras, vaciar los residuos con abundante agua inmediatamente. Al desechar los materiales contaminados (tarjetas de prueba, los lazos de plstico, etc,) mediante la inmersin en una solucin desinfectante. Todas las muestras contienen microorganismos potencialmente peligrosos y deben ser manejados con procedimientos de seguridad adecuados. Condiciones de almacenamiento Almacene todos los reactivos a 2 C a 8 C. Estabilidad Todos los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la botella. No utilizar despus de la fecha de caducidad. Caractersticas de rendimiento (A) Prueba de Oxoid Salmonella rpido Las pruebas de laboratorio han demostrado Salmonella con los determinantes antignicos siguientes se pueden recuperar de la prueba de Salmonella rpido Oxoid y detectado por la prueba de Salmonella ltex Oxoid. Antgenos flagelos Fase 1: a, b, c, d, i, k, r, y, z, z 10, 29 z, z 38, fg, FGS, FGT, gp, g, g, GMST, gmt, gpu, GQ, gst, gt, MPT (u), mt, lv, LZ 38, LZ 13, z 4 z 23 z 4 z 24, z 4 z 32. Fase 2: 1.2, 1.5, 1.6, 1.7, z 6, eh, enx, Senz 15, pl. Los antgenos somticos Subgnero 1: AZ, 51, 52. Subgnero 2: BG, I, L, M, O, R, S, T, V, W, Z, de 52 aos. (B) Las colonias de las placas de agar selectivo Las investigaciones adicionales han demostrado que la prueba de ltex Salmonella puede ser utilizado como una pantalla rpida de los aislados de ciertos medios selectivos. (Se recomienda que los laboratorios validar este mtodo con su propia casa en las cepas.) Los siguientes diez serotipos de Salmonella todos dieron reacciones positivas de aglutinacin con el reactivo de prueba Oxoid Salmonella ltex, y las reacciones negativas con el reactivo de control de Salmonella Oxoid ltex durante la prueba de XLD (xilosa lisina desoxicolato) Agar (CM0469), MLCB (Manitol Lisina Cristal Violeta Verde Brillante ) Agar (CM0783), SS (Salmonella-Shigella) Agar (CM0099), SMS (modificada de Salmonella Shigella) Agar (CM0533), BGA (Agar Verde Brillante) (CM0263), Salmonella Oxoid cromognicos Medio (CM1007). S. enteritidis, S. Poona, S. Hadar, S, heidelberg, S. infantis, S. agona, S. typhimurium, S. newport, java y S. Virchow. Las cepas de C. freundii, Shigella spp., H. alvei, M. morganii, P. vulgaris, P. mirabilis, E. coli, K. pneumoniae, E. amnigenus 2 y Enterobacter spp. todos dieron resultados negativos con el ltex. Algunas cepas de H. alvei pueden dar reacciones fibrosa, pero esto suele ser tambin evidente con el ltex de control y por lo tanto, no debe confundirse con una

reaccin de aglutinacin verdadera 3. En las evaluaciones ms mediante el test de Salmonella ltex Oxoid como una prueba de deteccin de Salmonella, 562 cepas de Salmonella con una morfologa tpica de DCLS (desoxicolato de sacarosa a la lactosa) Agar (CM0393), Agar Hektoen entrica (CM0419) y Agar bismuto sulfito (CM0201), y 85 serotipos conocidos fueron los sub-cultivadas en agar inclinado de TSI y ponerlas a prueba con el ltex, segn la nota objeto. Los resultados son los siguientes: Tabla 1