EL ANLISIS DE LAS MUESTRAS CLNICAS POR ESPECTROMETRA DE ABSORCIN ATMICA

INTRODUCCIN. El Anlisis Clnico representa una parte muy importante de la absorcin atmica, segmento de las aplicaciones que comparte algunas similitudes con el anlisis del medio ambiente. La mayora de las muestras analizadas se toman del grupo principal de los fluidos biolgicos, como sangre entera, plasma, suero y orina. En menor medida, los tejidos duros y blandos, como los huesos, las uas y el pelo, tambin puede ser utilizado para propsitos especficos (principalmente toxicidad). Los estudios nutricionales relacionados con su dieta significa que las heces pueden ser analizadas en algunas ocasiones. Toda la gama de tcnicas de absorcin atmica se puede emplear en el anlisis de la llama, base de los elementos esenciales mayores y menores, el anlisis de horno de grafito de los elementos traza y el anlisis de vapor para el grupo de txicos, sobre todo la formacin de hidruro. Tcnicas de preparacin de las muestras son a menudo importantes, en especial cuando el horno de grafito se va a utilizar. Los niveles de fondo de alta de los metales alcalinos significa que la eficiencia de correccin de fondo de alta puede ser necesario para los anlisis del horno, junto con la capacidad de utilizar cubetas de plataforma y los procedimientos de modificacin de la matriz. Anlisis clnicos a menudo utiliza tcnicas de deteccin para acelerar el rendimiento. Mtodos rpidos utilizando el anlisis de la llama STAT, por ejemplo, puede ser utilizado para seleccionar las muestras con niveles normales de los elementos, dejando las muestras anormales se mide por los procedimientos de anlisis ms completo.

1) Sangre entera y suero: La sangre es un tejido altamente especializado que consiste de varios tipos de clulas en suspensin en un medio lquido que contiene una variedad de sustancias disueltas que se transportan de una parte del cuerpo a otra. Los componentes celulares consisten en los glbulos rojos, que transportan gases respiratorios, los glbulos blancos, que combaten la enfermedad, y las plaquetas, que desempean un papel importante en la coagulacin de la sangre. El suero de la sangre se prepara a partir de sangre total por centrifugacin, que separa el lquido del material celular. El suero contiene muchos compuestos como el agua, protenas, glucosa, lpidos, aminocidos, sales, enzimas, hormonas, anticuerpos antgenos, y la urea. Muchos elementos metlicos se pueden combinar con estos compuestos. El plasma de sangre se separa de la sangre entera, al permitir que la sangre coagule, naturalmente, a continuacin, que separa el lquido del cogulo. Se trata principalmente de agua y sales inorgnicas, con trazas de material orgnico restante.

2) La orina: La orina es un color amarillo plido, ligeramente cida lquido excretado por los riones y que

contiene productos de desecho eliminado de la sangre. La composicin de la orina se estudia para comprender los procesos metablicos de la identificacin y cuantificacin de los productos finales formados y se excreta en la orina. Tambin la prueba puede ser til en el diagnstico y el tratamiento de estados patolgicos por la identificacin de sustancias anormales o sustancias en cantidades anormales en la orina.

3) Los analitos: Los elementos metlicos medidos en los anlisis clnicos se dividen en tres grupos segn su funcin en el metabolismo humano, y son generalmente clasificados como esenciales, txicos o teraputicos.

Elementos esenciales - Elementos Esenciales principales: Ca, Mg, Na, K - Elementos Esenciales menores: Zn, Cu, Fe - Oligoelementos Esenciales: Cr, Mn, Mo, Co, V, Se, Ni

Los elementos esenciales se dividen en tres subgrupos de elementos mayores, menores y trazas, dependiendo de sus niveles de concentracin normal en las muestras. Los elementos dentro de cada subgrupo son los siguientes.

Elementos Esenciales Mayores Calcio El calcio es un elemento mineral esencial que abarca hasta el 2% del peso del cuerpo humano. Los huesos contienen alrededor de 1 kg en un humano tpico masculino, pero slo el 1% del contenido total de calcio es fisiolgicamente activo en los fluidos corporales. El ion calcio disminuye la excitabilidad neuromuscular, participa en la coagulacin de la sangre, activa las enzimas y juega un papel importante en la transferencia de iones inorgnicos a travs de las membranas celulares. Esencialmente todo el calcio en la sangre est presente en el suero y los niveles normales de calcio en suero de adultos se encuentran en los rangos de 2,23 a 2,60 mmol / L.

