LA PROPAGACIN VEGETATIVA

A DIFERENCIA de lo que sucede en los vertebrados, la semilla es liberada cuando an sus tejidos no se han diferenciado totalmente . La semilla contiene clulas embrionarias que darn origen a todos los tejidos de la nueva planta despus del proceso de germinacin; adems, muchas de las clulas de los tejidos vegetales ya maduros conservan la potencialidad de diferenciarse y dar origen a diversas estructuras; estas clulas forman parte de meristemos primarios y secundarios que pueden encontrarse en todos los rganos de las plantas. Gracias a esto es posible obtener plantas enteras a partir de tejidos de yemas, tallos, races y hasta hojas de casi cualquier planta. La propagacin clonal o vegetativa de plantas es una produccin a pa rtir de partes vegetativas. Se utilizan tejidos vegetales que conserven la potencialidad de multiplicacin y diferenciacin celular para generar nuevos tallos y races a partir de cmulos celulares presentes en diversos rganos. Este tipo de propagacin tiene esencialmente tres variantes, que son: 1) la micropropagacin a partir de tejidos vegetales en cultivo in vitro; 2) la propagacin a partir de bulbos, rizomas, estolones, tubrculos o segmentos (esquejes) de las plantas que conserven la potencialidad d e enraizar, y 3) la propagacin por injertos de segmentos de la planta sobre tallos de plantas receptivas ms resistentes. La propagacin vegetativa comprende desde procedimientos sencillos, conocidos de tiempos inmemoriales por los campesinos de todo el mundo, hasta procedimientos tecnolgicamente muy avanzados, basados en la tecnologa del cultivo de tejidos vegetales, mediante los cuales se puede lograr la propagacin masiva de plantas genticamente homogneas, mejoradas y libres de parsitos. Los proce dimientos modernos permiten la obtencin de cultivares totalmente libres de agentes patgenos, incluyendo virus, e incluso la fabricacin de semillas artificiales por medio de la tcnica de embriognesis somtica y encapsulado. Adems de la propagacin, la s tcnicas de cultivo de tejidos in vitro tambin permiten seguir procedimientos modernos de conservacin de germoplasma gracias al mantenimiento prolongado de cultivos de crecimiento lento y la criopreservacin de tejidos. ESTRUCTURAS DE PROPAGACIN VEGETATIVA Varias especies de plantas vasculares, en su mayora especies cultivadas, no producen semillas aunque tengan flores, su multiplicacin o propagacin vegetativa no implica la fusin de clulas germinativas. Esta forma de propagacin tambin se presenta en plantas que normalmente producen semillas, y slo se le considera como reproduccin asexual cuando sustituye en gran parte a la reproduccin sexual. Se trata de un proceso que implica el enraizamiento y la separacin de una parte de la. planta orig inal cuando mueren los tejidos vegetales que las semillas unan. De esta manera, las clulas, tejidos u rganos desprendidos se desarrollan directamente en nuevos individuos. Las zonas de abscisin pueden ser precisas, como sucede en la separacin de los bulbilos, o puede darse la

fragmentacin de una planta debida al deterioro y muerte del individuo parental o bien de los tejidos de interconexin, como en el caso de los brotes de las races. Las estructuras de propagacin vegetativa funcionan tambin como rganos de resistencia y de almacenamiento en las temporadas adversas, los cuales algunas veces son almacenados por tiempos prolongados. Estructuras de propagacin vegetativa en plantas no vasculares La propagacin vegetativa se presenta en todo el rein o vegetal; por ejemplo, en algunas algas pluricelulares la propagacin vegetativa se realiza mediante su fragmentacin en dos o ms individuos. Las cianobacterias presentan a lo largo de sus filamentos unas clulas muertas, agrandadas y de pared gruesa, qu e se encuentran a intervalos a lo largo de sus filamentos, las cuales ayudan a la fragmentacin. Varios tipos de plantas no vasculares tienen estructuras especializadas relacionadas con la propagacin vegetativa. Las hepticas producen estructuras semejantes a las yemas llamadas propgulos, que al desprenderse de su pedicelo son arrastrados por la lluvia hasta sitios en los que se desarrollan como nuevas plantas, mientras que los lquenes producen cuerpos reproductores conocidos como soredios, integrados p or masas de hifas fngicas y de clulas algales. Estructuras de propagacin vegetativa en plantas vasculares En virtud de la totipotencialidad del tejido vegetal, es decir, de su capacidad para formar yemas y races adventicias, casi cualquiera de los rganos de una planta vascular tiene relacin con su propagacin vegetativa al sufrir modificaciones anatmicas y funcionales que le permiten desarrollarse en un organismo vegetal completo e independiente, con las mismas caractersticas genticas de la plant a progenitora. Las yemas, por lo general, se encuentran en las axilas de las hojas, en la porcin terminal del tallo, o bien se desarrollan en cualquier porcin del tallo y dan origen a races adventicias. Entre las estructuras de propagacin vegetativa a lgunas comparten semejanzas en su desarrollo, por lo que no siempre es posible hacer una diferenciacin muy clara entre ellas, sino que ms bien se ubican en un continuo de caractersticas. Sin embargo, algunos autores las clasifican tomando en cuenta los rganos vegetales de los cuales se originan. Con base en este criterio describiremos algunas de las ms comunes. Propagacin vegetativa por tallos y yemas Los tallos horizontales areos y subterrneos de varias especies silvestres y cultivadas se alargan y forman races adventicias en sus nudos. Mientras los tejidos se mantienen intactos se trata del crecimiento de una sola planta, como sucede en muchas especies de gramneas. A este individuo completo de extenso crecimiento se le conoce como genet o clon. Pero cuando el tejido de

interconexin muere o es cortado, cada uno de los segmentos da lugar a un nuevo individuo al que se le conoce como ramet (figura 13A).

Figura 13. A) Separacin de los ramets individuales por muerte del tejido de interconexin; B) estolones; C) rizoma; D) el tubrculo (papa) se corta en piezas y cada una contiene una yema para que a partir de los tubrculos se propagen ms plantas. Una modificacin de este tipo de propagacin ocurre cuando el extremo libre de un tallo largo alcanza el suelo y adems de desarrollar races adventicias, la yema de crecimiento da lugar a un tallo erecto, lo que se conoce como acodadura (figura 14); este proceso ocurre frecuentemente en la propagac in de las frambuesas y las zarzamoras.

Figura 14. Acodadura. Las ramas alcanzan el suelo y enraizan. Por otro lado, los tallos areos de algunas hierbas y arbustos caen por su propio peso al suelo. La produccin de races adventicias y la muerte de las conexiones con el individuo parental permiten la generacin de plantas independientes. En otros casos, la sola fragmentacin de los tallos o de las ramas y su contacto continuo con el suelo es suficiente para que los segmentos formen races y se

desarrolle un individuo completo. Este tipo de propagacin es comn en los cactos, los sauces y en la planta acutica conocida como elodea. Entre las principales estructuras de propagacin vegetativa originadas a partir de los tallos y de las yemas se encuentran las siguientes: Propagacin vegetativa por tallos 1) Estolones. Constan de secciones relativamente largas y delgadas de tallos areos horizontales con entrenudos largos y cortos alternados que generan races adventicias. La separacin de estos segmentos enraizados permite el desarrollo de plantas hijas. La fresa es un ejemplo de las especies que comnmente presentan este tipo de propagacin (figura 13B). 2) Rizomas. Se generan a partir del crecimiento horizontal de un tallo subterrneo, por lo general ms robusto que el que da origen a un estoln. Las viejas porciones se degradan y se separan en fragmentos que debern enraizar de manera independiente. Este tallo subterrneo presenta hojas escamosas en las axilas, donde se pueden generar yemas axilares, adems de presentar races adventicias (figura 13C). Una vez formado el vstago principal se da un crecimiento continuo. Cada estacin de crecimiento presenta un crecimiento simpodial por medio de la yema axilar o monopodial por medio de la yema terminal. El rizoma funciona como rgano de almacenamiento de reservas. De esta manera se propagan especies de importancia econmica, tales como el bamb, la caa de azcar, el pltano, as como algunos pastos. 3) Tubrculos. Son estructuras gruesas, suculentas, que actan tambin como estructuras de reserva. Se forman en el extremo de tallos subterrneos delgados. Un ejemplo muy conocido lo constituye la papa. Los tubrculos presentan en su superficie nudos con hojas escamosas, arreglados de manera espiral, y cada uno de ellos consta de una o ms yemas pequeas. Cuando se inicia el crecimiento del vstago principal las races adventicias se desarrollan en la base del tubrculo y las yemas horizontales se alargan y producen tallos etiolados en forma de estolones. A partir de los tubrculos que han formado ramas horizontales se forman tubrculos nuevos (figura 13D). Los tubrculos y los rizomas son muy semejantes y en algunos casos es casi imposible distinguirlos. Sin embargo, una caracterstica distintiva de un rizo ma verdadero es que presenta un grosor uniforme en toda su longitud, sobre la cual crecen races adventicias, las cuales no existen en los nudos de los tubrculos. Otra diferencia entre estas estructuras consiste en que el rizoma formar el vstago principal de la nueva planta, mientras que el tubrculo forma ramas laterales (figura 13C y 13D). 4) Brotes. Se definen como ramas o tallos que desarrollan races adventicias sin que sean independientes de la planta progenitora. Se desarrollan en las axilas de las hojas escamosas o de las yemas adventicias sobre las races. En la pia comestible los brotes se desarrollan en las axilas de las hojas inferiores que son cubiertas por el suelo.

