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EL ESTRS OXIDATIVO EN PLANTAS

Mara de Lourdes Miranda-Ham* y Lizbeth Castro-Concha

Unidad de Bioqumica y Biologa Molecular de Plantas, Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn. Calle 43 # 130, Chuburn de Hidalgo, Mrida, Yucatn, Mxico. 97200.

*A quin debe dirigirse la correspondencia. E-mail: mirham@cicy.mx; Telfono: 999 9813943; Fax: 999 9813900 1

RESUMEN El oxgeno apareci en la atmsfera de la Tierra hace 2200 millones de aos y desde entonces, los organismos han evolucionado de manera constante para contrarrestar los efectos dainos de este gas txico y mutagnico. Sin embargo ahora, la mayora de los organismos necesitan del oxgeno para producir eficientemente la energa necesaria para realizar sus funciones vitales. Las especies reactivas de oxgeno engloban tanto a los radicales libres que se forman de la reduccin incompleta de la molcula de oxgeno como a las especies relacionadas como el oxgeno singulete y el perxido de hidrgeno. Las especies reactivas de oxgeno tienen en las plantas, papeles importantes en el crecimiento, desarrollo e interacciones con el medio ambiente, y por tanto, se producen en cantidades significativas durante la fotosntesis y la respiracin. Sin embargo, se mantiene la homeostasis redox mediante mecanismos que controlan su sntesis y depuracin. El desbalance entre la produccin y la eliminacin de las especies reactivas en los organismos conducen a lo que se conoce como estrs oxidativo. Existen dos tipos de mecanismos antioxidantes que mantiene esta homeostasis: los enzimticos y los no enzimticos. Dentro de los enzimticos, podemos citar a la superxido dismutasa, la catalasa, las peroxidasas y entre los no enzimticos, tenemos a compuestos como el ascorbato y el glutatin. Se discutirn los resultados obtenidos por nuestro grupo de investigacin sobre ambos tipos de mecanismos antioxidantes en dos modelos experimentales: Lycopersicon esculentum Mill y Capsicum chinense Jacq. bajo condiciones ambientales biticas y abiticas, que conducen a la formacin de especies reactivas de oxgeno.

PALABRAS CLAVE: Estrs oxidativo, plantas, enzimas antioxidantes, ascorbato, glutatin.

INTRODUCCIN Desde la introduccin del oxgeno molecular en nuestra atmsfera por las cianobacterias capaces de realizar la fotosntesis hace 2700 millones de aos, las especies reactivas de oxgeno (ROS, por sus siglas en ingls - Reactive Oxygen Species) han sido las acompaantes incmodas de la vida aerbica. La necesidad que tienen los organismos por el oxgeno eclipsa el hecho de que puede ser un gas txico y mutagnico; ms an, estos mismos organismos sobreviven ya que han desarrollado mecanismos antioxidantes muy eficientes (Halliwell, 2006). El trmino especies reactivas de oxgeno se refiere, tanto a los radicales libres del oxgeno, como son el anin superxido (O2-), el hidroxilo (OH-) y el peroxilo, as como a otras molculas que no son radicales, como el oxgeno singulete (1O2) y el perxido de hidrgeno (H2O2). Un radical libre es cualquier especie capaz de tener una existencia independiente, que contiene uno o ms electrones desapareados. Un electrn desapareado es aquel que se encuentra solo y ocupando un orbital atmico o molecular. Los radicales pueden formarse a travs de numerosos mecanismos, entre los cuales se incluye la adicin de un electrn a un no-radical. El oxgeno molecular se considera un radical libre, ya que no tiene completamente apareados sus electrones. Sus dos electrones tienen el mismo nmero cuntico de spin, es decir, sus spins son paralelos; de aqu su gran capacidad para reaccionar con la mayora de las molculas que no son radicales (Halliwell, 2006) (Figura 1). Las ROS, que se producen durante los procesos de respiracin y fotosntesis bajo condiciones fisiolgicas normales, son depuradas a travs de una serie de complejos mecanismos enzimticos y no enzimticos. Cuando el equilibrio entre la produccin y la eliminacin de especies reactivas de oxgeno es perturbado por una serie de factores medioambientales adversos, ya sean biticos o abiticos, se produce lo que se conoce como estrs oxidativo. Desde hace algunos aos, se ha empezado a reconocer que las ROS tienen un papel importante en los procesos de sealizacin en plantas, y que controlan procesos fundamentales en las plantas, tales como el crecimiento, el desarrollo, la respuesta a estmulos medio-ambientales y la muerte celular programada (Apel y Hirt, 2004, BaileySerres y Mittler, 2006). 3

Figura 1. Principales especies reactivas de oxgeno.

ESTRS OXIDATIVO Cada ao el estrs ambiental causa prdidas considerables en la calidad y productividad de los cultivos, incluso bajo condiciones de produccin protegida como invernaderos y tneles. Estas condiciones ambientales desfavorables pueden ser biticas, impuestas por otros organismos, o abiticas, promovidas por un exceso o dficit en el ambiente fsico o qumico que las rodea. Los diferentes tipos de estrs disparan una amplia gama de respuestas en la planta que pueden ocasionar una reduccin en las tasas de crecimiento y productividad como consecuencia de las alteraciones del metabolismo celular y la expresin gentica. La duracin, severidad y velocidad de un estrs al que se ven sometidas las plantas influyen directamente en sus respuestas. Independientemente de su naturaleza, un factor comn en todas las condiciones adversas es la sobreproduccin de especies reactivas de oxgeno (Inz y Van Montagu, 1995). El estrs oxidativo es un estado alterado de la homeostasis de xido-reduccin intracelular, es decir, el balance entre oxidantes y antioxidantes. Dada su gran reactividad y 4

en ausencia de mecanismos que las depuren, las ROS producen daos en la estructura y la funcin de las clulas (Simontacchi et al., 2001). ESTRS ABITICO. En plantas, las ROS se producen continuamente en el cloroplasto, mitocondria y peroxisomas. En condiciones normales, la produccin y remocin de las ROS est estrictamente controlada. Sin embargo, el equilibrio entre la produccin y la depuracin de stas puede ser perturbado por diversos factores fisicoqumicos, como son el dficit hdrico, la salinidad, las temperaturas extremas, la excesiva o insuficiente radiacin luminosa, la anaerobiosis por encharcamiento o inundacin, los factores mecnicos como el viento o la compactacin del suelo y las lesiones. Los factores qumicos incluyen el estrs nutricional, o la presencia de contaminantes inorgnicos (SO2, NOX, O3, o metales pesados) u orgnicos como los CFC (compuestos clorofluorocarbonados), BPC (bifenilos policlorados) o HAP (hidrocarburos aromticos policclicos). Frecuentemente, se presentan combinaciones de dos o ms de estas condiciones (Cabrera, 2006). ESTRS BITICO. Una de las ms rpidas reacciones de defensa al ataque por patgenos es la llamada explosin oxidativa, la cual constituye la produccin de ROS, principalmente O2- y H2O2 en el sitio de invasin. La generacin de O2- ha sido identificada en un amplio rango de interacciones planta-patgeno que involucran bacterias, hongos y virus (Low y Merida, 1996). Este tipo de estrs tambin puede ser provocado por insectos y nematodos, as como tambin por herbvoros. La interaccin planta-patgeno puede ser de tipo compatible, en la cual el patgeno infecta la planta, provocando una enfermedad, o incompatible, en la que los mecanismos de defensa de la planta impiden su entrada o establecimiento. En este ltimo caso, las clulas que estn en contacto con el patgeno pueden enviar seales a las clulas y tejidos vecinos para que se produzcan cambios bioqumicos destinados a evitar la diseminacin del patgeno. Este sistema se denomina resistencia sistmica adquirida (Cabrera, 2006). Numerosas enzimas han sido implicadas en la produccin apoplstica de ROS, despus del reconocimiento exitoso del patgeno. La utilizacin de inhibidores ha permitido involucrar a las NADPH oxidasas de membrana plasmtica y a las peroxidasas de pared celular, como las principales fuentes de ROS (Torres et al., 2006). Las NADPH oxidasas catalizan la produccin de O2- a travs de la reduccin del oxgeno, utilizando NADPH como

donador de electrones. El O2- generado por esta enzima sirve como materia prima para la produccin de una gran cantidad de oxidantes (Apel y Hirt, 2004). Las peroxidasas son un complejo grupo de protenas que catalizan la xido reduccin de varios sustratos que utilizan perxido. En particular, las peroxidasas dependientes de pH en la pared celular, pueden llegar a ser una fuente importante de H2O2, si estn en presencia de algn reductor que la clula libere en respuesta a algn estmulo (Torres et al., 2006).

MECANISMOS DE DEPURACIN DE LAS ROS Las plantas han desarrollado estrategias para eliminar el exceso de ROS. Estos mecanismos celulares son diversos, y tienen complejas relaciones entre ellos, dependiendo de los compartimentos celulares en los que se encuentran. Existen en las plantas mecanismos de proteccin enzimticos y no enzimticos que atrapan e inactivan eficientemente las ROS. Los principales antioxidantes no-enzimticos incluyen a compuestos como el ascorbato y el glutatin, as como los tocoferoles, los flavonoides, los alcaloides y los carotenoides que se encuentran en las plantas en altas concentraciones y constituyen una primera lnea de defensa. Mutantes que presentan niveles de cido ascrbico muy bajos o un contenido alterado de glutatin son hipersensibles al estrs.

ASCORBATO. Es el antioxidante cuantitativamente predominante en las clulas vegetales, se encuentra en todos los compartimentos subcelulares, incluido el apoplasto, en concentraciones que oscilan entre 2-25 mM. El ascorbato es oxidado por el oxgeno, el anin supexido, el oxgeno singulete y el perxido de hidrgeno para dar lugar al radical monodeshidroascorbato, el cual se desproporciona en ascorbato o deshidroascorbato (Smirnoff, 2000) (Figura 2). Desempea un papel fundamental en la fotoproteccin y la regulacin de la fotosntesis, y preserva las actividades de enzimas que tienen iones metlicos de transicin (Cu2+, Fe2+) como grupo prosttico. El ascorbato es tambin un poderoso antioxidante secundario, ya que reduce la forma oxidada del -tocoferol. Adicionalmente, es el reductor utilizado para la hidroxilacin de residuos de prolina de la extensina, una protena de la pared 6

celular. Tambin est implicado en la elongacin de la raz, el funcionamiento de los estomas, y desempea una funcin crtica asociada a los mecanismos a travs de los cuales las plantas sensan los cambios medio ambientales y responden a ellos (Noctor y Foyer, 1998; Foyer y Noctor, 2005). GLUTATIN. Lo que comnmente se conoce como glutatin es el glutatin reducido (GSH
glutamil-L-cistenglicina). Este tripptido que existe abundantemente en los cloroplastos es

sintetizado en dos pasos, catalizados por la -glutamilcistena sintetasa (-ECS) y la glutatin sintetasa, siendo el primero de ellos el paso limitante de su biosntesis en plantas (Ogawa, 2005). El glutatin se caracteriza por ser el compuesto tilico no-proteico ms abundante, distribuido principalmente en clulas eucariticas. Se encuentra en concentraciones milimolares, y presenta una alta capacidad de donar electrones. El 90% del glutatin se encuentra normalmente en su estado reducido. El glutatin oxidado puede de nuevo ser reducido a GSH por accin de la glutatin reductasa que utiliza NADPH como poder reductor (Figura 2) (Li et al., 2004).

Figura 2. Ciclo del ascorbato-glutatin. AA, ascorbato; DHA, deshidroascorbato; DHAR, deshidroascorbato reductasa; GR, glutatin reductasa; GSH, glutatin reducido; GSSG, glutatin reductasa. oxidado; MDHA, monodeshidroascorbato; MDHAR, monodeshidroascorbato

Se ha encontrado que el glutatin est involucrado en diferentes procesos en las plantas, entre los que destacan la diferenciacin, la muerte celular programada, la 7

senescencia, la regulacin del ciclo celular, la floracin, la acumulacin de pigmentos, y la destoxificacin de xenobiticos y metales pesados. Recientemente se le ha asignado un papel como regulador del crecimiento y como inductor de genes de defensa (Ogawa, 2005). Poco se conoce del papel que juegan los flavonoides y los carotenoides en la destoxificacin de ROS en las plantas. Sin embargo, se sabe que la sobreexpresin de la caroteno hidroxilasa en Arabidopsis conlleva un aumento en la cantidad de xantofila en el cloroplasto, dando como resultado una mayor tolerancia al estrs producido por alta luminosidad (Apel y Hirt, 2004). Esto podra deberse a los sistemas de dobles enlaces conjugados que se encuentran en estas molculas. Los principales sistemas antioxidantes enzimticos en plantas son la familia de la superxido dismutasa (SOD), la ascorbato peroxidasa (APX), la glutatin peroxidasa (GPX) y la catalasa (CAT) (Figura 3). Las SODs actan como la primera lnea de defensa contra el ataque de las ROS, dismutando el superxido a H2O2 (Figura 3a). La APX, la GPX y la CAT subsecuentemente eliminan al H2O2 formado. En contraste con la CAT (Figura 3b), la ascorbato peroxidasa requiere del ascorbato reducido, e indirectamente de GSH, para regenerar el sistema en el ciclo del ascorbatoglutatin (Figura 3c). La reduccin del H2O2 hasta agua por accin de la APX involucra la oxidacin del ascorbato hasta monodeshidroascorbato (Ecuacin 1 de la figura 3c), el cual puede ser regenerado por accin de la monodeshidroascorbato reductasa (MDAR), utilizando NADPH como poder reductor (Ecuacin 2 en la figura 3c). El monodeshidroascobato puede espontneamente dismutar hasta deshidroascorbato. La regeneracin del ascorbato est mediada por la accin de la deshidroascorbato reductasa (DHAR), utilizando para esto la oxidacin del GSH hasta GSSG (Ecuacin 3 en la figura 3c). Finalmente, la glutatin reductasa (GR) puede regenerar el GSH a partir del GSSG. Al igual que la APX, la GPX tambin reduce el H2O2 hasta agua, pero emplea directamente GSH como agente reductor (Ecuacin 1 en la figura 3d). El ciclo de la GPX se cierra con la regeneracin del GSH, a partir de GSSG por accin de la GR (Ecuacin 2 en la figura 3d). A diferencia de la mayora de los organismos, las plantas poseen mltiples genes que codifican para la SOD y la APX. Diferentes isoformas de estas enzimas se encuentran localizadas en el cloroplasto, mitocondria, peroxisomas, as como en el citosol y el apoplasto. Por otro lado, la GPX es citoslica y la CAT se localiza predominantemente en los peroxisomas (Apel y Hirt, 2004). 8

La asignacin de funciones para las enzimas antioxidantes ha sido explorada por medio de los organismos transgnicos. En el caso de tabaco, la sobreexpresin de la SOD de cloroplasto no alter su tolerancia al estrs oxidativo, lo cual sugiere que otros mecanismos antioxidantes pueden ser los limitantes (Allen, 1995). Por otro lado, la expresin de la SOD de cloroplasto de chcharo en tabaco aumenta su resistencia al dao de membrana provocado por el metil violgeno, un poderoso oxidante utilizado para mimetizar condiciones ambientales adversas (Allen, 1995). En el caso de la CAT, estudios realizados con plantas transgnicas de tabaco han demostrado que resulta ser indispensable para la tolerancia al estrs oxidativo, ya que plantas que no poseen actividad de CAT presentan altos niveles de ROS en respuesta al estrs, tanto bitico como abitico (Willekens et al., 1997).

a)

Superxido dismutasa:

b)

Catalasa:

c)

Ciclo del Ascorbato-glutatin:

1) H2O2 + Ascorbato

APX

H2O + Monodeshidroascorbato (MDHA)

2) MDHA + NADPH

MDHAR

Ascorbato + NADP+

d)

Ciclo de la glutatin peroxidasa:

1) H2O2 + GSH GPX

H2O + GSSG

Figura 3. Principales mecanismos enzimticos de depuracin de las ROS.

EL PAPEL DE LAS ROS EN EL CRECIMIENTO Y LA RESPUESTA HORMONAL. Reportes recientes demuestran la importancia de las ROS como reguladores en el desarrollo de las plantas. Existe evidencia que indica que las ROS desempean un papel en el crecimiento y que la regulacin de su produccin en los diferentes compartimentos celulares es un factor importante que regula la morfologa y la formacin de diferentes rganos en la planta (morfognesis) (Carol et al., 2005). Se ha demostrado que las ROS que estn involucradas en el desarrollo de las plantas son producidas por las NADPH oxidasas, las cuales generan O2-, utilizando NADPH como donador de electrones. En Arabidopsis se ha demostrado que tres miembros de esta familia de enzimas estn involucrados en diferentes aspectos del crecimiento de la raz (Gapper y Dolan, 2006). Plantas que presentan mutaciones en el gen RHD2/atrbohC, que codifica para una NADPH oxidasa involucrada en la elongacin de la raz, presentan una disminucin en su produccin de ROS, y son 20% ms bajas que las plantas normales (Foreman et al., 2003). Adems de su papel en la elongacin de la raz, existe evidencia que stas desempean un papel en el crecimiento de otros rganos, como sucede durante la expansin de la hoja en maz o en el control de la dominancia apical y la morfologa de la hoja en Lycopersicon esculentum (Gapper y Dolan, 2006). Las ROS han sido implicadas como segundos mensajeros en respuesta a los fitorreguladores. En el caso de races de maz, estudios realizados demuestran que stas funcionan como un componente que disminuye la respuesta al gravitropismo mediado por auxinas (Joo et al., 2001). Por otro lado, se ha sugerido tambin que el etileno y las ROS son necesarios para el establecimiento y la funcin de los ndulos de raz en leguminosas semiacuticas. Trabajos recientes han demostrado tambin que las ROS son seales indispensables para el cierre estomtico, mediado por ABA. En el caso de las clulas guarda de Arabidopsis, ABA estimula la acumulacin de ROS va la activacin de canales de calcio en la membrana plasmtica. La sntesis de ROS en respuesta a ABA tambin ocurre en Vicia faba, pero la produccin se da en la membrana plasmtica y en el cloroplasto (Apel y Hirt, 2004; Kwak et al., 2006).

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INVESTIGACIN REALIZADA EN EL GRUPO El trabajo de nuestro grupo de investigacin se ha centrado en los mecanismos que el tomate, Lycopersicon esculentum Mill. utiliza para contender con el exceso de ROS producidas durante la interaccin con Phytophthora infestans. Se utiliz como modelo experimental, cultivos de clulas en suspensin, generados a partir de hojas jvenes de Lycopersicon esculentum Mill. cv. Ro Grande. Los cultivos se han mantenido durante casi diez aos, en el medio MS (Murashige y Skoog, 1962), suplementado con las vitaminas del medio B5 (Gamborg et al. 1968), 2.24 M 2,4-D, 0.049 M cinetina, 3% sacarosa y 0.22% gelrite, pH 5.8. La muerte celular es un aspecto fundamental a monitorear durante las primeras fases de la interaccin planta-patgeno y hay una serie de caractersticas que identifican a esta respuesta inmediata, denominada como respuesta hipersensible, como son cambios en el flujo de iones, cambios en el pH celular, la generacin de especies reactivas de oxgeno, la expresin de genes relacionados con la defensa, el fortalecimiento de paredes celulares y la produccin de compuestos antimicrobianos. Sin embargo, se presentaban contradicciones en lo que se refera a la cuantificacin veraz de la viabilidad de las clulas en respuesta a la infeccin por un patgeno. Por esto se realiz un anlisis de cuatro diferentes mtodos comnmente utilizados para determinar este parmetro: los ensayos con sales de tetrazolio, el ensayo de azul de Evans, el ensayo con acetato de fluorescena y por ltimo, la observacin microscpica. Al comparar estos mtodos, se determin que el utilizar tan slo un mtodo para determinar los cambios fisiolgicos y bioqumicos que se presentan en las primeras horas de la interaccin podra conducir a conclusiones errneas. Es por esto que cuando se adopta algn mtodo para determinar la viabilidad, debe tomarse en cuenta no slo las caractersticas del cultivo celular sino tambin la naturaleza de los mecanismos de entrada del patgeno, puesto que algunas de las limitaciones intrnsecas de las determinaciones podran enmascararlas. Los datos obtenidos indican que el ensayo basado en la reduccin de las sales de tetrazolio es el ms adecuado para monitoreare las respuestas primarias que tienen lugar en las primeras fases de la interaccin (Escobedo y Miranda-Ham, 2003). Se realiz el anlisis bioqumico de la respuesta al estrs en las clulas en suspensin retadas con oligogalacturnidos (OGA), en trminos de cambios en los niveles de ROS, del 11

ascorbato, y en las actividades especficas totales y los perfiles de isoenzimas de las SOD, la CAT, la APX y las peroxidasa de guayacol (g-POX). Los oligogalacturnidos utilizados proviene de Citrus y son pequeos oligosacridos que son capaces de inducir la respuesta hipersensible en clulas en suspensin. En conjunto el anlisis de los resultados permite sugerir que las clulas en suspensin se encuentran normalmente bajo un estrs oxidativo constante, ocasionado posiblemente por la agitacin en la que se encuentran. No obstante, las clulas son competentes para percibir, responder y amplificar la seal en respuesta a los OGA, que se manifest por el rpido e importante incremento en H2O2, as como una continua produccin de O2-. Esto da lugar a una condicin hiper-oxidante, resultado del incremento transitorio en las actividades de las enzimas que producen H2O2, la reduccin en cantidad del ascorbato reducido, y la disminucin en las actividades de las enzimas depuradoras del perxido como la APX, la CAT y las g-POX. Despus de unas horas las clulas testigo, como consecuencia del incremento en la poza de ascorbato, as como de las actividades de las enzimas mencionadas. Estas clulas presentan una segunda explosin oxidativa de ROS, observada por el aumento en la actividad total de SOD y la disminucin de la actividad de la APX despus de 24 h de iniciado el tratamiento (Gracia-Medrano et al., 2005). El uso de los homogeneizados de Phytophthora infestans, as como de los oligogalacturnidos, representan una interaccin de tipo incompatible, en la cual el mantenimiento de la homeostasis de las ROS en los diferentes compartimentos celulares es el resultado de una regulacin muy fina de los sistemas antioxidantes, a travs de la comunicacin concertada entre las actividades de las diferentes enzimas y las fluctuaciones en el estado redox y el tamao de la poza de ascorbato. En resumen, los resultados obtenidos en el sistema de Lycopersicon esculentum apoyan la existencia de interconexiones complejas entre la regulacin secuencial y concertada de las actividades de las enzimas antioxidantes y el status redox intracelular, que a su vez estn mediado el encendido y apagado de la sntesis de otras molculas como el cido saliclico, el cido jasmnico y el xido nitroso, que amplifican y regulan otros mecanismos de defensa. Es de notar que existen variaciones en la poza del cido saliclico, en coordinacin con alteraciones en la acumulacin de ROS que se han detectado en las clulas de tomate durante el estrs (Vicinaiz, 2004). 12

Por lo que respecta a los estudios con clulas de chile habanero, an cuando se encuentran en sus primeras fases, se puede comentar que el glutatin se encuentra principalmente en su estado reducido, tanto en las clulas testigo como en aquellas que han recibo el homogeneizado de Phytophthora capsici. Esto indica que la glutatin reductasa se encuentra activa para transformar al glutatin oxidado a reducido, y as mantener un adecuado equilibrio en el reciclaje de las molculas antioxidantes dentro del ciclo de ascorbato-glutatin para evitar que se pierda la homeostasis celular (Cabrera, 2006).

