DETERMINACIN DEL SEXO

En la mayora de los organismos existen dos sexos (macho y hembra) y aparecen en proporciones mas o menos iguales Igualdad explicada por primera vez por Ronald Fisher El sexo es determinado por la presencia de cromosomas sexuales XX en hembra; XY en macho Excepcin en Isopodo (Armadillidium vulgare) donde hembras presentan ZW y machos ZZ

LA PRESENCIA O AUSENCIA DE UN CROMOSOMA SEXUAL NO ES, COMO SE CREIA, EL MECANISMO NICO, UNIVERSAL Y NECESARIO PARA LA DETERMINACIN DEL FENOTIPO SEXUAL. Un ejemplo evidente, es el caso de Drosophila melanogaster

D. melanogaster: tres cromosomas son AUTOSOMALES y el par restante es el par sexual, donde cada gameto macho es XY y la hembra es XX. Autosomas: cromosomas de gran semejanza entre machos y hembras. Cromosomas Sexuales: estructura diferente entre machos y hembras.

En 15 das se obtiene una d nueva progenie.

 A pesar de que hembras tienen cromosoma XX y machos XY, la presencia de Y no determina el sexo masculino en Drosophila, sino que cada sexo es determinado por un equilibrio entre los genes de los autosomas y los genes del cromosoma X El cromosoma X produce efectos feminizantes, mientras que los autosomas contienen genes que inducen masculinizacin Es decir, el sexo de la mosca es determinado por la proporcin X:A
Una proporcin X:A de 1,0 produce mosca hembra; una proporcin X:A de 0,5 produce un macho. Si la proporcin es menor de 0,5 se produce macho dbil y estril

LA DETERMINACIN DEL SEXO a) Determinacin sexual debida a un par de genes; como ocurre, por ejemplo, en las plantas dioicas. b) Determinacin sexual por cromosomas sexuales. En el reino animal, los sistemas ms frecuentes de determinacin sexual son: - Sistema XX-XY. Como el del hombre y el resto de los mamferos. - Sistema ZZ-ZW. Se da en aves, reptiles, etc. En este caso el macho es el sexo homogamtico (ZZ) y la hembra el heterogamtico (ZW).

- Sistema XX-XO. La hembra es homogamtica XX y el macho heterogamtico (XO) posee un slo cromosoma X y no tiene cromosoma Y. Se da en liblulas, saltamontes c) Sexo por haploidia: Los huevos fecundados (diploides) dan lugar a hembras y los no fecundados (haploides) a machos. Ejemplo: las abejas. d) Sexo debido al equilibrio gentico como en Drosophila : La determinacin sexual se encuentra en los autosomas y depende de la relacin numrica entre el nmero de cromosomas X y el de juegos autosmicos (A).

e) Sexo determinado por factores ambientales. En ciertos casos, por ejemplo, en ciertas especies de cocodrilos, el sexo se determina en funcin de la temperatura de incubacin de los huevos. f) Inversin sexual. El sexo depende de la proporcin de machos y hembras existentes en la poblacin o de la edad. As, ciertos peces cuando son jvenes tienen un sexo y de adultos tienen otro.

Complementos cromosmicos y fenotipos sexuales en Drosophila

Juegos haploides Complemento cromosmico sexual de autosomas

Gen Sex-lethal En hembras: Protena Sex-lethal

Protena Sex-lethal Corte y empalme de pre-mRNA sex lethal en etapas tardas del desarrollo Corte y empalme de pre-mRNA sex-lethal

Proporcin X:A

Fenotipo sexual Hembra macho macho hembra metahembra metahembra Fenotipo intersexual metamacho metahembra

XX XY XO XXY XXX XXXY XX XO XXXX

AA

1,0 0,5 0,5 1,0 1,5 1,5 0,67 0,33 1,3

mRNA Sex-lethal

AA AA AA AA AA AAA AAA AAA

En machos:

Ausencia de Protena Sexlethal

mRNA con codn de terminacin al principio de la secuencia

Protena Sxl unin cerca de extremo 3 de mRNA, entre exones 2 y 3 Bloquea asociacin apropiada entre cofactor U2AF y la snRNP U2 Formacin de empalmosoma (snRNP U1, U2, U4, U5 y U6) Empalme de exones 2 a 4, excluyendo el 3 Se genera mRNA que se traduce a protena activa Sxl En machos est incluido el exn 3 y en consecuencia el codn de terminacin que evita la traduccin de la protena Sxl

LECTURA DEL COCIENTE X:A

XX 1
sis-a sis-b sis-c runt dpn

Cociente X:A 1
da her emc gro
Protenas denominador (autosomales) Protenas numerador (crom. X)

XY 1
sis-a sis-b sis-c runt dpn

2
da her emc gro
Protenas denominador (autosomales)

vs.

vs.

Protenas numerador (crom. X)

Sxl (Sex-lethal)

Sxl (Sex-lethal)

ACTIVACIN DE Sxl
Hembra 2X:2A 2X 2A Macho 1X:2A 1X 2A

Protena Sxl corte y empalme de gen Tra (Transformer) y Dsx (Double-sex)

Mecanismo de splicing alternativo El producto del gen Tra gobierna el splicing del pre-mRNA del gen Dsx
Gen Sxl

Gen Sxl

PL

PE
Transcripcin

PL

PE
No hay transcripcin

Splicing Traduccin Protena Sxl activa (354 aas)

CASCADA BAJO Sxl

Hembras
Sex-lethal transformer

CASCADA REGULATORIA
Machos

Trnscrito primario

Mosca XX
Sxl activa Genes crom. Y

Mosca XY
Sxl inactiva

Prot. Dsx + femen. Genes msl

Prot. Ix (intersex)

Formac. esperma

Prot. Dsx masc. Genes msl

Transformer Tra-2 No protena

Genes diferen. femen. Genes diferen. masc. Genes diferen. masc. Genes diferen. femen.

doublesex

Transcripcin normal genes crom. X

Transcripcin activada genes crom. X

Doublesex fem.

Doublesex mas.

Fenotipo femenino

Fenotipo masculino

LA DETERMINACIN DEL SEXO EN MAMFEROS (HOMBRE)

Nivel
Cromosomal/ gentico Gonadal

LA IMPORTANCIA DEL CROMOSOMA Y

XX X XXX - Hembra normal - Fenotipo femeninoinfrtil (Turner) - Hembra normal (triple-X) - Relacin entre el cromosoma X y el fenotipo femenino - Como mnimo XX para hembra normal XY XXY XXXXXY Y - Macho normal - Macho normal, generlmente frtil (Klinefelter) - Fuerte sndrome de Klinefelter, fenotipo masculino - monosmico Y - letal en el embrin

Eventos
XY=macho XX=hembra

Momento
Fertilizacin

De gnadas 9-16 semanas tras la indiferenciadas a testculos fertilizacin u ovarios Estructuras reproductivas internas y externas Fuertes sentimientos de ser macho o hembra 8 semanas tras fertilizacin a pubertad Desde la niez

Fenotpico

Identidad de gnero

- El cromosoma Y determina el fenotipo masculino - Basta con un Y

Compensacin de dosis gnica

Porcin no homloga, genes ligados al sexo

X
Se transmiten segn herencia mendeliana

Regin pseudoautosmica

En los organismos en donde las hembras y los machos difieren en el nmero de cromosomas X, se presenta el mecanismo de compensacin de dosis gnica, de forma tal que los productos de los genes ligados al sexo estn representados en cantidades equivalentes en hembras y machos. Este proceso recibe el nombre de compensacin de dosis gnica

Y
Genes holndricos
Porcin no homloga, genes que se transmiten de padres a hijos

 En D. melanogaster, los dos cromosomas X de las hembras son activos y la compensacin de dosis gnica tiene lugar en los machos por hipertranscripcin de su nico cromosoma X. En Caenorhabditis elegans la compensacin de dosis gnica se realiza en las hembras por hipotranscripcin de sus dos cromosomas X. En los mamferos, la compensacin de dosis gnica consiste en la inactivacin de uno de los cromosomas X de las hembras.