Propagacin vegetativa por yemas. A partir de la produccin de las yemas axilares con orientacin vertical en los tallos de algunas plantas (figura 15A) y de su posterior desprendimiento y cada al suelo, se producen estructuras de propagacin vegetativa tales como los bulbos que se presentan en la cebolla, el tulipn y el lir io o los cormos del gladiolo y el azafrn. Ambas estructuras, una vez liberadas, se establecen de manera subterrnea pero forman ramas que dan lugar a nuevas plantas.

Figura 15. A) Yemas axilares; B) cormo; C) cormelo; D) bulbo. 1) Cormos. Se forman en las yemas de las axilas de las hojas de un tallo robusto y suculento que proporciona los nutrientes necesarios para la nueva estructura, la cual se desprender del progenitor y se desarrollar subterrneamente como un tallo corto, erecto y slido con nud os y entrenudos. Los cormos tienen forma de esferas aplanadas dorsoventralmente, como los del gladiolo y el azafrn. Estn envueltos en delgadas hojas escamosas que los protegen del dao fsico y de la prdida de agua, pero que no funcionan como estructuras de almacenamiento, a diferencia de las escamas de los bulbos. Cuando se desprenden las escamas marcan crculos alrededor del cormo. ste desarrolla races adventicias ventrales o basales. El pice del cormo es un vstago terminal que se desarrollar en l as hojas y en un vstago floral terminado por una inflorescencia, y en cada uno de los nudos se producen las yemas axilares (figura 15B). El cormo se multiplica ramificndose simpdicamente, y si se corta un cormo, manteniendo una yema en cada seccin, cada uno de estos segmentos desarrollar un cormo nuevo. 2) Cormelos. Sobre el extremo inferior del cormo se producen pequeas estructuras semejantes a los estolones conocidos como cormelos (figura 15C). La muerte del cormo parental permitir la separacin d e los cormos hijos, los

cuales pueden ser almacenados durante el invierno y plantados durante la temporada favorable para el crecimiento. 3) Bulbos. Se desarrollan sobre tallos cortos y engrosados, a partir de yemas axilares de hojas carnosas. De stas obtienen elementos de reserva, a diferencia de los cormos que las obtienen a partir del tallo, lo cual les permite producir rpidamente races adventicias. Se desarrollan subterrneamente en forma de tallos carnosos, cubiertos con hojas engrosadas a manera d e escamas que funcionan como rganos de reserva (figura 15D). Es posible que se produzca ms de un bulbo a partir de cada yema. En algunos casos se desarrollan masas de bulbos en el extremo del tallo, cada uno de ellos llamados bulbilos, los cuales pueden ser dispersados lejos del bulbo parental. En el centro de los bulbos existe un meristemo vegetativo o un vstago floral. Por su consistencia existen dos tipos de bulbos: 1) los tunicados, que estn cubiertos por escamas secas y membranosas que protegen al bulbo y le dan una estructura ms o menos slida. A esta clase pertenecen la cebolla y el tulipn; 2) los no tunicados, que no presentan la cubierta seca y sus escamas estn separadas y unidas a la placa basal. Este tipo de bulbos daa fcilmente por lo que deben ser manejados con cuidado. 4) Pseudobulbos. Esta estructura vegetativa se da en la familia de las orqudeas. Son crecimientos tuberosos del tallo completo o de parte de ste o de las ramas. En las axilas de las escamas de la base de los pseudobulbos se forman vstagos nuevos o pseudobulbos en serie que conectan segmentos del tallo (figura 16A).

Figura 16. A) Pseudobuldo, y B) produccin de nuevas plantas en el margen de la hoja, como en la planta millonaria.

5) Turiones. Se presentan generalmente en especies acuticas como estructuras de resistencia a condiciones ambientales adversas; se conocen tambin como yemas de invierno y se forman a partir de yemas que se desprenden del tallo o que persisten cuando el resto de la p lanta muere. Las hojas del turin contienen elementos de reserva y cuando se restablecen las condiciones favorables se inicia la produccin de las races adventicias. 6) Chupones. Son estructuras que se forman en las axilas de las hojas escamosas de los tallos subterrneos y de los rizomas, o de las yemas adventicias de las races. El chupn forma varios entrenudos cortos; despus de formar uno o ms nudos desarrolla races adventicias y puede formar una nueva planta. El pltano y el bamb forman chupones. Propagacin vegetativa por races Una forma extensa de propagacin de las plantas se da mediante numerosos brotes que crecen de sus races horizontales. Tales brotes se forman slo si la raz es daada, entonces los brotes se diferencian en un tejido ca lloso. Las races carnosas y aglomeradas de los camotes, las dalias y las peonias son tambin un medio de propagacin vegetativa. Propagacin vegetativa por hojas Este tipo de propagacin no es tan frecuente en la naturaleza como los dos anteriores. Sin embargo, es posible encontrarlo en las hojas de algunos helechos, que forman una especie de acodadura al entrar en contacto con el suelo; en otras especies, entre las que se encuentran las violetas africanas, se forman nuevos individuos a partir de las hoj as que se desprenden y caen al suelo y que posteriormente desarrollan races adventicias (figura 16B). Propagacin vegetativa por estructuras florales En algunas plantas los meristemos apicales que normalmente se desarrollaran como flores se convierten en yemas vegetativas asociadas con races adventicias. Estas estructuras crecern independientemente al ser liberadas de la planta progenitora. La produccin de yemas vegetativas en lugar de flores se conoce como prolificacin o falsa viviparidad. Los bulbilos son yemas axilares de consistencia carnosa que almacenan reservas. En algunas especies de cebolla los bulbilos se forman en lugar de las flores, mientras que en algunas especies de agave las inflorescencias son reemplazadas por cientos de bulbilos. E l nombre de estas estructuras de propagacin vegetativa se debe a que visualmente se parecen a los bulbos, pero su color es verde; cuando estn sobre la planta progenitora carecen de races adventicias, las cuales se desarrollan cuando los bulbilos son lib erados. PROPAGACIN VEGETATIVA INDUCIDA Como hemos visto, la potencialidad de las plantas para generar nuevos individuos a partir de segmentos de su organismo est distribuida ampliamente

en las plantas de muchos ambientes. Para muchas especies la reprod uccin asexual predomina sobre la sexual, y es que las condiciones de su ambiente hacen muy improbable que la semilla llegue a generar una planta capaz de establecerse debido a las limitaciones de recursos fundamentales como el agua, la luz o la competenci a con las plantas establecidas. Un caso bien conocido en nuestro pas es el de las cactceas y otras plantas de las zonas ridas que presentan muchas de las estructuras reproductivas antes citadas. Por ejemplo, los nopales se reproducen fcilmente en forma natural a partir de segmentos del tallo, que tienen una forma muy peculiar y se les conoce como pencas, y en trminos botnicos como cladodios. stos se desprenden espontneamente o a consecuencia de algn hecho traumtico y enraizan en forma natural, lo que constituye en muchos casos el principal mecanismo de reproduccin de estas plantas (figura 17).

Figura 17. Propagacin vegetativa por medio de los cladodios de plantas de nopal (segmentos del tallo). Con base en la potencialidad presente en la nat uraleza en lo que respecta a la propagacin vegetativa de las plantas, se han desarrollado mtodos de propagacin inducida, cuya complejidad va desde las tecnologas ms rsticas hasta los mtodos ms tecnificados. ENRAIZAMIENTO DE SEGMENTOS Esta tcnica de propagacin tiene muchas ventajas y se emplea exitosamente sin necesidad de gran inversin econmica. La tcnica ms comn es la induccin de la formacin de races en una seccin del tallo o de la rama, de manera que se origine una planta independient e. En los casos en que se ha experimentado propagar rboles mediante la enraizacin a partir de segmentos se ha tenido xito en ms de 80 por ciento. Segn la parte de la planta de donde se obtienen los segmentos (cortes o fragmentos) se ha dividido en co rtes de: hojas, de brotes o renuevos, de raz y de ramas. La seleccin de cualquiera de ellos depende bsicamente de las caractersticas inherentes a cada especie, de las facilidades para obtener y manipular los cortes (en funcin del estado fenolgico de la planta), del propsito de la propagacin y de la disponibilidad de recursos econmicos. A continuacin se mencionan algunas de las caractersticas de los diferentes tipos de cortes:

1) Cortes de hojas. Algunas especies herbceas, como las violetas africanas y las peperomias, producen races a partir de sus hojas y posteriormente tallos; sin embargo, esto no ocurre con facilidad en la mayora de los rboles. Los cortes que incluyen adems de la hoja una yema axilar y un fragmento de rama son adecuados para propagar algunas plantas como las camelias y los rododendros, que son especies leosas y tambin se utilizan para propagar rboles cuando la cantidad disponible de otro tipo de segmentos es escasa. 2) Cortes de raz. La capacidad de muchos rboles de producir ramas a partir de sus races (en condiciones adecuadas de crecimiento) se utiliza para propagar algunas plantas, como los pltanos y los guayabos. 3) Cortes de ramas. La propagacin vegetativa mediante segmentos de ramas o brotes es uno de los mtodos ms usados para propagar plantas leosas en vivero. Segn las caractersticas de madurez de la madera de donde se obtienen las ramas o brotes, los cortes se han dividido en cortes son: de maderas duras, semiduras y suaves. Aunque las diferentes fases de maduracin se presentan de manera continua, generalmente se distinguen por la forma y el color de las hojas y por los cambios de coloracin del tallo o ramas. Las tcnicas de propagacin de rboles po r medio de cortes de ramas se dividen en dos tipos bsicos: de segmentos foliados y de segmentos defoliados. Cada uno de stos utiliza cortes de madera con un grado de maduracin diferente, y como proceden de rboles de contrastante ciclo fenolgico, esta diferencia se relaciona con la acumulacin de reservas en los tejidos del tallo. En los rboles caducifolios, de los cuales se obtienen los segmentos defoliados, antes de la cada de las hojas hay acumulacin de reservas, las cuales estn destinadas a formar posteriormente hojas nuevas. A partir de estas reservas se generan las races y las hojas en el segmento; en cambio, los segmentos foliados por lo general proceden de rboles de hoja perenne, que no acumulan reservas en el tallo y que deben continuar fotosintetizando para producir los recursos necesarios para generar nuevo crecimiento. Enraizamiento de segmentos defoliados Esta tcnica de reproduccin vegetal se da espontneamente en la naturaleza cuando una rama o fragmento de una planta cae al suelo y logra enraizar otra vez y producir as un nuevo individuo. Tambin se le ha empleado desde tiempos inmemoriales por los horticultores para la propagacin de rboles de ornato y frutales; un ejemplo de este mtodo son las cercas vivas de palo mulato o colorn, que vemos alrededor de potreros y cultivos en el trpico mexicano. Para la construccin de estas cercas los campesinos cortan los segmentos o ramas al efectuar los desmontes, los almacenan en un lugar fresco y sombreado y los plantan al principio de la poca de lluvias. Los rboles que ms fcilmente se propagan de esta manera son los que presentan una fase fenolgica de defoliacin y latencia meristemtica al final de la poca favorable para el crecimiento, como muchos rboles de las selvas bajas caducifolias y subcaducifolias, los cuales tienen la posibilidad de enraizar a partir de segmentos defoliados; por ejemplo, el cacahuananche, el palo

mulato, el ciruelo amarillo de tierra caliente y el colorn, entre otras. En ocasiones, esta forma de propag acin tambin es adecuada para algunas leosas no deciduas de hojas angostas. El mtodo consiste bsicamente en cortar ramas o pencas y plantarlas en el suelo hmedo para provocar su enraizamiento. Este ocurre fcilmente sin necesidad de emplear sustancias enraizadoras, ya que al encontrarse en un estado de latencia meristemtica, a l volver al estado de crecimiento los propios cambios hormonales que ocurren en el segmento desencadenan la produccin de races en la superficie que est en contacto con el suelo. Los cortes se obtienen de ramas de crecimiento de la estacin anterior y se realizan cuando la etapa de crecimiento cesa y la abscisin de hojas se ha presentado (finales de otoo o en el invierno). Debido al tamao de los segmentos y a las condiciones de lignificacin de la madera (madera dura), los cortes no se deshidratan y conservan la humedad el tiempo suficiente para generar un nuevo crecimiento de races y ramas. A continuacin se enumeran los pasos y criterios que se deben considerar para realizar esta actividad: 1) Seleccionar donantes vigorosos y sanos con alta cantida d de reservas alimenticias, preferentemente de un banco de plantas donantes que han crecido en condiciones de completa iluminacin y que por lo tanto contienen alta cantidad de reservas alimenticias. 2) Elegir los segmentos basales o centrales de la rama, que son los que tienen ms reservas alimenticias necesarias para el desarrollo de las nuevas races, pues de ellos se derivan las ramificaciones secundarias. Por ello no se deben elegir ramas con entrenudos muy largos o de ramas pequeas y dbiles. 3) El tamao de los segmentos vara entre 15 y 75 cm de largo, el criterio adecuado para elegirlo depende de la especie, ya que se requiere que se incluyan por lo menos dos nudos, aunque lo recomendable es de cuatro a seis, sobre todo cuando los entrenudos son muy cortos. El dimetro de las ramas en que se realizan los cortes puede ser de 0.6 a 5 centmetros. 4) El corte basal se hace justo abajo de un nudo (sitio donde preferentemente se forman races adventicias) y el corte superior se realiza de 1.3 a 2.5 cm arriba del otro nudo. El corte puede ser de mazo (incluye una seccin del tallo de madera ms vieja), de taln o tacn (la porcin de madera vieja es ms pequea) y el recto (no incluye madera vieja) (figura 18).

Figura 18. Se sealan en la parte supe rior las partes de una estaca y en la porcin inferior los tipos de corte utilizados para la obtencin de estacas: a) recto, b) taln o tacn y c) mazo. 5) Empaquetar las estacas cuidando su orientacin, para mantener su polaridad y permitir que el flujo de savia siga su direccin normal. Por eso se marca la base con un corte sesgado o se baa la base con cera, lo cual ayuda tambin a evitar la prdida de humedad, que podra propiciar enraizamientos pobres. 6) El enraizamiento de segmentos defoliados ocur re fcilmente, ya que el propio ciclo fenolgico hace coincidir la produccin de hormonas de crecimiento con el periodo de enraizamiento y crecimiento de yemas del segmento. Aun as, se favorece notablemente el enraizamiento si se emplean hormonas y algunos procedimientos para asegurar el desarrollo rpido de los segmentos. Las sustancias ms usadas para acelerar el enraizamiento son el cido naftalenactico (ANA) y el cido indolbutrico (AIB), de los cuales se hablar posteriormente. El enraizamiento tamb in se favorece colocando los segmentos a temperatura baja (5 -8C) por algunas semanas, ya que esto estimula la sntesis de hormonas en plantas que proceden de climas en los que hay una estacin fra.

Finalmente, para lograr un buen enraizamiento hay que escoger los segmentos con las caractersticas ptimas de madurez de la madera y que carezcan de hojas. 7) Para la siembra se eligen terrenos que renan las caractersticas sugeridas en el captulo III. Algunas opciones para preparar y manipular las estac as antes de la plantacin se presentan en el cuadro 22.
CUADRO 22. Mtodos de preparacin y manipulacin de los segmentos o cortes defoliados previos a su plantacin definitiva.

Enraizamiento de segmentos foliados Segn las condiciones de lignificacin de la madera los segmentos foliados se dividen en: cortes de maderas blandas (meristemos), cortes de maderas semiduros (parcialmente maduros) y cortes de maderas duras siempre verdes (lignificados). Cualquiera de sto s llevan hojas o brotes meristemticos (material fisiolgicamente juvenil) y su tamao es mucho mas pequeo que los defoliados. Las especies que se propagan con esta tcnica son la caoba, el zapote negro, el chicozapote y el bar, entre muchos otros ms.

Debido a la presencia de hojas que continan transpirando activamente y a las condiciones diferenciales de madurez en las ramas jvenes, los segmentos pueden deshidratarse muy fcilmente. Por esto, es necesario mantenerlos en compartimientos sombreados y hmedos hasta que enraizan y toman del suelo suficiente agua. Siempre es necesario emplear sustancias enraizadoras como el cido indolbutirico (AIB) o el naftalenactico (ANA) y con frecuencia es indispensable mantener los segmentos recin plantados bajo a gua nebulizada para evitar la deshidratacin. Segmentos foliados de maderas blandas Los cortes se seleccionan en la estacin de crecimiento, antes de que se presente la lignificacin, y son tomados de los renuevos tempranos o de ramas jvenes generadas a finales de la primavera y principios del verano. Esto significa que las ramas se encuentran en crecimiento activo, por lo que en su acopio y manipulacin se deben tener cuidados especiales. La clave para el xito es mantener los cortes turgentes, desde el periodo de colecta hasta que son puestos a enraizar en dispositivos diseados especialmente para que las estacas mantengan la turgencia. Se ha encontrado en varias especies que los segmentos provistos de meristemos cercanos al tronco principal, o al eje de crecimiento apical tienen mayores probabilidades de enraizar que las puntas de las ramas distantes. Otras veces, los ejes de crecimiento que surgen de un pice podado son los que presentan mayor potencial de enraizamiento. Esto vara en funcin de la especie y de la tcnica utilizada, por lo que se debe probar cul es la fuente de material que origina las estacas juveniles (suculentas), no lignificadas, ms adecuadas. Pueden ser: rebrotes de tocones, rebrotes basales de rboles en pie, rebrotes de planta s jvenes y pices de rboles podados. En cualquiera de estos casos se produce cierto nmero de brotes laterales con crecimiento vertical (los que no presentan crecimiento vertical deben desecharse), que se utiliza como fuente de estacas. Se deben consider ar tres aspectos para realizar este tipo de propagacin: a) la eleccin y manejo de la planta donante, b) la obtencin de las estacas y c) el enraizamiento y establecimiento del segmento. A continuacin se detallan estos puntos: Eleccin y manejo de la planta donante Las plantas donantes deben ser vigorosas, sanas y estar sujetas a un buen manejo para asegurar la produccin continua y prolongada de gran nmero de estacas de fcil enraizamiento. Se pueden cosechar brotes de una misma planta donante cada dos o tres meses, pero no se recomienda hacer cosechas muy frecuentes, pues se afectaran las reservas alimenticias de la planta, su sistema radicular y la fertilidad del suelo. La planta donante debe ser fertilizada con regularidad y mantener por lo men os una rama con hojas que pueda continuar fotosintetizando y que de esta manera sirva como brote alimentador para la planta donante. Tambin debe