CONCLUSIONES En la ltima dcada, el estudio del estrs oxidativo ha suscitado gran inters, ya sea por el hecho de que se cuenta con un arsenal de tcnicas modernas que permiten obtener respuestas que antes no hubiera sido posible obtener, o porque se ha alcanzado la madurez necesaria para enfrentar la paradoja que constituye vivir en una atmsfera oxidante. Sin lugar a dudas, en los aos venideros, la cantidad de informacin que estar disponible redundar en mejores y ms eficientes maneras de aumentar la productividad en los cultivos.

LITERATURA CITADA Allen R.D., 1995. Dissection of oxidative stress tolerance using transgenic plants. Plant Physiol. 107: 1049-1054. Apel K. and H. Hirt, 2004. Reactive oxygen species: Metabolism, oxidative stress and signal transduction. Annu. Rev. Plant Biol. 55: 373-399. Bailey-Serres J. and R. Mittler, 2006. The roles of reactive oxygen species in plant cells. Plant Physiol. 141: 131. Cabrera, Y.A., 2006. Efecto de Phythopthora capsici sobre el metabolismo del glutatin en suspensiones celulares de chile habanero (Capsicum chinense Jacq.). Univ. Autnoma de Yucatn. Mrida, Mxico. Tesis de Licenciatura.

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Carol R.J., S. Takeda, P. Linstead, M.C. Durrant , H. Kakesova, P. Derbyshire, S. Drea, V. Zarsky and L. Dolan, 2005. A RhoGDP dissociation inhibitor spatially regulates growth in root hair cells. Nature 438: 1013-1016. Escobedo G-M. R.M. and M.L. Miranda-Ham, 2003. Analysis of elicitor-induced cell viability changes in Lycopersicon esculentum Mill. Suspension culture by different methods. In vitro Cel.. Dev. Biol. 39: 236-239. Foreman J., V. Demidchik, J.H. Bothwell, P. Mylona, H. Miedema, M.A. Torres, P. Linstead, S. Costa, C. Brownlee, J.D. Jones, J. Davies and L. Dolan, 2003. Reactive oxygen species produced by NADPH oxidase regulate plant cell growth. Nature 422: 442-446. Foyer C. and G. Noctor, 2005. Oxidant and antioxidant signaling in plants: a re-evaluation of the concept of oxidative stress in a physiological context. Plant Cell Environm. 28: 1056-1071. Gamborg O.L., R.A. Miller and K. Ojima, 1968. Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells. Exp. Cell Res. 50:151-158. Gapper C. and L. Dolan, 2006. Control of plant development by reactive oxygen species. Plant Physiol. 141: 341-345. Gracia-Medrano R.M.E., F. Vzquez-Flota and M.L. Miranda-Ham, 2005. Enzymatic scavenging of reactive oxygen species in Lycopersicon esculentum Mill. cell suspension cultures elicited with oligogalacturonides. Phyton 2005: 15-25. Halliwell B., 2006. Reactive species and antioxidants. Redox biology is a fundamental theme of aerobic life. Plant Physiol. 141: 312-322. Inze D. and M. Van Montagu, 1995. Oxidative stress in plants. Curr. Opin. Biotechnol. 6: 153158. Joo J.J., Y. S. Bae and J. S. Lee, 2001. Role of auxin-induced reactive oxygen species in root gravitropism. Plant Physiol. 126: 1055-1060. Kwak J.M., V. Nguyen and J.I. Schoeder, 2006. The role of reactive oxygen species in hormonal response. Plant Physiol. 141: 323-329. Li Y., G. Wei and J. Chem, 2004. Glutathione: a review on biotechnological production. Appl. Microbiol. Biotechnol. 66: 233-242.

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ANTIOXIDANTES EN LAS PLANTAS: ALGUNOS FACTORES EDFICOS Y AMBIENTALES QUE LOS MODIFICAN

Adalberto Benavides-Mendoza*, Homero Ramrez, Valentn Robledo-Torres, Laura Olivia Fuentes-Lara

Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Departamento de Horticultura, Buenavista, Saltillo, Coah. 25315. Tel. (844)411-0303, email: abenmen@uaaan.mx

*Correspondencia abenmen@uaaan.mx 16

RESUMEN Los antioxidantes son compuestos que permiten la vida celular en un ambiente oxidante. Su presencia es ubicua en los organismos aerobios, que son los responsables de la eliminacin de los radicales libres los cuales se producen, de manera natural, en los sitios de actividad energtica celular. Los perfiles relativos y la cantidad de antioxidantes son variables frente a los estmulos ambientales ya que dependen, para su sntesis, de grupos de genes cuya expresin se induce diferencialmente. Los antioxidantes son componentes importantes en la dieta de los humanos, de all la importancia de aumentar su cantidad en los alimentos. Se enumeran algunos resultados que evidencian la forma como los caracteres del suelo modifican la calidad nutricional de las plantas, en particular respecto a su contenido de antioxidantes.

PALABRAS CLAVE: calidad nutricional, radicales libres, fitoqumicos.

INTRODUCCIN En el transcurso de la evolucin, las plantas desarrollaron mecanismos que permiten la induccin de respuestas frente a los estmulos diversos del ambiente. Una parte de tales respuestas, como la morfologa de los estomas, la constitucin de los tallos, el tipo de metabolismo C3, C4 CAM, entre otras, son constitutivas, pues dependen de su patrimonio gentico particular; otras, en cambio, se manifiestan slo bajo alguna condicin inductiva particular. Estas ltimas respuestas son las que se observan, en el corto plazo, durante la adaptacin de las plantas al ambiente. Las citadas respuestas; se desencadenan por factores bitico tales como patgenos, plagas y simbiontes, o por factores abiticos como alta o baja temperatura, radiacin, salinidad, entre otros, y no necesariamente en condiciones que originan estrs. Las respuestas inducidas tambin pueden ser de largo plazo; son las responsables de la conocida plasticidad fenotpica de las plantas, que resulta de la alteracin en los programas de desarrollo. El ambiente de crecimiento es una fuente constante de informacin y recursos para las plantas, las cuales se encuentran en un estado dinmico de cambio fisiolgico y metablico, 17

que resulta, a su vez, de recurrentes modificaciones en la expresin gnica. Los fenotipos, ms que inmutables, son entonces dinmicos y cambiantes en escalas de tiempo que van de unos pocos segundos a das o meses. Las respuestas adaptativas que ocurren frente a cualquier factor ambiental dependen de la accin de sealizadores (o inductores) que interaccionan con receptores especficos, ubicados normalmente en las membranas que rodean al citoplasma, al tonoplasto, as como a otros organelos. Normalmente, el receptor activado por el sealizador modifica la expresin gnica, e induce la sntesis y acumulacin de ciertos metabolitos secundarios, fitoalexinas protenas u otros compuestos relacionados con las respuestas al estrs. Asimismo, los sealizadores pueden inducir cambios modulatorios de corto plazo en las propiedades de la membrana celular, o bien determinar modificaciones pos-traduccin en ciertas protenas, lo que da lugar a una cadena de sealizacin o cascada de transduccin de seales ambientales (Benavides-Mendoza, 2002). Entre los sistemas de respuesta mencionados, se encuentra la sntesis de fitoqumicos y antioxidantes. Estos compuestos cumplen funciones importantes como atrapadores de radicales libres, estabilizadores y protectores del DNA y protenas frente al estrs por oxidacin (Inz y Van Montagu, 1995) en todos los seres vivos aerobios. Queda por definir si tales fitoqumicos y antioxidantes cumplen funciones adicionales a la resistencia al estrs (Roitsch, 1999). Al respecto, se sabe que muchos fitoqumicos no muestran expresin constitutiva, sino que dependen del trasfondo ambiental especfico, probablemente porque modifican la expresin gnica al cambiar los programas de desarrollo de la planta y generar patrones especiales de metabolismo y morfognesis (Allen et al., 1995; Bohnert y Sheveleva, 1998). Vase la Figura 1.

ANTIOXIDANTES EN LAS PLANTAS La funcin qumica de los antioxidantes es ceder potencial reductor a los compuestos oxidantes capaces de daar a los componentes celulares. Los productos finales de esta reaccin de disipacin energtica antioxidante-oxidante son comnmente el O2 y el H2O, acompaados de liberacin de calor. Los compuestos oxidantes ms abundantes en las clulas vegetales se derivan de la activacin de la molcula de dioxgeno (O2), lo que da 18

lugar a especies qumicas parcialmente reducidas, como el oxgeno singlete O21 y el radical superxido (O2-), que constituyen las especies activas (o reactivas) de oxgeno (ROS) primarias. Las reacciones posteriores de las especies activas de oxgeno primarias con los componentes celulares, forman otros radicales libres (como el radical hidroxilo HO-) u otros compuestos oxidantes como el perxido de hidrgeno, H2O2, que tienen carcter oxidante pero no son radicales libres (Mittler, 2002).

Figura 1. Resumen esquematizado del sistema de regulacin ambiental de los programas de desarrollo de las plantas. La accin de estos procesos da lugar a una planta con un fenotipo particular.

Las ROS, en general, son producto de reacciones del metabolismo energtico como la fotosntesis, la respiracin y la fotorespiracin. Otras reacciones de sntesis de ROS ms 19

especficas y sujetas a control celular sobrevienen por la accin de enzimas como la NADPH oxidasa, amino oxidasas y peroxidasas de la pared celular. La funcin de estas ltimas enzimas es producir ROS involucradas en la muerte celular programada y en la defensa contra patgenos (Mittler, 2002). El nivel normal de produccin de ROS en las clulas vegetales de 240 s M
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O2 con un

nivel estacionario de 0.5 M H2O2 en los cloroplastos, aumenta hasta 720 M s1 O2, con un nivel estacionario de 15 M H2O2 en los cloroplastos por los factores ambientales que inducen estrs osmtico, como el dficit hdrico, la salinidad y la baja temperatura, o bien por el dao mecnico. Tanto en el caso de factores biticos como abiticos, la sobreproduccin de las ROS causan estrs oxidativo celular, aunque tales compuestos tambin parecen cumplir con la importante funcin de indicadores del estrs y segundos mensajeros en las cadenas de transduccin de seales de respuesta al estrs (Mittler, 2002). La mencionada funcin dual de las ROS, por una parte como sealizadores del estrs, por otra, como compuestos que causan la muerte celular, indica que el control de su concentracin por medio de sustancias antioxidantes, parece ocurrir debido, cuando menos, a dos mecanismos: (i) uno que lleva a cabo el control fino de los niveles de los ROS para propsitos de sealizacin y (ii) otro que se encarga de la desintoxicacin de las ROS producidas en exceso durante los eventos de estrs. Para el caso de la sealizacin parece ser que tanto la concentracin de una ROS especfica, como la concentracin relativa de diferentes ROS, es determinante en la determinacin de la respuesta celular. El cuadro 1 contiene un resumen de los principales sistemas bioqumicos que produce, elimina o disminuye la produccin de ROS.

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Cuadro 1. Procesos de produccin, eliminacin y disminucin de especies activas de oxgeno en plantas. MECANISMO Produccin O2 en fotosntesis (transporte de electrones y PSI y PSII) O2 en respiracin (transporte de electrones) H2O2 por la glicolato oxidasa O21 por clorofila excitada O2 por la NADPH oxidasa H2O2 por la -oxidacin de cidos grasos H2O2 por la oxalato oxidasa O2 por la xantina oxidasa H2O2 y O2 por peroxidasas, Mn2+ y NADH Eliminacin O2 por superxido dismutasa Cloroplasto, mitocondria, citoplasma, peroxisoma, apoplasto Cloroplasto, mitocondria, citoplasma, peroxisoma, apoplasto Peroxisoma Citoplasma Pared celular, citoplasma, vacuola 21 LOCALIZACIN

Cloroplasto

Mitocondria

Peroxisoma Cloroplasto Membrana plasmtica Peroxisoma Apoplasto Peroxisoma Pared celular

H2O2 por la ascorbato peroxidasa H2O2 por la catalasa H2O2 y ROOH por la glutatin peroxidasa H2O2 por peroxidasas

H2O2 por tioredoxina peroxidasa H2O2 y O2 por cido ascrbico

Cloroplasto, citoplasma, mitocondria Cloroplasto, citoplasma, mitocondria, peroxisoma, apoplasto Cloroplasto, citoplasma, mitocondria, peroxisoma, apoplasto Membranas Cloroplasto

H2O2 por el glutatin ROOH y O2 por el -tocoferol O21 por carotenoides Disminucin o Prevencin Adaptaciones anatmicas para disminuir la produccin de H2O2 , O21 y O2 Metabolismo C4 CAM para disminuir la produccin de H2O2 y O2 Migracin de clorofila para disminuir la produccin de H2O2 , O21 y O2 Disminucin o supresin de la fotosntesis para disminuir la produccin de H2O2 y O2 Modulacin de los fotosistemas y pigmentos antena para disminuir la produccin de O21 y O2 Oxidasas alternativas para disminuir la produccin de O2

Epidermis foliar y mesfilo

Cloroplasto, citoplasma, vacuola

Citoplasma

Cloroplasto

Cloroplasto

Cloroplasto, mitocondria

Modificado de Mittler (2002). Mullineaux y Karpinski (2002).

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Los principales sistemas de eliminacin de ROS en las plantas incluyen a las enzimas antioxidantes superxido dismutasa (SOD), ascorbato peroxidasa (APX) y a la catalasa

(CAT), as como la actividad de quelatacin y secuestro de iones de metales, la cuales disminuye o previene la formacin de radicales hidroxilo, resultantes de reacciones HaberWeiss o reacciones Fenton. El balance de la actividad de los tres sistemas enzimticos: SOD, APX y CAT es crucial para determinar la concentracin relativa estacionaria de radicales superxido y de perxido de hidrgeno, lo cual, a su vez, controla la produccin de radicales hidroxilo. Tal parece que las diferencias en la afinidad al H2O2 de las enzimas APX (afinidad en concentracin de M) y CAT (afinidad en concentracin de mM), son resultado de que las diferentes enzimas pertenecen a dos clases de sistemas de eliminacin de ROS: uno de control fino y otro de eliminacin de exceso en condiciones de estrs (Mittler, 2002). La disminucin de produccin de ROS, es un mecanismo preventivo para evitar el dao oxidativo tan importante, como el de eliminacin de ROS. Dado que muchos factores abiticos inducen estrs y el consiguiente aumento en la concentracin de ROS, cualquier factor anatmico, morfolgico, bioqumico o fisiolgico que disminuya la intensidad del estrs, ser valioso desde el punto de vista de que reduce la produccin de ROS. En la naturaleza, el factor inductor de estrs ms comn es el exceso de captura de radiacin (que genera gran cantidad de poder reductor), versus la poca capacidad de utilizacin del potencial reductor, dependiendo este ltimo en gran cuanta de la concentracin de CO2. En otras palabras, el nivel actual de CO2 (390 L L-1) permite que las plantas C3 utilicen adecuadamente la radiacin solo hasta en un tercio o la mitad de la irradiancia normalmente alcanzada en muchas regiones del planeta. Cuando se rebasa este nivel de saturacin de la radiacin electromagntica (ubicado para plantas C3 entre 500 y 900 mol de fotones m-2 s-1), entonces se presenta un exceso de poder reductor que genera radicales libres, como resultado de la reduccin parcial del O2. En ese sentido, cualquier cambio en la planta que le permita disminuir la captura de radiacin, disminuir, a su vez, el estrs por saturacin de radiacin electromagntica. Ejemplos de lo anterior son las adaptaciones fisiolgicas observadas en plantas C4 y CAM, o bien los movimientos nsticos o de enrollamiento foliar que surgen en algunas especies C3. Otras adaptaciones son: la acumulacin de estructuras reflejantes en la superficie foliar o el acomodo de los estomas en cavidades de la epidermis. Todo lo anterior provoca la 23

disminucin de la captura de radiacin electromagntica y la disminucin de la transpiracin. Otro ejemplo lo constituye la disminucin reversible de la densidad de pigmentos antena de los centros fotosintticos, respuesta que se traduce en una menor captura efectiva de radiacin.

FITOQUMICOS Y ALIMENTACIN HUMANA Son importantes los compuestos antioxidantes en la alimentacin humana? La respuesta es positiva, ya que el estrs oxidativo se encuentra presente en todos los organismos aerobios, y los humanos no son excepcin. Los mismos compuestos fitoqumicos y antioxidantes que se encuentran en las plantas, cumplen en nuestra especie importantes funciones de proteccin y estabilizacin frente a las especies activas de oxgeno (Youdim y Joseph, 2001). Se sabe que la ingesta de alimentos con altos niveles de compuestos antioxidantes y fitoqumicos se relaciona con mayores niveles de los mismos compuestos en el cuerpo humano. Del mismo modo, hay gran cantidad de reportes acerca de los diferentes efectos de diversos fitoqumicos y antioxidantes vegetales sobre la capacidad antioxidante de los rganos y tejidos del cuerpo humano (Cao et al., 1998), la resistencia a las enfermedades (Gate et al., 1999), la prevencin de accidentes vasculares, as como en algunos males degenerativos (Youdim y Joseph, 2001). La ingesta de 400 a 600 g da-1 de frutas y vegetales se asocia con la reduccin de la incidencia de muchas formas comunes de cncer y enfermedades degenerativas. Los compuestos responsables de este efecto benfico son los compuestos fitoqumicos, que al igual que modulan la expresin gnica en las plantas, lo hacen en los humanos al inhibir carcinognesis de diversas formas (Heber y Bowerman, 2001). Los siguientes mecanismos de accin de los compuestos fitoqumicos y antioxidantes los describi Ferrari (2004): 1. Estabilizadores de membranas mitocondriales y promotores de la funcin mitocondrial, esto es, agentes que disminuyen la muerte celular por apoptosis (muerte celular programada) o necrosis.

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2. Agentes quelatantes que disminuyen el dao oxidativo causado por metales libres en forma inica, los cuales son promotores de reacciones Fenton. 3. Antioxidantes que disminuyen el dao celular, estimulan la actividad antioxidante intrnseca, protegen el DNA de la oxidacin e inhiben la muerte celular en rganos clave. 4. Inductores de apoptosis en clulas prenoeplsicas o neoplsicas y agentes promotores de necrosis de tumores.

Una forma prctica de reconocer la presencia de los fitoqumicos es el color. Los frutos y vegetales de color rojo contienen licopeno (el pigmento precursor de los carotenoides, que se encuentran en gran cantidad en los tomates), que se asocia con la salud de la prstata. Los de color amarillo y verde-amarillo, como el maz y varios vegetales de hoja, contienen lutena y zeaxantina, pigmentos que se localizan en la retina y disminuyen el riesgo de degeneracin macular. Los frutos de color rojo y morado contienen antocianinas, antioxidantes potentes que se encuentran en las manzanas rojas, las uvas, las fresas, las frambuesas, las cerezas y en el vino de uva. Los alimentos vegetales de color naranja, como el mango, la zanahoria, la calabaza y el durazno contienen beta-caroteno. El color amarillo-naranja como el encontrado en naranjas, mandarinas y limones se asocia con los flavonoides. Los alimentos blancos del tipo de la cebolla y el ajo contienen compuestos de sulfuro con gran actividad germicida y antioxidante (Heber y Bowerman, 2001). Los vegetales de la familia de las crucferas como el brcoli, la col de Bruselas y el kale contienen glucosinolatos (Heber y Bowerman, 2001); estos compuestos son convertidos en isotiocianatos por una myrosinasa vegetal y por la microflora gastrointestinal. Los isotiocianatos y algunos glucosinolatos bloquean de forma muy efectiva la carcinognesis inducida qumicamente en animales. Los isotiocianatos tambin son inductores de las protenas de fase 2, un grupo de protenas antioxidantes asociadas a la reduccin de la susceptibilidad a la carcinognesis en los mamferos, modelo para el estudio del cncer (Talalay y Fahey, 2001). En la actualidad, gran cantidad de textos, productos y sistemas se proponen para que los humanos aumenten la ingesta de fotoqumicos. Ocasionalmente ocurre confusin al hablar 25

del efecto de ciertos alimentos; para evitarla, Bloch y Thomson (1995) presentan los siguientes conceptos de diversos compuestos y su modo de accin en la salud humana:

1. Agente quimiopreventivo: componente de los alimentos de carcter nutritivo o no nutritivo que, de acuerdo a resultados cientficos, ha demostrado inhibir la carcinognesis. Ejemplo: los polifenoles del t (Camelia sinensis), el resveratrol de las uvas o el vino, los isoflavonoides de la soya, la curcumina de la hierba Curcuma longa. 2. Alimento funcional: cualquier alimento o ingrediente alterado del mismo que produce un efecto benfico, ms all del que proveen los nutrimentos considerados tradicionalmente como lo son las vitaminas, protenas, etc.. Ejemplo, soya por su asociacin con la disminucin de ciertos tipos de cncer, t verde como antioxidante, nueces por la disminucin de accidentes vasculares, ajo por sus propiedades antioxidantes y de quimioprevencin, etc. 3. Fitoqumicos: sustancias que se encuentran en los frutos y vegetales comestibles que pueden ingerirse diariamente en cantidades pequeas. Tienen el potencial de modular favorablemente el metabolismo humano y prevenir el cncer, adems de otras enfermedades de tipo degenerativo. Ejemplos: isoflavonoides, resveratrol, licopeno, quercetina, alil-sulfuros, etc. 4. Nutracutico: cualquier sustancia considerada como alimento o parte de este, que ofrece beneficios mdicos o para la salud, y es til para la prevencin y el tratamiento de enfermedades. Pueden ser extractos de alimentos o el alimento en s considerando su contenido de cierto compuesto activo. Ejemplos: las vitaminas como el cido flico, los minerales (selenio), los extractos de plantas (ajo, Ginko biloba, jengibre) y los extractos de origen animal (carosina, carnitina, quitosano).

