Universidad de Concepcin

Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas & Centro EULA-Chile

VARIACIN MORFOLGICA DE GALAXIAS MACULATUS (JENNYS) EN AMBIENTES DE LAGOS, RIOS Y ESTUARIOS DE LA ZONA CENTRO-SUR DE CHILE.

Seminario para optar al ttulo de Bilogo Roberto Andrs Cifuentes Barrasa 2006
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Este seminario de ttulo ha sido desarrollado en el Laboratorio de Ecologa de peces del Centro de Ciencias Ambientales EULA-Chile.

Profesor Gua

Dra. Evelyn Habit Conejeros

Comisin Evaluadora:

---------------------------------Dra. Evelyn Habit Conejeros

-------------------------------------Dr. Pedro Victoriano Seplveda

--------------------------------------Dr. Vctor Hugo Ruiz

Coordinador Seminario de Ttulo

-----------------------------------Dra. Maritza Hoinetzenn

Agradecimientos

En primer lugar, deseo expresar los ms inmensos sentimientos cario a mi hermosa madre Sara, Enoc y mis bellsimos hermanos, Daniel y Matas. Gracias por su apoyo incondicional en instarme a seguir mis intereses por la Biologa, sin ellos, yo jams llego a este momento. Deseo expresar mis sinceros agradecimientos a la Dra. Evelyn Habit, por la confianza y oportunidad de permitir Al TITO ser parte del Fish team, y as poder desarrollar los temas que son de mi total gusto y fascinacin. Por ltimo, agradezco a todos mis amigos, amigas y profesores, que han hecho del pasar por la UdeC, y en especial, por la Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas, lo que siempre pens que sera, una experiencia sobre todo, muy entretenida.

ndice

Resumen Introduccin Hiptesis Objetivos Materiales y mtodos Resultados Discusin Bibliografa Anexo

5 8 13 14 15 23 43 48 56

Resumen La variacin morfolgica entre especies y poblaciones de una misma especie es un fenmeno comn entre los organismos y se presenta a diversas escalas, como respuesta a procesos ecolgicos y evolutivos. Los factores causantes de esta variacin en poblaciones de peces de aguas continentales son mltiples. En una escala ecolgica, los clines geogrficos, las interacciones y el uso de recursos son sealados como los ms importantes factores que modulan los fenotipos intra y entre poblaciones. Galaxias maculatus es un pequeo pez de extensa distribucin en aguas continentales del hemisferio sur, siendo la mayor dentro de su gnero. Uno de sus aspectos ms relevantes, es presentar variacin de ciclos de vida entre sus poblaciones, el cual puede ser didromo o residente de sistemas lacustres. Estas particularidades hacen de esta especie un atractivo sustrato para evaluar hiptesis acerca de las variaciones poblacionales referentes a morfologa. En el presente estudio se analizaron 19 poblaciones de Galaxias maculatus provenientes de sistemas lacustres, fluviales y estuarinos que la especie comnmente habita en el centro sur de Chile, mediante anlisis morfolgico por morfometra geomtrica. Esta herramienta permite centrar la atencin en la geometra de los individuos, bloqueando la influencia del tamao, rotacin y escalamiento. Los resultados muestran la existencia de variacin morfolgica entre poblaciones provenientes de distintos tipos de sistema, siendo aquellas que habitan sistemas lacustres significativamente diferentes en cuanto a su forma de las poblaciones habitantes de estuarios. Estas diferencias estn referidas al desplazamiento anterior de la insercin de la aleta anal, posicin dorsal del ojo y mayor depresin dorsoventral de la cabeza, en las poblaciones lacustres respecto de las estuarinas. Estos resultados permiten

establecer la existencia de variabilidad morfolgica entre poblaciones de G. maculatus y dan pie a la elaboracin de hiptesis explicativas acerca de las causas de esta variacin.

Palabras clave: Galaxias maculatus, variacin morfolgica, morfometra geomtrica,

ambientes lacustres y estuarinos.

Introduccin Un problema central en biologa evolutiva es el comprender los procesos que son responsables de la variabilidad fenotpica y gentica observada en la naturaleza, y cmo esta se expresa a varios niveles jerrquicos: intrapoblacin, entre poblaciones pertenecientes a una misma especie y entre poblaciones de distintas especies (Milano et al. 2005). Esta variabilidad es un fenmeno comn tanto en animales como en plantas, y constituye una respuesta a procesos en escala ecolgica y evolutiva (Miner & Vonesh 2004), por lo cual, la variacin de forma y/o tamao de un estructura, propia de una especie, puede ser tanto el reflejo de condiciones ecolgicas diferenciales entre sus poblaciones (Klingenberg et al. 2003), como la respuesta a procesos histricos (evolutivos), como presiones selectivas divergentes entre poblaciones aisladas, siendo esto ltimo, una de las bases de procesos de especiacin ecolgica (Schluter 1998). Pero tambin, la variacin morfolgica, visto como plasticidad fenotpica entre poblaciones, es importante pues puede llegar a modular el efecto de la seleccin natural. Un ejemplo de ello, son los empates morfolgicos entre distintos componentes genotpicos poblacionales, lo que puede resultar en un resguardo de variacin gentica poblacional (Gianoli, 2004), conservando entonces el potencial evolutivo de esta (Thompson, 1996; Stockwell et al., 2003). A la vez, el estudio morfolgico tambin puede entregar informacin acerca de diversos aspectos de la biologa de una especie (fisiologa, etologa, etc.) (Chan 2001; Videler & Wardle 1991; Videler 1993; Vogel 1994; Gerstner 1999; Triantafyllou et al. 2000; Nilsson & Broenmark 2000; Schoener 1986). Por lo tanto, la adecuada comprensin de los fenmenos que modulan la morfologa, es un primer y fundamental paso para conservacin (Ruckelshaus et al. 2002).

Los peces de aguas continentales, han sido un importante sustrato de estudio en este sentido, siendo la variacin morfolgica relacionada con mltiples factores, como la obtencin de recursos (Smith & Sklason 1996), o la competencia intra poblacin (Wilson & Turelli 1986) o entre especies (Lindsey 1981, Magnan 1988). Pero las diferencias entre sistemas en composicin y distribucin de recursos, y los clines geogrficos de factores abiticos tambin son causas de ajustes fenotpicos en los individuos (Cussac et al. 2004; Lavin & McPhail 1985, 1986, Mittelbach et al. 1992, Walker 1997). Para peces de aguas continentales, el patrn general indica que junto con el aumento de latitud, las especies exhiben un aumento en sus rangos de distribucin y de su tamao poblacional, relacionado con la disminucin de la diversidad especfica (Schluter 1998). Otro patrn descrito corresponde a la existencia de un mayor grado de diversificacin de caracteres morfolgicos intra e inter poblaciones en poblaciones de grandes tamaos (Schluter 2000), evidenciado por ejemplo en la ocurrencia de polimorfismos trficos (Smith & Skulason 1996). Otras causas de esta diversificacin son la segregacin progresiva ontogentica de subgrupos poblacionales (Ruzzante et al. 2003) o el efecto de los depredadores que afecta la distribucin y abundancia de fenotipos (Milano et al. 2002; Langerhans et al. 2004). Un pez de singulares caractersticas que sirve de sustrato adecuado para este tipo de anlisis es Galaxias maculatus (Jennys). Este es un pez nativo de aguas continentales del Hemisferio sur, que presenta una extensa distribucin que incluye Australia, Tasmania, Nueva Zelanda, Sudamrica e Islas Malvinas (Cussac et al. 2004; Ruiz & Marchant 2004; Zattara & Premoli 2005). Esta particular distribucin podra ser causa tanto de efectos vicariantes en su distribucin original (Croizat et al. 1974) y/o dispersin postmesozoica (McDowall, 1971; Waters & Burridge, 1999). Si bien es definida como una especie 8