mantenerse en la sombra, al menos por unas semanas, lo cual favorecer el futuro enraizamiento de las estacas, ya que en esta situacin la planta no padece estrs hdrico. Obtencin de estacas Para obtener y manipular adecuadamente las estacas deben tomarse en cuenta varios factores: la alta humedad del aire, la intensidad moderada de luz, con temperaturas estables, un medio favorable de enraizamiento, y una proteccin adecuada contra el viento, las pestes y las enfermedades. Sobre todo debe evitarse la deshidratacin, pues los cortes con hojas pierden rpidamente agua por medio de la transpiracin, aun cuando ex ista una alta humedad relativa. Y es que, como no tienen races, la absorcin de agua es mucho ms lenta, y esto afecta el estado de hidratacin de la estaca. A continuacin presentamos unas recomendaciones para obtener los cortes de la planta donante: 1) La obtencin de ramas de la planta donante debe realizarse por la maana o por la tarde (antes de las 10 am o despus de las 4 pm), con la finalidad de evitar la prdida de agua durante las horas de mayor insolacin. 2) Es conveniente que la poda de las ramas elegidas (con crecimiento vertical) se realice a la altura de los 10 nudos o menos, como en el caso de los brotes obtenidos de tocones. Cuando se dificulte distinguir el nmero de nudos es recomendable tomar como criterio una altura del brote o rama , desde 10 cm hasta 1 m, para asegurar una mayor capacidad de enraizamiento (figura 18). 3) Las hojas de las ramas de donde se obtendrn los cortes deben tener entre 8 y 10 cm de largo, de lo contrario hay que reducir el rea foliar, debido a que hojas muy grandes favorecen la prdida de agua y las muy pequeas no producen suficientes carbohidratos u otras sustancias necesarias para que el corte sobreviva. Se puede reducir el rea foliar cortando las hojas con unas tijeras y cuidando que el tejido no se da e por machacamiento o estrujamiento (figura 19).

Figura 19. Proceso de obtencin de estacas de la planta donante y manipulaciones de los cortes. Las estacas ms fcilmente enraizables son las que se obtienen de rebrotes en troncos cortados. Hay formas correctas e incorrectas de resegmentar los rebrotes que se muestran a la izquierda. Es importante mantener hmedos los segmentos durante su transporte. 4) Ya cortados los brotes se marcan con el nmero de la planta donante (nmero de clon), se introducen lo ms rpidamente posible en bolsas de plstico con algn material que retenga bastante agua y se cierran para evitar la prdida de humedad. Deben mantenerse en un sitio fresco y sombreado y en cuanto sea posible se trasladan al rea de enraizamiento del vivero. 5) Al extraer los brotes para hacer los cortes deben mantenerse hmedos y frescos, exponindolos lo menos posible al viento, ya que ste incrementa la prdida de humedad. Los cortes deben hacerse con instrumentos filosos, en forma oblicua por arriba del nudo, o bien rectos para evitar que el sistema radicular se forme de un slo lado. La longitud ptima de las estacas es usualmente entre 3 y 10 cm. Independientemente del tipo de corte o tamao, stos siempre debern contar al menos con una hoja en la punta de la estaca, para que sta proporcione nutrientes y otras sustancias necesarias para el enraizamiento. Enraizamiento y establecimiento El rea donde se colocarn las estacas para el enraizamiento debe ser fresca y sombreada. La temperatura ptima para que ocurra se encuentra entre los 20 y 25C. Cuando las temperaturas suben arriba de 30C la humedad relativa de la atmsfera o contenido de vapor de agua presente en el aire tendr que ser muy alto (ms de 90%) para impedir que las plantas pierdan demasiada agua al

incrementarse su transpiracin y terminen marchitndose. La sombra se puede producir con materiales de origen vegetal como hojas de palma, paja, ramas secas, o con mallas plsticas especiales diseadas para ese propsito. Es importante que el material utilizado transmita una luz que sea apropiada para activar la fotosntesis de las plantas. 1) Induccin del enraizamiento Como se mencion, no todas las plantas tienen la capacidad de enraizar espontneamente, por lo que a veces es necesario aplicar sustancias hormonales que provoquen la formacin de races. Las auxinas son hormonas reguladoras del crecimiento vegetal y, en dosis muy pequeas, regulan los procesos fisiolgicos de las plantas. Las hay de origen natural, como el cido indolactico (AIA), y sintticas, como el cido indolbutrico (AIB) y el cido naftalenactico (ANA). Todas estimulan la formacin y el desarrollo de las races cuando se aplican la base de las estacas. La funcin de las auxinas en la promocin del enraizamiento tiene que ver con la divisin y crecimiento celular, la atraccin de nutrientes y de otras sustancias al sitio de aplicacin, adems de las relaciones hdricas y fotosintticas de las estacas, entre otros aspectos. La mayora de las especies forestales enraizan adecuadamente con AIB, aunque se ha observado que para algunos clones la adicin de ANA resulta ms benfica. Un mtodo sencillo es la aplicacin de la hormona por medio del remojo de la base de las estacas (de 2 a 3 cm) en soluciones acuosas y con bajas concentraciones de auxina (de 4 a 12 horas), segn las instrucciones de los preparados comerciales. Sin embargo, este mtodo es lento y poco exacto, difcil de realizar cuando los cortes son numerosos y algunas veces las hojas se marchitan durante el proceso; entonces se puede recurrir a las auxinas disponibles en aerosol. Para las especies forestales tropicales se recomienda la inmersin de la base de las estacas en soluciones de AIB al 4% en alcohol etlico como solvente, por periodos muy cortos (5 segundos). Posteriormente se acomoda la base de la estaca en aire fro para evaporar el alcohol, antes de colocarlas en el propagador (figura 20).

Figura 20. Aplicacin de auxinas solubilizadas en alcohol a los segmentos, evaporacin del alcohol de los segmento s y siembra en el propagador rstico. 2) Propagadores y medios de enraizamiento. El ambiente en el cual las estacas son puestas a enraizar es de vital importancia. Los propagadores deben reunir caractersticas que eviten cualquier desecacin en las estacas. Un propagador es una construccin que evita la prdida de agua del medio que rodea a las estacas. Su funcin es similar a la de un almcigo, pues ambos propician las condiciones ambientales adecuadas para la germinacin y establecimiento de las plntulas o para el enraizamiento de las estacas, segn sea el caso de que se trate. Hay propagadores con sistemas de aspersin de alto costo que regulan automticamente la frecuencia y la intensidad de la aspersin. Se instalan en invernaderos con control de luz y humedad. Sin embargo, la humedad tambin se puede controlar de manera sencilla en un compartimiento que tenga una tapa transparente para permitir el paso de la luz y evitar la prdida de humedad; el fondo del compartimiento se cubre con una mezcla de arena y grava saturadas de agua, sobre la cual se pone el medio de enraizamiento. Adicionalmente se debe reducir la insolacin del dispositivo y dar aspersiones manuales peridicas (figura 21).

Figura 21. Aspecto del propagador rstico y composicin del medio de enraizamiento para las estacas. 3) Sustrato de enraizamiento. Un buen medio de enraizamiento se obtiene con arena gruesa o grava fina, que debe estar limpia (aunque no necesariamente estril) hmeda y bien aereada. Si su capacidad de retencin de agua es baja se puede mejorar adicionando aserrn (no demasiado fresco), turba, vermiculita u otros materiales (vase el captulo III). En el caso de haber inicios de pudrimiento en las estacas ser necesario aplicar algn fungicida al medio de enraizamiento. 4) Siembra de las estacas en el propagador. Las estacas ya preparadas se siembran rpidamente pero tomando en cuenta las siguientes indicaciones: los cortes deben colocarse a una profundidad de 2 a 3 cm; para asegurar que queden firmes es necesario compactar un poco el sustrato de enraizamiento; cuando se utilizan estacas multinodales con varias hojas se debe evitar que las hojas inferiores queden en contacto con el medio de enraizamiento para evitar la putrefaccin. 5) Trasplante y acondicionamiento de las estacas. En varias especies propagadas vegetativamente se ha observado q ue el enraizamiento de las estacas se inicia despus de dos semanas, y est lo suficientemente desarrollado despus de 4 a 6 semanas (cuando las races miden de 1 a 2 cm)

(figura 22). Las estacas que enraizan en tiempos ms largos son dbiles y no deben conservarse. El trasplante de las estacas tiene que hacerse inmediatamente despus de ser removidas del medio de enraizamiento. Al sacar las estacas de su medio hay que tener cuidado de no daar las races, despes se verifica que el sistema radical tenga tr es races como mnimo y que su distribucin sea radial. Cuando las estacas presenten una o dos races, o bien cuando el sistema radical se forme slo de un lado se deben desechar, para no poner en riesgo el vigor o una adecuada forma de crecimiento.