Los antioxidantes se encuentran dentro de las categoras de agentes quimiopreventivos y fitoqumicos.

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MANIPULACIN DEL AMBIENTE Y CALIDAD NUTRICIONAL DE LAS PLANTAS Trabajos recientes han demostrado que es posible manipular los mecanismos de defensa de las plantas y los niveles de antioxidantes y fitoqumicos especficos, por medio de la ingeniera de genes (Inz y Van Montagu, 1995), con la manipulacin ambiental (Pastori et al., 2000), con la aplicacin de fertilizantes qumicos u orgnicos, o con inductores qumicos naturales o artificiales que funcionan como sealizadores, antioxidantes y promotores de oxidacin controlada (Beligni y Lamattina, 1999; Dietrich et al., 1999; Kocsy et al., 2001; Benavides-Mendoza, 2002). En otras palabras, el propio sistema de sealizacin y de regulacin de la adaptacin ambiental es potencialmente til para, en cierta forma, dirigir la respuesta de las plantas hacia los fenotipos que se consideran adecuados, es decir, a aquellos que tienen altos niveles de antioxidantes. Surge entonces la pregunta de si el incremento en la cantidad de antioxidantes traer consecuencias indeseables sobre los consumidores humanos o sobre la misma planta. A la fecha no se conocen efectos indeseables en los humanos asociados con un alto consumo de antioxidantes naturales. En cuanto a las plantas, la informacin actual sobre el cambio en el ttulo de antioxidantes totales, no indica que su aumento cause cambios negativos sobre el crecimiento, el desarrollo o la calidad de las plantas. Un tema diferente es el cambio del perfil particular de uno o ms de los antioxidantes de las plantas. En efecto, si los antioxidantes cumplen funciones como sealizadores o promotores de la actividad de ciertos genes, su presencia en mayor o menor concentracin podra cambiar el programa de desarrollo de la planta, lo que dara lugar a cambios fenotpicos

diversos. Algo parecido ocurre en las semillas cuando se busca cambiar la calidad o composicin de las protenas que se almacenan en ellas. Surge el problema de que algunas protenas no se almacenan simplemente como fuente de N, sino que tienen papeles activos en la defensa o en la adaptacin al estrs (Wang et al., 2003). Algunos trabajos recientes parecen indicar que es posible manipular algunos factores del entorno de crecimiento de las plantas, de tal forma que se logre aumentar la capacidad antioxidante total, sin que este cambio se relacione con respuestas negativas en el crecimiento o desarrollo de las plantas. Ejemplo de ello es el uso de soluciones nutritivas con 27

un aumento moderado en los niveles de salinidad, con el propsito de producir frutos de tomate con mayor cantidad de antioxidantes (De Pascale et al., 2001; DAmico et al., 2003; Sgherri et al., 2007). Otro ejemplo lo constituye el uso de pequeas cantidades de elementos traza como el selenio, la plata, etc. que al ser absorbidos por la planta, desencadenan una respuesta oxidativa que, a su vez, se traduce en un incremento en la cantidad total de antioxidantes en las plantas (Cabrera de la Fuente et al., 2006; Rosales-Velzquez et al., 2006). Obviamente, un factor ambiental tan importante como la radiacin electromagntica, en sus componentes de calidad e irradiancia, cambiar la calidad nutricional de las plantas. En efecto, se sabe que Brassica juncea acumula diferentes perfiles de vitaminas si crece en ambientes con luz solar completa o con slo el 50%, resultante del uso de mallas sombra. La disminucin de la radiacin causa disminucin en el ascorbato (seguramente como resultado de la menor disponibilidad de glucosa) y aumento en los carotenoides y en la clorofila, sin modificar el cido flico (Lester, 2006). La respuesta anterior es un ajuste a la capacidad de captura de radiacin que da lugar a cambios en los componentes nutricionalmente importantes de las hojas. Otros efectos descritos en varias especies hortcolas son: el aumento de la concentracin de ascorbato al utilizar fuentes de luz enriquecidas en la banda del azul, el aumento en la cantidad de licopeno en tomate expuesto a radiacin enriquecida en el rojo y la respuesta contraria al enriquecer la radiacin con rojo lejano. Del mismo modo, la exposicin a la radiacin UV-B se asocia con la disminucin de la concentracin celular de ascorbato y carotenoides (Lester, 2006). Esta ltima respuesta seguramente resulta del aumento de la cantidad de radicales libres, resultado de la exposicin a este tipo de radiacin electromagntica. Las respuestas de las plantas a la radiacin electromagntica ocurren en un contexto de concentracin celular de elementos minerales relacionados con las reacciones redox de transferencia de electrones. En este sentido, el Fe, Zn, Cu, Mn, Ca y Mg son determinantes. En general, la mayor disponibilidad de minerales en la matriz de intercambio del suelo resultar en frutas y hortalizas con mayor concentracin de ascorbato, cido flico y carotenoides, a excepcin del nitrgeno cuya concentracin se asocia de forma negativa con la cido ascrbico (Lester, 2006). El cultivo en suelos arenosos dar lugar a frutas y hortalizas con menor cantidad de vitaminas (Lester y Crosby, 2002). 28

Los elementos P, K, Mn, Cu, B y Zn presentan un efecto positivo sobre el ascorbato; los elementos N, K, Mg, Mn, Cu, B y Zn se correlacionan con valores ms altos de -caroteno. Por su parte, al disponerse de niveles adecuados de N, P y B, la concentracin de vitaminas del complejo aumenta (Lester, 2006). Algo parecido sucede con el pH del suelo, ya que este factor causa diferencias en la disponibilidad de nutrimentos minerales. Los extremos de pH disminuyen la concentracin de vitaminas: al aumentar el pH disminuye el ascorbato, mientras que los valores bajos de pH dan lugar a cosechas con escaso contenido de carotenoides (Lester, 2006). Un punto interesante a estudiar es si existe algn efecto sobre la calidad nutricional de los frutos cuando los elementos minerales se aportan en forma sinttica u orgnica. Los pocos estudios rigurosos que se han realizado, indican que existe una diferencia real y que el mayor contenido de vitaminas se obtiene con los fertilizantes orgnicos (Lester, 2006). Es posible que tal diferencia se encuentre en la mayor disponibilidad de elementos minerales al aportar diversos cidos orgnicos, hmicos y flvicos, as como por la conocida capacidad de la materia orgnica de disminuir el potencial redox del suelo y de aumentar la disponibilidad de metales.

CONCLUSIONES Los antioxidantes naturales encontrados en las plantas responden a seales ambientales. Los factores ambientales mencionados son manipulables, en mayor o menor medida, en los sistemas de produccin comerciales, lo cual significa que se encuentra al alcance la posibilidad de mejorar la calidad nutritiva de los productos vegetales que consumimos, respecto al contenido de antioxidantes. Sin embargo, actualmente no existe un consenso en el sentido de que la mayor calidad nutricional implique mayor valor comercial, lo que hace difcil convencer a los productores de que eleven sus costos de manejo en campo para conseguir mayor cantidad de antioxidantes. Es necesaria una estrategia conjunta que abarque el manejo de los suelos, las variedades, el manejo del producto, el almacenamiento, la comercializacin y el consumo, para lograr que la poblacin aumente su ingesta de antioxidantes y vitaminas provenientes de fuentes naturales vegetales.

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REGRESAR

CARACTERIZACIN NUTRIMENTAL DE FRUTOS DE TOMATE HBRIDOS DE CULTIVARES COMERCIALES Y EXPERIMENTALES

J. Siller Cepeda, M.D. Muy Rangel, M. Bez-Saudo, L. ContrerasAngulo, R. Vlez de la Rocha, R. Contreras-Martnez

Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo A.C. Unidad Culiacn. Carretera a Eldorado km. 5.5 Campo El Diez, Culiacn, Sinaloa, CP 80110, Mxico

Correspondencia: jsiller@ciad.edu.mx

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RESUMEN En el estado de Sinaloa se evalan anualmente ms de 100 hbridos de tomate producidas por 22 compaas trasnacionales. Estos materiales experimentales son evaluados y comparados con los materiales comerciales para encontrar los de mayor rendimiento y productividad. A pesar de que los frutos de tomate son una fuente importante de vitamina C, potasio, cido flico, licopeno y -caroteno y de que numerosos estudios epidemiolgicos han demostrado la importancia de consumir este fruto para reducir la aparicin de enfermedades cardiovasculares y diversas formas de cncer, no existe informacin sobre el contenido nutrimental tanto de los materiales de tomate que se cultivan actualmente en Sinaloa, como de los nuevos hbridos en etapa experimental. El objetivo del presente trabajo consisti en caracterizar la calidad nutrimental de los frutos de tomate rojo maduro de cultivares comerciales y experimentales y determinar si existen diferencias en el contenido nutrimental de stas. Se seleccionaron frutos de tomate bola en estado de madurez comercial de 28 materiales hbridos, 14 de hbito de crecimiento determinado y 14 de indeterminado. Se evalu el contenido proximal (protenas, grasas, carbohidratos y minerales) utilizando la metodologa recomendada por el AOAC (1990). Se cuantificaron vitamina C y -caroteno por HPLC y licopeno por espectrofotometra. El mayor contenido de licopeno lo present la variedad Sharon con ms de 60 g/g. Las variedades con mayor contenido de Vitamina C fueron R-494, GVS-51993, XP-12302 y TX9960, las cuales presentaron alrededor de 16 mg/100g. Estas cantidades cubren el 26% de la ingesta diaria recomendada. Los minerales ms importantes en todas las variedades fueron calcio, fsforo y potasio. Se observaron diferencias marcadas entre variedades, principalmente en el contenido de minerales, vitamina C, licopeno y -caroteno. Los resultados obtenidos sern tiles a los productores para seleccionar los materiales a cultivar y comercializar en mercados que demandan productos con alto valor nutritivo.

Palabras Clave: Tomate, proximal, vitamina, licopeno, -caroteno

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INTRODUCCIN La mayora de las exportaciones de hortalizas mexicanas son encaminadas a abastecer la demanda de los mercados estadounidenses y en menor proporcin los de Canad. Sin embargo, la bsqueda de nuevos mercados de exportacin ha dado en los ltimos aos resultados positivos hacia algunos pases de Europa y Japn. Estos acontecimientos han mostrado que para competir en esos mercados es necesario llegar con productos de excelente calidad que permitan sobresalir en estos mercados. Ante la globalizacin de los mercados, el contenido nutrimental es una herramienta que permitir continuar siendo competitivo en los mercados internacionales. La calidad nutrimental, definida por el contenido de nutrientes, vitaminas, minerales y antioxidantes tiene desde este punto de vista, un importante significado en la comercializacin, dado que su conocimiento impacta en las preferencias del consumidor y ayuda a conseguir un mejor precio. Aunado a esto, la evidencia clnica acumulada hasta el momento contina mostrando que el contenido de algunos nutrientes del tomate esta asociado con un menor riesgo de desarrollar ciertas enfermedades crnicas y cncer, lo cual ha incrementado su consumo e inters por conocer su valor nutrimental. Esto demand, que un punto central en la investigacin fuera estudiar el contenido nutrimental de los frutos de tomate para determinar si existen diferencias entre variedades. Aquellos materiales que presenten frutos con alto valor nutrimental, podrn ser promocionados en el mercado con una calidad distintiva y llegar a ser ms competitivos.

MATERIALES Y MTODOS Se seleccionaron frutos de tomate bola en estado de madurez comercial de 28

materiales, 14 de hbito de crecimiento determinado y 14 de hbito de crecimiento indeterminado (Cuadro 1). Los frutos fueron cosechados en estado rojo maduro del campo experimental del INIFAP en Enero de 2004. Los materiales se seleccionaron en base a la informacin de rendimiento y calidad fsica y qumica generada en el ciclo pasado por

Valenzuela (2003) y Siller et al. (2003). Una vez cosechados los frutos se trasladaron a los laboratorios del CIAD Unidad Culiacn donde fueron seleccionados para obtener homogeneidad en el tamao, forma, color y en cuanto a que estuvieran libres de defectos, 35

plagas y enfermedades. El diseo experimental fue en 2 bloques (hbito de crecimiento) y un factor totalmente al azar con 14 niveles (variedad). Los anlisis se hicieron por triplicado. Para el anlisis de varianza se utiliz el paquete estadstico MINITAB 13.1. En los casos donde se encontraron diferencias significativas se emple la prueba de Tukey para la comparacin de medias, con un nivel de confianza del 95%.

Anlisis proximal y de minerales. El anlisis de la composicin nutrimental de los frutos de tomate se realiz de acuerdo a las tcnicas recomendadas por el AOAC (1990). Las determinaciones realizadas fueron contenido de humedad (920.39), protena (988.05), grasas, (920.39), fibra (962.09) y cenizas (942.05). El porcentaje de carbohidratos se determin por diferencia, substrayendo del contenido de humedad el resto de los componentes. Se cuantificaron los minerales siguiendo la metodologa oficial No. 955.06 del AOAC (1990). Despus de la digestin cida de las cenizas, la muestra se filtr y se llev a 100 ml con agua deionizada. Se utiliz un espectrofotmetro de absorcin atmica Varian Mod. AA220 para medir la absorbancia a la longitud de onda especfica para cada mineral: Ca (422.7nm), Na (589.6nm), K (769.9nm), Mg (285.2nm), Mn (279.5nm), Fe (248.3nm), Cu (324.7nm) y Zn (213.9nm). Para cada mineral se construy una curva de calibracin con estndares de referencia de concentracin conocida.

Vitamina C. La extraccin se llev a cabo tomando 10 g de muestra homogenizada con 40

ml de agua HPLC filtrada y fra. La mezcla fue homogenizada usando una licuadora convencional Osterizer a velocidad media por 2 minutos. La mezcla fue filtrada a travs de una malla de organza y posteriormente con papel filtro Whatman No. 41, el sobrenadante clarificado se hizo pasar por un cartucho Sep-Pak C18. Del extracto obtenido se tom una alcuota de 1 ml a la cual se le adicion 1 mg de Dithiothreitol, se mantuvo en reposo por 2 horas en la oscuridad, y se filtr finalmente a travs de una membrana de Nylon de 0.45 m de tamao de poro, para inyectase al sistema cromatogrfico. Se utiliz un cromatgrafo de lquidos Varian equipado con una bomba terciaria ProStar 230 y un detector de arreglo de diodos ProStar330. Se emple una columna Varian C18 de 5 m 150 X 4.60 mm, operada a temperatura ambiente y un inyector con capacidad de 20 l. La fase mvil fue KH2PO4 0.2 M 36

y un flujo de 0.5 ml/min. La deteccin se determin a una longitud de onda de 254 nm aunque se registr el espectro de absorbancia en el rango de 200 a 400 nm. Para el anlisis de resultados se construy una curva de calibracin (R = 99.7%) con soluciones de estndar de cido ascrbico (Sigma-Aldrich) de concentraciones conocidas 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ppm (Gkmen et al., 2000).

-caroteno. Se utiliz la tcnica descrita por Bushway y Wilson (1982). Cinco g de muestra homogenizada se mezcl con 5 g de Na2SO4 y 0.5 g de MgCO3 y se someti a tres extracciones sucesivas con 30 ml de una mezcla de metanol-tetrahidrofurano 50:50 con 0.01% de BHT. Utilizando un homogenizador de tejidos Ultra Turrax T25 y filtrando a vaco entre cada extraccin; los tres filtrados se colocaron en un matraz volumtrico de 100 ml y se utiliz la misma mezcla extractora para aforar. Se tom una porcin de esta solucin y se hizo pasar por una membrana de Nylon de 0.45 m de poro y 25 mm de di metro. El equipo cromatogrfico y la columna fueron los mismos que para vitamina C, la diferencia fue que se utiliz como fase mvil una mezcla de Acetonitrilo:Metanol:Tetrahidrofurano en proporcin 53:35:7, con una velocidad de flujo de 1.5 ml/min. La deteccin se realiz a 460 nm y la cuantificacin mediante una curva de calibracin (R= 98.5%) construida con soluciones de concentracin conocida de un estndar de -caroteno (Sigma-Aldrich).

Licopeno. El licopeno se cuantific por medio de la tcnica espectrofotomtrica recomendada por LycoRed (1995). La muestra se homogeniz y se tomaron 1.25 g dentro de un tubo para centrfuga, se adicionaron 25 ml de mezcla extractora (ter de petrleo:etanol:acetona 50:25:25 con 0.5 g/L de BHT). Se centrifugaron los tubos a 10000 rpm por 16 min, se adicionaron 6.25 ml de agua destilada fra y se centrifugo por 6 min ms. Se dej en reposo para la separacin de fases. En un matraz volumtrico se colocaron 5 ml de la fase superior del tubo y 13 ml de una solucin de BHT al 0.4% en ter, finalmente se llev el volumen hasta el aforo con ter de petrleo. Inmediatamente se midi la absorbancia en un espectrofotmetro UV-Vis Cary 1E Varian a una longitud de onda de 472 nm. Los resultados se calcularon considerando un coeficiente de extincin molar de 3 450. Todo el proceso se llev a cabo a baja temperatura y al abrigo de la luz blanca.

37

RESULTADOS Y DISCUSIN Antes de discutir los resultados es necesario resaltar que la variedad comercial con hbito de crecimiento determinado es la R-494, mientras que para las variedades con hbito de crecimiento indeterminado fueron las variedades comerciales Attention y Gironda. Anlisis Proximal. En el Cuadro 2 y Cuadro 3 se presentan los valores promedio del porcentaje de cada uno de los componentes de los frutos de hbito de crecimiento determinado e indeterminado respectivamente. Aunque los valores para cada variedad son muy cercanos entre s, se presentaron diferencias significativas en cuanto al contenido de protena y grasa entre algunas variedades; sin embargo, el aporte por racin de stos componentes no es muy importante, por lo que no se sealan. La utilidad de estos resultados se debe a que con ellos se elabor la etiqueta nutrimental de cada una de las variedades estudiadas (datos no mostrados). Vitamina C. En la Figura 1a se presentan los valores del contenido de Vitamina C (cido ascrbico) en frutos de tomate de hbito determinado. Las variedades con mayor contenido de Vitamina C fueron R-494, GVS-51993, XP-12302 y TX-9960, presentando entre 14 y 17.2 mg/100 g, estas cantidades cubren entre el 23 y 28 % de la ingesta diaria recomendada de vitamina C en Mxico (NOM-051-SCFI-1994). Aunque la variedad comercial result con el mayor contenido de vitamina C, no present diferencias significativas (p<0.05) con las otras 3 variedades experimentales. Por otro lado, los frutos con menor contenido de vitamina C fueron los de las variedades L-219 y HMX-3824, las cuales presentaron diferencias significativas con respecto a las variedades de mayores niveles de esta vitamina. En la Figura 1b se ilustran los resultados de vitamina C en frutos de tomate de hbito de crecimiento indeterminado. Los frutos con la mayor cantidad de esta vitamina fueron los de la variedad Miramar con 18 mg/100g, Gironda (comercial), CLX 37125 y GVS 1025 tambin presentaron valores similares. Con base en esos resultados, estas variedades experimentales pueden ser elegidas como altas en vitamina C, ya que una porcin de 100 g de estos frutos cubren entre el 25 y 30% del requerimiento diario (NOM-051-SCFI-1994). Aunque la variedad Atenttion es comercial, no present niveles de vitamina C importantes, al igual que los frutos de las variedades Charleston, Badro y GC-42031 que slo 38

alcanzaron niveles entre 10 y 12 mg/100g. Algunos autores reportan en promedio 20 mg/100g de vitamina C para los distintos tipos de tomate, siendo los de tipo cherry los ms ricos en esta vitamina. Los valores encontrados en este estudio coinciden con otros autores los cuales reportan distintas cantidades en un rango de 12.5 hasta 24 mg/100g (Schewfelt, 1986; Lee y Kader, 2000; Binoy et al., 2004). Licopeno. En la Figura 2a se muestran los resultados del contenido de licopeno de los frutos de tomate de las diferentes variedades evaluadas. Existen diferencias marcadas entre variedades, sobresaliendo por su mayor contenido de licopeno la variedad Sharon con ms de 60 /g, seguida por la variedad GVS-51992, Soraya y TX-99960. Las variedades con menor contenido de licopeno fueron la GVS-51993 y la PR-461, sobrepasando apenas los 30 g/g. En este grupo se encontr variedad comercial R la como una mejor caracterstica de comercializacin. Con respecto a los resultados de licopeno en frutos de tomate indeterminado (Figura 2b), los ms altos niveles los present la variedad FA-1912 con cerca de 50 g/g; pero en general todas las variedades presentaron valores cercanos a 40 g/g, s la GVS lo -51994 alcanz apenas los 30 g/g. En comparacin con los frutos de hbito determinado, todas las variedades de tomate indeterminado mostraron un menor contenido de licopeno. El contenido de licopeno para tomate rojo maduro vara entre 30 y 77.4 g/g, segn lo que se ha reportado en otros estudios. Los frutos de las variedades evaluadas se encuentran en el promedio de stos valores (Gross, 1991; USDA, 1998; Nguyen y Schwartz, 1999). Beta-caroteno. El -caroteno es el pigmento carotenoide con mayor actividad como provitamina A, por lo que es muy importante para la dieta humana. Los frutos de tomate evaluados en ste trabajo presentaron cantidades importantes de ste pigmento. Los resultados se ilustran en la Figura 3a; en donde sobresalen por su mayor contenido de caroteno los frutos de la variedad HMX-3824 con 2.7 g/g, siendo diferente sta estadsticamente, aunque los frutos de las dems variedades alcanzaron valores de caroteno entre 2.3 y 2.5 g/g. Los frutos de hbito de crecimiento indeterminado se comportaron de manera muy similar, ya que todas las variedades tuvieron niveles de -caroteno alrededor de 2.5 g/g 39 -494 con 35 g/g. El mayor

contenido de licopeno de las variedades experimentales mencionadas se puede explotar

(Figura 3b). El contenido de -caroteno de ambos grupos de frutos es muy similar y concuerda con lo reportado en la literatura, con valores para tomate entre 1.7 y 5.6 g/g (Azcon-Bieto y Talon, 1993; Tanamachi, 2002).