esencialmente didroma-catdroma (Water & Wallis 2001; Zattara 2002), la capacidad de establecer poblaciones con ciclos de vida completos en sistemas lacustres (landlocked populations o poblaciones residentes) es uno de los rasgos ms conspicuos de esta especie (Cussac et al. 1992; Barriga et al. 2002), y marca uno de los aspectos mas intrigantes en la evolucin de los peces de agua dulce, pues especies que presentan poblaciones que varan en su ciclo de vida, guardan un especial acervo de diversificacin morfolgica, ecolgica y gentica (Waters & Wallis 2001). En Chile, G. maculatus (Puye) se distribuye ampliamente entre el ro Huasco y Tierra del Fuego (Dyer, 2000), siendo un habitante comn de sistemas lacustres, fluviales y estuarinos (Campos 1986). La informacin especfica sobre esta especie para Chile es escasa y se concentra en los trabajos de Campos (1970; 1973; 1974; 1985). La mayor cantidad de informacin para poblaciones sudamericanas proviene de sistemas de la vertiente este de los Andes. La variacin morfolgica y gentica entre poblaciones lacustres del norte de la Patagonia, fue estudiada por Zattara (2002) y Zattara & Premoli (2005), encontrando resultados muy diferentes para estos dos parmetros. Mientras que los resultados sobre estructuracin y diversidad gentica mostraron que prcticamente no existe flujo gnico entre las poblaciones, stas presentaron alta diversidad morfolgica, sin claros caracteres diagnstico para ellas. Solo Cussac et al. (2004) encontr una aparente relacin entre latitud y nmero de vrtebras en poblaciones lacustrinas de Argentina, cuya explicacin sera una interaccin entre algn efecto de la latitud y la distancia al mar. La amplia distribucin, la variedad de ambientes que ocupa y las variaciones en el ciclo de vida, hace del estudio detallado de la variacin morfolgica en Galaxias maculatus una buena oportunidad para conocer si tales variables se reflejan en variaciones morfolgicas particulares dentro de esta distribucin o tipos de sistemas que habita (e.g. lagos, ros y 9

estuarios). El reconocimiento de la existencia de tal variabilidad sera el primer paso para analizar los forzantes de tal variacin morfolgica inter e intrapoblacional. Clsicamente, los estudios morfolgicos se basaron en anlisis morfomtricos que buscaban conocer la relacin entre la morfologa de un individuo o estructura y su covariacin con otras variables (Marcus 1990), analizando la mayor parte de las veces variables lineales sin considerar las relaciones entre radios o ngulos entre puntos. En la dcada de los 80s el estudio de la morfologa tuvo un importante avance gracias al desarrollo estadstico de la teora de forma, que hizo posible la combinacin de los ya desarrollados mtodos estadsticos multivariados y las nuevas formas de visualizar puntos en una estructura de manera conjunta, geomtrica y covariable. Esto en un principio fue llamado como Sntesis Morfomtrica, pero luego Rohlf & Marcus (1993) denominaron definitivamente Morfometra Geomtrica, haciendo posible el mximo aprovechamiento de la informacin que tiene una estructura. Una de las principales ventajas de esta nueva herramienta, es el bloqueo de la influencia de longitud, volumen o tamao de individuos o estructuras a comparar (Rohlf & Slice 1990; Rohlf et al. 1996; Adams & Funk, 1997), permitiendo centrarse en la forma, obteniendo as una visin geomtrica de stas (Adams & Rohlf 2000; Adams et al. 2002). De esta manera, la herramienta surge como una buena aproximacin para el estudio del cambio de forma, encontrando nuevos caracteres que pudiesen tener valor ecolgico, evolutivo o taxonmico. En la presente investigacin, se analizan poblaciones de G. maculatus provenientes de diversos sistemas del centro-sur de Chile, que incluyen los tres tipos de ambientes donde habita la especie (fluviales, lacustres y estuarinos) en un gradiente latitudinal entre los 37 y 42 Lat. Sur, a fin de investigar sobre la existencia de variaciones morfolgicas entre stas, mediante la combinacin de herramientas de morfometra geomtrica y anlisis 10

estadsticos multivariados. Se espera que la morfologa de las distintas poblaciones refleje la influencia de las variaciones de los tipos de sistemas y rango distribucional en el que habita la especie. En particular, se espera que, en el gradiente latitudinal, las poblaciones que habiten sistemas de la misma tipologa (e.g. lagos), presenten una mayor similitud entre ellas en comparacin a las poblaciones provenientes de sistemas distintos (e.g. ros o estuarios). Este anlisis permitir conocer la existencia de variacin morfolgica en esta especie de pez nativo de aguas continentales chilenas, con el fin de elaborar hiptesis sobre su causalidad.

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Hiptesis

Galaxias maculatus presenta una extensa distribucin geogrfica en Chile, donde habita en sistemas fluviales, estuarinos y lacustres, cada uno de los cuales presenta un patrn morfolgico distintivo a lo largo de un gradiente latitudinal.

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Objetivos

Objetivo general Analizar la variacin morfolgica entre poblaciones de Galaxias maculatus, en diversos sistemas lacustres, estuarinos y fluviales del centro-sur de Chile, a lo largo de un gradiente latitudinal.

Objetivos especficos

Utilizar la morfometra geomtrica como herramienta de anlisis de la forma de galxidos sudamericanos.

Conocer los patrones de variacin morfolgica de Galaxias maculatus entre poblaciones provenientes de sistemas del centro-sur de Chile que habitan en estuarios, ros y lagos.

Examinar la variacin morfolgica de la forma del cuerpo y de la cabeza, con el fin de detectar distintas fuentes de variacin y describir los rasgos morfolgicos que identifican grupos particulares segn el tipo de ambiente y/o la latitud en que habitan.

Conocer las variables geogrficas y/o de calidad del agua que explican de mejor manera los patrones de variacin morfolgica detectada.

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Materiales y mtodos

rea de estudio El rango de distribucin de G. maculatus considerado en este estudio comprende desde el ro Biobo (VIII Regin) hasta el Lago Natri (X Regin) en la Isla Grande de Chilo. Las coordenadas geogrficas para los sitios se obtuvieron mediante el uso de un sistema de posicionamiento global (GPS). En cada sitio de muestreo se registraron las siguientes variables del hbitat: Temperatura, pH y Conductividad, obtenidas mediante un equipo de medicin multiparmetro marca Hanna. Con esta informacin se confeccion una matriz de datos ambientales por sitio de muestreo, la cual fue posteriormente utilizada para contrastarla con la matriz de variables morfolgicas. Para el caso de la poblacin del ro Biobo, fue tomada desde la coleccin del Laboratorio de Ecologa de Peces del Centro EULA, y se accedi a la base de datos del monitoreo ambiental del ro Biobo de este centro, con la cual fue posible completar la matriz de variables fsicas.

Obtencin de ejemplares

De un total de 19 poblaciones, 18 fueron obtenidas directamente desde los sitios considerados, en una campaa de terreno realizada entre los das 17 al 23 de Marzo del ao 2006. Las artes de pesca utilizadas fueron de dos tipos principales: 1.- redes de arrastre de 5 mm de abertura, 2.- equipo de pesca elctrica Smith & Root LR-24. En sistemas lacustres, el muestreo fue dirigido a las zonas litorales, en donde G. maculatus forma grandes grupos poblacionales (Campos 1973; Barriga et al 2002), de la misma forma fue hecho para zonas 14

estuarinas. En ros, de preferencia fue utilizada pesca elctrica, cerca del fondo en eventuales zonas de refugio como pozones, pozas y pozas temporales (Campos 1973; Habit & Victoriano 2006). Previo a la toma de fotografas, cada ejemplar fue medido (longitud estndar, en mm) mediante un vernier digital de 0,01mm de precisin.