Magnesio Los iones de magnesio sirven para una serie de importantes sistemas enzimticos involucrados en la transferencia y la hidrlisis de los grupos fosfato. El diagnstico de la -deficiencia tetnica de magnesio- es la aplicacin clnica ms importante en el suero, pero disminucin de los niveles de magnesio se encuentra en los casos de sndrome de mala absorcin, pancreatitis aguda, hipoparatiroidismo, alcoholismo crnico y delirium tremens, aldosteronismo, intoxicacin por

digital, despus de prolongadas alimentaciones I.V. y despus de la prdida excesiva de magnesio en la orina. El aumento de los niveles de magnesio srico se han observado en la deshidratacin, acidosis diabtica severa y en la enfermedad de Addison. Cualquier condicin que interfiera con los resultados de filtracin glomerular en la retencin de magnesio, y por lo tanto la elevacin de los niveles de magnesio srico. Los niveles normales de adultos estn en el rango 0,75-1,25 mmol/L. Sodio El sodio es el catin ms importante de los fluidos extracelulares. Aproximadamente dos tercios de los 70 g contenidos en el cuerpo de un adulto promedio se encuentra en estos fluidos, la mayora del resto est en los huesos y slo una pequea fraccin se encuentra dentro de las clulas. Presente en forma de cloruro, el sodio participa en muchas funciones fisiolgicas vitales. Se asocia con el control del pH de los lquidos corporales, la regulacin de las reacciones cido-base, y el ajuste del volumen de lquido corporal. El sodio se encuentra en todos los tejidos del cuerpo y su determinacin es uno de los niveles procedimientos. En el suero con mayor frecuencia se realizan clnicas de sodio es relativamente constante y las extremas fluctuaciones se utilizan en el diagnstico. Niveles bajos de sodio srico se encuentran en una variedad de condiciones, incluyendo, poliuria severa, acidosis metablica, Addison `s de la enfermedad, la diarrea y la enfermedad tubular renal. El aumento de los niveles sricos se encuentran en hiperadrenalismo (sndrome de Cushing `s), deshidratacin severa debido a la prdida de agua principal, ciertos tipos de lesin cerebral, coma diabtico despus de la terapia con insulina y el tratamiento excesivo con sales de sodio. El rango de valores normales de sodio en suero son 135 a 148 mmol / L. Potasio El potasio es el catin principal intracelular que se encuentran en el cuerpo humano. Los niveles en el lquido extracelular e intracelular se mantienen por un mecanismo de transporte activo. Los niveles bajos de potasio pueden causar cambios excitatorios de la irritabilidad muscular y la funcin del miocardio, que vaya acompaado de cambios caractersticos electro-cardiogrficos. Las deficiencias de los iones de potasio pueden ocurrir como resultado de la prdida excesiva de potasio a travs de diarrea prolongada o vmitos. Aumento de los niveles sricos de potasio se puede observar en los casos de oliguria, anuria, o la obstruccin urinaria. Los niveles normales de potasio srico son en rango de 3,5 a 5,3 mmol / L. La Espectrofotometra de Absorcin Atmica (FAAS) es una tcnica ideal de anlisis para medir los elementos esenciales mayores y menores. FAAS se ha utilizado durante muchos aos para las pruebas de rutina de los elementos esenciales, ya que es una tcnica rpida, sencilla y precisa, que rara vez sufre de interferencias. Se puede determinar la mayora de elementos metlicos en concentraciones desde mg/L e incluso ug/L para algunos elementos. Los nuevos instrumentos pueden proporcionar una mayor capacidad de anlisis y aumentar la productividad con la automatizacin completa, incluyendo la comprobacin de control de calidad. Es habitual para medir los elementos esenciales mayores y menores en el suero por espectrometra de absorcin atmica de llama. No es posible aspirar suero no diluido directamente en un instrumento de

absorcin atmica debido a la viscosidad del suero, y un factor de dilucin de por lo menos de 1:10 se recomienda normalmente para evitar problemas de bloqueo con el nebulizador y/o la ranura del quemador. Elementos Esenciales Menores Zinc El zinc es esencial para el crecimiento y la propagacin de los cultivos celulares y para el funcionamiento de varias enzimas. Que constituye cerca de 0.003% del cuerpo humano normal. El zinc est presente en el suero, plasma, eritrocitos y leucocitos. Existe en el plasma tanto en trminos generales como consolidados y fracciones firmemente sujetos relacionados con las albminas y las globulinas del suero. los niveles de zinc son un indicador importante de las diversas condiciones patolgicas. Los valores normales de cinc en el suero se encuentran en el rango de 11 a 24 mmol / L (0,7 a 1,60 mg / L). Existe poca variacin con el sexo o la edad, pero hay una variacin diurna con la concentracin mxima que se presenta sobre las 10.00 horas.

Cobre Cobre es un elemento menor de edad muy amplio y se puede encontrar en la mayora de las formas de vida. Una deficiencia en los resultados de cobre en trastornos graves en el crecimiento y el metabolismo. La aplicacin clnica ms importante de la determinacin de cobre est en su diagnstico de la degeneracin hepatolenticular (Wilson `s de la enfermedad), en los que es significativamente los niveles sricos de cobre total reducido. Los altos niveles de cobre en la sangre se producen la mayora de las infecciones crnicas y agudas, y en la leucemia, Hodgkin `s de la enfermedad, anemias diversas, la hemocromatosis, la artritis reumatoide, el embarazo, la cirrosis y el infarto de miocardio. Los niveles normales en suero varan con la edad y el sexo. Los recin nacidos estn en el rango de 3 a 11 mmol / L (0,2 - 0,7 mg / L), los nios mayores de 6 meses y adultos 11-20 mmol / L (0,7 - 1,3 mg / L). Los machos adultos se encuentran en el rango de 11 a 20 mmol / L (0,7 - 1,3 mg / L) mientras que las hembras son ligeramente ms altas, en el rango de 12,5 a 24 mmol / L (0,80 a 1,55 mg / L). En el embarazo, de 16 semanas a trmino, los valores de las mujeres se elevan a 27 - 40 mmol / L (1,7 a 2,5 mg / L).