CONCLUSIONES La informacin generada en este estudio permite clasificar en rangos las distintas variedades en funcin de sus caractersticas nutrimentales. Esta informacin puede ser explotada para promocionar su valor nutracutico en la comercializacin. Las caractersticas que principalmente pueden resaltarse incluyen los contenidos de vitamina C, licopeno y caroteno. El anlisis proximal y de minerales realizado marca pequeas diferencias entre variedades y es til para identificar cada variedad con su etiqueta nutrimental y cubrir as en un futuro inmediato los nuevos requisitos exigidos en los mercados internacionales.

LITERATURA CITADA AOAC, 1990. Official Methods of Analysis. 15th Edition Asociation of Official Analytical Chemists. AOAC International. Washington, D. C., USA. Azcon-Bieto, J., Talon, M., 1993. Fisiologa y bioqumica vegetal. Ed. InteramericanaMcGraw-Hill. Espaa. Binoy, G., Kaur, C., Khurdiya, D. S., Kapoor, H. C., 2004. Antioxidants in tomato (Lycopersicum esculentum) as a function of genotype. Food Chemistry 84:45-51. Bushway, R. J., Wilson, A. M., 1982. Determination of y -carotene in fruit and vegetables by high performance liquid chromatography. Can. Inst. Food Sci. Technol. 15(1) 165-168.

40

Gkmen, V., Kahraman, N., Demir, N., Acar, J., 2000. Enzimatically validated liquid chromatograpic method for the determination of ascorbic and dehydroascorbic acids in fruits and vegetables. J. of Chromatography A, 881 309-316. Gross, J., 1991. Pigments in vegetables. Chlorophylls and Carotenoids. Avi Book. NY, USA. Lee, S. K., Kader, A. A., 2000. Preharvest and postharvest factors influencing vitamin C content of horticultural crops. Postharvest Biology and Technology. 20: 207-220. LycoRed Natural Products Industries, Ltd., 1995. Lycopene in tomato products. LycoRed Protocol No. MU-107 and MU-103, July. Beer-Sheva, Israel. Nguyen, L. M., Schwartz, J. J., 1999. Lycopene: Chemical and Biological Properties. Food Technology. Vol. 53(2) 38-45. NOM-051-SCFI-1994. Especificaciones generales de etiquetado para alimentos y bebidas no alcoholicas http//www.economia.gob.mx/normas/noms/kpronoman/p051scfi.doc Tanamachi Castro, M. J., 2002. Niveles de antioxidantes en variedades hbridas de tomate de larga vida de anaquel. Universidad Autnoma de Sinaloa. Maestra en Ciencia y Tecnologa de Alimentos. Culiacn, Sinaloa, Mxico. Schewfelt, R. L., 1986. Quality of fruits and vegetables. Scientific status sumary. Institute of Food Technologists. 99-106. Siller, J., Bez, M., Araiza, L., Contreras, A., Muy, M. D., 2003. Calidad y vida de anaquel de hbridos de tomate y chile bell. Informe Tcnico Fundacin Produce Sinaloa Ciclo 2002-2003. Culiacn, Sinaloa, Mxico. USDA-NCC, 1998. Carotenoid Database for US Foods Valenzuela, U. J. G., 2003. Informe Tcnico de Validacin de Hortalizas. Fundacin Produce Sinaloa Ciclo 2002-2003. Culiacn, Sinaloa, Mxico. preenvasadas.

41

Cuadro 1. Materiales de tomate bola evaluados y compaa proveedora de semillas. V COMPAA DETERMINADOS INDETERMINADOS COMPAA

Golden Valley Golden Valley LSL Biotechnologies LSL Biotechnologies LSL Biotechnologies Zeraim Gedera Seminis Seminis H - Test Sakata Harris Moran Harris Moran Syngenta Syngenta

GVS-51993 GVS-51992 R-449N

GVS-1025 GVS-51994 FA-1912

Golden Valley Golden Valley Zeraim Gedera Zeraim Gedera Seminis Seminis Enza Zaden Enza Zaden Syngenta Syngenta Syngenta Enza Zaden Enza Zaiden Harris Moran

R-494*

TROFEO

L-219* SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

PS-151052 MIRAMAR ATTENTION* GIRONDA* GC-42031 ZUNI CHARLESTON BADRO CAIMAN CLX-37125

42

Cuadro 2. Composicin Proximal de Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos de Hbito de Crecimiento Determinado.

HUMEDAD PROTEINA GRASA VARIEDAD % GVS-51993 94.70 GVS-51992 95.36 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING 94.63 95.10 94.62 95.36 94.65 94.85 95.60 94.70 94.69 95.17 95.15 94.96 % 0.82 0.73 0.87 0.68 0.96 0.69 0.91 0.86 0.73 0.85 0.84 0.84 0.80 0.78 % 0.04 0.03 0.05 0.01 0.03 0.02 0.03 0.04 0.03 0.02 0.03 0.03 0.03 0.01

CENIZAS FIBRA % 0.51 0.55 0.61 0.47 0.59 0.50 0.51 0.53 0.49 0.58 0.54 0.60 0.49 0.50 % 0.91 0.35 0.57 0.69 0.74 0.72 0.79 0.74 0.72 0.70 0.65 0.72 0.73 0.60

CARBOHIDRATOS % 3.02 2.98 3.27 3.05 3.05 2.70 3.11 2.97 2.43 3.15 3.26 2.63 2.80 3.15

43

Cuadro 3. Composicin Proximal de Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos de Hbito de Crecimiento Indeterminado. HUMEDAD VARIEDAD % GVS-1025 GVS-51994 FA-1912 TROFEO PS-151050 MIRAMAR ATTENTION GIRONDA GC-42031 ZUNI 95.04 96.20 95.52 94.37 95.48 95.08 94.67 94.40 94.97 95.20 % 0.58 0.43 0.46 0.59 0.52 0.53 0.60 0.61 0.53 0.54 0.50 0.59 0.52 0.48 % 0.02 0.01 0.02 0.04 0.02 0.04 0.03 0.02 0.02 0.03 0.03 0.03 0.02 0.02 % 0.47 0 .3 4 0.59 0.82 0.52 0.65 1 .6 5 0.73 0.59 0.55 0.72 0.63 0.60 0.51 % 0.94 0 .5 6 0.69 0 .9 1 0.91 0.99 0.94 1 .0 2 0.82 0.87 0.81 0.93 0.67 0.75 % 2.94 2.44 3 .7 2 3.26 2.55 2.71 2 .1 1 3.22 3.07 2.81 2.94 3.06 2.77 2.96 PROTEINA GRASA CENIZAS FIBRA CARBOHIDRATOS

CHARLESTON94.98 BADRO CAIMAN CLX-37125 94.75 95.42 95.27

44

a)

b)
Contenido de Vitamina C (mg/100g)

Contenido de Vitamina C (mg/100g)

10.0

12.0

14.0

16.0

18.0

20.0

0.0

2.0

4.0

6.0

8.0

10

12

14

16

18

20

GVS-1025
GVS-51992 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

GVS-51994

FA-1912

TROFEO

PS-151052

MIRAMAR

ATTENTION

GIRONDA

0
GVS-51993

Figura 1. Contenido de Vitamina C en Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos. a) hbito de crecimiento determinado; b) hbito de crecimiento indeterminado

45

GC-42031

ZUNI

CHARLESTON

BADRO

CAIMAN

CLX-37125

a)

b)
Contenido de Licopeno (g/g)

Contenido de Licopeno (g/g)

10
10 20 30 40 50 60 0

20

30

40

50

60

GVS-1025

GVS-51994

FA-1912

TROFEO

PS-151052

MIRAMAR

ATTENTION

GIRONDA

0
GVS-51993 GVS-51992 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

Figura 2. Contenido de Licopeno en Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos. a) hbito de crecimiento determinado; b) hbito de crecimiento indeterminado

46

GC-42031

ZUNI

CHARLESTON

BADRO

CAIMAN

CLX-37125

b) a)

Contenido de -caroteno (g/g)

Contenido de -caroteno (g/g)

0.5 1 2 3 1.5 2.5 0
3

0.5 1 2

1.5

2.5

GVS-1025

GVS-51994

FA-1912

TROFEO

PS-151052

MIRAMAR

ATTENTION

GIRONDA

GVS-51993 GVS-51992 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

Figura 3. Contenido de -caroteno en Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos. a) hbito de crecimiento determinado; b) hbito de crecimiento indeterminado

47

GC-42031

ZUNI

CHARLESTON

BADRO

CAIMAN

CLX-37125

REGRESAR

EFECTO DE LA NUTRICIN VEGETAL EN RENDIMIENTO Y VIDA POSCOSECHA EN HORTALIZAS

Maritza Arellano Gil y Marco Antonio Gutirrez Coronado*

Fisiologa de Cultivos. Instituto Tecnolgico de Sonora

*Correspondencia: totono@itson.mx

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RESUMEN
La produccin de hortalizas en el sur de Sonora, se ha incrementado de manera significativa en los ltimos quince aos, de manejarse un rea de alrededor de 800 ha a mas de 15 mil ha a la fecha, sobresaliendo en la diversidad de cultivos, los miembros de las solanceas, tales como el chile, el tomate y la papa y de las cucurbitceas, la sanda, calabacita, meln y pepino, adems de reas constantes de cebollas, brcoli y esprrago entre otras, liderando en reas de produccin chile, papa y sanda a nivel Valle del Yaqui, Sonora. Dentro de los factores de produccin que inciden en el manejo de hortalizas en el sur de Sonora, la nutricin vegetal y uso de fertilizantes juega un papel decisivo, sobre todo en el orden de las relaciones entre los nutrimentos, el abuso de alguno de ellos, el desabasto de otros y la influencia directa dentro de la fisiologa y bioqumica poscosecha de los diversos productos que se obtienen de ellas. Ya que al alterar en cualquier momento del desarrollo de este tipo de cultivos, la cual es muy breve, sobre todo el perodo de emergencia a primeros frutos, el aporte de nutrimentos debe ser de manera rpida y segura, cuidando estn los que se necesiten en cada fase de su crecimiento, dentro de estos tenemos al nitrgeno, fsforo, potasio, calcio, magnesio, fierro, cobre, zinc entre otros.

Palabras claves: Fertilizantes, relaciones nutrimentales, produccin, calidad

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NUTRICIN VEGETAL La nutricin vegetal estudia y concilia las demandas nutrimentales y propiedades del medio con mtodos de mejoramiento en nutricin, su objetivo primordial, es analizar los factores y procesos involucrados en la nutricin de los cultivos en relacin con la produccin en cantidad y en calidad, sin afectar el ambiente y cuidando una buena relacin costo beneficio; esto comprende aspectos fisiolgicos, ecolgicos y bioqumicos. La fertilizacin como parte de la nutricin vegetal tiene como fin el lograr que la alimentacin de la planta satisfaga las expectativas de su cultivo, se le considera como el factor de produccin ms importante despus de la disponibilidad de agua y que junto con la temperatura y las propiedades fisicoqumicas del suelo son los factores primarios que determinan la productividad de stas (Gutirrez, 1995; Uvalle y Osorio, 1998).

Diagnstico nutrimental. La prctica actual de decidir sobre la dosis de fertilizacin, muchas veces se basa en amplias experiencias locales, lo cual ha sido til para obtener rendimientos aceptables, pero a veces no llega a ser efectiva ni econmica. Los suelos difieren ampliamente en su capacidad de suministro, lo cual depende de su reserva total, movilizacin y/o dinmica de fijacin, accesibilidad de la raz a algn nutrimento, o cuando uno o varios elementos se encuentran en cantidades excesivas (niveles txicos); por lo anterior, es necesario utilizar diferentes mtodos de diagnstico en suelos y plantas, que sean una herramienta efectiva para hacer un uso ms adecuado de los fertilizantes; el diagnstico nutrimental tiene como finalidad predecir la deficiencia de un elemento dado y adquiere su mayor valor cuando se emplea en forma preventiva, ya que la aparicin de un problema nutricional significa una disminucin en el rendimiento (Etchevers, 1987; Alcntar y Sandoval, 1999). Los diferentes tipos de anlisis que se pueden utilizar para llevar a cabo un diagnstico nutrimental son: sintomatologa visual, anlisis de suelo, de salinidad, de fertilidad, de extracto de pasta saturada y anlisis vegetal (Grageda, 1999). El anlisis de extracto de pasta nos indica la concentracin de iones de elementos nutritivos disponibles en el suelo, que nos ayuda en el ajuste de la solucin nutritiva que se est utilizando (Burgueo, 1997).

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El anlisis vegetal denominado tambin anlisis foliar de tejidos vegetales anlisis mineral de plantas, se ha convertido en una gran herramienta para identificar y/o confirmar desrdenes nutricionales, ya que correlaciona el contenido de un nutrimento dado, con la apariencia de la planta, rendimiento y/o calidad del producto cosechado. Su objetivo principal es detectar con oportunidad el status de algn elemento con el fin de hacer las correcciones pertinentes al programa inicial de fertilizacin (Grageda, 1999; Castellanos et al., 2000). En los Cuadros 1 y 2 se indica una gua de niveles crticos de concentracin en los principales macro y micronutrimentos en tomate y para cultivos en general. An cuando el objetivo principal del anlisis vegetal es diagnosticar anomalas nutrimentales, tambin sirve para ratificar un diagnstico de sntomas visuales a travs del estudio de la movilidad de los nutrimentos, variaciones en forma, color, hbito y estado general de la planta sin olvidar los factores suelo, clima, manejo e incidencia de plagas y enfermedades; identifica deficiencias latentes en cultivos que aunque no presentan ninguna anomala visual, sus rendimientos son bajos y su calidad deficiente; proporciona evidencia de que los nutrimentos aplicados como correctivos han sido absorbidos por la planta; provee una idea clara de la absorcin y acumulacin de algunos nutrimentos que ayudan a interpretar los resultados de la experimentacin agrcola; adems de reconocer una anomala, ayuda en la identificacin de las causas; al analizar diferentes rganos u organelos celulares, colabora en el entendimiento de los mecanismos de acumulacin y movimiento de nutrimentos, as como su participacin en diversos procesos fisiolgicos de los cultivos; por ltimo, identifica

deficiencias cuando se presentan por efectos antagnicos o competencias nutrimentales no especficas, tal es el caso de la deficiencia de fierro inducida por una absorcin excesiva de manganeso, la alta fertilizacin con fsforo que suele afectar la absorcin de zinc o bien cuando la asimilacin de potasio se ve restringida por una aplicacin de altas cantidades de hidrxido de sodio (Alcntar y Sandoval, 1999; Castellanos et al., 2000; Salisbury y Ross, 2000).

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Cuadro 1. Tabla de valores para interpretacin del anlisis vegetal en tomate en la etapa de floracin. SUFICIENTE % 1.80-2.5 0.18-0.6 3.50-6.0 1.50-2.5 0.33-0.9 ppm B Cu Fe Mn Zn Benton et al., 1991. 23-24 3-4 50-59 40-49 18-19 25-75 5-50 60-300 50-250 20-250 >75 >50 >300 >250 >250

CULTIVO ELEMENTO N P K Ca Mg Tomate

BAJO 1.50-1.79 0.16-0.17 3.00-3.49 1.20-1.49 0.28-0.32

ALTO >2.5 >0.7 >6.0 >2.5 >0.9

Cuadro 2. Niveles crticos de micronutrimentos (ppm) en el anlisis vegetal para cultivos en general. MICRONUTRIMENTO Boro Cobre Fierro Manganeso Molibdeno Zinc DEFICIENTE <15 <4 <50 <20 <0.1 <20 SUFICIENTE 20 - 100 5 - 20 50 - 250 20 - 500 0.5 - ? 25 150 TOXICO >200 >20 no conocido >500 no conocido >400

(Jones, 1983 citado por Grageda, 1999). 52

Relaciones nutrimentales. Uno de los aspectos ms importantes a considerar en la interpretacin de resultados del anlisis vegetal, se refiere a las relaciones nutrimentales, pues es comn que se presenten sntomas de deficiencia de algn nutrimento por un desbalance, en cuanto a su concentracin relativa con los dems. Esta relacin es importante, tanto en el sustrato donde crecen las plantas (suelo o soluciones nutritivas) como dentro de la planta misma, ya que muchas veces altas concentraciones de algn elemento pueden reducir la porcin absorbida de otro causando as una deficiencia de forma indirecta o inducida (Fageria et al., 1997; Alcntar y Sandoval, 1999). Por lo anterior, son frecuentes las interpretaciones errneas cuando se evala solamente la concentracin de un nutrimento, sin considerar su balance con otros que puedan ser antagnicos entre s. Por ejemplo una alta relacin entre Mn/Fe en el medio nutritivo

favorece la deficiencia de fierro; esto indica que si, por ejemplo en manzana el anlisis foliar nos reporta una concentracin de 150 ppm de fierro, no podemos con ste ltimo dato inferir si el cultivo est, o no, bien abastecido, ya que la suficiencia de fierro estar determinada, en parte por la concentracin de Mn; as el fierro ser suficiente adecuado si el rango de Mn oscila entre 60 y 80 ppm, pero si el nivel de ste se encuentra entre 100 y 200 ppm, es de esperarse competencia de Mn en algunos sitios activos de fierro. Finalmente si al manganeso tiene valores arriba de 250 ppm, es casi seguro que el exceso de ste lmite de forma significativa la absorcin y actividad del fierro. Tanto en ste caso especfico, como en otros balances nutrimentales, adems de considerar la relacin Mn/Fe, habrn de considerarse los aspectos antes descritos para la interpretacin del anlisis. De igual manera es muy importante considerar algunas otras interacciones que pueden originar desbalances entre pares inicos: Zn/P, Zn/N, Cu/P, Fe/P, Mo/S, B/Ca, Zn/Fe, Fe/Mo, Cu/Fe, Cu/Mo, Cu/Zn, Ca/Mg, K/Mg, y K/Ca (Mortvedt et al., 1972; Fageria, 2001). Grageda (1999), seala que los resultados del anlisis de suelo generan valores en los nutrimentos que es conveniente relacionar, debido a que actan muy ligados entre s, y pueden llegar a competir por sitios de intercambio en el suelo, lo cual define fuertemente su disponibilidad y su desbalance influir en la decisin de aplicar o no algn nutrimento. En general para calcio es conveniente que el anlisis de suelo arroje valores equivalentes al 6585% de la capacidad de intercambio catinico (CIC) y para magnesio que ocupe el 10-15% y que la relacin Ca/Mg no sea menor a 2 ni mayor que 20 porque podran ocurrir deficiencias. 53

La relacin de potasio y magnesio (K2O/MgO) se aconseja que sea de 1, si supera 4 hay riesgos de carencia inducida de magnesio (Burgueo, 1997; Fageria et al., 1997; Grajeda, 1999). La interaccin entre nutrientes en las plantas cultivadas ocurre cuando al abastecimiento de uno de los nutrientes afecta la absorcin y utilizacin de otros nutrientes, este tipo de interaccin es muy comn cuando un nutriente tiene un exceso de concentracin en el medio de cultivo y pueden ocurrir en la superficie de la raz o dentro de la planta. Las interacciones pueden ser clasificadas en dos categoras principales; en la primera estn los precipitados o complejos que ocurren entre iones por su capacidad de formar vnculos qumicos; y la segunda es entre iones con propiedades tan similares que compiten por el sitio de adsorcin, absorcin, transporte y funcin en la raz de las plantas o dentro de sus tejidos; ste ltimo tipo de interaccin es frecuente entre nutrientes de similar tamao, carga, geometra de coordinacin y configuracin electrnica, y ocurre comnmente entre Ca2+, Mg2+, K+, y Na+. (Benton et al., 1991; Fageria, 2001; Marschner, 2003). Los balances adecuados entre nutrimentos varan con la etapa fenolgica de la planta; as lo que fue ptimo para el desarrollo de la plntula puede no serlo ya para el desarrollo y cuajado de fruto, de ah la importancia de conocer los equilibrios crticos para cada etapa fenolgica (Uvalle y Osorio, 1998; Grageda, 1999). Las relaciones entre nutrimentos pueden ser positivas o negativas o bien que no haya interaccin. Cuando la respuesta del cultivo a la combinacin de nutrientes es ms grande que la suma de sus efectos individuales, la interaccin es positiva; cuando el efecto de la combinacin es ms pequeo, la interaccin es negativa; en el primer caso los nutrientes presentan sinergismo y en el ltimo caso es antagonismo. Si no hay diferencia de la respuesta en la combinacin con respecto a su aplicacin separadamente, hay ausencia de interaccin. En la mayora de los experimentos de nutricin en plantas es estudiado el efecto de un solo nutriente en el crecimiento de las plantas, sin embargo las investigaciones que analizan el efecto de ms de un nutriente en el mismo experimento son limitadas; bajo sta situacin, las interacciones entre los nutrientes pueden ser identificadas tomando en consideracin los efectos de incrementar concentraciones de nutrientes en la toma o absorcin de otro nutriente y su correspondiente respuesta del cultivo (Benton et al., 1991; Fageria et al., 1997; Fageria, 2001). 54