Eleccin de individuos y toma de fotografas

Luego de obtenida la muestra poblacional en cada punto de muestreo, fue apartada una submuestra de 30 individuos por poblacin, que correspondieron a los individuos que presentaron las mayores tallas, siguiendo as la metodologa sugerida por OReilly & Horn (2004) y Rber & Adams (2001). Estos se mantuvieron vivos hasta el momento de su trabajo, cuando se llevaron a una solucin con altas concentraciones de anestesia BZ-20. Posteriormente fueron identificados generando un cdigo individual, etiquetados, medidos (caliper digital MARCA), pesados (balanza digital OHauss 0,01g) y fotografiados (cmara digital Lumix Panasonic con resolucin de 6.0 megapxeles y 12x de zoom ptico). Finalmente fueron fijados en alcohol 96% para ser almacenados en la coleccin del laboratorio de Ecologa de Peces del centro EULA-Chile.

Anlisis de la informacin
Anlisis de la talla Previo a los anlisis mediante morfometra geomtrica, se obtuvieron los promedios y errores estndar del tamao (longitud estndar en mm) por poblacin, tipo de sistema y gradiente latitudinal. Para analizar la existencia de diferencias significativas entre la talla de las distintas poblaciones, se utilizaron anlisis de varianza no paramtricos de Kruskal15

Wallis en Statistica 6.0. Esto se efectu con el fin de conocer si las diferencias detectadas en la morfologa, estaban relacionadas con tamaos corporales.

Morfometra geomtrica

La variacin de forma fue cuantificada usando los mtodos de morfometra geomtrica (Bookstein, 1991; Rohlf & Marcus, 1993), mediante la comparacin de configuraciones de consenso de hitos morfolgicos homlogos (landmarks y/o semilandmarks). El primer paso, luego de la obtencin de las fotografas, fue la construccin de un archivo *.TPS para cada poblacin, esto hace posible el ingreso a la batera de software necesarios para los anlisis. Esto fue realizado mediante TpsUtil 1.34 (Rohlf, 2005). Un landmark se define como un hito morfolgico y/o lugar geomtrico en una estructura que es homlogo y que puede ser reconocido de igual forma en todos los objetos, en este caso individuos, en estudio (Monteiro et al. 2000; Zelditch et al. 2004). En tanto, un semilandmark es un punto o rasgo geomtrico (curva, superficie, etc.) definido en trminos de la posicin de otro punto (landmark o semilandmark). Estos semilandmarks son de mucha utilidad al ser usados para incorporar informacin acerca de curvaturas en un anlisis de forma (Zelditch et al. 2004). Con el fin de analizar las variaciones morfolgicas a distintas escalas morfolgicas, y dada la forma corporal relativamente sencilla de los galxidos (con escasos hitos en vista lateral debido a su forma alargada), se trabaj con dos vistas: vista lateral del cuerpo y vista lateral de la cabeza. La primera permiti el anlisis de las variaciones existentes en la configuracin de consenso para la vista lateral de un total de 12 hitos (8 landmarks y 5 semilandmarks), capturando para esto informacin desde la totalidad del cuerpo de los individuos en vista lateral. El detalle de la conformacin y ubicacin de estos 16

se muestra en la fig.2. La segunda escala de anlisis fueron hitos morfolgicos ubicados en la zona de la cabeza de los individuos, en los cuales se digitalizaron en total 16 hitos (3 landmarks y 13 semilandmarks), siendo la cabeza de los peces una estructura amplia atencin dentro de la literatura de la morfometra geomtrica (Chakrabarty 2005; Letcher 2003) por la ventajas que presenta, dado que presenta una alta plasticidad morfolgica ante variaciones ambientales, como el tipo y disponibilidad de alimentos (Eklv & Svanbck 2006; Langerhans et al 2004; Svanbck & Eklv 2004). El detalle de la conformacin y ubicacin de estos se muestra en la fig. 3. La digitalizacin completa, tanto de landmarks como semilandmarks, se efectu en el software TpsDig 2.05 (Rohlf 2006). Una vez terminado este paso, la diferenciacin entre landmarks y semilandmarks fue hecha en el software TpsUtil 1.34 (Rohlf, 2005). Forma, en morfometra geomtrica, es definida como toda la informacin geomtrica que permanece cuando los efectos de orientacin, escalamiento y rotacin son removidos de un objeto (Kendall, 1977). Esto es uno de los aspectos ms sobresalientes dentro de la morfometra geomtrica. Este paso se logra al importar los archivos digitalizados, en este caso, al software TpsRelw 1.42 (Rohlf, 2005), donde se remueve toda la variacin no atribuida netamente a la forma, procedimiento denominado Generalized Procustes Analysis (GPA). El siguiente paso fue generar variables de forma, en los cuales se pudieron centrar los anlisis y comparaciones. Para esto, el TpsRelw procedi a la superimpocisin y obtencin de forma de consenso, ajustando las configuraciones de landmarks y semilandmarks a centroides promedio para cada uno de stos en un espacio bidimensional. Este procedimiento permite generar valores que surgen de la variacin de las configuraciones de consenso de cada individuo en relacin a los promedios. Como resultado, se obtiene una matriz multivariada, en la que cada variable corresponde a una 17

variable de la forma de cada individuo. Estas variables y sus variaciones en la poblacin (nmero de individuos utilizados en el anlisis) permiten efectuar las comparaciones y pruebas estadsticas, intra e interpoblaciones. El siguiente paso fue visualizar grficamente los Relative Warps (deformaciones relativas) generados al comparar la totalidad de los individuos. Con esto se pudo obtener una primera aproximacin acerca de las principales variaciones producidas y cuales son los landmarks y/o semilandmarks que mas estn aportando a las diferencias entre todos los individuos. En este paso no es aun posible distinguir el origen de cada individuo en el ploteo grfico realizado en el TpsRelw. Para esto es necesario convertir el reporte de salida de este software a un archivo *.xls en el cual si fue posible distinguir individuos y poblaciones. Una vez obtenida la matriz completa de variables de forma, para los dos tipos de anlisis a ejecutar (vista lateral cuerpo completo y vista lateral de la cabeza) se procedi a la distincin por poblacin. Estas matrices de variables de forma (cuerpo completo y cabeza), fueron ingresadas al programa PRIMER v.6 (Clarke & Gorley 2005) para anlisis multivariados a nivel de poblaciones. Los anlisis que se describen a continuacin se efectuaron tanto para la totalidad de los individuos por poblacin, como para el promedio poblacional por sitio de muestreo. En ambos casos, los mejores resultados se obtuvieron a partir del promedio, ya que el alto nmero de individuos analizados por sitio representaban rplicas de una misma poblacin, disminuyendo la posibilidad de obtener buenos niveles de estrs en los subsecuentes anlisis de escalamiento multidimensional. El primer paso para ambos casos de anlisis, fue construir una matriz de distancia (disimilitud) entre los sitios basado en las variables morfolgicas, utilizando Distancia Euclidiana como ndice. Posteriormente se obtuvo un ordenamiento mediante escalamiento multidimensional no paramtrico o NMDS que permiti visualizar las relaciones de disimilitud de los sistemas. 18

En general, este procedimiento busca el ordenamiento o ajuste de las muestras (poblaciones), basado en la mutidimensionalidad de sus variables, en un espacio bi o tridimensional donde se representa su mejor posicin, conservando las relaciones de disimilitud y entregando valores de significancia y bondad de ajuste de la representacin (stress). Para visualizar la disimilitud de las poblaciones de acuerdo a su origen o tipo de sistema de procedencia, se utilizaron las categorizaciones de Estuario, Fluvial y Lacustre. Para analizar sus variaciones en el gradiente latitudinal, se clasific cada poblacin dentro de un grado de latitud, las cuales estuvieron ubicadas aproximadamente desde el paralelo 38 al 42 Lat Sur. Luego se consideraron los grados como factor de anlisis. En cada caso (anlisis de la vista lateral del cuerpo y cabeza), con el fin de conocer si el patrn visualizado mediante el anlisis de NMDS era significativo primero se utilizaron test de ANOSIM de dos vas, con tipo de sistema y grados como factores de anlisis. En aquellos casos, en que un factor result no significativo, se procedi a realizar el test de ANOSIM de una va (Clarke et al 2005). Este anlisis no se efectu para el caso del gradiente altitudinal, ya que el diseo de muestreo basado en tipos de sistemas, refleja este gradiente, dado que la mayor parte de los sistemas lacustres muestreados estuvieron en altas elevaciones y todos los estuarios se ubican en elevaciones bajas. Al mismo tiempo los sistemas fluviales se encuentran en elevaciones intermedias.