Hierro Un hierro fue el primero de los elementos de menor importancia de ser reconocidos como necesarios para las plantas y los animales. Un macho adulto promedio se estima que contiene 4-5 g de hierro. La mayor parte del hierro existe en formas complejas a las protenas, ya sea como compuestos heme o porfirina, especialmente la hemoglobina o mioglobina. Hierro en la sangre se encuentra combinado con la hemoglobina en los eritrocitos y como la transferrina en el plasma en una proporcin de aproximadamente 100 a 1. La disminucin en los niveles de hierro srico se debe generalmente a una deficiencia en la cantidad total de hierro presente en el cuerpo, que puede ser causada por la falta de ingesta suficiente o absorcin de hierro. Los valores bajos de hierro srico se encuentran en tipos

hemorrgico y la anemia hipocrmica f, en la enfermedad aguda y crnica, el embarazo, y los estados por deficiencia de hierro. Los altos valores de hierro srico se observa en la hemocromatosis, en las formas de anemia caracterizada por la formacin de la hemoglobina disminuye ya menudo en hepatitis. Los niveles normales de hierro en el suero de los varones adultos estn en el rango 9,5 a 23 mmol / L (0,60 - 1,50 mg / l), mientras que para las mujeres adultas el rango es de 8 a 20 mmol / L (0,50 a 1,30 mg / L). Los niveles sricos de hierro disminuye en las personas mayores a 6,2 - 12,5 mmol / L (0,40 a 0,80 mg / L). Los elementos esenciales menores estn presentes en una concentracin que est en el extremo inferior del rango normal de la llama. Se puede determinar mediante el STAT accesorio o por la tcnica de horno de grafito.

Trace Elementos Esenciales Cromo El cromo es considerado como un elemento esencial, pero tambin es conocido por ser txico cuando est presente en concentraciones elevadas. El metal ha demostrado ser biolgicamente activas en cantidades traza, y la molcula que contiene cromo-conocido como el factor de tolerancia a la glucosa se piensa que es una insulina de accin cofactor, y por lo tanto se ha implicado en el metabolismo de la glucosa. El anlisis de la sangre de cromo se utiliza como un reflejo de la exposicin a largo plazo, mientras que el cromo urinario refleja mejor absorcin de los ltimos. Las concentraciones normales de cromo en la sangre humana en su conjunto estn en el rango de 0,5 - 5,0 mg / L.

Manganeso El manganeso es reconocido como un elemento que es esencial para la nutricin humana. Influye en el crecimiento normal, y desempea un papel importante en la activacin de una enzima (arginasa) necesario para la formacin de urea. Los altos niveles de manganeso son considerados como txicos. Los sntomas observados en los casos de envenenamiento por manganeso incluyen la inestabilidad psicomotora y alucingena. La rigidez y los movimientos de las extremidades son similares a las de Parkinson y tambin sugieren un similaridad a la enfermedad de Wilson.

Molibdeno La importancia del molibdeno es un elemento esencial ha sido establecida. El ion cataliza molibdeno xantina y la actividad del aldehdo oxidasa. Deficiencia de molibdeno en el hombre no ha sido reconocida, pero los casos de toxicidad y deficiencia en animales se inform ampliamente.

Cobalto Cobalto es reconocido como un oligoelemento esencial. El cobalto es necesario en el cuerpo para la sntesis de la vitamina B12. Otras funciones importantes de este metal implican la activacin de enzimas y la formacin de la hemoglobina. Los altos niveles de cobalto inducen nuseas y vmitos

debido a la irritacin local de la mucosa gstrica.

Vanadio El adulto normal tiene 10 a 25 mg de vanadio sobre todo en los dientes, los huesos y la grasa. La mayor parte del vanadio ingerido se excreta rpidamente en la orina y el resto se conserva en el hgado y los huesos. El vanadio se cree que inhibe los niveles de colesterol in vitro. La deficiencia de vanadio es reportado como causante de desarrollo de los huesos con retraso y el rendimiento reproductivo afectado.

Selenio El selenio se reconoci por primera vez como un elemento esencial en el metabolismo humano en el 1950. Las deficiencias de selenio se asocian con enfermedades del corazn, la distrofia muscular y trastornos reproductivos, y el elemento es un componente esencial de la glutatin peroxidasa enzima de mamferos. Al igual que con muchos elementos esenciales de selenio es tambin conocido por ser txico cuando est presente en concentraciones ms altas. Los sntomas de la intoxicacin por selenio incluyen dolor abdominal y parlisis parcial posible. Las concentraciones de selenio en sangre reportados como normales varan de 50 a 350 mg / L y dependen de varios factores de la dieta.

