Profesores: MsC. Claudia Tapia UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE Larios, Jos Estrada Flores.

COLOMBIA Grupo: primer semestre medicina Asignatura: Biologa Celular Practica # 2 Tema(s): Sistema de Transporte a Travs de la Membrana

Temas incluidos: composicin qumica de la membrana, sistemas de transportes a travs de la membrana INTRODUCCIN La difusin es un fenmeno sencillo que ocurre frecuentemente. Si se colca unas gotas de colorantes en un frasco con agua, lentamente las molculas de colorante se dispersaran en todo el recipiente. Cul es la razn? Las molculas que hacen parte de cualquier sustancia se mueven constantemente, las molculas de un solido se mueven muy lentamente y estn muy cercas una de otras, en tanto molculas de lquidos y gases estn mas separadas y se mueven rpidamente. Pero no solo la separacin de las molculas intervienen en el movimiento de las mismas, la temperatura y la concentracin de las sustancias inciden en el proceso de difusin. As las molculas del colorante se dispersan de un sitio de mayor concentracin a menor concentracin, esto se le conoce como difusin a favor del gradiente de concentracin. En las clulas sustancias como el agua, oxigeno y dixido de carbono se difunden libremente a travs de la membrana, sin embargo, una difusin eficiente requiere no solo de una distancia corta, sino un gradiente de concentracin pronunciado, la actividad metablica hace que se mantengan esos gradientes de concentracin y ocurra una difusin eficiente. La membrana celular es selectivamente permeable por lo que permite el paso de algunas sustancias mientras bloquea le paso de otras. Se conocen dos tipos de difusin: la Osmosis en la cual las molculas de agua atraviesan la membrana

celular de un sitio de mayor concentracin a otro de menor y la Dilisis en las que las partculas de soluto atraviesan la membrana de un sitio de mayor concentracin a otro de menor. El movimiento osmtico de agua a travs de la membrana causa algunos problemas cruciales en los seres vivos.

. Descripcin de la prctica En esta prctica se realizaran algunas pruebas que demuestren aspectos de la fisiologa de la membrana celular, as como el efecto de la variacin de la concentracin de agua y solutos dentro y fuera de las clulas.

Se espera que al finalizar la prctica el estudiante haya logrado los siguientes objetivos: OBJETIVO GENERAL y Observar el fenmeno de la osmosis y el papel que juegan el tamao molecular y la concentracin de las molculas que se encuentran a un lado y a otro de la membrana. OBEJTIVOS ESPECIFICOS

Reconocer el proceso de difusin mediante la utilizacin de distintas membranas.

Construir un modelo sencillo que simule algunos aspectos de la fisiologa celular.

MATERIALES Y METODOS Materiales

Solucin de almidn al 1% Solucin de sacarosa al 0.1, 0.25, 0.5, 0.9, 1.2% Soluciones de cloruro de sodio (0.6%, 0.9% y 1.2%) Solucin de glucosa al 5% Lminas y laminillas. Alcohol al 70%. Lugol Agua destilada Microscopio Bolsas de dilisis (tubo de celulosa para dilisis) Goteros Gradillas Tres tubos de ensayo de 10ml por grupo. Tubos capilares Papel milimetrado Pinza de diseccin Ligas Palos de pinchos Hoja de elodea

Procedimiento

1. Sustancias osmticamente activas e inactivas. Prepare una bolsa de dilisis, corte un tramo de 25 cm de longitud del tubo de dilisis y mjelo para separar las paredes, a un cm del extremo amarre con una liga de tal manera que se obtenga una bolsa. Llnela hasta 5 cm del borde con una mezcla de partes iguales de las soluciones de almidn y glucosa. Tome un poco de esta mezcla y un poco de agua destilada por separado (esta ultima se va a utilizar como medio externo) y haga para ambas, la prueba de lugol. Cierre la bolsa de dilisis y lvela con agua destilada para eliminar cualquier rastro exterior de las sustancias usadas y sujetndola a un palo de pinchos suspndalas en un recipiente lleno de agua destilada.

Pasados 15 minutos, haga la prueba de lugol con el agua del medio externo, en vaso de no obtener resultados, espero 10 minutos ms y repita la prueba. Que demuestran los resultados de este experimento? Qu sustancias osmticamente activa y osmticamente inactiva existen en la sangre de un mamfero y de donde provienen? 2. Turgencia y plasmlisis en eritrocitos.

Con una lanceta estril, haga una pequea incisin en la yema de un dedo o el lbulo de la oreja (en el sitio menos doloroso) de un estudiante voluntario. Limpie previamente con alcohol al 70% el sitio que se va a tratar. Tome una muestra de sangre en un tubo capilar y distribyala en tres tubos de ensayos que contengan las soluciones porcentuales de NaCl indicadas. A los dos minutos, extraiga una gota de cada medio y observe al microscopio comparando el resultado en una tabla (construya esta como lo considere adecuado). Recuerde que una solucin de NaCl al 0.9% es isotnica con respecto al protoplasma y que el dimetro de un glbulo rojo es de 7 micras. Que resultados espera obtener? Explique. En que fundamenta la hiptesis? Esquematice y rotule sus esquemas. 3. Turgencia, plasmlisis y presin osmtica en las clulas de Egeria densa (Elodea). Corte varias hojas de la planta y coloque unos cinco cortes en cada uno de los recipientes en los que haya soluciones molares de sacarosa a las concentraciones indicadas. Conserve algunos recipientes vacios, posteriormente le servirn par preparar otras soluciones. Despus de transcurridos 10 min. Tome una hoja de la solucin mas concentrada y observe con el microscopio. Haga un esquema de la clula. Observe especialmente la membrana plasmtica si esta claramente separada de la pared se dice que la clula esta plasmolizada. Tome ahora una hoja de la solucin mas diluida y repita las observaciones. Si las clulas tienen un aspecto hinchado se dicen que estn turgentes. Prosiga sus observaciones con las dems hojas de las otras soluciones y trate de comprobar si

a medida que la concentracin del medio externo aumenta, se observa mayor proporcin de clulas plasmolizadas. Anote grficamente el porcentaje de clulas plasmolizadas en relacin a la concentracin de las soluciones. Determine aproximadamente en que solucin presenta plasmlisis incipiente, la mitad de las clulas observadas, o sea, que la membrana plasmtica este apenas separada de la pared. Por definicin aquella solucin en la que el 50% de clulas observadas presenta plasmlisis incipientes se considera isotnica con respecto al protoplasma de tales clulas, por lo que las presiones osmticas de la solucin y del protoplasma celular pueden considerarse como iguales Cul es la solucin isosmotica con el protoplasma celular? Cul es la presin osmtica del protoplasma celular de elodea en condiciones normales? Para obtener el valor de presin osmtica utilice la siguiente ecuacin:

P.O=RTC En la que R es la constante universal de los gases (0.082) si la presin se mide en atmosferas, T la temperatura en grados absolutos y C la concentracin molar. La formula anterior es adecuada para el calculo de la presin osmtica de sustancia no ionizables y muy diluidas. PREGUNTAS DE INVESTIGACIN.

 Consulta cuales son las principales funciones de la membrana celular  explique el proceso de presin osmtica y su importancia biolgica  Defina transporte activo y establezca diferencias entre este y el fenmeno de dilisis y osmosis.

Webgrafia www.depts.alverno.edu/NSMT/truchal/Bi251/images.html www.ship.edu/~gspaul/sems.html www.wisc.edu/botit/img/bot/130/Plant%20Cell%20/Electron%20Micrographs/