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Figura 2.- Dispocisin de landmarks y semilandmarks utilizados en el anlisis de forma de la vista lateral del cuerpo de G. maculatus. Landmarks: 1.- Lmite anterior de la lnea de contorno del cuerpo, 2.Punto medio ventral de la circunferencia ocular, 3.- Punto medio dorsal de la circunferencia ocular, 4.- punto de contacto entre la abertura branquial y la lnea de contorno ventral, 6.- Punto de insercin anterior de la aleta dorsal, 7.- Punto de insercin anterior de la aleta plvica, 10.- Punto medio del lmite posterior del pednculo caudal (u origen de la aleta caudal). Semilandmarks: 5.- Proyeccin del valor X del landmark 4, hacia la lnea de contorno superior del cuerpo, 8.- Punto medio entre landmarks 1 y 6, proyectado en la lnea de contorno dorsal, 9.- Punto medio entre landmarks 1 y 7, proyectado en la lnea de contorno ventral, 11.Punto medio entre landmarks 6 y 10, proyectado en la lnea de contorno dorsal del pednculo caudal 12.Punto medio entre landmarks 7 y 10, proyectado en la lnea de contorno ventral del pednculo caudal.

14 1 15 4

6 12 5 3

10

16

13

11

Figura 3.- Dispocisin de landmarks y semilandmarks para el anlisis de la vista lateral de la

cabeza en G. maculatus. Landmarks: 1.- punto lmite de contorno de la cabeza, 11.- punto de contacto
entre las lneas de contorno de la abertura branquial y contorno inferior. Semilandmarks: 2, 3, 4 & 5.- puntos de la circunferencia ocular que representan valores mnimos y mximos en x e y, 6.- proyeccin del valor en x del punto 5 hacia la lnea de contorno superior, 7.- proyeccin del valor en x de 5 hacia lnea de contorno inferior, 8.- proyeccin del valor en x de 4 en la lnea de contorno inferior, 9.- proyeccin del valor x de 4 en la lnea de contorno superior, 10.- proyeccin del valor x de 11 hacia la lnea de contorno superior, 12.- punto medio entre 6 y 10, 13.- punto medio entre 7 y 11, 14.- ubicado 15 valores de distancia de 1 en lnea de contorno superior, 15.- proyeccin del valor x de 14 en la lnea de contorno inferior, 16.- punto medio entre 7 y 8 proyectado en la lnea de contorno inferior.

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Anlisis de variables geogrficas y del hbitat Estas variables fueron ingresadas a una matriz de datos ordenadas para cada uno de los sistemas estudiados. Una vez confeccionada, esta matriz fue ingresada al programa PRIMER v.6 (Clarke & Gorley 2005). Teniendo la matriz de datos brutos, se realiz un anlisis de Draftsman plots para decidir si las variables necesitaban transformacin. Se trabajaron todas con log
x+1.

Luego se procedi a la normalizacin de estas para llevarlas a

la misma escala. Sobre la base de la matriz transformada y normalizada se efectu un PCA con diagrama de vectores, para explorar las variables que mejor explican las relaciones entre los sitios muestreados.

Relacin de las variables morfolgicas con variables geogrficas y fsicas del hbitat.

Para analizar si existen relaciones entre las variables geogrficas y del hbitat con las variables morfolgicas, se utiliz el procedimiento de BioEnv en PRIMER v.6 (Clarke & Gorley, 2005). Este procedimiento permite definir si existe un conjunto de variables que expliquen el patrn multivariado descrito mediante las variables morfolgicas de las poblaciones. Para determinar la significancia de los subsets de variables entregadas por BioEnv, se utiliz un test Global BioEnv. Este procedimiento fue efectuado para tres set de variables en cada caso: (a) todas las variables ambientales medidas, (b) solo las variables geogrficas, (c) solo las variables de calidad del agua.

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Resultados

El tamao de los individuos provenientes de las distintas poblaciones analizadas fue significativamente diferente entre ellas (ANOVA Kruskal-Wallis, H(16,491) = 202; p=0,000). En la figura 4 se observa que las poblaciones de Lingue y Queule, que corresponden a sistemas estuarinos, son los que presentaron las mayores tallas, siendo la poblacin del ro Valdivia la de menor longitud promedio. Al comparar la longitud estndar promedio de las poblaciones por tipo de sistema (figura 5), se observa que las mayores tallas las alcanzan las poblaciones estuarinas, siendo significativamente mayores que las lacustres y fluviales (ANOVA Kruskal-Wallis, H(2,505) = 73,58; p=0,000). Finalmente al comparar la tallas promedio en relacin a la latitud (figura 6), estas no mostraron un patrn de variacin claro, aunque si existen diferencias significativas por grupos de poblaciones por grado de latitud (ANOVA Kruskal-Wallis test: H(5)=41.62, p =.0000).
80 75 70 65 Longitud estndar (mm) 60 55 50 45 40 35 Contaco Neltume Biobo Bueno Maulln Calafquen Rupanco Toltn Valdivia Riihue Lingue Panguipulli Llanquihue Tarahuin Queule Huillinco Natri Std. Dev. Std. Err. Mean

Figura 4.- Promedio (media), desviacin y error estndar de la longitud estndar de los individuos de G. maculatus por poblacin.

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72 68 64 Longitud Estndar (mm) 60 56 52 48 44 40

Std. Dev. Std. Err. Fluvial Estuario Lacustre Mean

Figura 5.- Promedio (media), desviacin y error estndard de los individuos de G. maculatus por tipo de sistema.

68 66 64 62 60 Longitud Estandar (mm) 58 56 54 52 50 48 46 44 42 40 36 37 38 39 40 41 42 Grados de Latitud Sur Mean SE SD

Figura 6.- Promedio (media), desviacin y error estndard de los individuos de G. maculatus divididos en poblaciones por grados de latitud.