Figura 22. Segmento foliado enraizado. Posteriormente se pasan a recipientes que contengan sustrato aereado y con buena fertilidad. Es recomendable agregar tierra del sitio donde naturalmente crece la especie para as favorecer la inoculacin de la microf lora apropiada. Es necesario estabilizar los trasplantes adecuadamente, para lo cual los envases deben llenarse con el medio de crecimiento aproximadamente a la mitad de su capacidad. La estaca se coloca en el envase en posicin correcta (con la yema al ras del suelo y en su mayor parte dentro del medio del envase) y se termina de llenar. Esto ayuda a que no queden espacios de aire en su base y a que las races no se daen, lo que asegura que stas queden bien distribuidas en el envase (sin curvaturas o enr ollamientos). Cuando hay ms de una yema se recomienda eliminar algunas con el fin de asegurar la formacin de plantas con un slo eje y favorecer que el eje se desarolle en forma recta (figura 23).

Figura 23. Proceso de trasplante de estacas del propa gador a los envases de crecimiento. Algunas estacas recin enraizadas se deshidratan al pasarlas directamente al medio externo, por lo que se recomienda dejar los envases unos das ms en el propagador, protegiendo a ste con plstico para evitar su conta minacin con el material de los envases. En el periodo en que las estacas se aclimatan a las condiciones ambientales que existen fuera del propagador es conveniente colocarlas primero en un ambiente sombreado y hmedo por dos o tres semanas, y despus exponerlas paulatinamente a condiciones decrecientes de humedad y crecientes de luz y temperatura. Segmentos foliados de maderas semiduras y segmentos foliados de maderas duras siempreverdes La diferencia entre este tipo de segmentos y los de maderas blandas estriba en las condiciones de lignificacin de las ramas y en la poca del ao en que stas se obtienen de la planta donante. El uso de esta tcnica es muy importante en la propagacin vegetativa de varias especies de pino, las especies siempre verdes de hoja angosta con maderas duras, y en la propagacin de rboles siempreverdes de hoja ancha. Para el enraizamiento de este tipo de segmentos hay que seguir las mismas indicaciones que se mencionaron para el manejo y seleccin de brotes en las plantas donant es de maderas blandas, as como tambin para la manipulacin y cuidado de los cortes y evitar as el estrs hdrico en las estacas. Sin embargo existen algunas diferencias en el manejo de los cortes de especies siempreverdes de hoja ancha y de hoja angosta . Especies siempreverdes de hojas anchas En el caso de los segmentos de maderas semimaduras, las ramas de especies siempreverdes de hojas anchas se obtienen en el verano, cuando el

crecimiento empieza a declinar y la madera se encuentra parcialmente madu ra. Los cortes pueden tener longitudes de 7.5 a 15 cm, y las hojas de la punta de la estaca se conservan, si stas son muy grandes se debe disminuir su tamao (figura 24).

Figura 24. Segmentos foliados siempreverdes de hojas angostas y de hojas anchas. Segmentos de maderas duras siempreverdes de hojas angostas Para los segmentos de maderas duras siempreverdes de hojas angostas el enraizamiento toma mucho tiempo (desde varios meses hasta un ao) y es muy importante evitar que las estacas sufran estrs hdrico durante este periodo. Los cortes se obtienen de plantas donantes jvenes, ya que este factor es determinante para tener xito. Generalmente los cortes se realizan en ramas terminales, de la poca de crecimiento pasada, a finales de otoo o bien en invierno. La longitud de las estacas vara de 10 a 20 cm, y hay que tener cuidado de remover las hojas de la mitad de la estaca hacia la base (figura 24). A diferencia de los segmentos foliados de maderas blandas estos dos ltimos tipos de cortes requieren un medio de enraizamiento que incluya mezclas de vermiculita, y turba en proporcin 1:1, o bien de perlita y vermiculita que proporcionan nutrientes y mayor humedad. Adems, el enraizamiento se puede favorecer aplicando calor a la base de las estacas (24 a 26.5C). Esto es particularmente favorable para las especies de hoja angosta. Asimismo, para estos ltimos cortes la aplicacin de AIB a altas concentraciones es usualmente benfico para incrementar la velocidad y porcentaje de enraizamiento, adems de favorecer el desarrollo de sistemas radiculares robustos. Ambos tipos de cortes, los de hojas anchas y angostas, enraizan mejor en invernaderos con sistemas de aspersin automticos o bajo propagadores rsticos, en condiciones de alta iluminacin y humedad relativa, o bien, bajo ligeras nebulizaciones. INJERTO La tcnica de injerto consiste en tomar un segmento de una planta, por lo general leosa, e introducirlo en el tallo o rama de otra planta de la misma especie o de una especie muy cercana, con el fin de que se establezca

continuidad en los flujos de savia bruta y savia elaborada, entre el tallo receptor y el injertado (figura 25). De esta manera, el t allo injertado forma un tejido de cicatrizacin junto con el tallo receptor y queda perfectamente integrado a ste, pudiendo reiniciar su crecimiento y producir hojas, ramas y hasta rganos reproductivos. Esta tcnica es muy antigua y ya era practicada por los horticultores chinos desde tiempos remotos. Tiene grandes ventajas, sobre todo para el cultivo de rboles frutales y de ornato, pues permite utilizar como base de injerto plantas ya establecidas que sean resistentes a condiciones desfavorables y enfermedades, utilizndolas como receptoras de injertos de plantas ms productivas y con frutos de mejor calidad y mayor produccin.

Figura 25. Existen diversas tcnicas de injerto que permiten la unin de segmentos de dos individuos diferentes: a) injerto de una rama sobre una incisin lateral de un tallo, b) injerto de una yema en la corteza de un tallo, c) injerto de un tallo sobre otro. Al contrario de lo que generalmente se cree, el injerto no produce una combinacin de caractersticas entre la planta receptora y la injertada. Los frutos de la planta injertada no cambian sus propiedades ni su sabor, la nica ventaja es que el injerto permite utilizar bases ya desarrolladas, lo que acelera la produccin de frutos. Tambin se aprovecha la resistencia (a e nfermedades o condiciones desfavorables) de variedades de rboles frutales de menor calidad, para injertar en ellos variedades de mayor calidad pero menos resistentes. El injerto es una forma particular de reproduccin asexual por segmentos que se utiliza en gran escala en la fruticultura. Una de las industrias que recurren con mayor frecuencia a esta tcnica es la vitivinicultura o cultivo de la vid. Con gran frecuencia las plantas productoras de uvas de baja calidad, pero muy

resistentes a la sequa y a las enfermedades, son injertadas con segmentos de vides de alta produccin y calidad. Esta tcnica es muy empleada para mejorar la produccin de viedos antiguos ya establecidos desde hace mucho tiempo. Las tcnicas de injerto son muy variadas y existe un mtodo ptimo para cada propsito y tipo de planta. En esencia todos los procedimientos consisten en tener a la disposicin buenas plantas receptculo y buenos segmentos que injertarle. La tcnica se inicia haciendo un corte en el tallo receptor y otro en el segmento a injertar, para que hagan contacto los tejidos vasculares del injerto con sus equivalentes en la planta receptora. Una vez realizado el injerto se protege la herida con una cera especial y se cubre con tela o con una cuerda para evitar que se desprenda. El tejido injertado por lo general est defoliado y es conveniente que el injerto coincida con la poca de primavera para que, al reiniciar el crecimiento de los tejidos, los estmulos hormonales que caracterizan ese momento de la vida de la planta induzcan el establecimiento de una conexin apropiada entre los tejidos de ambas partes. Para que un segmento pueda injertarse sobre otra planta, como ocurre en los animales que reciben injertos de rganos, tiene que haber una afinidad entre los tejidos que van a ponerse en contacto para que el injerto no sea rechazado. Por esto el injerto slo es posible entre plantas de una misma especie, aunque sean de diferentes variedades o razas. A veces es posible el injerto entre especies diferentes, siempre y cuando stas sean muy cercanas entre s, o sea, que por lo menos pertenezcan al mismo gnero. MICROPROPAGACIN El desarrollo de las tcnicas de cultivo de tejidos vegetales, aunadas al descubrimiento de las hormonas de crecimiento y diferenciacin de la s plantas auxinas y citoquininas, permiti el desarrollo de varias tcnicas de cultivo orientadas hacia la propagacin de plantas que son ahora de uso corriente en muchos laboratorios de investigacin del mundo y tambin en empresas de propagacin comercial. Estas tcnicas estn basadas en el hecho de que los tejidos vivos de las plantas conservan la potencialidad de dar origen a un organismo completo. Las clulas que conservan mejor esta potencialidad son las que estn menos diferenciadas hacia una funcin especfica, como las que estn presentes en las yemas y en otros tejidos primarios de las plantas, por ejemplo los extremos de las races, los segmentos nodales, las semillas, el parnquima del tejido vascular foliar, el cambium y algunas partes floral es. La tcnica de cultivo de tejidos se inicia con la toma de segmentos de plantas en crecimiento que se esterilizan y se cultivan en soluciones nutritivas especiales, con frecuencia gelificadas. A estos medios se incorporan combinaciones adecuadas de hor monas de crecimiento para obtener una proliferacin celular en el segmento. A partir de esta proliferacin puede ocurrir la formacin directa de races y tallos que originen una o varias plantas nuevas completas (figura 26). Tambin es posible inducir la m ultiplicacin de las clulas germinales del explante para formar un cmulo de tejido poco

diferenciado llamado callo o una estructura peculiar carente de paredes celulares llamada protoplasto, cada uno de los cuales se emplea en diversos procedimientos de propagacin.