La importancia de las interacciones nutrimentales en la produccin de cultivos, es un reflejo indirecto de su contribucin al rendimiento, investigaciones al respecto muestran que los ms altos rendimientos han sido obtenidos donde los nutrientes y otros factores del crecimiento estn favorablemente balanceados, cuando uno se aleja de ese estado los antagonismos se reflejan en reduccin del rendimiento. Las interacciones antagnicas y sinrgicas estn determinadas por el nivel de cada nutriente en el suelo y la especie de la planta y algunas veces entre cultivares de la misma especie, en suma, la fsica, qumica y las propiedades biolgicas del suelo tambin cambian los patrones de las interacciones de nutrientes en las plantas. El mejor entendimiento de sas propiedades del suelo nos puede conducir a reducir las interacciones negativas y a hacer ms eficiente la produccin de los cultivos. Aunque han sido reportados muchos estudios, las interacciones no estn completamente caracterizadas. Las interacciones entre macro y micro nutrientes necesitan mas estudio y caracterizacin, especialmente bajo condiciones de campo (Salisbury y Ross, 2000; Fageria, 2001; Marschner, 2003). Mortvedt et al., (1972), hacen nfasis en la compleja naturaleza de las relaciones entre crecimiento de la planta, la concentracin de nutrimentos en solucin y la concentracin de los mismos dentro de la planta; el crecimiento depende de varios factores que interactan entre s, tales como: el abastecimiento de nutrimentos, el rango de absorcin de los nutrimentos, la distribucin de stos hacia sitios funcionales y la movilidad de los mismos. Grandes progresos se han logrado a ste respecto, principalmente en lo relativo a los problemas en los puntos de conexin entre factores interactuantes. Los futuros enfoques de la nutricin vegetal probablemente estarn dirigidos a dilucidar los mecanismos de las relaciones entre micronutrimentos a nivel celular y molecular. Por ejemplo existe la necesidad de identificar los sitios de la planta en donde el fierro y el zinc son metablicamente activos y donde las concentraciones excesivas de fsforo pueden interferir con la mxima actividad de sos nutrimentos. Por sta razn, un simple anlisis de fierro y zinc, en hojas, tallos y races, probablemente no ser suficiente para interpretar sus interacciones con fsforo (Alcntar y Sandoval, 1999; Castellanos et al., 2000). El metabolismo del nitrgeno en las plantas requiere un contenido adecuado de potasio en el citoplasma, sin embargo la influencia de NH4+ en la solucin nutritiva y la toma de potasio por la planta es controversial, bajo este contexto se llev a cabo un estudio para identificar el 55

efecto de la forma del nitrgeno en la toma de potasio en chile bell pepper; se evaluaron cuatro proporciones de NH4+ - N a NO3- -N: 0:6, 0.9:5.1, 1.8:4.2, y 3:3, y se concluy que cuando NH4+ - N ocupa entre el 15 a 30% del total del nitrgeno en la solucin nutriente, el rendimiento total del fruto se incrementa, junto con la eficiencia de la fertilizacin de potasio en bell pepper (Gohua, 2002). La aparicin de necrosis apical o blossom-end rot (BER) en tomate est relacionada con una disminucin en la absorcin y translocacin del Ca debida, no solo a las condiciones ambientales, sino tambin a su interaccin con el potasio, nitrgeno, fsforo y boro contenidos en la membrana permeable de la clula y en la estructura de la pared celular, esto se pone de manifiesto cuando el BER se presenta incluso cuando se aportan las necesidades totales de Ca2+, debido a la limitada capacidad de las plantas para regular su distribucin interna, fundamentalmente hacia los rganos de baja transpiracin y rpido crecimiento, como los frutos, esto puede ser potenciado por la inhibicin de la absorcin del Ca en presencia de una elevada concentracin de Mg (Zhu and Shu, 1991; Willumsen et al., 1996; Sams and Conway, 2003). La relacin existente entre la absorcin de Ca2+ y de agua por parte de la planta, tiene gran influencia en la nutricin de las plantas; en tomate, al aumentar la presin de vapor en la atmsfera, disminuye el flujo de transpiracin, y por ende, la absorcin de Ca2+, si adems se presenta una relacin Ca2+ : (K+ + Mg2+ + NH4+) baja, es decir menor de 40 : 60 es muy probable que se manifiesten algunos problemas fisiolgicos derivados de un desbalance nutrimental, como es el caso de la pudricin apical. Con base en la demanda de cationes por parte de la planta de tomate, Lara (1999), expresa dicha relacin, en porcentaje de mol cm-3, y menciona que sta disminuye al pasar de una etapa fenolgica a otra, en la etapa vegetativa el mayor desarrollo se present con la relacin 42 : 58, al pasar a la etapa reproductiva esta relacin cambi a 35 : 65, y en la etapa de desarrollo de fruto la relacin que proyect un incremento en el desarrollo de la planta fue 28:72. Extraccin de nutrientes. Las hortalizas son generalmente de crecimiento rpido y produccin intensiva, adems, las exigencias de calidad (tamao, color, textura, firmeza, sabor, etc.), son mayores, por lo que tienen una demanda intensiva de la mayora de los nutrimentos en un perodo muy corto de tiempo, ya que la mayora de las especies hortcolas son de ciclo corto, completando su ciclo productivo entre 8 y 16 semanas. El estado 56

nutricional de ellas est relacionado con el rendimiento y calidad de la cosecha y se ve afectado, por diversos factores como las propiedades fsicas y qumicas del suelo, la fertilizacin aplicada, la precipitacin y el riego, la demanda per se del cultivo y sus interacciones con otros factores presentes en el suelo (Grageda, 1999; Maroto, 1992). Conocer la cantidad ptima de un nutrimento de inters consumido diariamente durante la estacin de desarrollo de un cultivo, que resulte en un rendimiento ptimo y de calidad, permitira definir la cantidad mnima de este nutrimento por aplicar diariamente y que es requerido para mantener una concentracin estable del mismo, en el medio correspondiente, que conjuntamente con la cantidad ptima de races y su distribucin en el sistema, nos asegurara que las plantas absorben agua y nutrimentos de acuerdo a sus demandas (Ho and Adams, 1995; Hochmuth, 1998). La demanda nutrimental de cada cultivo, est basada en la habilidad de absorber una cantidad de nutrimentos necesarios para alcanzar una meta de produccin y se contabilizan por la concentracin en la materia seca de los productos cosechados, es decir frutos y follaje. Las plantas contienen prcticamente los 92 elementos naturales, pero slo necesitan 16 para un ptimo crecimiento. El contenido crtico de los macronutrimentos en la planta oscila en el rango de 2 - 30 g kg-1 de materia seca, mientras que los micronutrimentos oscilan de 0.3 - 50 mg kg-1 de materia seca (Gutirrez, 1995; Finck, 1998). En condiciones de campo, en el Valle de Culiacn, Sinaloa, al analizar el efecto de tres dosis de nitrgeno (250, 350 y 450), potasio y lminas de riego por goteo (LR), sobre la produccin de frutos de tomate, se midi la tasa de absorcin (en mg planta-1 da-1) mxima y acumulacin de nitrgeno en hojas, tallo y raz, y sta ocurri en el perodo de 30 a 70 das despus del transplante (ddt), posteriormente descendi debido a la demanda de frutos en crecimiento; la acumulacin fue mayor en hojas que en tallos, sin embargo a partir de los 70 ddt ocurri un fuerte transporte de stos hacia los frutos, el cual fue mayor en la dosis mas baja del elemento. Dosis de nitrgeno superiores a 250 k ha-1 no mejoraron la produccin del fruto, y su contenido de slidos solubles totales (grados Brix) y acidez tampoco se incrementaron significativamente, adems la firmeza, color y prdida de peso se vieron disminuidos significativamente. La dosis alta de potasio no increment la produccin, ni los parmetros de calidad arriba mencionados, excepto el color del fruto que si se mejor. El

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tratamiento que mostr alta produccin del fruto, sin afectar la calidad del mismo fue el de 250 kg ha-1 de N + 150 kg ha-1 de K2O + 304 mm de lmina de riego (Villarreal et al., 1999). En las especies de fruto y flor, la extraccin de N, P y K es muy lenta en el primer mes de desarrollo de los cultivos, pero a partir del segundo mes se incrementa drsticamente (floracin, amarre y desarrollo del fruto). En tomates y chiles los elementos extrados se localizan principalmente en los frutos para el caso del N y P, mientras que el K, en tallos y hojas. Para obtener un rendimiento de 50 ton ha-1 el tomate requiere 180, 50 y 200 kg ha-1 de N, P2O5 y K2O, respectivamente (Domnguez, 1997; Grageda, 1999). Programas de fertilizacin. Para el cultivo de tomate en el Valle del Yaqui se recomienda de 200 a 250 kg/ha de nitrgeno, y de 60 a 100 k ha-1 de fsforo. Con relacin a potasio, no se ha encontrado respuesta a su aplicacin en rendimiento de fruto; sin embargo, para mejorar las caractersticas de calidad, y previo anlisis de laboratorio, se puede suplementar con 100 k ha-1 de este elemento. El fsforo y el potasio, as como la mitad del nitrgeno deben ser aplicados antes del transplante, y el resto del nitrgeno antes o durante los dos siguientes riegos, depositando al fertilizante en banda a un lado de las plantas. En riegos por goteo, es conveniente aplicar el 40% de la dosis como fertilizacin base antes del transplante, y el resto deber dosificarse de acuerdo a un calendario de aplicacin durante el ciclo del cultivo (INIFAP, 2001). En las recomendaciones generales de fertilizacin para riego por goteo y gravedad se recomienda aplicar el fsforo en su totalidad en presiembra por sus caractersticas de disponibilidad, en el mismo sentido, el nitrgeno debe fraccionarse a lo largo del ciclo, pero reduciendo su aplicacin en la etapa de amarre de frutos, en cucurbitceas y en chiles es recomendable aplicar la mayor parte antes de floracin con el fin de tener una planta con buen anclaje y desarrollo vegetativo para proteger los frutos de daos por radicacin solar principalmente (Grageda, 1999; INIFAP, 2001). En sistemas de riego rodado la sugerencia de fertilizacin es 150 N, 80 P2O5 y 0 K2O. Para riego por goteo, el programa se basa en recomendaciones para Florida Estados Unidos, realizadas por Hochmuth (1998); suponiendo transplante como mtodo de siembra y un espacio entre camas de 1.8 m, se propone la distribucin que se presenta en el Cuadro 3 de acuerdo al desarrollo del cultivo.

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Con el objetivo de determinar la fertilizacin ptima en tomate, Gretchen y Barker (2002), llevaron a cabo un estudio, donde evaluaron concentraciones de nitrgeno de 0 a 200 mg l-1 acompaado de incrementos proporcionales de otros macro nutrientes como: fsforo (0 a 44 mg l-1), potasio (0 a 160 mg l-1), calcio (0 a 200 mg l-1) y Mg (0 a 48 mg l-1). La concentracin de nutrientes extrables en el medio se increment linealmente con el incremento de nutrientes en la solucin, sin embargo al pasar el tiempo, subieron las concentraciones de nitrgeno en el medio, pero fsforo, potasio, calcio y magnesio disminuyeron. La concentracin de nitrgeno, fsforo y potasio en las hojas se increment al aumentar las cantidades de sos nutrientes en la fertilizacin, pero magnesio y calcio no tuvieron cambios significativos en hojas con el incremento en el abasto de nutrientes; con el tiempo las concentraciones de nitrgeno, fsforo, calcio y magnesio en los tejidos disminuy, pero potasio ascendi. El mximo crecimiento, se dio con las siguientes concentraciones crticas en la solucin nutritiva (en mg kg-1): 30 NO3-N, 30 P, 300 K, 2600 Ca y 800 Mg y en hojas: (en g kg-1): 35 NO3-N, 10 P, 70 K, 35 Ca y 20 Mg. En condiciones de campo se evaluaron diferentes tratamientos de ferti riego para determinar su efecto sobre el crecimiento, rendimiento y calidad del chile jalapeo. Los factores de estudio fueron 3 con cuatro niveles cada factor: carga de tensin de humedad del suelo (30, 60, 90 y 120 kPa), fertilizacin nitrogenada (290, 340 390 y 440 kg ha-1) y potsica (10, 50, 90 y 130 kg ha-1). Los nutrimentos se aplicaron proporcionalmente a los requerimientos hdricos del cultivo a travs de su ciclo. Las variables de estudio fueron: tasa de crecimiento y variables fisiotcnicas, rendimiento acumulado de 3 cosechas y calidad del fruto evaluada con una escala de 1 a 10. Los anlisis arrojaron diferencias altamente significativas y se concluy que el mximo crecimiento, se present con una carga de humedad del suelo de 90 kPa, 390 kg ha-1 de nitrgeno y 90 kg ha-1 de potasio; el rendimiento mximo de 5289.7 kg ha-1 se obtuvo con: 120 kPa, 341.6 kg ha-1 de nitrgeno y 130 k ha-1 de potasio; la mxima calidad del fruto con calificacin de 10 se present en el tratamiento de 114.31 kPa, 435 kg ha-1 de nitrgeno y 10 kg ha-1 de potasio (Bez et al., 2002). La fertilizacin con micronutrimentos para hortalizas, se ha vuelto muy compleja debido a la introduccin de nuevas fuentes y al uso de nuevos mtodos de aplicacin. Generalmente, son mas convenientes las aplicaciones foliares, debido a que se evitan reacciones de fijacin o bloqueo en suelos alcalinos, sin embargo el uso de quelatos a base de EDDHA en 59

nutrimentos como el fierro y zinc, dan excelentes resultados. En el Cuadro 4 se presentan dosis generales de micronutrimentos para aplicaciones al suelo y foliares; en stas ltimas normalmente se aplican de 200 a 400 l ha-1 de solucin (Grageda, 1999). Las aportaciones de micro elementos son de 100 a 1000 veces menores que las de macro elementos y se hacen con soluciones madres de fabricacin comercial, lo cual es muy comn, ya que evita pesar cantidades muy pequeas de sales, lo cual es difcil de realizar y representa un riesgo de error que puede convertirse en toxicidad (Burgueo, 1997).

Cuadro 3. Programa de inyeccin de fertilizantes a travs del sistema de riego por goteo para tomate. DOSIS DE INYECCIN (kg ha-1 DESARROLLO DEL CULTIVO: ETAPA(SEMANAS) N Transplante - primeros brotes (2) Primeros brotes - primeros racimos florales (3) Primeros racimos florales - primer corte (7) Primer corte - 3 corte (1) 3 corte en adelante (3) (Hochmuth, 1998). 1.1 1.7 2.2 1.7 1.1 K 0.9 1.4 1.8 1.4 0.9 dia-1)

RESULTADOS IMPORTANTES DE NUTRICIN VEGETAL EN EL ITSON Dentro de los trabajos conducidos por el equipo de trabajo de fisiologa poscosecha del ITSON, se presentan algunos resultados.

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Tratamientos y Diseo Experimental. Los tratamientos estudiados provienen de una matriz San Cristbal, estos tratamientos se detallan en el Cuadro 5, donde la dosis 4 se ubic como el testigo recomendado para la regin. Las dosis de fertilizacin fueron diversas combinaciones de N, P (P2O5), K (K2O) y 25 kg ha1 de Ca (CaO) y Mg (MgO). Cuadro 4. Dosis generales de micro nutrimentos para aplicaciones al suelo y follaje de cultivos hortcolas. DOSIS NUTRIMENTO PRODUCTO Suelo (kg ha- Foliar (kg 100 lt-1
1

agua) 1.25 1.00 1.25 0.005 - 0.008 1.25 0.25 - 0.625

Fierro Manganeso Zinc Molibdeno Cobre Boro

Sulfato ferroso (FeSO4 7H2O) Sulfato de manganeso (MnSO4) Sulfato de zinc (ZnSO4 7H2O) Molibdato de amonio ((NH4)6Mo7O24 4H2O) Sulfato de cobre (CuSO4 5HO) Tetraborato de sodio (Na2B4O7 10H2O)

15 - 50 15 - 35 5 - 50 0.07 - 2.25 3 - 55 22 - 55

(Grageda, 1999).

La adicin de fertilizantes se realiz en tres etapas: pre trasplante (1/3 de N y 1/2 de P), primeras flores (1/3 de N, 1/2 de P, K, Ca y Mg) y cuajado de frutos (1/3 de N, 1/2 de K, Ca y Mg). Los fertilizantes usados fueron: urea, fosfato mono amnico, sulfato de potasio, nitrato de calcio y sulfato de magnesio. El diseo experimental fue bloques al azar con cuatro repeticiones; cada unidad experimental const de cuatro surcos de 10 m de largo. Se sembraron las siguientes hortalizas: tomate (Cv Tequila), chile caribe (Cv Santa Fe), pepino (Cv Indio) y calabaza (Cv Robers), el primero a 2 metros y el resto a un metro de separacin entre surcos, la segunda semana de noviembre del 2004, as como papa (Cv Atlantic) bajo

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condiciones de invernadero. Aqu se presentarn avances de investigacin slo en tomate, pepino y papa.

Cuadro 5. Descripcin de los tratamientos de fertilizacin. Tratamiento N P K Ca Mg

Dosis de nutrimentos - - - - - - - - - - - - - kg ha-1- - - - - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 100 150 200 250 300 350 400 450 50 50 100 150 150 150 200 200 250 50 100 100 150 200 300 300 400 300 25 00 25 00 00 25 00 00 25 25 00 25 00 00 25 00 00 25

Variables evaluadas. Nmero y peso de frutos, Clorofila total con Spad (Soil Plant Analysis Development 502 de Minolta) (Kantety et al., 1996; Rodrguez et al., 1998 y Swiader y Moore, 2002); Acidez titulable (% de cido ctrico por titulacin con NaOH), grados brix (slidos solubles en grados brix con refractmetro RHB-32), resistencia a la penetracin (en kgf con penetrmetro Fruti Pressure Tester FT-327 (slo en tomate) y prdida de peso por diez das.

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RESULTADOS Y DISCUSIN

TOMATE

Nmero de frutos total. En el nmero de frutos total, es decir la suma de los once cortes, se presentaron diferencias significativas, (Cuadro 6), y sobresalen los tratamientos 4 y 6 que representan las dosis intermedias de las dosis de fertilizacin evaluadas, lo cual establece un lmite mximo de 300 kg ha-1 para la fertilizacin nitrogenada, resultados similares reportan Elamin y Al-Wehaibi (2005) en el rendimiento del tomate con la dosis 368-70-175 bajo condiciones de campo; Colla et al., (2001) no encontraron diferencias en rendimiento en dosis de 80 a 160 kg ha-1 en tomate cultivado en suelo arenoso. Respecto a las dosis de potasio aplicadas podemos observar que los tratamientos 1, 5 y 9 con 50, 200 y 300 kg ha-1 se comportaron de manera similar, por lo tanto se recomienda hacer un manejo racional de este mineral para evitar posibles desbalances nutrimentales y adversos efectos ambientales (Ho y Adams, 1995; Mulholland et al., 2001; Burgarn et al., 2002). Peso de frutos total. Al analizar los frutos, se presentaron diferencias significativas (Figura 1) en el peso, y destacan los tratamientos 4 y 6 los cuales corresponden tambin al mayor nmero de frutos; resultados similares en rendimiento de tomate reportaron Villarreal et al., (2002), con las dosis de 250 a 450 kg ha-1 de nitrgeno a campo abierto y suelo Pellustert de Culiacn, Sin.; se han presentado evidencias del efecto benfico del potasio en el rendimiento (Valencia, 2003), pero en este estudio no se obtuvo respuesta, ya que no fue requerido un alto abastecimiento de este nutriente para lograr altos rendimientos (Ho y Adams, 1995), sin embargo Castellanos et al. (2000), recomiendan aplicaciones hasta de 150 kg ha-1 en suelos con muy altos contenidos de ste elemento en forma intercambiable (Cuadro 1). Alrededor del 30% de los frutos se clasificaron como rezaga, donde uno de los principales problemas fue pudricin apical, debida tal vez a que las plantas fueron expuestas a alta temperatura durante la floracin y llenado del fruto, lo cual se asocia con disminucin en el transporte de calcio, de tal manera que el problema de pudricin apical se observ por igual en los tratamientos con y sin calcio en el estudio aqu presentado. Investigaciones previas realizadas por Ho et al. (1999), sobre efectos de altas temperaturas, demostraron 63

que el polen muere, se bloquea la fotosntesis y por ende el crecimiento general de las plantas expuestas, adems el proceso de maduracin se interrumpe y puede promover determinismo.