En Drosophila, la determinacin sexual y la compensacin de dosis gnica estn bajo el control del gen Sex-lethal (Sxl). Acta sobre los genes de compensacin de dosis: genes male-specific lethals (msl+s). Son cuatro genes: mle, msl-1, msl-3 y msl-2

En Mamferos: Inactivacin al azar de un cromosoma X de la hembra durante el desarrollo embrionario

Control gentico de la inactivacin La inactivacin est controlada por un locus del propio cromosoma X, conocido como el Centro de Inactivacin del X (Xic). Dentro de esta region hay RNAs no codificantes y elementos reguladores implicados en la eleccin del que se va a inactivar.

 En Xic, se localiza el Xce (Elemento controlador del X), situado a unas 100 kb de la regin 3 del gen Xist que est implicado en el proceso de eleccin del cromosoma que se va a inactivar. Una vez elegido el cromosoma que se va a inactivar, un RNA no codificante se extiende a lo largo de Xist e inicia el silenciamiento del mismo.

En un principio, los dos cromosomas X expresan Xist, de forma inestable. Durante el proceso de inactivacin, uno de estos dos Xist es degradado por otro RNA llamado DXPas34, tambin en el locus Xic, evitando as la inactivacin de uno de los cromosomas.

Regulacin gentica durante el desarrollo

Desarrollo ontogentico

Genes Hometicos Genes que participan en el desarrollo de los organismos y que determinan la identidad de los segmentos o partes individuales del embrin en sus etapas iniciales Confieren a la clula identidad espacial o posicional inequvoca en diferentes regiones a lo largo del eje anteroposterior del cuerpo
indican a la clula si forma parte de la cabeza, del trax o del abdomen del individuo.

Drosophila melanogaster Primero se expresan los genes de polaridad del huevo

Genes maternos: crean gradiente citoplasmtico en el huevo y su origen es materno bicoid: segmentos anteriores nanos: segmentos posteriores

Segundo, los genes de segmentacin: determinan nmero y organizacin de los segmentos

Genes de segmentacin (aprx. 20): determinan el nmero y la organizacin de los segmentos Genes gap: regiones del embrin Genes regla de pares (pair-rules): definen pares de segmentos Genes de polaridad de segmento: definen segmentos individuales

Los productos de los genes anteriores, activan a los genes hometicos que determinan la identidad de cada segmento
Codifican protenas que se unen al DNA activando otros genes Contienen secuencia muy conservada de 180 nt, llamada caja hometica La caja se traduce en regin de protena, de 60 a.a. que codifican el homeodomnio, a travs del cual se une a DNA

Los genes hometicos se agrupan en el genoma en clusters

Clasificacin Genes HOX Genes ParaHOX Genes NK

Genes HOX
Actan en el control maestro del desarrollo de los organismos multicelulares, centrndose su accin en la regulacin de la morfognesis y diferenciacin celular durante el desarrollo en animales, plantas y algunos hongos En Drosophila
Agrupados en dos complejos en el cromosoma 3 Complejo Antennapedia: regula desarrollo de cabeza y segmentos torcicos anteriores Complejo Bithorax: regula abdomen y segmentos torcicos posteriores

El orden de estos genes refleja su orden de expresin en el cuerpo de la mosca

En Mus musculus
Cuatro complejos de genes, al igual que en humanos, llamados HoxA (6), HoxB (11), HoxC (15), HoxD (4),

Conservacion evolutiva de los genes hometicos (Hox)

Genes ParaHOX
Se originaron a partir de la duplicacin y evolucin posterior de genes HOX Restringido a cefalocordados y vertebrados Es un complejo que incluye tres genes:
Cdx (homeobox tipo caudal), Gsh (genomic screened homebox) y Xlox/lpf1 (Xenopus laevis homeobox 8/insuline promotor factor 1).

