Principios Bsicos de la Cromatografa de Gases. Principales bloques de un cromatgrafo y sus funciones. Cromatografa de gases convencional y de alta resolucin.

Columnas empacadas y capilares. Evolucin de los equipos cromatogrficos. - Columna Cromatogrfica. Mecanismos y proceso de separacin. Clasificacin. Fases mvil y estacionaria. Gases portadores. Control de flujos de gases. Zonas de temperatura. Seleccin adecuada de la columna. Fases estacionarias quirales. Cromatografa de gases rpida. Columnas cromatogrficas aptas para altas temperaturas de anlisis. - Sistemas de Aplicacin y Deteccin de la Muestra. Cmara de inyeccin. Tipos de puertos de inyeccin. Inyeccin split/splitless. Inyector - volatilizador con temperatura programada (PVT). Inyeccin de volumen de muestra grande (LVI). - Detectores. Clasificacin. Caractersticas bsicas: selectividad, universalidad, especificidad, nivel mnimo de deteccin, rango dinmico lineal. Consideraciones para la seleccin adecuada de un detector. Anlisis de compuestos a nivel de trazas. - Tcnicas de Acoplamiento. Detector selectivo de masas. Versatilidad y alcances analticos. Obtencin de espectros de masas. Monitoreo de iones seleccionados. Detector infrarrojo con transformada de Fourier. Detector de emisin atmica. Acoplamientos LC-GC. Otros detectores especficos. Aplicaciones. Cromatografa de gases multidimensional. - Anlisis Cualitativo y Cuantitativo. Aspectos generales. Teora y aplicacin. Sistemas de ndices de retencin. Determinacin de reas. Estandarizacin. Estandarizacin interna y externa. Obtencin de curvas de calibracin. Determinacin de factores de respuesta. Validacin de resultados. Ejemplos. Prcticas de laboratorio.

.Cromatografa de gases (GC) 6.1.Fundamentos y principios bsicos La idea de esta tcnica se basa en la volatilizacin de la muestra y su posterior inyeccin en la cabezade una columna cromatogrfica. Para la elucin de la muestra se usa un gas inerte como fase mvil, deesta manera

la fase mvil no interacciona con las molculas del analito, simplemente transporta el analitoa travs de la columna. Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC): Cromatografa gas-slido (GSC): la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos se produce mediante adsorcin. Cromatografa gas-lquido (GLC): la fase estacionaria son molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un gas inerte. Esta es la que se usa ms ampliamente. GSC la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos en ella se produce mediante elproceso de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha provocadoque este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la retencin del analito sobre la superficiees semipermanente y se obtienen picos de elucin con colas. Su nica aplicacin es la separacin deespecies gaseosas de bajo peso molecular. La GC es un sistema compuesto de gas portador, sistema de inyeccin de muestra, columna (generalmente dentro de un horno), y dete ctor.
Cromatografa de gases (GC) 6.1.Fundamentos y principios bsicos La idea de esta tcnica se basa en la volatilizacin de la muestra y su posterior inyeccin en la cabezade una columna cromatogrfica . Para la elucin de la muestra se usa un gas inerte como fase mvil, deesta manera la fase mvil no interacciona con las molculas del analito, simplemente transporta el analitoa travs de la columna. Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC):

Cromatografa gas-slido (GSC): la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos se produce mediante adsorcin. Cromatografa gas-lquido (GLC): la fase estacionaria son molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un gas inerte. Esta es la que se usa ms ampliamente. GSC la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos en ella se produce mediante elproceso de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha provocadoque este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la retencin del analito sobre la superficiees semipermanente y se obtienen picos de elucin con

colas. Su nica aplicacin es la separacin deespecies gaseosas de bajo peso molecular. La GC es un sistema compuesto de gas portador, sistema de inyeccin de muestra, columna (generalmente dentro de un horno), y detector 16 6.2. Instrumentacin Gas portador: Debe ser un gas inerte para evitar que reaccione con el analito o con la columna. Los gases de usomas comn son helio, nitrgeno, hidrogeno o argn. Se controla su entrada en el sistema mediantemanmetros para garantizar un flujo constante y estable. Las presiones de entrada son desde 10 a 25 psi. Sistema de inyeccin de muestra : El analito se inyecta usando una microjeringa en una cmara de vaporizacin instantnea sellada poruna junta de silicona (Septum). El analito debe ser introducido en pequeas cantidades para asegurar elmejor anlisis, si la columna es ordinaria el volumen es de unos 20 microlitros ; si la columna es capilar elvolumen es menor de 10 -3 microlitros. Se usan divisores de flujo a la entrada de la columna para desecharanalito hasta alcanzar estos volmenes. Las muestra slidas deben introducirse en forma de disolucin, eldisolvente se pie rde en la cmara de vaporizacin y as no interfiere en la elucin. Columnas y sistemas de control de temperatura : Existen dos tipos de columnas: -Empaquetadas o de relleno -Tubulares abiertas o capilares (Mas eficaces y rpidas) La longitud de las columna s es de 2 a 50 metros, de acero inoxidable, vidrio, slice o tefln. Las columnas se enrollan de forma helicoidal para encajar en el horno. La temperatura influye directamente sobre la separacin de los analitos, se necesita una precisin dedcimas de grado. La temperatura depende del punto de ebullicin del analito, as pues se ajusta latemperatura un poco por encima del punto de ebullicin. Si son varios analitos se debe ajustar la rampa detemperatura, que consiste en aumentar la temperatura de forma gradual o por etapas hasta separar losanalitos. El problema de subir demasiado la temperatura es que aumenta la velocidad de elucin ytambin aumenta el riesgo de descomposicin del analito. Detectores: Detector de ionizacin de llama: es un quemador de hidrogeno/oxigeno donde se mezcla el eluyente