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Anlisis vista lateral del cuerpo 1) Descripcin morfolgica El anlisis de la vista lateral del cuerpo, entregado por el software TpsRelw (Rohlf, 2005), dio como resultado un total de 20 variables de forma (20= 2k-4; donde k es el nmero de landmarks o semilandmarks). De stas, las primeras 15 acumulan ms del 99,99% de la variacin dentro de la muestra, siendo las dos primeras las mas informativas, sumando el 53.03% de la variacin total (Tabla 1). Tabla 1.- Variables de forma generadas (relative warps) para el anlisis de la vista lateral del cuerpo,
indicando su porcentaje de aporte particular a la varianza total de la muestra (SV) y el porcentaje acumulado de stas (Cum %). Se destaca en negrita las variables con mayor peso y consideradas en los anlisis posteriores. Variable de forma
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

SV
0.28038 0.25802 0.19431 0.15747 0.14252 0.11737 0.09164 0.07585 0.06655 0.06197 0.05468 0.04594 0.04271 0.03718 0.03472 0.00360 0.00236 0.00142 0.00076 0.00070

%
28.71 24.32 13.79 9.06 7.42 5.03 3.07 2.10 1.62 1.40 1.09 0.77 0.67 0.50 0.44 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

Cum %
28.71 53.03 66.82 75.88 83.30 88.33 91.40 93.50 95.12 96.52 97.61 98.38 99.05 99.55 99.99 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00

La figura 7, muestra la configuracin de consenso para la vista lateral del cuerpo, obtenida luego de sobreponer la totalidad de configuraciones de puntos de todos los individuos incluidos en este anlisis (n=518). La figura 8 muestra la configuracin 24

consenso y vectores de deformacin, representando la magnitud de variacin de cada landmark y/o semilandmark, estando los vectores directamente relacionados a la

2 3

6 11 10

12

Figura 7.- configuracin de consenso para la vista lateral del cuerpo.

Figura 8.- Configuracin de consenso y vectores de deformacin para cada ladmark y semilandmark. El largo de cada vector se relaciona directamente con su aporte a la variacin dentro de la configuracin.

magnitud de la variacin. La tabla 2 muestra los valores de varianzas de cada ladmark y semilandmarks desde el centroide de cada uno. Un ploteo grfico, como el de la figura 9, permite mostrar la presencia de variacin morfolgica en el total de los individuos analizados, representndose aqu las dos primeras variables de forma, en donde el punto (0,0) del plano x,y mostrado, representa la forma de consenso, y los puntos dispersos en el plano, las variaciones en torno a este. En general, los resultados indican que las mayores variaciones morfolgicas, al comparar entre s la totalidad de los individuos, estn centradas en la cabeza y zona de insercin de la aleta anal. De las 20 variables de forma generadas, 15 fueron consideradas en los anlisis posteriores, las 25

5 restantes mostraron ser muy poco informativas y no fueron consideradas (Zelditch et al. 2004).
Tabla 2.- Varianzas aportadas por cada landmark y semilandmark a la generacin de las variables de forma. Sx: varianza en el eje x; Sy: varianza en el eje y; S: varianza total.

Landmark
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Sx
0.00003935 0.00000850 0.00000968 0.00002022 0.00001211 0.00003169 0.00004534 0.00002658 0.00004177 0.00005395 0.00000629 0.00000493

Sy
0.00001837 0.00000797 0.00001668 0.00001564 0.00001282 0.00001542 0.00001633 0.00002902 0.00007711 0.00000693 0.00000717 0.00000568

S
0.00005772 0.00001647 0.00002636 0.00003586 0.00002493 0.00004711 0.00006167 0.00005559 0.00011888 0.00006088 0.00001347 0.00001061

2) Anlisis estadsticos de la forma del cuerpo

El anlisis por escalamiento multidimensional no paramtrico para las variables de forma basados en la vista lateral del cuerpo (figura 10), muestra que no existe un claro ordenamiento en el gradiente latitudinal, lo cual queda confirmado por el ANOSIM de dos vas (ANOSIM, Rglobal-grados = 0,29, p=0.059). Sin embargo, el mismo test arroj una diferencia significativa para el factor tipo de sistemas (ANOSIM, Rglobal-tipo sistema= 0,509, p= 0,048), por lo cual se sigui el anlisis slo para este factor.

26

Figura 9.- Ordenamiento bidimensional donde se representan las dos primeras variables de forma que explican acumuladamente el 53.03% de la variacin total dentro de la muestra. En los extremos se presentan configuraciones y sus grillas de deformacin que indican las principales zonas de variacin dentro de la muestra.

27

Figura 10.- Anlisis por escalamiento multidimensional no paramtrico para las variables de forma de la vista lateral del cuerpo y grados de latitud.

El anlisis por escalamiento multidimensional no paramtrico para las variables de forma basados en la vista lateral del cuerpo (figura 11), muestra la disposicin de los grupos poblacionales (fluvial, estuarino o lacustre) basado en la matriz de distancia (3D; stress=0.03). Se puede apreciar una dispocisin agrupada de las poblaciones de lagos, mientras que las poblaciones fluviales y estuarinas aparecen ms disgregadas en el espacio 3D, a pesar de lo cual el test de Anosim arroj una diferencia estadstica significativa global (ANOSIM, RGlobal=0.31, p=0.014). Sin embargo, las

comparaciones pareadas por tipo de sistemas, mostraron que solamente existen diferencias significativas de forma entre las poblaciones lacustres y estuarinas 28

(ANOSIM, R=0.354, p=0.012). En tanto, las comparaciones fluvial-estuarina (Anosim, R=0.354, p=0.089) y fluvial lacustre (Anosim, R=0.187, p=0.195) resultaron no ser significativamente distintas.

Figura 11.- Escalamiento multidimensional no paramtrico 3-D de las poblaciones basado en la matriz de
distancia Euclidiana obtenida de la matriz de variables de forma de la vista lateral del cuerpo.

Al realizar una comparacin entre las formas de consenso de la vista lateral del cuerpo entre los grupos de poblaciones significativamente distintos (estuarinas y lacustres) (figura 12), se evidencia que las diferencias estn explicadas por dos rasgos principalmente. En primer lugar, las poblaciones lacustres presentan cabezas levemente 29

ms pequeas, tomando en consideracin la variacin de la posicin del landmark 4 (punto de contacto entre la abertura branquial y la lnea de contorno ventral). Por otra parte, estas poblaciones de lagos presentan diferencias en la posicin del landmark 7, que es el punto de insercin de la aleta anal, estando levemente mas adelante respecto del origen de insercin de la aleta dorsal. A esta escala, tambin se presenta una sutil diferencia en la posicin de los landmarks ubicados en la circunferencia ocular (2 y 3), encontrndose que en las poblaciones lacustres estn levemente desplazados hacia la regin anterior.

Figura 12.- Configuracin de consenso para los dos grupos de poblaciones significativamente distintos para el anlisis de la vista lateral del cuerpo. Arriba: puntos verdes, poblaciones de sistemas estuarinos. Abajo: puntos azules, poblaciones de sistemas lacustres.

II Anlisis vista lateral de la cabeza 30

1) Descripcin morfolgica: El anlisis para la vista lateral de la cabeza, gener un total de 28 variables de forma (2k-4=28). De stas, las primeras 15 suman el 99,91% de la variacin dentro de la muestra, siendo las dos primeras las mas informativas, acumulando el 66.88% de la variacin total (Tabla 3).

Tabla 3.- Variables de forma generadas (relative warps) para el anlisis de la vista lateral de
la cabeza, indicando su porcentaje de aporte a la varianza total de la muestra (SV) y el porcentaje acumulado de stas (Cum %). Se destaca en negrita las variables con mayor peso.
Variable de forma
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28

SV
0.66411 0.44854 0.36689 0.23287 0.20856 0.16471 0.13614 0.11100 0.08544 0.07482 0.06792 0.05948 0.05021 0.04367 0.03770 0.02246 0.01412 0.00741 0.00590 0.00435 0.00397 0.00364 0.00309 0.00214 0.00206 0.00175 0.00155 0.00135

SV %
45.93 20.95 14.02 5.65 4.53 2.82 1.93 1.28 0.76 0.58 0.48 0.37 0.26 0.20 0.15 0.05 0.02 0.01 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

Cum %
45.93 66.88 80.89 86.54 91.07 93.90 95.83 97.11 97.87 98.45 98.93 99.30 99.56 99.76 99.91 99.96 99.98 99.99 99.99 99.99 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00

La figura 13, muestra la configuracin de consenso para la vista lateral de la cabeza, obtenida a partir de la sobreposicin del total de configuraciones de puntos que representan la totalidad de individuos en anlisis (n=205). La figura 14 muestra la configuracin 31

consenso y vectores de deformacin, representando esto la magnitud de variacin de cada landmark y/o semilandmark y su aporte relativo a la variacin total dentro de la muestra. El largo de los vectores est directamente relacionado a la magnitud de la variacin, dependiendo esto del aporte de cada individuo. La tabla 4 muestra las varianzas de cada ladmark y semilandmarks en torno al centroide de cada punto. Un ploteo grfico, como el de la figura 15, permite apreciar la presencia de variacin morfolgica dentro del total de los individuos analizados, representndose aqu las dos primeras variables de forma. En general, al comparar todos los individuos se puede apreciar que las mayores se centran en

6 9 14 1 4 5 2

12

10

15 8

3 16

7 13 11

Figura 13.- Configuracin de consenso para landmarks y semiladmarks de la vista lateral de la cabeza.