Nquel El nquel es considerado un oligoelemento esencial. La concentracin en el tejido blando es relativamente baja, aunque los niveles ms altos se encuentran en el esqueleto. Tambin se informa de que se presente en el ARN y el ADN. La deficiencia de nquel pueden afectar el proceso reproductivo y disminuir la oxidacin in vitro en hgado de glicerofosfato.

Elementos txicos Elementos txicos son a menudo definidos como aquellos que interfieren con los procesos metablicos. Los elementos que generalmente se incluye en este grupo son los siguientes: plomo, mercurio, arsnico, talio, cadmio, aluminio, boro, antimonio.

Plomo El plomo es un elemento txico, que tiende a acumularse en los tejidos y los huesos de los individuos expuestos. Se puede absorber por inhalacin del aire o por ingestin de slidos o lquidos. La mayora del plomo se excreta en los riones, pero el proceso de eliminacin es mucho ms lento que el ritmo al que se absorbe. La exposicin prolongada al plomo puede resultar en la anorexia, plomos en el margen de las encas, nuseas, dolor abdominal severo, parlisis, confusin mental, anemia, convulsiones y dao cerebral.

Mercurio El mercurio es un contaminante ambiental, que tiene graves consecuencias txicas. Los compuestos de mercurio y compuestos de mercurio, especialmente orgnicos, incluso en bajas concentraciones, son capaces de inactivar los bonos sulfhidrilo y por lo tanto interfieren con la funcin celular. Los compuestos Alquil mercurio pueden causar daos irreversibles al sistema nervioso central mientras que los compuestos inorgnicos de mercurio causa una lesin reversible de los tejidos como los riones y los intestinos.

Arsnico La toxicidad del arsnico es bien conocida histricamente. El arsnico se combina fcilmente con las protenas debido a su gran afinidad por los grupos sulfhidrilo. Los resultados en la precipitacin de las protenas, produciendo irritacin gastrointestinal y la inhibicin irreversible de sistemas enzimticos importantes, que son importantes los efectos txicos de arsnico. La gran afinidad de arsnico para las protenas de los tejidos es tambin responsable de la rpida eliminacin de arsnico de la sangre. La sangre, por lo tanto, no es un buen ejemplar, salvo en los casos en los que ha sido una sobredosis de esta sustancia ingerida.

Talio La toxicidad del talio ha sido un fenmeno frecuente en todo el mundo en el hombre y los animales domsticos. Las sales de talio se utilizan como rodenticidas y tambin, tanto interna como externamente, como una crema depilatoria. El rasgo caracterstico de la intoxicacin por talio es la prdida de pelo o de vez en cuando, la prdida de las uas y la piel de los pies. Dado que este metal no est en material biolgico, por todo lo demostrado en la orina es significativo.

Cadmio El cadmio es un elemento extremadamente txico. La exposicin aguda a cadmio lleva ms de un edema pulmonar. La exposicin prolongada puede conducir al enfisema, la proteinuria, y anosmia. Otro problema asociado con el cadmio es su tendencia a sustituir el zinc en el cuerpo. Esto puede ser grave, ya que el zinc tiene un papel vital en la funcin de muchas enzimas.

Aluminio La determinacin de aluminio en los lquidos biolgicos ha sido objeto de numerosas publicaciones. La mayor parte de la atencin se le ha dado al anlisis de suero, ya que los niveles de suero pueden ser utilizados para la intoxicacin por aluminio. En pacientes con insuficiencia renal tratados mediante dilisis, est bien establecido aglutinantes, el agua contaminada de aluminio y los lquidos de dilisis pueden causar toxicidad por aluminio.

Boro La causa principal de intoxicacin humana por Acido brico, a excepcin de la ingestin oral, es la

reabsorcin a travs de membranas lesionar o quemar la piel y las mucosas. La mayora de boro ingerido o reabsorbe se elimina por los riones, sin embargo, en los casos de intoxicacin de boro puede ser detectado en la sangre, lquido cefalorraqudeo, lquido de dilisis peritoneal de fracciones, el cerebro, el hgado, el bazo y los tejidos del corazn.

Antimonio Antimonio y sus compuestos son extremadamente txicos. El contacto fsico, humos o polvo son conocidos por causar dermatitis, conjuntivitis queratitis y ulceracin del tabique nasal. Los hidruros voltiles derivados de antimonio, estibina, es muy peligroso y puede ser responsable de la hemlisis y dolores abdominales.

Elementos teraputicos Elementos teraputicos se utilizan para tratar ciertas enfermedades, y sus niveles en pacientes sometidos a tratamiento adoptado son monitoreados para controlar la dosis y el progreso del tratamiento adoptado.

Oro Complejos de oro se utilizan en el tratamiento de la artritis reumatoide y otras enfermedades del colgeno otros. El oro radiactivo tiene aplicacin en tratamientos de cncer y de la hoja cargada de oro se ha utilizado para los procedimientos neuroquirrgicos como un dispositivo para el cierre de la piamadre frgil.

Platino Las sales de platino, sobre todo cisplatino (cisdiaminodicloroplatino (II)), es un potente agente contra el cncer con la actividad clnica sustancial contra el cncer de testculos, la cabeza de cncer de ovario y tumores malignos del cuello, y otros tumores. Cisplatino efectos antitumorales es mediado a travs de su unin al ADN para formar un nmero de diferentes especies moleculares y platino total de unin al ADN est directamente relacionado con el tumor de clulas de matar.