Son cruciales para el desarrollo del cerebro y del tubo neural y comparte muchas similitudes con los genes Hox.
Tema 9. Regulacin de la expresin gnica en eucariotas

Genes NK En Drosophila melanogaster NK1, NK3 y NK4 en cromosoma 3, NK2 en cromosoma 1 Cambio de nombres:
NK1 slouch NK2 vnd (ventral nervous system defective) NK3 bap (bagpipe) NK4 msh2 (muscle-specific homeobox 2) Se aislaron otros hasta llegar a 9: NK5, LBx o ladybird (Lbe, Lbl), Msx y Tlx

 En humanos, los genes NKX3.1 y NKX3.2 son ortlogos del gen bap LBX1 y LBX2 son ortlogos del gen ladybird y los genes NKX2.3, NKX2.5 y NKX2.6 lo son del tin de la mosca de la fruta

Genes PAX Codifican protenas de unin al DNA (paired domain homeobox) Cuando se alteran (mutacin), provocan malformaciones El mecanismo de accin de los genes Pax es an desconocido, sin embargo, se sabe que son capaces de inducir la transformacin neoplsica en algunos tejidos

Grupos en mamferos: Grupo Pax 1 (Pax 1 y 9), Grupo Pax 2 (Pax 2, 5 y 8), Grupo Pax 3 (Pax 3 y 7) Grupo Pax 4 (Pax 4 y 6).

PAX1 participa en el desarrollo de vertebrados y segmentacin de embrin. Codifica protena de 440 a.a. a partir de 4 exones. PAX2, identificado en formacin de rion y desarrollo de nervio ptico. A partir de 11 exones se genera protena de 417 a.a. Mutaciones en humanos ha sido asociaco con sndrome renal. PAX3 ha sido identificado en odo, ojos, desarrollo facial. Genera protena de 479 a.a. Mutaciones se asocia con sndrome de Waardenburg. PAX4 involucrado con desarrollo de islas pancreaticas. Genera protena de 350 a.a.

 PAX5, desarrollo neural y espermatogenesis, diferenciacin de clulas B. PAX6, desarrollo de ojos y rganos sensoriales, tejidos neurales y epidermicos as como otras estructuras derivadas del ectodermo PAX7, desarrollo de msculo esqueltico. PAX8, asociado con expresin especfica de tiroides. Transcribe protena de 451 aa. a partir de 11 exones

Evolucin de los genes hometicos

Gen homeobox fundador Cis duplicacin

Megacomplejos presente en la separacin de cnidarios y organismos con simetra bilateral

Los genes Hox se expresan sobre todo en el ectodermo y neuroectodermo, contribuyendo al desarrollo del sistema nervioso central de los vertebrados. Los genes del complejo NK contribuyen a establecer patrones en el mesodermo, especialmente en Drosophila y son fundamentales para el desarrollo del corazn en los vertebrados. Los genes ParaHox se expresan sobre todo en el endodermo posterior y medio.

Genes hometicos en el hombre y enfermedades En humanos existen 39 genes Hox localizados en cuatro clusters que se encuentran los cromosomas 2, 7, 12 y 17 Mutaciones provocan afecciones y sndromes:

 Hipervitaminosis A durante el embarazo

La vitamina A causa la expresin de los genes Hox 1-4 en grupos de clulas que habitualmente no expresan estos genes. El cido retinoico puede alterar regulacin de genes HOX en el embrin Malformaciones: labio leporino, malformaciones del cuello y cabeza, hidrocefalia, enfermedades cardacas

Sndrome de Waardenburg
Defecto en gen hometico (PAX Paired box, familia de factores de transcripcin que contienen homeodominio. Importantes para especificacin de tejidos en etapas tempranas de desarrollo Genera alteracin a la cresta neural durante el desarrollo Anomalias faciales, problemas de visin, sordera, dolor de articulaciones, rigidez

Aniridia
Mutacin humana en la que se pierde el iris del ojo Defecto en gen hometico PAX 6 El afectado no puede controlar la entrada de luz en el ojo Empleo de lentes coloreadas

Cardiopatas congnitas
Causadas por mutacin en el gen NKX2.5, del cromosoma 5 Gen tinman de los humanos Flujo anormal de sangre en el corazn