32

10 12

14

1 4 5

15 3

16

13

11

Figura 14.- Configuracin de consenso y vectores de deformacin

para cada ladmark y semilandmark. El largo de cada vector se relaciona directamente con su aporte a la variacin dentro de la configuracin.

el ojo, variacin en el largo de la cabeza y su depresin dorsoventral. Siguiendo el protocolo de Zelditch et al (2004), se eliminaron un total de 13 variables de forma (16-28) por ser poco informativas. En la figura 15 se representa grficamente la presencia de variacin morfolgica dentro de la muestra. En esta representacin, se muestran las dos primeras variables de forma, las que aportan cerca del 67% de la variacin total dentro de la muestra, y ejemplifica la magnitud de la variacin entre la totalidad de individuos.

33

Figura 15.- Ordenamiento bidimensional donde se representan las dos primeras variables de forma generadas para el anlisis de la vista lateral de la cabeza y que explican acumuladamente el 67% de la variacin total dentro de la muestra. En los extremos se presentan configuraciones y sus grillas de deformacin que indican las principales zonas de variacin dentro de la muestra.

2) Anlisis estadsticos de la forma de la cabeza

El anlisis por escalamiento multidimensional no paramtrico para las variables de forma basados en la vista de la cabeza (figura 16), muestran que no existe un ordenamiento en el 34

gradiente latitudinal, lo cual queda confirmado por el Anosim de dos vas (ANOSIM, Rglobal-grados = 0,191, p=0.12). Sin embargo, el mismo test arroj una diferencia significativa para el factor tipo de sistemas (ANOSIM, Rglobal-tipo sistema= 0,47, p= 0,05), por lo cual se sigui el anlisis slo para este factor.

Figura 16.- Anlisis por escalamiento multidimensional no paramtrico para las variables de forma de la vista lateral del cuerpo segn grados de latitud.

La figura 17 muestra el ordenamiento por escalamiento multidimensional no paramtrico (NMDS) para las variables de forma de la cabeza por poblacin y por tipo de poblacin. Se pueden distinguir cinco agrupaciones. La primera corresponde a Llanquihue, Panguipulli, Riihue, Calafqun, Rupanco y Tarahun, los cuales representan exclusivamente a sistemas lacustres. Luego Queule, Lingue y Maulln que corresponden a estuarios; Valdivia, 35

Contaco y Bueno que corresponden las dos primeras a estuarios y la ltima a ro, Huillinco, Neltume y Toltn, correspondientes las dos primeras a lagos y la ltima a ro, y finalmente Biobo y Natri, un ro y un lago. Al poner a prueba la significancia de las diferencias de forma entre las poblaciones segn el tipo de sistema, result que stas son significativamente distintas (ANOSIM, RGlobal=0.33, p=0.0015). Sin embargo, las comparaciones pareadas mostraron que slo las poblaciones de estuarios y lagos son significativamente diferentes (ANOSIM, R=0.41, p=0.007). En tanto, no existen diferencias entre las poblaciones fluviales y estuarinas (ANOSIM, R=0.26, p=0.16) ni entre las fluviales y lacustres (ANOSIM, R=0.24, p=0.10).

Figura 17.- Ordenamiento por escalamiento multidimensional (2-D) de las variables de forma de la cabeza segn tipo de sistema.

36

Al realizar una comparacin de la forma de consenso, solo entre los grupos de poblaciones significativamente distintos (lacustre y estuarino) (figura 18) se puede observar que las principales diferencias estn referidas a la posicin y tamao del ojo, a la robustez de la cabeza y el tamao de sta. En las poblaciones lacustres, el ojo est levemente desplazado hacia la lnea de contorno superior, en tanto que tambin presenta un mayor dimetro. La cabeza de los individuos de las poblaciones lacustres se presenta ms comprimida dorsoventralmente, dando un aspecto ms aguzado hacia la zona anterior de la estructura.

Figura 18.- Comparacin entre las configuraciones de consenso de los dos grupos de poblaciones significativamente distintos para el anlisis de la vista lateral de la cabeza. Izquierda: Configuracin para poblaciones de sistemas estuarinos; Derecha: Configuracin para poblaciones de sistema lacustres.

37

Variables ambientales La tabla 4, muestra las coordenadas geogrficas de los puntos de muestreo. La tabla 5, muestra los valores para las variables fsicas el hbitat. Basado en la combinacin de ambas tablas, se confeccion una matriz de variables ambientales, con la cual se efectu el anlisis de componentes principales, identificando cada sitio de muestreo segn el tipo de sistema al que pertenece, los cuales representan los tres tipos de hbitat donde se hallan las poblaciones de G. maculatus.

Tabla 4.- Ubicacin y elevacin de los sitios muestreados Sistemas lacustres UTM (18s)
X Y

Coordenadas geogrficas 39 33 53 S; 72 16 19 W 39 38 38 S; 72 19 24 W 39 48 06S; 71 58 28 W 39 40 42 S; 71 58 28 W 40 47 25 S; 72 14 00 W 41 07 35 S; 73 01 31 W 42 40 58 S; 73 55 00 W 42 48 08 S; 73 46 47 W 42 42 47 S; 73 47 13 W 36 10 15 S; 73 10 50 W 39 09 16 S; 73 09 50 W 40 20 48 S; 73 10 49 W 41 29 45 S; 73 18 16 W 41 34 03 S; 73 23 55 W 40 33 26 S; 73 42 45 W 39 23 27 S; 73 11 48 W 39 26 33 S; 73 12 29 W 39 50 22 S; 73 16 09 W 41 07 18 S; 73 35 38 W

Calafqun 734225 Panguipulli 729659 Neltume 245334 Riihue 734225 Rupanco 695131 Llanquihue 665746 Huillinco 588738 Natri 599773 Tarahuin 599318 Sistemas fluviales Biobo 673431 Toltn 658644 Bueno 654538 Toledo 641515 Paredes 633505 Contaco 609013 Sistemas estuarinos Queule 655283 Lingue 654177 Valdivia 648076 Maulln 617122

5616913 5608333 5590009 5616913 5481924 5445298 5273814 5260397 5270323 5920170 5664458 5532163 5404787 5396995 5509580 5638284 5632566 5588630 5091270

Altura M.S.N.M 211 121 199 100 129 34 0 34 54 0 4 0 5 8 0 4 0 0 0

38

Tabla 5.- Variables de calidad del agua de los hbitats muestreados. Sistemas lacustres pH Conductividad (S) 7,89 56 8,16 40 8,29 40 7,76 39 8,53 41 9,04 103 7,62 2158 7,8 44 7,14 45 Sistemas fluviales 10 10 68 17 7,94 69 19,5 8,42 51 19,5 6,95 350 Sistemas estuarinos 16,4 6,96 436 19,5 8,56 5000 18,6 8,33 3380 16,5 8,43 5000