Figura 26. Del explante (a) se obtienen yemas (b) que se desarrollan formando tallos adventicios (c, d, e). Estos tallos pueden aislarse para lograr su diferenciacin y despus trasplantarse a recipientes con suelo (f -j). El cultivo de tejidos y clulas vegetales tiene otras aplicaciones ms o menos relacionadas con la propagacin clonal. Entre stas se encuentra la obtencin de lneas de plantas genticamente muy uniformes, con fines experimentales; el almacenamiento o transporte de germo plasma vegetal (de lo cual trataremos ampliamente ms adelante); el control cada vez ms importante de infecciones sistmicas crnicas en las plantas mediante la obtencin de propgulos libres de virus y otros agentes infecciosos. En la ingeniera gentica moderna el cultivo de tejidos tiene importancia en los procesos de transgnesis, hibridacin interespecfica y en la generacin y seleccin de variantes genticas de las plantas. Cada uno de estos temas es de gran complejidad y se necesitara una obra mucho ms extensa para hablar de ellos, lo cual no es el propsito de este libro. Aqu se vern los aspectos relativos al cultivo de clulas y tejidos vegetales exclusivamente en lo que respecta a las tcnicas ms sencillas de micropropagacin de rboles actualmente en uso en laboratorios de tecnologa sencilla en muchos lugares del mundo. Por mucho tiempo las tcnicas de micropropagacin han sido consideradas demasiado complicadas para convertirse en una opcin viable para la propagacin de rboles en region es

tropicales subdesarrolladas. Sin embargo, tal punto de vista es poco realista ya que existen mtodos de micropropagacin que slo requieren recursos tcnicos e instalaciones mnimas. La bibliogrfia cientfica moderna contiene innumerables trabajos que describen tcnicas de cultivo de tejidos y rganos vegetales en medios complejos y finamente formulados, colocados en condiciones ambientales controladas con mucha precisin. Esto no sucede con las tcnicas sencillas de micropropagacin que rara vez se de scriben en los libros especializados disponibles. Yesto es un grave error, pues una vez que se ha probado que una especie de planta puede ser micropropagada exitosamente, los procedimientos de micropropagacin se simplifican y se vuelven accesibles para la s instalaciones sencillas que se encargan de la propagacin de plantas. Los procedimientos ms usados por los laboratorios de micropropagacin son cuatro mtodos diferentes para multiplicar plantas in vitro: 1) la activacin de la ramificacin axilar, 2) los segmentos nodales, 3) los tallos adventicios y 4) las embriognesis somticas. De los cuatro, este ltimo es el que se utiliza menos. Las tcnicas que dan los mejores resultados varan dependiendo de las especies y del propsito por el cual se propagan . 1) Activacin de la ramificacin axilar (figura 27A). Quiz sea el mtodo ms frecuentemente usado; en l se emplean meristemos tanto terminales como axilares del tallo para establecer los cultivos. Manipulando el cultivo mediante cambios en su ambiente qumico (hormonas) y en el fragmento que se cultiva, se suprime la dominancia apical y se induce la ramificacin axilar. Subsecuentes subdivisiones del cultivo en fragmentos permiten multiplicar los explantes hasta alcanzar el nmero deseado de tallos. A pesar de que la multiplicacin inicial es lenta, se incrementa rpidamente permitiendo varios subcultivos. Los tallos seccionados del cultivo pueden enraizar in vitro o directamente en el suelo. 2) Segmentos nodales (figura 27B). El mtodo de los segmento s nodales tiene la ventaja de que genera poca variacin gentica en las muestras, ya que en ningn momento se forma tejido calloso. Se inicia escindiendo segmentos de tallo con su correspondiente yema axilar. En el cultivo las yemas crecen y se alargan produciendo nuevos segmentos nodales susceptibles de ser a su vez escindidos. En un momento determinado los segmentos nodales producidos pueden dar origen a tallos y races ya sea in vitro o en el suelo, mediante una alteracin de la composicin hormonal del medio. Muchas plantas no pueden ser propagadas exitosamente de esta manera.

Figura 27. Tipos de propagacin por cultivo de tejidos: A) activacin de la ramificacin axilar, B) segmentos nodales, C) tallos adventicios y embriognesis somtica. 3) Tallos adventicios (figura 27C). Pueden ser inducidos a partir de callos originados por explantes de ramas u hojas y continuarse cultivando hasta obtener un gran nmero de callos, simplemente cambiando el ambiente hormonal en el que se desarrolla el callo original o subsecuentes fragmentos de ste. Los tallos obtenidos pueden enraizar in vitro o en el suelo. De todos los mtodos de propagacin ste es el que genera ms variabilidad gentica debido a que se utiliza un estadio calloso intermediario, por lo qu e no se recomienda para la micropropagacin de plantas en las que la integridad gentica es muy importante. Al formarse el callo ocurre una desdiferenciacin completa del tejido vegetal, que frecuentemente conlleva a la alteracin gentica, lo cual induce variabilidad en la informacin gentica entre las clulas del callo. 4) Embriognesis somtica (figura 27D). Embriones somticos o asexuales pueden resultar de un proceso de diferenciacin directa o indirecta a partir de clulas, rganos o estados callosos intermedios de una planta. Muchas veces los embriones somticos proliferan y producen embriones secundarios a partir de meristemos somticos, como las yemas axilares, partes de las flores o de semillas. Estos embriones adquieren una morfologa y comporta miento similar a los embriones naturales de origen sexual de las plantas y, como ellos, pueden germinar en el suelo. La embriognesis somtica puede convertirse en la forma ms eficiente de propagacin, ya que tericamente se obtendran millones de plantas a partir de una cantidad pequea de tejido en cultivo.

La produccin de embriones somticos se ha estudiado a fondo slo en un nmero muy pequeo de especies. Los embriones obtenidos de esta manera pueden utilizarse para producir semillas artificiales por medio del encapsulado con testas artificiales. Esta tcnica es muy prometedora, ya que potencialmente se incrementara de manera significativa la disponibilidad de propgulos de plantas valiosas de cultivo, se acortara el ciclo de crecimiento y se desarrollaran nuevos mtodos de conservacin y almacenamiento de germoplasma. La tcnica para producir embriones somticos se inicia con la produccin de un tejido calloso que, mediante el uso de combinaciones especiales de sustancias qumicas, da origen a un protoplasto en el que han desaparecido las paredes de la clula, asemejndose a un saco embrionario floral. Al colocar los protoplastos en el medio adecuado de cultivo comienzan a desarrollarse los embriones somticos a partir del protoplasto. Esta tcnica ha sido aplicada con xito a ciertos rboles tropicale s, como el caucho, el mango y otros. Los embriones somticos pueden incluso encapsularse en testas artificiales para originar semillas sintticas que se cultiven en el suelo o utilizarse para la conservacin de germoplasma vivo por mucho tiempo, utilizando tcnicas de deshidratacin y vitrificacin, y conservacin en nitrgeno lquido. Esto es posible incluso en plantas que originalmente producen semillas recalcitrantes. Las tcnicas de cultivo de tejidos requieren instalaciones y precauciones con cierto nivel de complejidad. La higiene y desinfeccin son muy importantes para evitar la contaminacin microbiana de los cultivos. La formulacin de los medios de cultivo es variada, sin embargo, stos contienen fundamentalmente sales minerales de los macroelementos y oligoelementos como: calcio, potasio, magnesio, nitrgeno, fsforo, azufre, manganeso, hierro, cloro, sodio, zinc, boro, molibdeno y cobre, los cuales son indispensables para el crecimiento de las plantas. Adems, algunos medios incorporan compuestos orgnicos sencillos como fuentes de carbono (generalmente carbohidratos), reguladores hormonales del crecimiento (auxinas, citoquininas y giberelinas), otros reguladores del crecimiento (aminocidos y vitaminas) y a veces antioxidantes (cido ascrbico). En la figura 28 se indican todas las alternativas biotecnolgicas que surgen a partir del cultivo de tejidos.

Figura 28. Opciones biotecnolgicas para la propagacin de plantas que se originan a partir del cultivo de tejidos, en las que se incluyen ta mbin tcnicas de modificacin gentica. SELECCIN CLONAL La micropropagacin y la propagacin vegetativa permiten emplear tcnicas de seleccin y mejoramiento de las caractersticas favorables de las plantas por medio de la seleccin clonal. Las caracte rsticas que pueden mejorarse cubren un amplio rango de posibilidades; por ejemplo, la resistencia de las plantas a la temperatura, a la sequa, a crecer en suelos pobres o con caractersticas desfavorables, como acidez o alcalinidad excesiva, salinidad al ta o saturacin de humedad; tambin puede mejorarse el rendimiento del forraje y frutos, su sabor y calidad nutricional, la velocidad de crecimiento, la calidad de la madera producida y la concentracin de compuestos secundarios valiosos como sustancias qumicas, ltex, gomas, etc. A continuacin describimos brevemente las dos tcnicas bsicas de seleccin clonal: 1) Se buscan en la naturaleza las plantas que presenten la caracterstica deseada en forma ptima (por ejemplo, los frutos ms deliciosos y grandes), y se toma de ese individuo los meristemos o segmentos que se vayan a utilizar para la propagacin vegetativa, para as obtener muchos individuos con la caracterstica deseada. 2) Se recolectan semillas, segmentos o meristemos de muchos individuos de una o varias poblaciones de la especie

que se desea propagar. Con este material se producen muchas plantas pequeas en un vivero y se someten a las condiciones desfavorables para las que se desea que tengan mayor resistencia; tambin se puede comparar su velocidad de crecimiento, su produccin de forraje o cualquier otra cualidad que se desee resaltar. Se escogen los individuos que muestren las caractersticas ptimas segn el caso y se utilizan para propagarlos vegetativamente y obtener as individuos mejo rados. Esta tcnica incluye la exploracin de las diversas poblaciones de una especie en el medio natural, ya que en el rea natural de distribucin geogrfica de una especie existe gran variacin en muchos de los atributos deseables de la especie. Siguiendo la segunda tcnica descrita ha sido posible obtener cultivos de rboles tropicales con caractersticas muy favorables. Por ejemplo, especies de acacia resistentes a la salinidad o al suelo cido; mezquites ornamentales resistentes al fro; especies de guaje productoras de abundante forraje de alta calidad y con rpido crecimiento en suelos pobres y, por ltimo, rboles maderables cuyo crecimiento est determinado por una fuerte dominancia apical. Esto permitir repoblar las selvas con individuos que pr oducen un fuste o tronco recto y alto, muy apropiado para seguir tcnicas ptimas de aserrado y uso en ebanistera, como es el caso del nogal africano y la caoba americana (figura 29).