Cuadro 6. Nmero promedio de frutos de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. Trat N P K Ca Mg Num. frutos en 4m2

Dosis de nutrimentos - - - - - - -kg ha-1- - - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 100 150 200 250 300 350 400 450 50 50 100 150 150 150 200 200 250 50 100 100 150 200 300 300 400 300 25 00 25 00 00 25 00 00 25 25 00 25 00 00 25 00 00 25

164.75 163.25 160.00 180.25 155.25 174.5 156.5 154.00 160.25 4.53 163.19 14.61 5.793

bc bc bc a c ab c c bc

C. V. (%) Media DMS F Trat.

Medias con la misma letra dentro de cada columna no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05)

64

Clorofila. Las unidades SPAD medidas despus de las dos primeras aplicaciones de los tratamientos de fertilizacin al suelo (Cuadro 7) presentaron diferencias estadsticamente significativas para el tratamiento 6, el cual present tambin los mayores rendimientos, y por lo tanto la mayor eficiencia para el traslado de los fotosintatos hacia los frutos, aunque no se presentaran diferencias en la tasa relativa de crecimiento (Ho, 1996 y 1999). Los niveles de nitrgeno del tratamiento 6 coinciden con los recomendados por Villarreal et al. (2002) bajo condiciones climticas de la regin de Culiacn, Sinaloa. Los valores de las unidades SPAD encontradas se encuentran dentro de los rangos normales que oscilan de 40 a 60 (Rodrguez, et al., 1998), por lo que se deduce que no se vio afectado el transporte y/o utilizacin de asimilados por limitacin de fsforo, que al agudizarse, se ven afectadas la respiracin y fotosntesis (De Groot et al., 2001).

18 16

REZAGA
ab

CHICO
a

MEDIANO
a

GRANDE

ab bc ba

14 12

abc

bc

kg 4m-2

10 8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Tratamientos

Figura 1. Peso total de fruto de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. La media total fue 13.365 kg 4m-2, C.V. 10.6%, DMS = 2.06. Medias con la misma letra dentro de cada barra no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05). 65

Cuadro 7. Unidades Spad en plantas de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. Dosis de nutrimentos Tratamiento N P K Ca Mg Pre transplante Primeras flores Cuajado de frutos - - - - - - - kg ha - - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 100 50 50 50 25 25 54.52 ab 52.17 cd 52.70 abcd 52.65 bcd 54.70 ab 54.95 a 53.35 abcd 51.52 d 53.82 abc 2.92 53.37 2.27 2.3904 59.95 bc 61.55 abc 62.65 ab 60.15 bc 56.85 d 63.20 a 61.25 abc 59.62 cd 56.85 abc 3.31 60.23 2.93 3.7033 58.52 58.15 57.90 57.79 57.75 56.20 57.34 56.42 57.62 5.08 57.52 2.58 0.2727
-1

Clorofila (uc)

100 00 00

150 100 100 25 25 200 150 150 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 C. V. (%) Media DMS F Trat.

Medias con la misma letra dentro de cada columna no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05)

Acidez titulable. Se encontraron diferencias estadsticamente significativas en la acidez determinada al momento del corte, los tratamientos evaluados presentaron valores que promediaron entre 0.3 y 0.6% de acidez (Cuadro 8), pero para efectos del anlisis estadstico 66

se transformaron a arcsen. Zambrano et al. (1996) no pudieron identificar una tendencia en el porcentaje de cido ctrico en frutos de tomate con diferentes estados de madurez desde la fisiolgica y completamente maduro y oscilaron de 0.39 a 0.46 % de acidez. En relacin al potasio, se observa una ligera tendencia entre la cantidad de fertilizante aplicado y el porcentaje de cido ctrico en cultivo de tomate, respecto a esto, Ho y Adams (1995), encontraron que la acumulacin de cido ctrico, al igual que otros cidos orgnicos, se debe al mecanismo de balance de carga catin-anin que tiene lugar cuando el potasio es transportado sin un anin acompaante hacia el interior del citoplasma (Marschner, 2003); sin embargo, los tratamientos de fertilizacin nitrogenada y potsica evaluados en tomate a nivel de campo por Villarreal et al., (2002), en Culiacn, Sinaloa, y bajo condiciones de invernadero por Burgarn et al., (2002), no presentaron diferencias estadsticas en los valores de acidez determinados por titulacin; aunque ste ltimo encontr una tendencia a la alza en la acidez en un pequeo intervalo de incremento en las concentraciones de potasio. Es importante denotar que ninguno de los tratamientos evaluados perturbaron la acidez de los frutos, la cual es un componente clave en la calidad de la fruta de tomate y por lo tanto se puede afirmar que esta no es afectada por las dosis de fertilizacin aqu estudiadas.

Slidos solubles totales. En el Cuadro 8 se observa que todos los tratamientos promediaron 5.5 grados brix, por lo que no fueron estadsticamente diferentes; Zambrano et al. (1996), al analizar frutos con muy diferentes estados de madurez encontraron un rango pequeo que oscilaba de 4.47 a 4.9 % de slidos solubles. La concentracin de azcar es determinada por el transporte de foto asimilados a los frutos y puede ser manipulada al alterar las relaciones de agua en la planta a travs del riego, adems de la temperatura y la cantidad de luz, sin embargo, sta ltima no tiene limitaciones en la regin del Valle del Yaqui, Sonora; se ha relacionado directamente al potasio con la calidad y mas especficamente con la migracin de los glcidos hacia los frutos y su condensacin al estado de azcares (Ho, 1999; Marschner, 2003). En un estudio llevado a cabo en tomate saladette de crecimiento determinado en 5 localidades del centro de California, no se encontraron diferencias significativas entre las aplicaciones de hasta 370 kg ha-1 de potasio, ya que los frutos promediaron 4 grados brix (Hartz et al., 1999), sin embargo Valencia (2003), vio incrementados los slidos solubles al combinar potasio con fertilizantes nitrogenados de 67

lenta liberacin, en suelos pobres con bajos niveles nutrimentales. Las pequeas variaciones en los slidos solubles observadas pueden estar relacionadas adems de la disponibilidad de potasio y magnesio, con las caractersticas del cultivar, los fertilizantes el manejo del riego ya que es conocido que el potasio regula el potencial osmtico del fruto y la apertura de estomas, lo cual influye en el intercambio de gases y la respiracin; cuando se encuentran altas concentraciones de potasio en frutos puede deberse a un dficit de agua y no al incremento de la importacin de potasio al fruto en si (Aydin y Yoltas, 2003; Burgarn et al., 2002 y Ho et al., 1987).

Resistencia a la penetracin. La resistencia a la penetracin arroj diferencias estadsticas (Cuadro 8), los frutos de los tratamientos evaluados mostraron una firmeza promedio de 5 a 6 Kgf, los cuales son similares a los reportados por Araiza et al. (1997) en hbridos de tomate con larga vida de anaquel, cosechados en el valle de Culiacn, Sinaloa; est firmemente documentado que el calcio mejora este parmetro al proporcionar mayor rigidez a la pared celular, adems de proteccin contra el estrs hdrico y retardar la maduracin del fruto (Marschner, 2003; Hirschi, 2004), esto se comprueba al identificar los frutos de los tratamientos 1, 3, 6 y 9 que contienen calcio en la misma cantidad con los valores ms altos de firmeza. Lozano et al., (1995), Braas et al., (2001) y Villarreal et al., (2002) no hallaron respuesta en la firmeza de los frutos de tomate, al variar grandemente las cantidades de calcio aplicadas.

68

Cuadro 8. Parmetros de calidad y vida poscosecha de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. Trat Dosis de nutrimentos N P K Ca Mg Acidez (%) Brix Resistencia Prdida de peso (Kgf) (%)

- - - - - - kg ha-1- - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 50 50 25 25 0.55 c 0.62 abc 0.62 abc 0.57 bc 0.59 abc 0.65 abc 0.67 ab 0.60 abc 0.69 a 0.05% 0.62 0.02 9 1.74 5.5 5.6 5.5 5.5 5.6 5.4 5.5 5.4 5.6 3.1 5.5 6.47 a 5.70 d 6.30 ab 6.05 bc 5.87 cd 6.32 ab 5.37 e 5.82 cd 6.30 ab 3.58 5.88 0.30 17.94 10.06 ab 12.05 bc 11.05 bc 9.06 a 10.06 ab 12.05 c 9.06 a 13.04 c 12.05 c 0.83 10.94 0.01 5.62

100 50 100 00 00 150 100 100 25 25 200 150 150 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 C. V. (%) Media DMS F Trat.

Medias con la misma letra dentro de cada columna no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05)

Prdida de peso. Los tratamientos de fertilizacin disminuyeron entre el 6 y 7% de su peso inicial y hubo diferencia estadstica entre los tratamientos (Cuadro 8), aun cuando se utiliz un cultivar con larga vida de anaquel (Tequila), valores similares de prdida de peso se 69

encontraron en un estudio de calidad poscosecha realizado por Araiza et al. (1997) en el valle de Culiacn. El tratamiento 7 (350-200-300-00-00) y 4 (200-150-150-00-00) fueron los que perdieron menos peso, sin embargo no se puede observar una tendencia respecto a la cantidad de nitrgeno y potasio, ya que el 7 tuvo la mayor prdida y el nueve al igual que el 1 tuvieron un comportamiento intermedio; de tal forma que no se tuvo un efecto marcado de la nutricin en este parmetro de calidad, aunque hubo tratamientos a los que se aplic hasta 450 kg ha-1 de nitrgeno, lo cual podra generar frutos muy suculentos con ms probabilidades de perder el peso de sa agua durante el perodo inmediato de poscosecha (Tatabei et al., 2003). Por otra parte, Villarreal et al., (2002), no pudieron establecer una relacin clara entre la dosificacin de nitrgeno y potasio con el comportamiento del peso de los frutos en poscosecha, an cuando esta comprobado que el potasio tiene un efecto hidratante en la clula lo que disminuira la prdida de agua en poscosecha (Marschner, 2003). Respecto del calcio, no se revel un efecto favorable hacia los tratamientos 1, 3, 6 y 9, los cuales perdieron un porcentaje de agua intermedio o bajo.

PEPINO

Nmero de frutos. Present diferencia significativa (Tukey, p<0.05). Los tratamientos con las mayores cantidades de frutos fueron el 2 y el 8 con casi 50 %, mas que el testigo (Cuadro 9), esto se atribuye a que la planta de pepino responde favorablemente a distintas dosis de nutrimentos, pero en particular a una relacin 2:1:2 de N P K. Baez et al., 2002, reporta resultados favorables con dosis de N desde 290 a 440 y K de 10 a 130, lo cual es importante para disear el esquema de fertilizacin que permita el adecuado balance de nutrimentos que de como resultado un ptimo rendimiento (Salisbury y Ross, 2000). No hubo una respuesta favorable en los tratamientos con Ca y Mg.

Peso de frutos. Los tratamientos 8 y 2 tuvieron estadsticamente los pesos ms altos, al igual que en nmero de frutos, mejorando en casi 60% el peso del tratamiento 4 designado como testigo (Cuadro 9). En los tratamientos con Ca y Mg, y en aquellos donde las concentraciones de N, P y K fueron pequeas, se present un peso bajo, comportamiento 70

que se ha reportado en sanda (Murakami y Araki, 2001) cuando se utilizan entre 140 y 200 kg ha-1, sin embargo cuando se excede el nivel de N (tratamiento 9), se genera una condicin de exceso que se manifiesta con daos en el tejido vascular, restriccin en la recepcin de agua y finalmente rendimientos bajos (Jones et al., 1991).

Peso seco. Se present una relacin directa entre el peso seco y los tratamientos con las mas altas cantidades de nutrimentos; la mayor diferencia estadstica la marc el tratamiento 8 con 47 % mas peso que el testigo, seguido de los tratamientos 6, 7 y 9 (Cuadro 9), situacin que se atribuye a los altos niveles de N, P y K suministrados, lo cual favorece la multiplicacin celular y el contenido proteico, manifestados en el desarrollo vegetativo de la planta; esto debido a que N y el P son parte estructural de las molculas de protenas (Rodrguez, 1989); sin embargo, las plantas que crecen con exceso de nitrgeno, muestran un crecimiento excesivo de la zona area, pero frutos pequeos (Salisbury y Ross, 2000).

Resistencia a la penetracin. No se obtuvo diferencia significativa, pero se presenta una tendencia de aumento en los tratamientos que contienen calcio, magnesio y bajas cantidades de nitrgeno, a excepcin del 9, debido a que ste contiene cantidades elevadas de N y K (Cuadro 10); el N promueve la existencia de frutos ms suculentos y por lo tanto poco firmes y el K genera problemas en la toma y asimilacin de calcio, el cual contribuye a la integridad de la membrana por lo tanto a la firmeza de los frutos. Al evaluar la textura del pepino, Sajnn et al. (2003) comentan que los puentes de calcio entre los polmeros ppticos han demostrado ser los responsables de la adherencia clulaclula y de la integridad del tejido fino del mesocarpio del pepino.

Prdida de peso. A pesar de no haber encontrado diferencias significativas, los tratamientos que contienen calcio como el 3, 6 y 9 resultaron ser los mas consistentes en su comportamiento bajo condiciones de almacenamiento, con 14, 10 y 11% menos prdida de peso que el testigo (Cuadro 10), situacin que Marschner (2003), atribuye a que el contenido

71

adecuado de calcio es esencial para consolidar las paredes de la clula y los tejidos finos de la planta, ya que al ser utilizado como pectato fortalece la lamina media de la pared celular. Cuadro 9. Componentes de rendimiento en respuesta a la fertilizacin al suelo con N, P, K, Ca y Mg en pepino. Tratamiento N P K Ca Mg Nmero de Frutos g 2m-2 g 0.5m-2 Peso de Frutos Peso seco

- - - - - - - - kg ha-1- - ---50 50 50 25 25 13.00 bcde 16.60 a 13.60 abcd 10.60 de 12.40 bcde 11.20 cde 14.40 abc 15.20 ab 10.00 de 3.73 19.52 13.00

4152.63 ab 4792.31 a 4391.24 ab 3018.84 c 3538.10 bc 3468.30 bc 4706.32 a 4926.23 a 2991.56 c 4.42 20.23 3998.39

87.69 108.79 95.89 89.12 93.97 101.55 96.65 105.77 87.27 0.51 22.53 95.52

100 50 100 00 00 150 100 100 25 25 200 120 120 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 F Tratamientos CV % Media

CV = coeficiente de variacin. En la columna medias con la misma letra son

estadsticamente iguales (Tukey, 0.05).

72

Cuadro 10. Componentes de calidad y clorofila en respuesta a la fertilizacin al suelo con N, P, K, Ca y Mg en pepino. Clorofila Tratamiento Resistencia Prdida a la penetracin N P K Ca Mg de peso 1 2 3 Aplicacin de fertilizante

- - - - - - - - kg ha-1- - ---50 50 50 25 25

Kgf 9.82 8.92 9.10 2.10 4.22 8.25 8.72 8.60 4.20 3.92 39.76 7.10

g 15.95 16.89 13.40 15.65 17.57 14.04 13.34 15.72 13.88 1.27 20.29 16.82

- - - - - - - - - - - - - uc- -----------34.21 ab 42.02 42.87 33.61 ab 43.23 44.39 32.46 b 42.29 45.90 30.21 ab 42.37 43.40 31.35 ab 44.13 47.73 34.76 a 42.21 42.08 34.67 a 44.25 42.04 35.29 a 43.91 42.70 32.15 ab 43.57 46.43 2.41 6.74 33.19 1.16 0.84

100 50 100 00 00 150 100 100 25 25 200 120 120 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 F Tratamientos CV % Media

3.84 10.18 43.10 44.17

uc = unidades clorofila. CV = coeficiente de variacin. En la columna medias con la misma letra son estadsticamente iguales (Tukey, 0.05).

73

Clorofila total. En las mediciones llevadas a cabo despus de la primera aplicacin de fertilizantes, se encontr diferencia significativa, donde la respuesta a los nutrimentos aplicados muestra rangos de 30.21 a 35.29 unidades de clorofila (uc), siendo los tratamientos 8, 6 y 7 los mejores, superando al testigo con 17%, 15% y 14% respectivamente, estos tratamientos manejan hasta 400 kg ha-1 de N, con excepcin del 9, por lo que se denota el estmulo en la molcula de clorofila, condicin no alcanzada por el testigo (Tratamiento 4). Despus de la segunda aplicacin de fertilizantes no se encontr diferencia significativa, sin embargo se registraron mas de 10 uc que en la primera

aplicacin, lo que demuestra que los nutrimentos fueron asimilados con el paso del tiempo. En la tercera aplicacin tampoco se observa diferencia estadstica, debido a una posible estabilizacin de la molcula de clorofila al no haber mas adiciones de nitrgeno (Cuadro 10). El medidor SPAD ha sido ratificado como un mtodo confiable para estimar con precisin la relacin entre las dosis ascendentes de fertilizacin nitrogenada y el nivel de clorofila, en cultivares de meln y calabaza en diferentes tipos de suelo (Stewart, 2001; Swiader y Moore, 2002).

PAPA

Nmero de tubrculos. Los resultados obtenidos en el nmero de tubrculos se pueden observar en el Cuadro 11, mostrando una diferencia estadsticamente significativa, en donde el tratamiento 8 supera al testigo con un 15%, teniendo dosis altas en N, P y K, pero careciendo de Ca y Mg. En el tratamiento 6 se puede observar un aumento en un 10% con respecto al testigo, siendo las dosis de nutrientes similares al testigo pero con porcentajes de Ca y Mg. El tratamiento 9 fue igual de efectivo que el testigo, con ms del doble de concentracin en las dosis de N, P y K, e iguales dosis de Ca y Mg. Mientras que el tratamiento 5 fue el ms deficiente con un 55% por debajo del testigo en el nmero de tubrculos, seguido del tratamiento 3 y 2, esto debido a que las dosis de nutrientes eran las ms bajas, siendo que durante las primeras etapas de tuberizacin es cuando se requiere la mayor absorcin de nutrientes.

74

Con un exceso de nitrgeno, la riqueza en fcula puede verse disminuida la podredumbre encuentra un medio ms favorable para su desarrollo y la madurez se retrasa. En general en las dosis de nitrgeno se debe de tener especial cuidado, el rendimiento del cultivo se ve muy afectado, aun antes de que aparezcan sntomas visibles de su deficiencia, no debe aadirse ni en exceso, ni demasiado tarde para que no halla una vegetacin demasiado desarrollada en la ltima fase del ciclo vegetativo que impida o disminuya la tuberizacin (Guerrero, 1990; Domnguez 1990).

Peso fresco. En el cuadro 11 se puede apreciar una diferencia significativa en el peso total de los tubrculos por tratamiento. El tratamiento 7 el cual carece de Ca y Mg, super a los dems tratamientos en un 47.47% ms con respecto al testigo, seguido por el tratamiento 8 el cual super al testigo en un 24.21%, al igual que el tratamiento anterior carece de Ca y Mg, pero con dosis ms altas en N y K. Mientras que el tratamiento 6 super al testigo en un 9.53% teniendo dosis similares a las anteriores pero con Ca y Mg. Los tratamientos 9 y 5 se mantuvieron con resultados similares al testigo y los tratamientos 3, 2 y 1 obtuvieron resultados por debajo del testigo, siendo el ms deficiente este ltimo con un 34.92% menos que el testigo, con dosis bajas en N, P, y K, pero adicionado con Ca y Mg. Los macronutrientes, sobre todo el nitrgeno es un factor determinante en el rendimiento, ya que favorece el desarrollo de la parte area y la formacin y engrosamiento de los tubrculos, por lo que es de esperarse que dosis altas y balanceadas den como resultado mayor consistencia y crecimiento del tubrculo. En muchas especies, el fsforo y el nitrgeno interactan estrechamente afectando a la madurez, de modo que el exceso de nitrgeno la retarda y la abundancia de fsforo la acelera (Salisbury y Ross, 2000).

Peso volumtrico. Los resultados en cuando a esta variable mostraron una diferencia estadsticamente significativa. El tratamiento 7 super al testigo con un 46.49%, seguido por el tratamiento 8 con un 23.56% y el tratamiento 6 con un 6.36%. Estos tratamientos contenan dosis altas de nitrgeno, fsforo y potasio, y slo el tratamiento 6 contena dosis de calcio y magnesio. Los tratamientos restantes estuvieron por debajo del testigo regional, siendo el tratamiento 9 y el tratamiento 5 los ms cercanos al testigo. Los tratamientos 3, 2 y 75

1 fueron en descenso, siendo este ltimo el ms deficiente en un 38.85% menos que el testigo (Cuadro 11).

Cuadro 11. Componentes de rendimiento en respuesta a la fertilizacin al suelo con N, P, K, Ca y Mg en papa en invernadero. Nmero de Tratamiento tubrculos totales N P K Ca Mg g m-2 4.25 abc 3.5 bc 2.5 c 5.0 ab 2.25 c 5.5 ab 4.0 abc 5.75 a 5.0 ab 105.7 c 113.1 bc 136.7 cde 162.3 bcd 147.6 bcde 177.8 bc 239.9 a 201.6 ab 159.6 bcde Peso de tubrculos Totales Peso volumtrico de tubrculos

- - - - - - - - kg ha-1- - - - - - 50 100 150 200 250 300 350 400 450 50 50 100 120 150 150 200 200 250 50 100 100 120 200 300 300 400 300 25 00 25 00 00 25 00 00 25 25 00 25 00 00 25 00 00 25

cc 96 c 106abc 130 bcd 157 bcd 141 bcde 167 bc 230a 194ab 151 bcde

CV = coeficiente de variacin. En la columna medias con la misma letra son

estadsticamente iguales (Tukey, 0.05).

Algunas veces la planta de papa puede mostrar sntomas de deficiencia de magnesio, sobre todo cuando los abonos son ricos en potasio, ya que el antagonista del magnesio es este ltimo, que al encontrarse en abundancia detiene la absorcin magnsica (Garca y Garcia, 76

1982). Domnguez (1990), reitera esto al decirnos que el exceso de otros elementos como el calcio y el potasio puede producir deficiencias en magnesio.