Litio El litio es ampliamente utilizado en el control de la fase manaca de la psicosis depresiva. Los niveles teraputicos durante el tratamiento inicial son 1,0 a 1,5 mmol / L de suero, hasta que el umbral de la eficacia se alcanza despus de 60-10 das. El nivel srico durante la terapia de mantenimiento es generalmente mantiene a 0,5-1,0 mmol / L. El aumento de los niveles de Litio son txicos, aunque las reacciones txicas son rara vez se ve con niveles sricos por debajo de 1,5 mmol / L. Sin embargo, se vuelven cada vez ms graves como el aumento de los niveles superiores a 2,0 mmol / L. Por tanto, es obligatorio someterse a este tratamiento.

En horno de grafito espectrometra de absorcin atmica (GFAAS) es una tcnica ideal para medir todos los elementos trazas esenciales. Aunque GFAAS es una tcnica ms lenta y ms complicada que la FAAS, tiene la ventaja de analizar los elementos traza en ug / L e incluso ng / L para algunos elementos. Otra ventaja de esta tcnica es que los volmenes de muestra slo pequeos, del orden de 50 a 100 uL, son obligatorios. Antecedentes (no especfico) la absorcin de la radiacin atmica de la muestra componentes de la matriz puede causar grandes errores, pero estos por lo general se puede corregir instrumentalmente, utilizando uno u otro de las dos formas complementarias de correccin de fondo disponible, Quadline (continuar fuente) o el efecto Zeeman. La automatizacin de esta tcnica es fcilmente disponible y se debe beneficioso para mejorar la medicin y precisin. Esta tcnica es ideal para el anlisis de todos los elementos traza, excepto el mercurio, por lo que la sensibilidad es pobre debido a la volatilidad alta del elemento. Los anlisis de uso ms frecuentes participacin de uno o ms de los siguientes procedimientos: a. - La inyeccin directa en el tubo de grafito o de la plataforma. b. - Dilucin con agua, Triton X-100 o cidos diluidos. c. - desproteinizacin con cido fuerte. d. - uso de modificacin de la matriz.

Rara vez es necesaria para digerir completamente la muestra, a menos que sea un tejido blando o hueso. Quelacin es una tcnica de extraccin utilizado anteriormente para concentrar el analito y eliminar componentes de la matriz interferir rara vez se requiere con instrumentos modernos, debido a su mejor rendimiento. Generacin de hidruros AAS es una tcnica atractiva para la formacin de hidruro de elementos, como el costo de capital de los equipos es mucho menor que GFAAS, sin embargo, las sensibilidades son similares. Sin embargo, la digestin de la muestra es ms probable ser necesario, y las precauciones que deben adoptarse para garantizar que la oxidacin de las interferencias del Estado son eliminados. 4) Muestreo: Hay una serie de tecnologas de muestreo bien definidos que se utilizan para situaciones clnicas.

Muestras de sangre La superficie de la piel suele ser limpiado con un algodn con alcohol desechable antes de cualquier toma de muestra de sangre. Esta precaucin es especialmente necesaria en el entorno industrial y en una muestra que se toma para el anlisis de un elemento como el aluminio, que se somete a un problema de contaminacin importante. La muestra de sangre capilar es mejor evitar, ya que es ms propenso a la contaminacin. En general, es normal para recoger una muestra de sangre venosa a travs de una aguja de metal desechable estndar, pero para algunos anlisis, como el manganeso, cromo y nquel, la contaminacin puede derivarse de este procedimiento. Para estos elementos de la sangre debe ser tomada a travs de una cnula de plstico y descart la inicial de 5 ml o reservadas para no-anlisis de elementos traza. Se

recomienda para cada elemento un tipo especfico de recipiente y anticoagulante. Para algunos elementos traza estas son fuentes importantes de contaminacin y la seleccin del tipo incorrecto puede invalidar por completo el ensayo. Algunos ejemplos son los siguientes: La heparina.- puede contener zinc, cobre y manganeso acumulados durante la separacin qumica y la purificacin. EDTA de potasio.- Se filtra el zinc en el plasma de los eritrocitos. Puede contener cantidades significativas de manganeso y cobalto. Tapones de goma / tapas.- Liberacin significativa cantidad de zinc. Tapones de plstico de color naranja / tapas.- Liberacin de cadmio. Gel de sistemas de separacin.- Liberacin de zinc y otros elementos. Tapones tipo tabique / tapas.- Tambin puede causar la contaminacin por plomo. Para minimizar la contaminacin es la mejor manera de recoger la sangre en un tubo de plstico liso y separar el suero. Para los ensayos de algunos, sobre todo de aluminio, tubos de policarbonato son las preferidas. La separacin de suero o plasma de los glbulos rojos se hace mejor con una pipeta Pasteur de polietileno transparente con bombilla integral. Pipetas de vidrio Pasteur con tetina de goma no deben usarse nunca porque el polvo de talco o dentro de la tetina contiene zinc, que se puede soplar en la pipeta durante la separacin causando as la contaminacin. La liberacin de aluminio de la copa de la pipeta tambin puede invalidar los ensayos para este elemento. El aluminio es tan omnipresente que es mejor enviar la muestra sin separar. Para los ensayos que requieren una muestra de sangre total, el EDTA potsico es el anticoagulante preferido, aunque algunos lotes pueden contener cantidades significativas de manganeso y cobalto, como ya se seal. Con el fin de detectar una posible contaminacin, por lo general se recomienda enviar un tubo vaco con cada muestra o grupo de muestras remitidas al laboratorio. Muestras de orina En general, muestras de orina de 24 horas son recolectadas. La coleccin es realizada en un recipiente que ha sido bien lavado con cido ntrico diluido (M o 2M), seguido de un lavado minucioso con agua desionizada. Cualquier sello con tapa de caucho negro se debe quitar antes del lavado y uso. Contenedores de polietileno no son adecuados para las colecciones de la orina para el mercurio y contenedores de policarbonato se debe utilizar. Un tubo estril universal que contenga 20 ml de la coleccin es normalmente enviado al laboratorio para su anlisis.