Figura 29. Seleccin clonal. En este caso se eligen los segmentos e nraizados que muestran la mayor dominancia apical, es decir, los que tienden a crecer en un solo eje, y se desechan los que tienden a ramificar. De esta manera se obtienen rboles con un fuste recto que permite un mejor uso industrial.
LOS VIVEROS

INDEPENDIENTEMENTE del origen de una planta, ya sea a partir de una semilla, de un segmento o por cultivo de tejidos, los primeros das de vida son los ms crticos para su sobrevivencia. Con el propsito de lograr que un mayor nmero de plantas sobreviva a esta etapa se utilizan instalaciones especiales en las que se manejan las condiciones ambientales y se proporcionan las condiciones de crecimiento ms favorables para que las nuevas plantas continen su desarrollo y adquieran la fortaleza necesaria para transplantarlas al lugar en el cual pasarn el resto de su vida. Por esto, el diseo de un vivero es un aspecto fundamental para llegar a obtener plantas listas para su siembra. El vivero es un conjunto de instalaciones que tiene como propsito fundamenta l la produccin de plantas. Como hemos visto, la produccin de material vegetativo en estos sitios constituye el mejor medio para seleccionar, producir y propagar masivamente especies tiles al hombre. La produccin de plantas en viveros permite prevenir y controlar los efectos de los depredadores y de enfermedades que daan a las plntulas en su etapa de mayor vulnerabilidad. Gracias a que se les proporcionan los cuidados necesarios y las condiciones propicias para lograr un buen desarrollo, las plantas tienen mayores probabilidades de sobrevivencia y adaptacin cuando se les trasplanta a su lugar definitivo. Debido a los fuertes problemas de deforestacin, a la prdida de biodiversidad que sufre el pas y a la gran necesidad de reforestar, los viveros pu eden funcionar no slo como fuente productora de plantas, sino tambin como sitios de investigacin donde se experimente con las especies nativas de inters, con la finalidad de propiciar la formacin de bancos temporales de germoplasma y plntulas de espe cies nativas que permitan su caracterizacin, seleccin y manejo. Esto permitir disear, conocer y adecuar las tcnicas ms sencillas para la propagacin masiva de estas especies. Adems, los viveros tambin podran ser sitios de capacitacin de donde sur gieran los promotores de estas tcnicas. Dependiendo de su finalidad, los viveros son temporales o permanentes. Vivero temporal o volante. Se establece en reas de dificil acceso, pero estn muy cercanos a las zonas donde se realizar la plantacin; su p roduccin predominante es la de plantas forestales. Generalmente se ubican en claros del bosque y trabajan por periodos cortos (de 2 a 4 aos cuando mucho) e intermitentes, ya que la produccin debe coincidir con la temporada de lluvias. Para su funcionamiento se requiere poca infraestructura y la inversin es baja. Su desventaja radica en que, como estn situados en reas de dificil acceso, no son fciles de vigilar y por lo tanto la produccin queda ms expuesta a daos por animales. Adems, por sus caractersticas de infraestructura, slo pueden implementarse en zonas de bosques templados y selvas hmedas. Vivero permanente. Es la extensin de terreno dedicado a la obtencin de plantas con diferentes fines (reforestacin, frutales y ornato), ya sea en r eas rurales o centros urbanos. Su instalacin requiere una inversin mayor en

equipo, mano de obra y extensin del terreno, y debe contar con vas de acceso que permitan satisfacer oportunamente la demanda de plantas. En los siguientes apartados se har u na serie de sugerencias importantes para la eleccin del sitio de establecimiento del vivero. Los requerimientos toman en cuenta aspectos tcnicos, ambientales y sociales. CRITERIOS PARA EL ESTABLECIMIENTO DE UN VIVERO La mala eleccin del sitio donde se establece el vivero repercute directamente en una baja calidad de la produccin de plntulas, lo cual a la larga se reflejar en una alta mortalidad en la plantacin. Por ello es fundamental la seleccin del sitio donde se establecer el vivero. Las condi ciones del sitio son ms determinantes cuando la produccin se obtiene a raz desnuda (por camas de crecimiento). Cuando la produccin se hace por medio de envases de crecimiento es importante considerar los factores que a continuacin se mencionan. Ubicacin, drenaje y suelo del vivero Al establecerse un vivero deben considerarse cuatro puntos principales: que sea difcil acceso, el suministro de agua, su orientacin en el terreno y la topografa de ste. De los dos ltimos aspectos depende, en gran part e, el buen drenaje del vivero y que se minimice la erosin. El drenaje tambin depende de la textura del suelo del lugar, por lo que debe cuidarse su relacin con la pendiente del sitio. En suelos de textura fina la pendiente deber ser suave (de 2 a 3%) y en el caso de suelos arenosos y profundos se recomienda nivelar el terreno. La textura del suelo es muy importante en el cultivo de plantas a raz desnuda, ya que adems de regular el drenaje y la erosin deber facilitar la extraccin de las plntulas y promover el crecimiento vegetativo. Un suelo bien drenado asegura su aereacin, por lo que es conveniente verificar que no existan capas endurecidas en los primeros 75 cm de profundidad y que el suelo sea profundo, por lo menos 120 centmetros. Independientemente del mtodo de propagacin que se emplee dentro del vivero (raz desnuda, almcigos o envases individuales) es importante verificar que tan cido o bsico es el suelo (pH), su textura y fertilidad para los requerimientos de la especie que se va a propagar. El pH se encuentra muy relacionado con el contenido de materia orgnica y disponibilidad de nutrientes necesarios para el buen desarrollo de las plantas; por esto, el rango de pH ms recomendable es de neutro (pH=7) a ligeramente cido (pH=6.5) o ligeramente alcalino (pH=7.5). Abastecimiento de agua y calidad de agua de riego Los viveros necesitan un suministro de agua abundante y constante, ya que las plantas que se producen se encuentran en pleno desarrollo y un inadecuado abastecimiento podra provocar incluso la muerte por marchitamiento.

La calidad del agua de riego es importante. Cuando contiene como elementos principales calcio y magnesio (agua dura) ayuda a crear en el suelo una buena estructura. En cambio, el agua que tiene gran cantida d de sodio y bajos contenidos de calcio y magnesio provoca que la arcilla y la materia orgnica del suelo absorban rpidamente el sodio. Esto promueve una estructura edfica indeseable, ya que el suelo disperso se asienta abajo de la superficie y forma una capa (de 10 a 20 cm de grosor) que impide el paso de las races o del agua. Tambin un alto contenido de sodio en el agua de riego causa quemaduras en las hojas de algunas especies al ser absorbido por las plantas. La cantidad de slidos en suspensin en el agua tambin modifica las caractersticas del suelo, ya que si tiene contenidos elevados de limo o coloides puede causar la compactacin superficial del suelo reduciendo su permeabilidad al agua y la aereacin. Tambin hay otros elementos que pueden estar presentes en cantidades txicas y afectar al cultivo, como el boro o algunos contaminantes. Clima Es muy importante conocer qu tipo de plantas se encuentran adaptadas a las condiciones climatolgicas que prevalecen en la zona donde el vivero se va a establecer. Asimismo, es necesario contar con los registros climticos que indiquen las pocas de riesgo, como las heladas, las sequas y la cantidad y distribucin del periodo de lluvias. stos pueden ser complementados o sustituidos con la informacin climtica que los habitantes de la zona manejan tradicionalmente. Con base en estos datos se logra una planeacin del momento adecuado para llevar a cabo las labores del vivero (siembras, trasplantes, podas, fumigaciones, etctera). CONSTRUCCIN DEL VIVERO Una vez que se elige el terreno donde se construir el vivero se inicia una serie de actividades relacionadas con la instalacin y construccin de la infraestructura necesaria para su funcionamiento. Estas actividades, resumidas en el cuadro 23, varan en funcin del tipo de plantas que se desea propagar y de los recursos econmicos disponibles. Bsicamente el vivero debe contar con las siguientes instalaciones: semilleros, rea de envasado, platabandas (estructuras que sombrean a las plantas), lotes de cr ecimiento, bodega y equipo e infraestructura de riego.
CUADRO 23. Criterios a considerar para el establecimiento de un vivero