CONCLUSIONES El reconocer la accin directa de cada nutrimento en el desarrollo de las hortalizas, sobre todo en el rendimiento y fisiologa poscosecha de sus frutos, es de vital importancia, ya que ah radica mucho del xito en la produccin de stas.

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REGRESAR

NUTRICIN VEGETAL CON FERTILIZANTES INTELIGENTES: CASO TOMATES

Catalina Mungarro Ibarra y Marco Antonio Gutirrez Coronado*

Fisiologa de Cultivos. Instituto Tecnolgico de Sonora

*Correspondencia: totono@itson.mx

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RESUMEN A nivel mundial las hortalizas, junto con las frutas ocupan actualmente el segundo lugar de los productos agropecuarios apenas aventajados por los cereales y se estima que tan solo dos hortalizas contribuyen con el 50% de la produccin mundial: la papa y el tomate, lo cual nos indica el enorme valor que representa ste ltimo, no solo en el comercio, sino tambin en el sistema alimentario. A nivel nacional, el tomate es el principal producto hortcola de exportacin, ya que representa el 37% del valor total de las exportaciones de legumbres y hortalizas y el 16% del valor total de las exportaciones agropecuarias. Debido a la gran demanda que se tiene de hortalizas, se ha visto la necesidad de buscar nuevas opciones para el mejoramiento de las mismas, a fin de obtener mayor produccin con calidad para hacerlas ms competentes en el mercado. Por otro lado, los elementos nutritivos de los fertilizantes utilizados tradicionalmente, en gran parte pueden no estar disponibles para planta reduciendo as su eficiencia. As mismo, se conoce que en las plantas existe una relacin estrecha entre la presencia de cidos orgnicos en la raz y un aumento en la absorcin de iones, dando con ello una mejor eficiencia en la toma y distribucin de los nutrimentos. Un caso particular es en tomates, por lo tanto, la presente investigacin est enfocada a la evaluacin del efecto de la adicin del cido polihidroxicarboxlico(PHCA), un fitoestimulador que ha dado respuestas satisfactorias en rendimiento agronmico y calidad de los cultivos, a frmulas fertilizantes puras sobre la nutricin, desarrollo y rendimiento de tomate (Lycopersicum esculentum Mill) de la variedad Quest. El trabajo se llev a cabo en el invernadero del Instituto Tecnolgico de Sonora, unidad Nainari de ciudad Obregn. El da 29 de Septiembre de 2004 se sembr en charolas de hielo seco, utilizando una semilla de la variedad Quest de tomate Saladette. Se transplanto a los 30 das en bolsas de plstico con drenaje, colocndolas completamente al azar dentro del invernadero, bajo un diseo simple. Habiendo 10 repeticiones para cada uno de los tratamientos efectuados en cada uno de los cultivos, stos fueron: T1: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin; T2: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxilicos; T3: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxilicos ms sustrato adicionado con ensolve. Adems se aplicaron micronutrientes a razn de 50, 100 y 200 g/ha por da en el primer, segundo y meses subsecuentes respectivamente. Las variables evaluadas fueron: Desarrollo vegetativo, extraccin de nutrientes y variables de rendimiento. Los resultados obtenidos ms 84

sobresalientes fueron: la tasa relativa de crecimiento, se vio favorecida con el tratamiento 3 con ms de 2 cm por da; en cuanto a grosor del tallo el tratamiento 2 se mostr por encima de los dems tratamientos, con una diferencia altamente significativa a los 75 das con ms de 0.1 cm; el peso seco total a partir de los 120 das despus del transplante, el tratamiento con cidos polihidroxicarboxilicos, despunto hasta llegar a los 900 g a los 160 das; el peso seco de hojas se vio favorecido mayormente a los 160 das en el tratamiento con PHCA y ensolve; la extraccin de nutrimentos fue de ms del 60% en los tratamientos 2 y 3 en el caso de Nitrgeno, Fsforo, Potasio y Calcio, tanto a los 80, 120 y 160 das de monitoreo; tanto el nmero y peso de frutos aumentaron en mas del 35% en los tratamientos 2 y 3 en
comparacin con el 1.

Palabras clave: pH, nutrimento, disponibilidad, absorcin.

INTRODUCCIN De todos es conocida la importancia que representan las hortalizas para el hombre; aportan divisas, son usadas como alimento, proporcionan vitaminas, cidos orgnicos fcilmente asimilables, sales minerales y aceites esenciales, entre otros; contribuyen al mejoramiento del sabor de la comida, al aumento de la secrecin de las glndulas digestivas y, con todo ello, a la mejor digestin y asimilacin de las sustancias nutritivas (Staub et al., 1996). A nivel mundial las hortalizas, junto con las frutas ocupan actualmente el segundo lugar de los productos agropecuarios apenas aventajados por los cereales y se estima que tan solo dos hortalizas contribuyen con el 50% de la produccin mundial: la papa y el tomate, lo cual nos indica el enorme valor que representa ste ltimo, no solo en el comercio, sino tambin en el sistema alimentario (Rodrguez, 2000).

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Debido a la gran demanda que se tiene de hortalizas, se ha visto la necesidad de buscar nuevas opciones para el mejoramiento de las mismas, a fin de obtener mayor produccin con calidad para hacerlas ms competentes en el mercado (Staub et al., 1996). Por otro lado, los elementos nutritivos de los fertilizantes utilizados tradicionalmente, en gran parte pueden no estar disponibles para planta reduciendo as su eficiencia. As mismo, se conoce que en las plantas existe una relacin estrecha entre la presencia de cidos orgnicos en la raz y un aumento en la absorcin de iones (Meja, 2003). Por lo tanto, la presente investigacin est enfocada a la evaluacin del efecto de la adicin del cido polihidroxicarboxlico (PHCA), un fitoestimulador que ha dado respuestas satisfactorias en rendimiento agronmico y calidad de los cultivos, a frmulas fertilizantes puras sobre la nutricin, desarrollo y rendimiento de tomate (Lycopersicon esculentum Mill).

GENERALIDADES DE LA FERTILIZACIN

El crecimiento y desarrollo normal de los vegetales esta determinado por la disponibilidad de ciertos elementos qumicos esenciales para el metabolismo de sus organismos, los cuales son: Nitrgeno, Fsforo, Potasio, Calcio, Magnesio, Azufre, Hierro, Cloro, Boro, Cobre, Manganeso, Molibdeno y Zinc (Rodrguez, 1989). En las prcticas agrcolas eficientes, el agricultor escoge la cantidad y el momento adecuado, de manera que las plantas absorban los nutrientes tanto como sea posible. La cantidad y la regulacin de la absorcin dependen de varios factores, tales como: La variedad del cultivo, la fecha de siembra, la rotacin de cultivos, las condiciones del suelo y el tiempo (Muoz y Castellanos, 2003). Al momento de decidir que fuente de fertilizante conviene utilizar es necesario considerar, entre otras cosas, las caractersticas del suelo, y las reacciones y transformaciones de los productos. Algunas fuentes de fertilizantes nitrogenados como las amoniacales generan un residuo que provoca cierta acidez al suelo (Hinsinger, 1998). Es conocido el mayor efecto acidificante del sulfato de amonio respecto del nitrato de amonio y la urea. Sin embargo, no se puede generalizar sobre este efecto en todos los suelos, normalmente la capacidad 86

amortiguadora de los suelos arcillosos hace que la acidez inducida por estos tres fuentes sea menor, particularmente en el caso del sulfato de amonio (Rodrguez, 1989). Para un aprovechamiento ptimo del cultivo y un potencial mnimo de contaminacin del medio ambiente, el agricultor debe suministrar los nutrientes en el momento preciso que el cultivo los necesita. Esto es de gran relevancia para los nutrientes mviles como el nitrgeno, que pueden ser fcilmente lixiviados del perfil del suelo, si no es absorbido por las races de las plantas (Hofer, 1991). En los casos de aplicacin de urea y de fosfato diamnico, las prdidas pueden darse a travs de la emisin de amonaco en el aire. Ambos fertilizantes deben ser incorporados en el suelo inmediatamente despus de la aplicacin, si no hay una lluvia inmediata o riego para incorporarlos en el suelo (Kirby y Mengel, 1967). Es de importancia particular en los suelos alcalinos (calcreos). Todos los nutrientes primarios y secundarios deberan ser incorporados inmediatamente despus de la aplicacin en las regiones en las que se esperan lluvias abundantes, para evitar prdidas debidas al escurrimiento y a la erosin (Hinsinger, 1998). La acidificacin de las soluciones nutritivas en fertirrigacin es una prctica comn y ventajosa desde numerosos puntos de vista, como veremos a continuacin. Aunque existe la posibilidad de utilizar otro tipo de sustancias, en general, la acidificacin de las soluciones hasta alcanzar el pH deseado se efecta mediante la aplicacin de cidos minerales (Marschner, 2003). De acuerdo con la composicin qumica de las aguas de riego normalmente empleadas, el poder tampn o amortiguador de stas ante la adicin de un compuesto cido, depende casi exclusivamente de la presencia de ion bicarbonato (HCO3-) (Wohanka, 2002). Este anin es la especie predominante del equilibrio del cido carbnico en disolucin entre pH 4 y pH 8.3, y es determinante en el valor de pH de la solucin. Al adicionar un cido, es decir, cualquier sustancia capaz de aportar iones hidrgeno (H+), se produce la siguiente reaccin de neutralizacin: HCO3- + H+ -- H2O + CO2 Con lo que eliminamos los iones bicarbonato, para obtener agua y dixido de carbono gas. Esta es la principal reaccin que nos va a gobernar el pH de una solucin nutritiva cuyo pH pretendemos controlar (Urrestarazu, 2005). 87

La aplicacin de fertilizantes en terrenos cultivables, debe estar orientada al uso racional de stos, disminuyendo el impacto econmico y al medio ambiente (Harrison, 1998). El manejo de la fertilizacin debe ser cuidadoso, evitando la contaminacin del suelo y del agua. Los cuidados en el uso de fertilizantes abarcan desde el manejo en bodegas, la calibracin de los equipos, hasta la aplicacin de fertilizantes en s. Especficamente el tomate es una hortaliza tolerante a la acidez, con valores de pH 6.8-5.0. En lo referente a la salinidad es medianamente tolerante. Con respecto a la textura del suelo, el tomate se desarrolla en suelos livianos (arenosos) y en suelos pesados (arcillosos), siendo los mejores los arenosos y limo-arenosos con buen drenaje (Rodrguez, 1989). La disponibilidad limitada de tierra adicional para la produccin agrcola, junto con el descenso del crecimiento de la produccin de los principales cultivos, ha aumentado la preocupacin sobre la capacidad de la agricultura para alimentar a una poblacin mundial que, segn se prev, superar los 7.500 millones de habitantes en el 2020 (Araya et al., 1995). La disminucin de la fertilidad del suelo ha planteado asimismo la preocupacin sobre la sostenibilidad de la productividad agrcola al nivel actual. Las estrategias futuras para el aumento de la productividad agrcola tendrn que concentrarse en un empleo ms eficiente, eficaz y sostenible que en el pasado de los recursos de nutrientes disponibles (Kuhn, 2002). El manejo integrado de los nutrientes necesarios para el crecimiento adecuado de las plantas, junto con la gestin eficaz de los cultivos, el agua, el suelo y la tierra, sern crticos para el sostenimiento a largo plazo de la agricultura (Shainberg y Shalhevet, 1984). El manejo integrado de los nutrientes (MIN) es una tcnica que busca tanto el aumento de la produccin agrcola como la proteccin del medio ambiente para las futuras generaciones. Se trata de una estrategia que incorpora nutrientes tanto orgnicos como inorgnicos de las plantas para lograr una mayor productividad de los cultivos, prevenir la degradacin del suelo y ayudar por lo tanto a cubrir las necesidades futuras de provisin de alimentos. Se basa en la aplicacin y la conservacin de nutrientes, las nuevas tecnologas para el incremento de la disponibilidad de nutrientes para las plantas y la divulgacin de conocimientos entre agricultores e investigadores (Lindsey y Jones, 1992). El xito del manejo integrado de nutrientes depender de los esfuerzos combinados de los agricultores, los investigadores, los agentes de extensin agrcola, los gobiernos y las organizaciones no gubernamentales (Araya et al., 1995).

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pH Y DISPONIBILIDAD DE NUTRIMENTOS

La mayora de la gente del medio agronmico sabe que el pH es un valor variable entre 0 y 14 que indica la acidez o la alcalinidad de una solucin. Y, adems, conoce que el mantenimiento del pH apropiado en el flujo del riego ayuda a prevenir reacciones qumicas de fertilizantes en las lneas, que un valor de pH elevado puede causar obstrucciones en los diferentes componentes de un sistema de fertirrigacin debidas a la formacin de precipitados, que un adecuado pH asegura una mejor asimilabilidad de los diferentes nutrientes, especialmente fsforo y micronutrientes, etc. Partiendo de esto podemos afirmar que uno de los factores de mayor importancia que afectan la disponibilidad de los nutrientes es el pH del suelo. El valor de pH de los suelos puede variar ampliamente; valores normales son de 5 a 7 para zonas hmedas, y de 7.5 a 8 para zonas ridas como es el caso de nuestra regin (Primo y Carrasco, 1981). El pH puede afectar la disponibilidad de los nutrientes ya que para que el aparato radical pueda absorber los distintos nutrientes, stos obviamente deben estar disueltos. Valores extremos de pH pueden provocar la precipitacin de ciertos nutrientes con lo que permanecen en forma no disponible para las plantas adems de que todas las especies vegetales presentan unos rangos caractersticos de pH en los que su absorcin es idnea (Navarro y Navarro. 2003). Fuera de este rango la absorcin radicular se ve dificultada y si la desviacin en los valores de pH es extrema, puede verse deteriorado el sistema radical o presentarse toxicidades debidas a la excesiva absorcin de elementos fototxicos (Rojas, 1991). Por ejemplo, con pH de suelos superiores a 7.5, se ve afectada la correcta asimilabilidad de nutrientes como fsforo, hierro y manganeso. Las distintas especies de cultivo muestran distinta adaptabilidad para su desarrollo en funcin del pH del terreno, existen especies ms acidfilas que otras y cada una presenta un rango de pH del suelo ideal para su crecimiento. En la tabla 1 se muestran los valores ptimos para los cultivos ms ampliamente difundidos, conviene tener en cuenta que estos valores son meramente aclaratorios, y que la mayora de las especies presentan una notable adaptabilidad a un amplio rango de pH, siendo este factor mucho ms crtico respecto a la influencia que ejerce sobre la dinmica de los nutrientes que han de ser absorbidos por las plantas (Tan, 1992).

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De este modo, el hierro, que es el elemento esencial cuya solubilidad resulta ms afectada por el pH, a menos que se adicione diariamente o en forma quelatada, se encentra en forma inica disponible para la planta en menos del 50% por encima de pH 7, mientras que a pH 8 no queda nada disponible debido a su precipitacin en forma de hidrxido frrico. Por el contrario, por debajo de pH 6.5, ms del 90% del hierro permanece disuelto y disponible para las plantas. El manganeso sigue una dinmica similar al hierro (Rodrguez, 1989). De forma anloga, por encima de pH 6.5, la disponibilidad del fsforo y el calcio pueden decrecer considerablemente debido al predominio de la forma HPO4-2 (que forma precipitados insolubles en contacto con el calcio) sobre la forma H2PO4- (que forma compuestos muy solubles con el calcio). Y por encima de pH 7 el riesgo de precipitacin de calcio y magnesio en forma de carbonatos, CaCO3 y MgCO3, es muy alto (Fuentes, 2006). En resumen, en el rango de pH 5.0-6.5, la prctica totalidad de los nutrientes est en forma directamente asimilable para las plantas, por encima de pH 6.5 la formacin de precipitados puede causar importantes problemas y por debajo de pH 5 puede verse deteriorado el sistema radical, sobre todo en cultivo hidropnico, donde el poder tamponador del sustrato suele ser muy pequeo (Muoz, 2003). El pH de la solucin nutriente en contacto con las races puede afectar el crecimiento vegetal de dos formas principalmente: La primera es la disponibilidad de los nutrientes: para que el aparato radical pueda absorber los distintos nutrientes, stos obviamente deben estar disueltos. Valores extremos de pH pueden provocar la precipitacin de ciertos nutrientes con lo que permanecen en forma no disponible para las plantas (Marschner, 2003). Por otro lado, puede afectar al proceso fisiolgico de absorcin de los nutrientes por parte de las races: todas las especies vegetales presentan unos rangos caractersticos de pH en los que su absorcin es idnea. Fuera de este rango la absorcin radicular se ve dificultada y si la desviacin en los valores de pH es extrema, puede verse deteriorado el sistema radical o presentarse toxicidades debidas a la excesiva absorcin de elementos fitotxicos (aluminio) (Hofer, 1991). El pH en las soluciones de fertirrigacin, tanto en cultivo en suelo como en hidropona, debe ser tal que permita estar disueltos a la totalidad de los nutrientes sin daar las races, 90

evitando de este modo la formacin de precipitados (algunos de los cuales pueden presentarse en forma de finsima suspensin invisible al ojo humano) que pudieran causar obturaciones en los sistemas de riego e indisponibilidad para la absorcin radical de dichos nutrientes (Wohanka, 2002). De este modo, el hierro, que es el elemento esencial cuya solubilidad resulta ms afectada por el pH, a menos que se adicione diariamente o en forma quelatada, se encuentra en forma inica disponible para la planta en menos del 50% por encima de pH 7, mientras que a pH 8 no queda nada disponible debido a su precipitacin en forma de hidrxido frrico Fe(OH)3 (xido, robn o herrumbre). Por el contrario, por debajo de pH 6.5, ms del 90% del hierro permanece disuelto y disponible para las plantas. El manganeso sigue una dinmica similar al hierro (Hinsinger, 1998). De forma anloga, por encima de pH 6.5, la disponibilidad del fsforo y el calcio pueden decrecer considerablemente debido al predominio de la forma HPO4-2 (que forma precipitados insolubles en contacto con el calcio) sobre la forma H2PO4- (que forma compuestos muy solubles con el calcio). Y por encima de pH 7 el riesgo de precipitacin de calcio y magnesio en forma de carbonatos, CaCO3 y MgCO3, es muy alto, lo que puede provocar importantes obturaciones de emisores y otros componentes en los sistemas de fertirriego. En resumen, en el rango de pH 5.0-6.5, la prctica totalidad de los nutrientes est en forma directamente asimilable para las plantas, por encima de pH 6.5 la formacin de precipitados puede causar importantes problemas y por debajo de pH 5 puede verse deteriorado el sistema radical, sobre todo en cultivo hidropnico, donde el poder tamponador del sustrato suele ser muy pequeo (Ascencio y Lazo, 2001). Dentro de los factores ms importantes que afectan la disponibilidad de P se han identificado: el pH, reacciones de adsorcin, contenidos de materia orgnica y la presencia de agentes biolgicos como actividad fosfatasa y cidos orgnicos de bajo peso molecular (Fuentes, 2006). Los cambios en el pH inducido por las races estn relacionados con la excrecin de cidos orgnicos de bajo peso molecular y con la absorcin diferencial de aniones y cationes. Ambos mecanismos estn asociados con la respuesta a la deficiencia de fsforo que conduce a diferentes rangos de tolerancia en diversas especies (Ascencio y Lazo, 2001). 91

Otro mecanismo por medio del cual las plantas extraen el fsforo es a travs del dixido de carbono desprendido por las races, el cual al reaccionar con el agua forma el cido carbnico, siendo una fuente de iones H+, que acidifican el medio, este proceso favorece la disolucin de los fosfatos insolubles en el suelo. Por eso al exponer a condiciones externas idnticas pueden comportarse de manera diferente evidenciando procesos localizados de alcalinizacin y acidificacin (Hinsinger, 1998). Por todo lo anteriormente expuesto, resulta imprescindible control del pH de la solucin, de esta forma se evitar la formacin de precipitados y, sobre todo, se lograr un estado ptimo para la nutricin mineral de los cultivos que se traducir en un aumento de la productividad y calidad de las cosechas (Navarro y Navarro, 2003).

Por qu acidifican los fertilizantes nitrogenados? Numerosos estudios han demostrado la bondad de las tcnicas nucleares (15N) para poder evaluar con precisin y rapidez, el aporte de nitrgeno proveniente de fertilizantes qumicos (poca, fuente y forma), abonos verdes, lodos y estircoles, en los cultivos de importancia agrcola, pues permiten medir la cantidad de nutrimento que la planta est tomando de las diferentes fuentes evaluadas (Bowen y Zapata, 1990; Zapata, 1990). Durante el proceso de nitrificacin del NH4 del fertilizante a NO3 se liberan iones H+ que pueden producir acidez en el suelo. El grado de acidez que induce depende de la fuente de N que se utiliza. Entre los fertilizantes nitrogenados de uso mas frecuente se encuentran la urea, el nitrato de amonio y el sulfato de amonio (Kirby y Mengel 1967). Durante su transformacin en el suelo, la reaccin da como resultado la produccin de igual cantidad de nitrgeno con las tres fuentes, pero los protones liberados son mayores para el sulfato de amonio. As, tenemos que por cada mol de sulfato de amonio se liberan 4 unidades (moles) de H+, mientras que cada unidad (mol) de urea y NA produce solo 2 moles de H+. Por lo tanto, si a un suelo le agregamos una cantidad determinada de nitrgeno / ha con cada una de estas tres fuentes, la acidez inducida por la nitrificacin del producto debera seguir el siguiente orden sulfato de amonio > urea = nitrato de amonio (Marschner, 2003).