Otras muestras La biopsia y grandes muestras de tejido son seccionados con un bistur de acero inoxidable limpia o una aguja, se coloca en un tubo de policarbonato seca y se almacena a -20 C hasta su uso. Los tejidos no son almacenados en formol ya que esto puede causar la contaminacin excesiva y tambin filtran grandes cantidades de cadmio y otros elementos del tejido. Todas las muestras que contienen o se sospecha contienen organismos, virus o sustancias tales como la hepatitis B o el VIH que puedan representar un peligro para la infeccin grave para el personal de laboratorio deben estar claramente identificados.

5) Preparacin de la muestra: Una de las ventajas de la espectrometra de absorcin atmica en el anlisis de muestras clnicas es que en la mayora de los casos muy poco, o nada, se requiere la preparacin de muestras. Si se requiere la preparacin de muestras que deben participar un mnimo de manipulacin y reactivos posibles. Es esencial que todos los reactivos utilizados sean de la ms alta calidad disponibles. El grado entre los niveles normales y patolgicos en las muestras biolgicas pueden ser muy pequeas, por lo tanto, el peligro de contaminacin siempre debe tenerse en cuenta. Cabe recordar que el primer requisito para obtener resultados precisos es la limpieza. Se debe tener cuidado, a toda la vajilla de laboratorio es de primordial importancia. Despus de su uso, el material de vidrio debe ser lavado con detergentes tensoactivos libre de fosfato, tales como Decon 90, y luego enjuagado en cido ntrico al 10% v/v hasta que sea necesario. 6) Las unidades de medida: En el laboratorio de qumica clnica tpica de una variedad de unidades se usan, pero la mayora de los laboratorios de los hospitales utilizan el sistema SI la unidad molar como la unidad principal de la presentacin de informes. Sin embargo, para las unidades de los usuarios no-clnica de masa por litro tambin se cita. Las relaciones adecuadas se muestran a continuacin para las unidades ms comunes.

1 ug / L = 1 mg / L = 1 parte por milln (ppm) 1 ng / L = 1 ug / L = 1 parte por billn (ppb)

Las concentraciones de elementos traza en la orina puede ser reportado por volumen, por salida de 24 horas urinario o por mmol de creatinina o por gramo de creatinina. Las concentraciones tisulares de la muestra se pueden registrar como mg o ug por gramo o kilogramo de peso fresco, peso seco o peso de las cenizas.

7) Los resultados tpicos: La siguiente seccin contiene una serie de ejemplos de anlisis clnicos utilizando las diferentes tcnicas. Apndices 1 y 2 muestran los valores de referencia para los elementos.

7) Los resultados tpicos: La siguiente seccin contiene una serie de ejemplos de anlisis clnicos utilizando las diferentes tcnicas. Apndices 1 y 2 muestran los valores de referencia para los elementos. a. - El anlisis simple llama de los elementos principales - con un simple dilucin por el factor apropiado y la adicin de La+ como un amortiguador para el Ca y Mg determinaciones o exceso de

Na+ como un buffer de ionizacin para las mediciones.

(Cuadro 2)

Anlisis de una serie de sueros de control de calidad de los elementos principales de Ca, Mg, Na y K con AAS de llama. b. - Anlisis de la llama usando el accesorio STAT para la deteccin rpida de los elementos de menor importancia - utiliza un simple 1 20 dilucin con agua desionizada. Tamao de la muestra puede ser minimizado mediante el uso de micromuestreador alcuota.

(Cuadro 3)

Anlisis de una serie de sueros de control de calidad para los elementos menores de Cu con AAS de llama y el STAT de accesorios.

c. - Anlisis de horno de grafito utilizando el horno GF95Z Zeeman para la determinacin de Pb. 100 ml de sangre total se mezclan con 900 ml de modificador de matriz (que contiene 0,1% v / v HNO3, 0.2% m / v dihidrgeno fosfato de amonio y 0,5% m / v Triton X-100).