Calafqun Panguipulli Neltume Riihue Rupanco Llanquihue Huillinco Natri Tarahuin Biobo Toltn Bueno Contaco Queule Lingue Valdivia Maulln

T (C) 18,6 18,8 16,8 18,2 18,2 18,1 16,1 14,2 16,1

El PCA con diagrama de vectores se muestra en la figura 19. La tabla 6 informa la variacin individual y variacin acumulada para cada uno de los componentes. Los 5 componentes principales obtenidos para este anlisis explican el 96.8% de la variacin entre los sitios, siendo los dos primeros PC los de mayor importancia, acumulando entre ellos el 57.6% de la variacin total. La grfica muestra dos ejes principales de variacin, el primero lo representan la conductividad-elevacin, siendo estos casi inversamente proporcionales. Se observa que lagos de altas elevaciones, presentan conductividades bajas y lo contrario para los sistemas estuarinos. El otro eje corresponde al norte-sur, en el cual queda marcado por la menor latitud del Rio Biobo, y un mayor pH. En resumen, las variables que ms explican la variacin entre sitios, son en primer lugar la latitud, que separa de forma clara al Rio Biobo, y luego la conductividad-elevacin que separa los lagos de estuarios. Hace la excepcin a este eje el Lago Huillinco que presenta un mayor 39

grado de similitud con las zonas estuarinas, esto por su alta conductividad. Valores intermedios de elevacin y conductividad distinguen a los sistemas fluviales de Rio Bueno y Toltn.
Tabla 6.- Cinco primeros componentes principales de la variacin entre los sitios muestreados. Los dos primeros, acumulan el 57.6% de la variacin total.

PC
1 2 3 4 5

Valores propios
2,14 1,31 1,05 0,758 0,548

Variacin (%)
35,7 21,9 17,4 12,6 9,1

Variacin acumulada (%)

35,7 57,6 75 87,6 96,8

40

Figura 19.- Dos primeros componentes principales y diagrama de vectores que representan los distintos
parmetros ambientales medidos. Tipos de sistema: lacustres, estuarinos y fluviales. ELEV: elevacin; T: temperatura; Conductividad; pH; UTM Y: latitud; UTM X: longitud.

Relacin de las variables morfolgicas con variables geogrficas y fsicas del hbitat. a) Relacin de variables morfolgicas del cuerpo y variables del ambiente Al efectuar BioEnv entre todas las variables medidas del ambiente (geogrficas y de calidad del agua) y las variables de forma de la vista lateral del cuerpo (basado en la vista lateral del cuerpo), result una correlacin no significativa (RSpearman= 0,31; p=0.12). Lo mismo result cuando se busc una correlacin entre estas variables de forma y solo aquellas geogrficas (RSpearman=0.121; p=0.452). Finalmente, solo se encontr una correlacin marginalmente significativa entre las variables de forma y las de calidad del agua (Rspearman=0.31; p=0.054). En este caso, las variables que explican esta correlacin son temperatura y conductividad. b) Relacin de variables morfolgicas de la cabeza y variables del ambiente Al relacionar las variables morfolgicas generadas por el anlisis de la cabeza y la totalidad de las referentes al habitat (geogrficas y de calidad del agua), se encontr una significativa correlacin con las variables temperatura y conductividad (Rspearman=0.527, p=0.008). Al relacionar las variables morfolgicas solo con las geogrficas, estas se correlacionaron positiva y significativamente con la latitud (UTM Y) (Rspearman=0,364; p=0.03). Finalmente, al relacionar las variables morfolgicas solo con las variables del hbitat, se repiti la correlacin significativa con las variables temperatura y conductividad (Rspearman=0,527; p=0.002).

41

Discusin Uno de los aspectos ms sobresalientes de Galaxias maculatus, es el presentar la ms extensa distribucin dentro de los peces de agua dulce del Hemisferio sur, y la ms amplia dentro del grupo de los galxidos (Waters 2000). A la vez, destaca por poseer poblaciones que varan en su ciclo de vida. Si bien est descrita como una especie esencialmente didroma (catdroma), algunas de sus poblaciones son residentes permanentes de sistemas lacustres (Cussac 2002; Chapman et al 2006; Zattara 2002), siendo la diadroma considerada un carcter primitivo dentro del grupo (Waters 2000; Waters & Wallis 2001). Estos aspectos hacen de G. maculatus un buen sustrato para evaluar hiptesis acerca del rol de los eventos histricos (tiempo geolgico) y del ambiente (tiempo ecolgico) sobre sus poblaciones. En esta investigacin se indag sobre la variacin morfolgica entre poblaciones de G. maculatus provenientes de los diversos sistemas que la especie habita en el centro-sur de Chile. El inters de la investigacin sobre morfologa, es que los ajustes fenotpicos y/o morfolgicos en peces de agua dulce han sido estudiados y han demostrado ser de gran importancia, por ejemplo, en el resguardo de variacin gentica de una poblacin (convergencias fenotpicas) (Schluter 2000), en la disminucin de los efectos de depredadores (Langerhans et al 2004; Svanbck & Eklv 2004), y en permitir el mximo aprovechamiento de los recursos disponibles en un hbitat intra y entre poblaciones (Ruzzante et al 1998, 2003; Svanbck & Eklv 2003). En resumen, el conocer sobre los diversos aspectos que inciden sobre la morfologa de una especie, es base para conocer el potencial evolutivo de esta.

42

Los resultados obtenidos demuestran la presencia de variacin morfolgica en la comparacin de poblaciones por grupo de sistemas, donde las diferencias significativas fueron en las comparaciones entre sistemas lacustres y estuarinos, para los dos anlisis realizados. El significado de estas variaciones puede ser atribuido a variados factores. El primero de ellos se relaciona con la existencia potencial de diferentes ciclos de vida, los cuales pueden pueden estar reflejndose en ajustes fenotpicos de las poblaciones. En este sentido, existe evidencia que apoya la hiptesis de que las poblaciones de sistemas lacustres postglaciales del sur de Chile podran ser residentes de estos. El primer registro fue hecho por Campos (1973) para la poblacin habitante del lago Riihue, describindola como residente. Recientes estudios genticos de las poblaciones de la cuenca del Ro Valdivia (X Regin), demuestran los bajos niveles de flujo gnico entre poblaciones del rea estuarina y poblaciones lacustres de la cuenca, como la del Lago Lacar en Argentina (Zattara & Premoli 2005), pero principalmente con la poblacin del Lago Riihue (Habit & Victoriano 2006). Esto es una fuerte evidencia de que, al menos las poblaciones de la cuenca del ro Valdivia son residentes, por lo cual es posible que los caracteres morfolgicos que distinguen las restantes poblaciones lacustres de aquellas estuarinas a la misma latitud estn reflejando las diferencias de los tipos de historia de vida. Por otra parte, an cuando no exista realmente una estructuracin gentica de por medio, es posible que la similitud de hbitats induzca ajustes fenotpicos en poblaciones que utilizan un mismo hbitat. As por ejemplo, Zattara (2002) complementa su estudio gentico de 8 poblaciones lacustres no didromas de G. maculatus, del norte de la Patagonia Argentina con comparaciones morfomtricas, concluyendo que no existen claras diferencias entre ellas, no habiendo una correlacin con los altos niveles de estructuracin gentica entre las poblaciones. Entonces, las similitudes morfolgicas encontradas en este estudio podran 43