con hidrogeno. En esta cmara se produce una chispa para causar ignicin, los compuestos orgnicos alquemarse se pirolizan y producen iones y electrones, aprovechando que se convierte en con ductor seinduce una corriente elctrica, para detectar iones desprendidos. Es un detector de masa, puesto queaproximadamente el numero de iones desprendidos es igual al numero de carbonos transformados. Detector de conductividad trmica : se basa en el calentamiento de una resistencia mediante el uso de una corriente elctrica. Esta resistencia tiene una temperatura que depende del gas circundante. La resistencia es un hilo de tungsteno, platino u oro. Detector termoinico: Se usa para compuestos fosforados y nitrogenados, su funcionamiento es parecido al detector de ionizacion de llama, el eluyente se mezcla con hidrogeno y se quema. El gas sepasa alrededor de una esfera de rubidio calentado a 600 C y sometida a 180 V, creando un plasma en elcual se forman gran cantidad de iones que producen una corriente medible, la intensidad es proporcionalal numero de iones formados y as determinar la cantidad del analito. Detector de captura de electrones : se basa en la emisin de una partcula por parte de tomos como el63Ni o tritio, el electrn emitido ioniza el gas portador y emite una rfaga de electrones, esta rfaga essensible a una corriente elctrica que podremos medir. En el caso de especies orgnicas los electrones sonabsorbidos, disminuyendo la intensidad de la corriente. 17 Detector de emisin atmica: el gas se introduce en un plasma de helio inducido por microondas, la alta temperaturaioniza toda la muestra y se miden los espectros de emisin mediante un espectrofotmetro acoplado al sistema. Columnas: Columnas de relleno: Son tubos de vidrio, metal inerte o tefln de 2 o 3 metros de longitud y 2 a 4 mm de dimetro interno el material de relleno del interior consiste en partculasesfricas para interaccionar con el analito. Normalmente se usan diatomeas puesto que es unmaterial ideal para la adsorcin. Columnas capilares: o

WCOT: Pared recubierta: son tubos capilares donde la pared interna esta recubierta con una fina capa de fase estacionaria. Son mas eficaces. o SCOT(soporte recubierto): tienen una capa en su lado interno de superficie adsorbente donde se acopla la fase estacionaria. Tienen mayor capacidad de carga. Fase estacionaria : Una fase estacionaria liquida inmovilizada requiere: - Caractersticas de reparto. - Baja volatilidad. - Baja reactividad. - Estabilidad trmica. Algunos de las fases estacionarias mas comunes son: Polidimetilsiloxano: fase no polar de uso general para hidrocarburos, drogas y esteroides. Poli(fenilmetidifenil)siloxano:para steres metlicos de cidos grasos, alcaloides, drogas y compuestos halogenados. Poli(fenilmetil)siloxano: drogas, esteroides, pesticidas y glicoles. Poli(trifluoropropildimetil)siloxano: para aromticos clorados, nitroaromticos, bencenos alquilsustituidos. Polietilenglicol: para compuestos como glicoles, alcoholes, eteres y aceites esenciales. Poli(dicianoalildimetil)siloxano: para cidos grasos poliinsaturados, cidos libres y alcoholes. 6.3.Aplicaciones al anlisis de alimentos Caracterizacin de aceites esenciales: se basa en la deteccin de sustancias terpenicas responsables de propiedades aromticas en los alimentos. Anlisis de nitrosaminas en agua potable: las nitrosaminas son sustancias carcingenas potenciales, se debe controlar su presencia en agua potable. Para esto se usa extraccin de la fase slida y GC con columna capilar.

Controles de alcoholemia: la GC se puede usar para determinar el volumen de alcohol en sangre. Determinacin de trazas de pesticidas organo-fosforicos (OPP) en aceite de oliva: el GC en combinacin con los detectores de ionizacin de llama permiten la deteccin de estos pesticidas, que apesar de ser baratos y de amplio espectro, son causantes de problemas irreversibles en la actividad de losneurotransmisores. Contaminacin por dioxinas: usando detectores de conductividad electroltica, permite el anlisis de residuos de dioxinas muy perjudiciales para la salud humana. Deteccin de pesticidas en aves y peces: s e usan columnas capilares para la deteccin de pesticidas voltiles o sustancias de vertidos txicos