La limpieza del terreno es una actividad muy importante ya que facilita las labores en el vivero, evita la competencia de la vegetacin original del terreno con las plantas que se producen, y facilita el control de insectos (hormigas, grillos, etctera). Antes de iniciar la produccin de plntulas es necesario detectar la presencia de malezas, nematodos, hongos, parsitos e insectos, principalmente cuando se pretende establecer el vivero en terrenos que con anterioridad se dedicaron a la agricultura. Esto permitir elegir las tcnicas de manejo y fumigacin necesarias que aseguren la produccin exitosa de plntulas con alta cali dad, sobre todo en cultivos a pie desnudo. MTODOS DE CULTIVO Antes de iniciar la siembra de semillas en el vivero es necesario tener claro cul es el mtodo de cultivo que se usar, pues su eleccin est directamente relacionada con su desarrollo y manejo, tanto en el vivero como en los sitios de plantacin. Los pasos que deben seguirse para cultivar plantas en un vivero se resumen en la cuadro 24.
CUADRO 24. Caractersticas del cultivo de plntulas para vivero con uso de envases de crecimiento en c omparacin con el mtodo de cultivo a raz desnuda

Los mtodos de cultivo en viveros se dividen en: cultivo a raz desnuda, en camas de crecimiento (camellones) (figura 30) y en envases de crecimiento (utilizando recipientes de gran variedad de material es y dimensiones) (figura 31). Se pueden iniciar por medio de la siembra directa de las semillas u obteniendo las plntulas por medio de almcigos (semilleros), para posteriormente trasplantarlas (figura 32). Cada uno de estos mtodos tiene sus particularidades. En el cuadro 25 se mencionan comparativamente sus ventajas y desventajas.

Figura 30. Forma y disposicin de las camas de crecimiento (camellones) en vivero para el cultivo a raz desnuda.

Figura 31. Diversos modelos de envases de crecimiento usados en vivero.

Figura 32. A. Crecimiento de la plntulas en envases protegidos por la sombra creada por hojas de palma. B. Almcigo de cajn de suelo que permite hacer germinar semillas en el campo para que crezcan hasta su transplante.
CUADRO 25. Cuidados de las semillas a partir de la siembra hasta el transplante

Para cultivar en vivero se debe tener especial cuidado durante la siembra, el trasplante y el crecimiento inicial de las plntulas. Los cuidados a partir de la siembra se resumen en el cuadro 26 y algunos aspectos se amplan a continuacin.
CUADRO 26. Aspectos que se deben considerar desde la siembra de las semillas hasta el transplante de las plntulas

Siembra de las semillas La siembra se realiza bsicamente en semilleros, camas de crecimiento o en envases individuales (cuadro 27). Cuando se eligen envases individuales para la siembra se debe escoger un buen medio de germinacin y crecimiento que rena las caractersticas sealadas en el cuadro 28 . Existe gran variedad y cada uno tiene diferentes caractersticas (cuadro 29). En gran parte, el xito de la siembra depende del linaje o calidad del lote de semillas (de ello depende tambin la homogeneidad en tallas), de la poca y profundidad en que la siembra se realice y de la densidad de siembra.
CUADRO 27. Mtodos de siembra para cultivo en viveros

CUADRO 28. Caractersticas que deben tener los medios de germinacin

La poca de siembra se determina segn las caractersticas propias de las plantas que se quiera propagar, el clima de la regin y la poca en que se desee realizar la plantacin. Se recomienda que la siembra se realice durante la primavera o un poco antes, cuando no se presentan riesgos de heladas; adems, las temperaturas clidas favorecen la germinacin y el crecimiento de las plantas. Si los inviernos son benignos o las especies por cultivar son resistentes a las bajas temperaturas, la siembra se puede hacer en otoo, para que las semillas germinen antes de los fros y las plntulas logren alcanzar una talla que les permita soportar el invierno.

Trasplante El objeto del trasplante es disminuir la competencia que existe en la siembra; aumentar el espacio vital entre las plantas jvenes; desarroll ar el sistema radicular (particularmente las raicillas ms finas), una vez que la raz principal se ha formado despus de la germinacin; favorecer el acceso a los elementos nutritivos; formar muchas ramificaciones radiculares, pues el crecimiento en altura est disminuido, y posibilitar el transporte y acomodamiento en su lugar. El trasplante se efecta rpidamente despus de la germinacin, en cuanto se desarrollan algunas hojas o agujas. Desde cualquier punto de vista es preferible realizarlo prematuramente, pues as se garantiza una buena recuperacin y se elimina la posibilidad de la detencin pasajera del crecimiento (crisis del trasplante); tambin ayuda a colocar verticalmente a la joven raz en la tierra sin encorvarla y sin que se daen las raicil las. Las plntulas se trasplantan a camas o envases dos o tres semanas despus de la germinacin, aunque el tiempo puede variar hasta cinco semanas, dependiendo de la especie. Como regla general, esto se debe realizar cuando la plntula se est desarrolla ndo a expensas de los cotiledones u hojas cotiledonarias y las raicillas laterales no se han desarrollado, pues una vez que aparecen las hojas verdaderas y races laterales el trasplante puede resultar perjudicial para ellas.
CUADRO 29. Medios de germinacin ms comunes para propagacin de plantas

Cuidados durante la germinacin y el crecimiento inicial de las plntulas Despus de la siembra y el trasplante se presenta un periodo crtico en el vivero durante el cual las semillas y las plntulas son vul nerables a los factores del ambiente y a los diversos depredadores y patgenos. Por ello deben

extremarse los cuidados en los semilleros, camas y envases de crecimiento, pues de lo contrario se presentan prdidas cuantiosas en este periodo. Por ejemplo, si las condiciones no son las apropiadas para la germinacin de las semillas y a stas no se les brindan los cuidados necesarios, puede ser que no germinen o que sean atacadas por depredadores y enfermedades, que continan siendo un problema aun despus de q ue las plntulas han emergido. Asimismo, la presencia de malas hierbas puede afectar su ritmo de crecimiento, y hasta provocar su muerte, al competir con ellas por agua, luz y nutrientes. Para disminuir los riesgos en la produccin se debe cuidar el riego , el deshierbe, la aparicin de plagas y enfermedades y se debe seleccionar que la talla de las plantas producidas sea la adecuada. Riego El riego es muy importante debido a que la prdida excesiva de humedad del suelo ocasiona que las semillas se sequen y se pierdan los beneficios obtenidos con el tratamiento pregerminativo, ya que la germinacin se reduce considerablemente. Tambin hay que cuidar la presin del agua, pues si es mucha o cae directamente sobre las semillas puede ocasionar que se desentierren y queden expuestas, lo que provocara su desecacin. Por otra parte, el exceso de humedad promueve el decaimiento de la germinacin por la incidencia del mal del semillero ( damping-off) y por otros agentes patgenos. Es importante recalcar que los rie gos no deben aplicarse en las horas de mayor incidencia de calor, porque esto aumenta considerablemente la evapotranspiracin y provoca lesiones en las plntulas e incluso su muerte. Aunque las temperaturas del suelo consideradas como crticas varan seg n la edad y la especie, est comprobado que el dao ocurre con ms frecuencia en plantas jvenes. Cuando se presentan temperaturas crticas en el vivero, la intensidad y la frecuencia adecuada de los riegos es variable y depende parcialmente del tipo de su elo. El sombreo evita una excesiva insolacin, pero cuando las temperaturas superficiales del suelo excedan los 30C una adecuada aplicacin del riego regula la temperatura. Deshierbe El deshierbe manual o mecnico evita problemas de competencia por luz, agua y nutrientes, por lo que adems de eliminar las malas hierbas es importante tener cuidado con el nmero de plntulas que emergen de las bolsas en las que se sembraron dos o tres semillas, en cuyo caso se sugiere que solamente se mantenga la planta ms vigorosa y se eliminen las restantes. El deshierbe con herbicidas trae consigo riesgos tanto para el cultivo como para el ambiente, por lo que debe hacerse con mucha precaucin. Plagas y enfermedades

Una de las enfermedades ms importantes es el "mal d el semillero"; y el mtodo que ms se utiliza para eliminar el hongo que lo produce es la fumigacin. Una opcin para evitar el uso de fungicidas es cubrir las semillas con una capa de arena de 5 cm de espesor, que favorece la reduccin de la humedad alrededor de la semilla e incrementa la temperatura en la superficie del suelo. Debido a que el "mal del semillero" es un problema constante en los viveros se recomienda efectuar revisiones continuas en el cultivo, con el propsito de detectar oportunamente su presencia o la de alguna otra enfermedad. De esta manera se puede prescribir y aplicar inmediatamente el tratamiento adecuado y evitar la prdida significativa de plantas. Manejo de tallas adecuadas El xito en el establecimiento de las plantas en las z onas que se desea reforestar depende en gran medida de su vigor y tamao, as como de la poca del ao en que se realice el trasplante. As, para que un vivero produzca las tallas requeridas para la reforestacin es necesaria la planeacin y organizacin, de todos los trabajos relacionados en la produccin de plantas. Cuando la produccin se hace en camellones la estancia en el vivero es mayor que cuando se hace por envases de crecimiento.