corresponder a la influencia directa de la similitud de habitats, haciendo converger las morfologas. Ello indica, que es posible concluir que la similitud encontrada entre la morfologa de las poblaciones lacustres se debe al tipo de hbitat, sin embargo, no es factible concluir con tanta certeza, que se deba a la existencia de poblaciones residentes. Desde la perspectiva ecomorfolgica, Langerhans et al (2004) indican que las diferencias fenotpicas entre poblaciones son causa directa de regmenes selectivos diferenciales. Las divergencias morfolgicas entre diversas poblaciones puede representar respuestas adaptativas a la seleccin y un resultado de cambio microevolutivo intraespecie. Los autores demuestran el efecto que los depredadores tienen en la distribucin y abundancia de fenotipos en Gambusia affinis, donde poblaciones con una gran presin por depredacin se caracterizan por poseer regiones caudales mas largas, cabezas levemente mas pequeas y cuerpos mas elongados. Estas caractersticas se observan tambin en las poblaciones lacustres de G. maculatus aqu analizadas. Sin embargo, Milano et al (2002) encuentra una relacin negativa entre el nivel de piscivora que experimentan poblaciones de la especie congenrica Galaxias platei y el largo de la aleta caudal. Considerando estos antecedentes, es factible postular que es probable que la depredacin tambin est influyendo de manera importante en la variacin morfolgica de las poblaciones de G. maculatus. Al respecto, Machi et al (1999) encuentran evidencia que las poblaciones de G. maculatus estn sometidas a una fuerte presin de piscivora en lagos Patagnicos, tanto por especies de peces piscvoros nativos como exticos de la Patagonia. Un acabado estudio sobre los niveles de piscivora que presentan los sistemas lacustres chilenos, como el realizado por Ortz-Sandoval (2006) para lagos de la Regin de Aysn, sera necesario para poder evaluar la distribucin de fenotipos en las poblaciones de G. maculatus y su posible relacin a las preferencias dietrias de peces piscvoros tales como los salmondeos. 44

En este mismo contexto ecomorfolgico, otra importante fuente relevante de variacin entre poblaciones lo constituyen las preferencias alimentarias y/o las diferencias entre la oferta ambiental de temes presa. Ruzzante et al (2003) realizan una comparacin de preferencias dietrias y de caracteres morfomtricos entre tres poblaciones de Percicthys trucha provenientes de dos lagos del norte y uno del sur de la Patagonia Argentina. Los resultados presentan una fuerte evidencia de que el patrn de variacin morfolgica est relacionado directamente con las preferencias alimentarias en las poblaciones, siendo la morfologa de las poblaciones con preferencias y ofertas de alimento similares ms parecidas entre ellas. Para G. maculatus, Ferriz (1984) describe la alimentacin de una poblacin del Ro Limay (Argentina), donde se describe una gran amplitud alimentria, que incluye fauna acutica (Cladcera, Quironmida, Coppoda) y terrestre (Himenptera, Coleptera). Sin embargo, no se presentan en la actualidad estudios comparativos entre poblaciones basados en la dieta que puedan relacionarse a las variaciones morfolgicas encontradas. Otro aspecto relevante de considerar en este anlisis es la diferencia encontrada entre la talla promedio de las poblaciones, siendo las poblaciones estuarinas significativamente mas grandes que las poblaciones lacustres y fluviales. Al respecto, recientemente Chapman et al (2006) discute el origen de la existencia de poblaciones de tallas mayores en G. maculatus, relacionndolas con la productividad de los sistemas donde stas habitan. Chapman et al (2006) comparan la talla de poblaciones de diversos sistemas del sur-oeste de Australia (~50 mm promedio) con poblaciones del este Australiano o de Nueva Zelanda (hasta 130 mm), encontrando que estos ltimos son significativamente ms grandes. A su vez, las poblaciones australianas que habitan sistemas menos productivos alcanzan tallas similares a las reportadas por Barriga et al (2002) para poblaciones lacustres de la Patagonia 45

Argentina, donde las tallas promedio entre distintos sistemas fluctuaron entre los 40 a 55 mm, y son similares a la talla promedio para los sistemas lacustres fue de 49,23 mm incluidos en este estudio. Este hecho se relacionara directamente con los niveles de productividad particulares de cada hbitat. Los sistemas del sur-oeste de Australia son sealados como muy poco productivos debido a sus bajos input de nutrientes, caracterstica que comparten con los sistemas lacustres oligotrficos de ambas vertientes de los Andes. Por contraparte, las tallas mayores de los sistemas estuarinos encontrados en este estudio (63 mm) se relacionan con mayores ndices de productividad, al igual que lo reportado por Chapman et al (2002) para poblaciones el este Australiano y para Nueva Zelanda. Para el caso del presente estudio, es importante sealar nuevamente, que una de las ventajas del uso de la morfometra geomtrica, es que bloquea la influencia en los anlisis de cualquier variable que no sea atribuida directamente a la forma (Rohlf & Marcus, 1993), siendo la forma, toda la informacin geomtrica que permanece en un objeto, luego que son removidos las diferencias escalamiento, rotacin y orientacin (Kendall 1977; Zelditch et al 2004). No fue encontrado en este estudio un patrn latitudinal significativo en la variacin de la forma, para ninguno de los dos anlisis realizados. Aunque aparentemente el rango considerado puede ser amplio (Biobo-Chilo), en realidad solo representa el 27,7% de la distribucin total de la especie en Chile, la que abarca entre la III a la XII regiones (Ruiz & Marchant 2004). Si bien el patrn morfolgico no es significativo, la poblacin del ro Biobo muestra ser diferente al evaluar sus variables de forma con el resto de las poblaciones y al observar el NMDS para las variables de forma de la vista lateral para las poblaciones y la latitud, se observa una tendencia clinal norte-sur, pero que es enmascarado 46

por las dispocisiones de las poblaciones lacustres de Chilo. Este resultado sera indicativo de existencia de un patrn latitudinal de variacin morfolgica que podra ser evidenciable al ampliar el rango y nmero de las poblaciones bajo anlisis. Si se considera que las variables ambientales muestran ser consistentes con la diferenciacin morfolgica entre poblaciones de sistemas lacustres y estuarinos, entonces es esperable que las propiedades particulares de los ros y lagos del norte del pas sean tambin consistentes con un patrn latitudinal de variacin morfolgica para las poblaciones. Llama particularmente la atencin, la singular asociacin que se presenta entre las poblaciones del Rio Biobo y el Lago Natri (Isla de Chilo), principalmente al evaluar las variables de forma de la cabeza por tipo de poblacin y por la latitud. No se encuentra una explicacin lgica para este resultado, siendo los mas probable que la convergencia morfolgica sea debida a algn factor ambiental actuando de similar manera sobre ambas poblaciones. Si bien este estudio ha abarcado los tres tipos de sistemas en que las poblaciones de G. maculatus se encuentran, es an posible mejorar el anlisis y por ende, mejorar las inferencias acerca de la variacin morfolgica entre poblaciones. Con la ya mencionada latitud, se incluir en el futuro el anlisis de poblaciones de sistemas lacustres costeros (e.g. Lago Budi, Lanalhue, Lleulleu), lo cual permitir evaluar la hiptesis planteada por Cussac et al (2004) referente a que la morfologa estara siendo influenciada tanto por la distancia al mar, la latitud y una combinacin de ambos efectos.

Finalmente, es posible concluir que la especie G. maculatus es una especie altamente plstica, evidenciando ajustes morfolgicos a los ambientes que utiliza de lago y estuarios. Estos no son manifiestos en las poblaciones fluviales, las cuales parecen ser la transicin entre poblaciones lacustres y estuarinas. 47

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Anexo

1. Sistemas y poblaciones muestreados.

Figura 20. Sitios de muestreados para las poblaciones de G. maculatus consideradas en este estudio. Se suma a estas, la poblacin previamente obtenida del Rio Biobo.

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