Cuadro 4: Anlisis de una serie de sueros de referencia certificados para el oligoelemento Pb mediante un sistema de horno de Zeeman.

d. - Anlisis de vapor con el accesorio de hidruro VP100 - en el ejemplo a continuacin la muestra se digiere con cido, tratados con cido clorhdrico concentrado para reducir Se (IV) a Se (III) y se determina utilizando 0,1% m / v borohidruro de sodio.

Tabla 5: anlisis de dos sueros de referencia certificados para la SE oligoelemento utilizando un sistema de hidruro VP100.

8) Conclusiones: La absorcin atmica es una tcnica que es ideal para el anlisis de muestras clnicas. Uso de la gama de accesorios, (llama, horno y vapor), es posible analizar mayores, menores y trazas nivel de todos los elementos de importancia clnica en una amplia gama de tipos de muestras. Los sistemas modernos de AAS tienen el poder de deteccin y son fciles de usar, con el software guiada por asistente para guiar al usuario mediante la configuracin del mtodo y anlisis con el mnimo de esfuerzo.

ABSORCIN ATMICA Pb FORMA COMPLETA EN SANGRE

Introduccin El plomo es un elemento no esencial y los efectos txicos derivados de su uso extensivo se conocen desde hace cientos de aos. A travs de la introduccin de medidas de seguridad estrictas en la industria y regulaciones que limitan su uso, el nmero de casos de intoxicacin grave plomo inorgnico se ha reducido drsticamente. Los casos de toxicidad, tanto industriales como no profesionales, no obstante, todava se producen, con sntomas de dolor abdominal, fatiga, debilidad, anemia y neuropata perifrica. En los nios, los efectos graves son ms comunes, que podran resultar en el fracaso del SNC y muerte. La concentracin de plomo en la sangre consideren nocivos para los nios pequeos es de 25 ug / dl. Sin embargo, en los Estados Unidos, este nivel ha sido recientemente rebajado a 10 ug / dl. Existen varios mtodos para la determinacin de plomo en la sangre han sido publicados en la

ltima dcada, con horno de grafito espectrometra de absorcin atmica es la tcnica preferida. Este mtodo describe dos procedimientos para la determinacin de los niveles de plomo en la sangre utilizando GFAAS, uno con la calibracin acuosa directa y con una matriz de estndares de igualado.

Rango Analtico Mtodos para la determinacin directa de plomo en la sangre humana entera se presentan. El mtodo 3 sigma lmite de deteccin del mtodo de la matriz acuosa y mtodo estndar son encontrados aproximadamente 0.78 ug / L y 0.61 ug / L, respectivamente, en la sangre entera.

Principio El plomo se determina directamente en GFAAS sangre entera utilizando. Quadline correccin de fondo se utiliza en todo. Fosfato de amonio, Triton X-100 y el cido ntrico se utiliza como mezcla modificadora de la matriz. La calibracin puede realizarse ya sea usando la matriz correspondiendo normas de la sangre o directamente mediante el uso de estndares acuosos, sin prdida observables en la precisin.

Mtodos Reactivos: cido ntrico (grado SpectrosoL). Estndar madre de plomo (1.000 mg / L SpectrosoL o equivalente). Dihidrgeno fosfato de amonio (reactivo AR). Triton X-100 (AR grado o equivalente). El metanol (AR grado o equivalente). El fenol (AR grado o equivalente). La toma de muestras Las muestras de sangre fueron preparadas de cido lavado automuestreador tazas inmediatamente antes del anlisis. Una solucin mixta modificador de matriz que contiene 0,1% v / v de cido ntrico, 0,2% m / v dihidrgeno fosfato de amonio y 0,5% m / v Triton X-100 se utiliza en todo.

Mtodo de calibrado acuosa Porciones de 100 uL de sangre total se mezclaron con 900 uL de la solucin de modificador de matriz mixta. Alcuotas de trabajo se prepararon diariamente por dilucin de serie de una norma general con 0,1% v / v de cido ntrico.

Desarrollo de mtodos La solucin mixta modificadora de matriz estabilizada plomo a 900 C, y dio lugar a limpio, bien en forma de picos de plomo cuando Quadline correccin de fondo se utiliz. La lnea alternativa de resonancia principal de 283,3 nm se utiliz para superar cualquier interferencia de fosfato disponible en la lnea de resonancia principal ventaja de 217,0 nm; los parmetros por defecto se utilizan para la mayora de las condiciones instrumentales otros.

amaadas, cubetas extendida vida fueron utilizados en el trabajo. Una temperatura de inyeccin de 75 C se utiliza para reducir el tiempo de horno fase seca y por lo tanto reducir el tiempo de horno total del programa a un poco ms de 1 minuto. Mediciones de la altura mxima se utilizaron exclusivamente.

Se observ que la acumulacin de material en la punta del inyector automtico se produjo despus de muchos anlisis, causando inyecciones incompatibles. Este fue eliminado por el uso de 0,5% v / v de metanol, 0,1% m / v Triton X-100 y 0,1% v / v de cido ntrico en el lquido de lavado automtico de muestras. Aunque depende de las condiciones AMBIENTALES, es posible el anlisis de muestras biolgicas que la actividad microbiana tambin puede tomar en y cerca de la punta del inyector automtico. Este problema puede ser resuelto mediante la adicin de unas 3 gotas de fenol con el lquido de lavado automtico de muestras.