(NH4)2SO4 + 4O2

4H+ + 2NO3- + 2H2O 92

(NH2)2CO + 4O2 NH4NO3 + 2O2

2H+ + 2NO3- + CO2 + H2O 2H+ + 2NO3- + H2O

cidos orgnicos. En suelos cultivables, la adicin de enmiendas orgnicas se utiliza entre otras cosas, para mejorar la fertilidad y propiedades del suelo, tales como la agregacin, capacidad de retencin de agua y efecto residual de herbicidas y productos

fitosanitarios(Pagliai et al., 2004). En la agricultura orgnica, el mejoramiento de las condiciones fsicas y qumicas del suelo promueve un incremento en la diversidad, desarrollo y actividad de microorganismos benficos, los cuales forman asociaciones simbiticas con las races de la mayora de las plantas de inters agrcola (Schssler et al., 2001). Dicha simbiosis promueve una mayor eficiencia en la absorcin radical de nutrientes como N (Tobar et al., 1999) y especialmente aqullos de lenta movilidad en el suelo como P (Smith y Read, 1997), Cu y Zn (Tarafdar y Marschner, 1994). Esto permitiendo adems, un mejoramiento en la resistencia de las plantas a las enfermedades radicales (Pozo et al., 2002). En numerosos estudios se ha encontrado en las plantas una relacin estrecha entre la presencia de cidos orgnicos en la raz y la absorcin de iones. As cuando hay un alto contenido de los cidos hay una alta toma de cationes, mientras que en condiciones de baja concentracin de cidos hay una toma de aniones (Gupta, 1997; Jackson y Coleman, 1959; Kirby y Mengel, 1967; Sutcliffe, 1962). La influencia de los cidos orgnicos en la absorcin de nutrientes, tambin ha sido estudiada haciendo aplicaciones de cidos orgnicos a la raz. En cebada, la aplicacin de algunos cidos incrementa la permeabilidad de las races a iones (Jackson et al., 1970). Una de las funciones importantes de los cidos orgnicos est en su relacin con el metabolismo del nitrgeno. Una vez absorbido el amonio del suelo, o producido por nitrato en la raz, reacciona con el cido cetoglutrico para formar el primer aminocido, el glutmico (Salisbury y Ross, 1994). Considerando lo anterior sera deseable modificar artificialmente la concentracin de cidos orgnicos presentes en la solucin del suelo mediante la aplicacin exgena de cidos orgnicos.

93

cidos carboxlicos. Los cidos carboxlicos se caracterizan por la existencia de uno o ms grupos carboxilos (-COOH) en su molcula. El tomo de hidrgeno de este grupo es activo y puede aparecer como in hidrgeno libre (hidronio), lo que justifica la calificacin de cido. Los cidos carboxlicos orgnicos, RCOOH, se dividen en alifticos, alicclicos, aromticos y heterocclicos; saturados y no saturados; no sustituidos y sustituidos; monocarboxlicos, dicarboxlicos, etc. (Luna, 2003). Estructuralmente, los cidos polihidroxicarboxlicos se

consideran formados por sustitucin de los tres tomos de hidrgeno de un carbono terminal por un tomo de oxgeno y un grupo hidroxilo (Wood y Keenan, 1974). Roman y Gutirrez (1993), encontraron que las adiciones de los diferentes productos a base de PHCA provocaron incrementos en rendimiento, calidad y vida poscosecha en tres tipos de meln de manera significativa. La variedad Honey Dew present 176% de peso, 100.5% en nmeros de frutos y vida de anaquel de 33.3% ms con respecto al testigo, en tanto que las variedades Cantaloupe y Crenshaw presentaron tambin un aumento con respecto al testigo del 72.3% y 36.7% ms en peso, 117.7% y 79.9% ms en nmeros de frutos, 83.3% y 88.8% ms en vida de anaquel respectivamente. Meja et al., (2003), realizaron un estudio de los PHCL e HBA en el desarrollo vegetal de granos, oleaginosas y hortalizas, obteniendo los siguientes resultados al aplicar solo PHCL: La aplicacin de PHCL en maz, chile y tomate, incrementaron la clorofila en relacin al testigo con un 26.54%, 26.92% y 15.57% respectivamente. Tambin estimularon la longitud de la raz del trigo con un 45.9%, garbanzo 73.37%, chile 53%, cebolla 79% ms que el testigo.

CASO TOMATE

El objetivo fue evaluar el efecto de la adicin de cidos polihidroxicarboxlicos (PHCA) a frmulas fertilizantes puras sobre la nutricin, desarrollo y rendimiento de tomate crecido en sustrato inerte y con adicin de suelo orgnico bajo condiciones de invernadero.

94

Ubicacin del experimento. El trabajo se llev a cabo en el invernadero del Instituto Tecnolgico de Sonora, unidad Nainari de Ciudad Obregn. La siembra se realiz en bolsas de plstico con drenaje, colocndolas completamente al azar dentro del invernadero, bajo un diseo simple al azar. Habiendo 10 repeticiones para cada uno de los tratamientos efectuados en cada uno de los cultivos.

Tratamientos. T1: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin. T2: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxlicos. T3: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxlicos. Sustrato adicionado con ensolve. Las fertilizaciones previstas para cada tratamiento y etapa se especifican en el Cuadro 1:

Cuadro 1. Tratamientos aplicados a tomate bajo condiciones de invernadero. Tratamiento Etapa 1 0-30das trasplante T1 T2 15-30-15 (standard) 15-30-15 PHCA T3 Ensolve 15-30-15 PHCA FEP = Frmula especial a pedido para etapa 2 para tomate + 1.5 % FEP + 1.0% PHCA FEP + 0.5% PHCA + 1.5 Etapa 2 post 30-60 trasplante FEP (standard) % FEP +1.0% PHCA das Etapa 3 post 60-120daspost trasplante FEP (standard) FEP + 0.5% PHCA

Adems se aplicaron micronutrientes a razn de 50,100 y 200 g/Ha por da en el primer, segundo y meses subsecuentes respectivamente.

95

Variables evaluadas.

1. Desarrollo vegetativo a) Altura de planta: Con cinta mtrica se midi la altura de la planta desde la base del tallo hasta el punto de crecimiento ms alto, cada cinco das desde el trasplante.
b) Grosor de tallo: Con vernier se tomo la lectura en la parte media del tallo de la planta,

quincenalmente desde el trasplante.

2. Extraccin de Nutrientes: Para evaluar estas variables se extrajo una planta completa por unidad experimental a los 40, 80 y 120 das despus del trasplante. a) Peso de materia seca: Cada planta se secciono en hojas, tallos, raz y fructificaciones y se colocaron en bolsas de papel, independientes y etiquetadas posteriormente se secaron en la estufa a 60C hasta peso constante. Finalmente se procedi a pesar cada rgano en balanza analtica.
b) Contenido

nutricional:

la

muestra

seca

compuesta

de

cada

planta

(homogenizada de los diversos rganos) se le realizo un anlisis nutricional completo de acuerdo a la tcnica instrumental aceptada para cada nutriente.

3. Variables de rendimiento: Para evaluar esta variable se cosecharan las plantas de cada unidad experimental registrndose
a) Rendimiento total: Se contar el nmero de frutos y se obtendr el peso de la

produccin de cada unidad experimental.

RESULTADOS Y DISCUSIN

Tasa Relativa de Crecimiento. Se evalu la tasa relativa de crecimiento, aunque no presento diferencia significativa estadsticamente, la parte area de la planta se vio favorecida en tamao con el tratamiento 3, que corresponde a la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos y el ensolve con una tasa relativa de crecimiento de ms de 2 cm por 96

da (Figura 1), seguido este, por el tratamiento 2. Ambos tratamientos estn por encima del testigo el cual apenas rebasa el 1.5 cm por da.

2.5

Tasa Relativa de Crecimiento (cm d-1)

1.5

0.5

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 1. Tasa relativa de crecimiento de tomate en respuesta a la aplicacin de los 3 diferentes tratamientos a los 100 das.

Esto

corresponde

lo

reportado

en

otros

trabajos

realizados

con

cidos

polihidroxicarboxilicos, los cuales muestran una mayor cantidad de biomasa generada con este tratamiento. Romn et al., 1998, encontraron resultados similares en meln, en donde el tratamiento con cidos polihidroxicarboxilicos, presento una tasa relativa de crecimiento por encima del testigo. Grosor de Tallo. Con respecto a este parmetro el tratamiento 2, correspondiente a la adicin de cido polihidroxicarboxilico, se mostr por encima de los dems tratamientos, con una diferencia altamente significativa a los 75 das, mientras que el testigo y tratamiento 3 presentaron valores estadsticamente iguales. No obstante, en los primeros 60 das despus 97

del transplante,

el tratamiento con una fertilizacin estndar (testigo) mostr diferencia

altamente significativa, con ms de 0.1 cm que los otros tratamientos (Figura 2).

1.4

a b b

1.2

Grosor de Tallo (cm)

a
1

b b
45 dias 60 dias 75 dias

0.8

0.6

113 dias 128 dias

0.4

0.2

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 2. Medicin de grosor de tallo de tomate en respuesta a la aplicacin en los tres tratamientos.

Peso de materia seca. Aunque a los 60 das el tratamiento con la fertilizacin estndar (testigo) se presento levemente por encima de los dems, a partir de los 120 das despus del transplante, el tratamiento con cidos polihidroxicarboxilicos, despunto hasta llegar a los 900 g a los 160 das. Esto puede atribuirse a que en el arranque del cultivo, la planta no requiere de gran cantidad de elementos, sin embargo, a partir del inicio de la floracin se requiere de un extra de nutrientes, para poder alcanzar el potencial gentico del material. Segn lo reportado en investigaciones anteriores por Luna (2003), reportan que la adicin de PHCA, favorece la absorcin de una mayor cantidad de nutrientes, y esto se traduce por lo tanto en plantas con mayor material vegetal (Figura 3).

98

1000

900

800

Peso Seco (g)

700

600

80 dias 120 dias 160 dias

500

400

300

200

100

0 1 2 3

Tratamientos Figura 3. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso seco total de tomate en respuesta a la aplicacin de cada tratamiento.

Peso Seco de Hoja. Este parmetro se vio favorecido mayormente a los 160 das en el tratamiento con PHCA y ensolve, aunque, el tratamiento que contena solo PHCA, tambin se mostr pro encima del testigo (Fig. 4). La adicin de mejoradores y cidos orgnicos favorece la mayor absorcin de nutrientes por las races y esto lleva a una mayor cantidad de fotosintatos por parte de la planta, lo cual se ve reflejado en el rea foliar. Esto corresponde con lo reportado por Meja (2003). El rea foliar, se ve incrementada en un 88.18% en trigo, 48.68% en maz, 196.13% en garbanzo 15% en chile, 20% en tomate y un 68% en cebolla comparado con el testigo.

99

160

140

Peso Seco Hoja (Gm)

120

100

80 dias
80

120 dias 160 dias

60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos Figura 4. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve, sobre el peso seco de la hoja a los 80, 120 y 160 das despus del transplante del tomate.

140

120

Peso Seco Tallo (g)

100

80

80 dias 120 dias 160 dias

60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 5. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve, sobre el peso seco de la tallo, a los 80, 120 y 160 das despus del trasplante del tomate.

100

Peso Seco Tallo. En esta variable no se mostr diferencias significativas entre tratamientos, sin embargo, hay que mencionar que a los 120 das el tratamiento 1 se presento por encima del tratamiento 2 y 3, sin embargo las mediciones a los 160 das, los tres tratamientos, dieron valores similares, lo que se traduce en que hasta en la etapa de produccin de fruto, las plantas tratadas con ensolve y cidos polihidroxicarboxilicos, engrosaron sus tallos, y el testigo mantuvo un engrosamiento paulatino. Peso Seco Raz. La raz report un mayor peso seco en los tratamientos a los cuales se les adicion PHCA, esto coincide con lo reportado por Meja, 2003: La absorcin de nutrimentos por la raz se incrementa al aportar fuentes proveedoras de H+ que exudan y se

intercambian con los cationes de la solucin del suelo y se enlazan con los radicales carboxlicos, que a su vez alteran la estructura de las membrana ocasionando una mayor apertura de la misma y facilitndose su entrada (Fig. 6). En las plantas tratadas con cidos orgnicos y ensolve, se generaron races de mayor tamao, aunque esto se marco notoriamente en las etapas maduras de la planta, lo cual sugiere que la adicin de estos tratamientos produjo la absorcin de nutrientes en mayor escala en la edad adulta de la plantas (Fig. 6).
450

400

Peso Seco Raiz (g)

350

300

250

80 dias 120 dias

200

160 dias
150

100

50

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 6. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso seco de la raz, a los 80, 120 y 160 das despus del transplante del tomate. 101

Contenido Nutrimental a los 80 das. Con respecto a los macro nutrimentos, estos se reportan en porcentaje en peso y los micro nutrimentos, se reportan en mg/Kg.El contenido de nitrgeno para el tratamiento 3 que corresponde a la adicin de cidos

polihidroxicarboxilicos y ensolve present un nivel mayor, seguido por el tratamiento 1 y finalmente el tratamiento 2. En cuanto al de fsforo el tratamiento 2 y 3 presentaron mayor cantidad que el testigo. Esto se explica porque los cidos polihidroxicarboxilicos regulan el pH de la rizosfera, en condiciones adecuadas para la absorcin de este elemento (Fg. 7).

Macronutrimentos 80 dias (%)

Nitrogeno (N) fosforo (P) Potasio (K) Calcio (Ca) Magnesio (Mg)

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 7. Contenido de macro elementos, a los 80 das despus del transplante del tomate.

El caso similar con el fsforo lo presenta el potasio, ya que tratamiento 3 y tratamiento 2 encuentran muy por encima del testigo con valores de 4.5 % y 4.9 % respectivamente. Mientras que el tratamiento 1 pasa ligeramente el 3% (Fg. 7). Aunque el nivel de calcio en los tres tramientos no muestras mucha diferencia es importante mencionar que el tratamiento 3, esta por encima, seguido por el tratamiento 2 y finalmente el testigo (Fg. 7).

102

El contenido de microelementos a los 80 das despus del transplante tuvo un comportamiento muy parecido en todos los elementos, siendo el tratamiento 3 el de mayores valores en fierro, cobre, manganeso y zinc, finalmente el tratamiento1 (testigo) (Fg. 8). el segundo mejor tratamiento fue el 2, y

Micronutrimentos 80 dias (ppm)

200

180

160

140

120

Fierro (Fe) Cobre (Cu)

100

Manganeso (Zn)
80

Zinc (Zn)
60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 8. Contenido de micro elementos, a los 80 das despus del transplante del tomate.

Contenido Nutrimental a los 120 das. En esta etapa que corresponde a la produccin el testigo mostr un mayor nivel de nitrgeno con 4% de este nutriente, mientras que el tratamiento 2 y 3 pasaron ligeramente el 3% (Fig. 9). Bowen y Zapata (1990), encontraron que la eficiencia del uso de nitrgeno en las plantas vara de acuerdo a los tratamientos que se le den a la misma. De este modo, los cidos carboxlicos aadidos, ayudaron a la planta a utilizar el nitrgeno para una mayor

produccin, caso contrario se observ en el testigo en donde el nutriente estaba presente ms no la cantidad de fruta producida.

103

Como era de esperarse y al igual que en el anlisis para fsforo y potasio de los 80 das despus del transplante, aqu la absorcin de fsforo fue mayor en el tratamiento 3 y 2, esto se debe como ya se explico a la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos. (Fig. 9). Marschner (2003), explica que an cuando el fsforo y el calcio sean minerales de poca movilidad, con la acidificacin, la rizosfera alcanza un pH justo para la absorcin de estos. En el anlisis de micro nutrimentos, no se encontr amplia diferencia entre los tratamientos, sin embargo hay que comentar que al igual que el la etapa de 80 das despus del transplante, el de mayor absorcin de fierro (Fe), manganeso (Mn), cobre (Cu) y zinc (Zn), fue el tratamiento 3, seguido por el 2 y finalmente el 1 (fig. 10).

Macronutrimentos 120 dias (%)

Nitrogeno (N)
4

fosforo (P) Potasio (K)

Calcio (Ca) Magnesio (Mg)

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 9. Contenido de macro elementos, a los 120 das despus del transplante del tomate.

104

Micronutrimentos 120 dias (ppm)

200

180

160

140

120

Fierro (Fe) Cobre (Cu)

100

Manganeso (Zn)
80

Zinc (Zn)
60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 10. Contenido de micro elementos, a los 120 das despus del transplante del tomate.

Contenido Nutrimental a los 160 das. En esta etapa el contenido de nitrgeno, fsforo y potasio en los tratamientos 3 y 2, se presentaron con valores superiores al testigo, esto puede explicarse por que de manera visual, las plantas correspondientes al tratamiento 1 mostraban signos de envejecimiento, mientras que las tratadas con cidos

polihidroxicarboxilicos, se observaban vigorosas y con una produccin en nmero de frutos, mayor que el testigo (Fg. 11). Esto corresponde a lo reportado por Hofer (1991), en donde la acidificacin, mantuvo a la planta absorbiendo nutrientes por ms tiempo que el testigo, presentando de esta manera, races y plantas en general ms vigorosas y productivas, por ms tiempo. Respecto a calcio y magnesio, los tratamientos se comportaron de igual manera que en los 80 y 120 das despus del trasplante, esto es, sin diferencia significativa, pero con mayor cantidad en el tratamiento 3, seguido por el 2 y finalmente el tratamiento 1 (Fig. 11).

105

Macronutrimentos 160 dias (%)

Nitrogeno (N)
4

fosforo (P) Potasio (K)

Calcio (Ca) Magnesio (Mg)

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 11. Contenido de macro elementos, a los 160 das despus del transplante del tomate.

Como puede observarse en la fg. 12, el tratamiento 3 presento mayor acumulacin de manganeso (Mn) y zinc (Zn), con respecto al testigo. Mientras que el testigo no llego a los 100 ppm de manganeso y zinc, el tratamiento 2 y 3 lo sobrepasaron. En el caso del cobre los tres tratamientos mostraron la misma cantidad del metal. Cabe mencionar en este apartado que no hubo referencias bibliografas para comparar los niveles de nutricin, debido a que en este estudio se analiz, todas las partes de la planta (hojas, tallos, raz y fructificaciones) y los datos existentes son nicamente para el anlisis de hoja, pecolo o savia.

106

250

Micronutrimentos 160 dias (ppm)

200

150

Fierro (Fe) Cobre (Cu) Manganeso (Zn)

100

Zinc (Zn)

50

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 12. Contenido de micro elementos, a los 160 das despus del transplante del tomate.

Nmero de Frutos. Con respecto al nmero de frutos en cada corte, aunque en los primeros cortes, el tratamiento con la fertilizacin estndar arroj un mayor nmero de frutos, los tratamientos con PHCA, se mostraron muy por encima del primer tratamiento en los cortes subsiguientes (Fig. 13). Esto demuestra que solo la fertilizacin mineral no explota al cien por ciento el potencial de produccin de la planta de tomate. A partir del corte nmero 4 las plantas adicionadas con cidos polihidroxicarboxilicos se presentaron hasta en 100 % por encima de testigo en el nmero de frutos producidos. Segn lo reportado por Luna (2003), al aplicar PHCA en tomate en campo, favoreci el amarre de frutos, puesto que los tratamientos con fertilizacin estndar tuvieron una perdida considerable de frutos a la cosecha.

107

60

50

corte 1 Corte 2

Numero de Frutos

40

corte 3 corte 4 corte 5

30

corte 6 corte 7
20

corte 8 corte 9
10

corte 10

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 13. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el nmero de frutos de tomate por corte.

300

250

Numero de Frutos

200

150

Total

100

50

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 14. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el nmero de frutos total de tomate por tratamiento. 108

Roman y Gutirrez (1993), encontraron que las adiciones de los diferentes productos a base de PHCA provocaron incrementos en rendimiento, calidad y vida poscosecha en tres tipos de meln de manera significativa. En el nmero total de frutos por tratamiento puede verse reflejado este efecto de manera significativa (Fig. 14).

Peso de Frutos. En las siguientes figuras se muestra el peso de frutos en cada uno de los cortes (fig. 15) y el peso de frutos en cada tratamiento (Fig. 16). Al igual que en el nmero de frutos, el peso se mostr mayor en los primeros dos cortes para el tratamiento con la fertilizacin estndar, pero despus los otros tratamientos superaron por mucho a este (Figura 15).

6000

5000

corte 1 corte 2

Peso de Frutos (g)

4000

corte 3 corte 4 corte 5

3000

corte 6 corte 7
2000

corte 8 corte 9
1000

corte 10

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 15. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso de frutos de tomate por corte.

109

Hay que hacer notar que en los cortes 7,9 y 10, cuando el testigo haba bajado se sobre manera su productividad las plantas tratadas, estuvieron en su carga mxima de fruta, mismo patrn que mostraron fsicamente cuando la plantas tratadas tenan an mucho vigor y las de testigo, presentaban signos de envejecimiento. En investigaciones anteriores se ha

reportado, que la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos promueve un mayor transporte de nutrientes en la planta, por lo tanto esto se ve reflejado en mayor nmero de frutos y ms peso en estos.

30000

25000

Peso de Frutos (g)

20000

15000

Total

10000

5000

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 16. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso de frutos de tomate total por tratamiento.

En la figura 16, se puede observar que mientras que el testigo no llego a los 2000gr en el tratamiento 3 casi alcanzo los 3000 gr y el tratamiento 2 estuvo en 2500 gr. Marschner (2003) escribi que una alta nutricin mineral, ayudada por la acidificacin del suelo, ayudara a las plantas a su mxima expresin productiva, segn las caractersticas de la variedad.

110

CONCLUSIONES El manejo eficiente de las diferentes fuentes de fertilizantes qumicos y el adecuado control del medio circundante de la solucin del suelo, traer por consecuencia una mejor toma y distribucin de los nutrimentos por las plantas y por ende una mejor productividad y cosecha de sus productos.

LITERATURA CITADA

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