Mtodo de validacin Mtodos de Sangre de la normalizacin se evalu la exactitud y precisin. Una serie de experimentos con muestras enriquecidas se llevaron a cabo, y los gradientes de las lneas de calibracin se compararon. Tres muestras de sangre fueron sobrecargadas a continuacin, con niveles de plomo conocidos y analizados por ambos mtodos. Los resultados se muestran en el cuadro 2. Diez replicas analizadas de tres muestras de sangre que contiene niveles de plomo fueron realizadas diferentes en una nica prueba con ambos mtodos de CALIBRACIN. Los resultados se muestran en la figura 5, tablas 3 y 4. Certificado de muestras de sangre de referencia de una serie de fuentes fueron analizadas por ambos mtodos, y los resultados se muestran en las tablas 5 y 6.

Resultados Para el mtodo acuoso, los resultados del experimento pico muestran que la pendiente de las lneas de calibracin son similares entre las matrices acuosas y la sangre. Las diferencias entre las alcuotas acuosas y muestras de sangre son relativamente menores que indica la interferencia insignificante. En esta situacin, el mtodo directo de la calibracin acuosa se puede utilizar con xito. Los resultados de los experimentos de recuperacin en el cuadro 2 confirmarlo, con recuperacin completa de la picos obtenidos para todas las muestras.

Se obtuvieron resultados a lo largo del trabajo, que se muestra en la tabla 3 y figura 5. En particular, ningn rastro de cualquier material carbonoso se observ el interior de la cubeta despus de la atomizacin. El uso de una rampa de cenizas rpido es que se elimina por el flujo del gas. La ausencia de esta acumulacin de material, y con el uso de una cubeta de ELC, permiti a varios cientos de muestras que deben analizarse sin ninguna intervencin. La masa caracterstica (masa de analito necesaria para generar un pico de la seal de 0,0044 unidades de absorbancia alta, o 0,0044 abs.s en el rea) para ambos mtodos, calculado a partir de los resultados del pico del experimento, fue de 3,6 pg en la altura del pico y 8,8 pg en el rea del pico para el mtodo acuosa, y 3,7 pg en la altura del pico y 7.1 pg en el rea del pico para el mtodo de la sangre de la matriz. El mtodo 3 sigma lmite de deteccin, calculada a partir de los resultados de la muestra de clulas sanguneas, utilizando ambos mtodos acuosa y ajustados a la matriz fue de 0,78 ug / L y 0.61 ug / L, respectivamente, en las muestras de sangre originales.

Conclusiones Mtodo para la determinacin de plomo en muestras de sangre entera por GFAAS se han desarrollado. Inyecciones caliente y un programa de horno rpido, con el uso de una cubeta de ELC, permitir a varios cientos de muestras que deben analizarse directamente sin problemas. Ambos mtodos de normalizacin presentadas son adecuados para esta aplicacin, dando resultados exactos y que permite amplios anlisis desatendido a realizar.

FORMA COMPLETA - Pb EN SANGRE ENTERA USANDO CUBETAS OMEGA PLATAFORMA

INTRODUCCION El plomo es un elemento no esencial y los efectos txicos derivados de su uso extensivo se conocen desde hace cientos de aos. A travs de la introduccin de medidas de seguridad estrictas en la industria y regulaciones que limitan su uso, el nmero de casos de intoxicacin grave inorgnica plomo ha cado drsticamente. Los casos de toxicidad, tanto industriales como no profesionales, sin embargo, todava se producen, con sntomas de dolor abdominal, fatiga, debilidad, anemia y neuropata perifrica. En los nios, los efectos graves son ms comunes, que podran resultar en el fracaso del SNC y muerte. La concentracin de plomo en la sangre consideren nocivos para los nios pequeos es de 25 ug / dl. Sin embargo, en los Estados Unidos, este nivel ha sido recientemente rebajado a 10 ug / dl. Existen varios mtodos para la determinacin de plomo en la sangre han sido publicados en la ltima dcada, con GFAAS ser la tcnica preferida. Este mtodo describe el procedimiento para la determinacin de los niveles de plomo en la sangre utilizando GFAAS medio de unidades mixtas de

la matriz modificada emparejado estndares de calibracin y las cubetas Omega plataforma.

Analtica gama Mtodos para la determinacin directa de plomo en la sangre humana entera se presentan. El lmite de deteccin 3s para el mtodo de calibracin es de 0,42 ug / L en la sangre y la masa caracterstica es de 5,1 ug.

Principio El plomo se determina directamente en la sangre entera utilizando. GFAAS con la plataforma de omega correccin de fondo cubetas. Quadline D2 se utiliza en todo, fosfato de amonio, Triton X100 y el cido ntrico se utiliza como mezcla modificadores de la matriz. La calibracin puede realizarse directamente a travs de las normas de Pb acuosa diluida con el modificador de matriz mixta. El uso de un sistema de visin del horno, como Thermo Scientific GFTV, permite que los eventos dentro de la cubeta para ser visualizados y es una herramienta esencial a la hora de realizar este anlisis.