Utilización de las Stem Cells en forma endovenosa

Hacia un nuevo concepto del tratamiento anti-aging 1, 2

Comunicación preliminar

Dr. Edgardo Celi (*), Prof. Dr. Jürgen Schiefelbein (**)

*Hematología - Regeneración de tejidos
** Anti Aging - A4M

Introducción

Los tratamientos con sangre entera (3) han sido utilizados desde hace años para
compensar las pérdidas agudas de la misma o intentando activar el sistema
inmunológico (dadas en forma intramuscular) suprimiendo las alergias, o también como
una alternativa para cualquier otro tipo de enfermedad.

Con el desarrollo del conocimiento, dichos tratamientos han avanzado de forma

acelerada ya que han sido utilizados los hemocomponentes: plaquetas, glóbulos rojos,
glóbulos blancos y las stem cells. Cada uno de ellos para patologías específicas.

Últimamente, además están siendo utilizados para otras finalidades ya que han sido
descubiertas nuevas funciones de los elementos formes de la sangre (4).

Así, las plaquetas se utilizan para promover el

rejuvenecimiento de los tejidos y la
cicatrización a partir de los factores de
crecimiento plaquetarios (PDGF) (5) que
estimulan la reproducción celular y disminuyen
la apoptosis (6), las células mononucleares para
aumentar la regeneración tisular, y por último,
las stem cells que originalmente fueron usadas
para el trasplante de médula ósea, son hoy Prof. Dr. Jürgen Schiefelbein;
utilizadas para tratamientos de diversas Dr. Edgardo Celi
patologías de los distintos órganos de la E-mail: ito@netverk.com.ar
economía (7,8,9).

Desde la vida perinatal a la adulta van apareciendo SC en los tejidos somáticos, como
parte de la fisiología del organismo para su renovación.

Esto nos lleva a concluir que en realidad las SC adultas no son células "primitivas"
derivadas del embrión, sino que son células que aparecen tardíamente, las cuales son
especializadas en proveer células de reposición para el mantenimiento tisular.

Estas “células adultas” se encuentran en espacios bien definidos y delimitados para cada
órgano, recibiendo el nombre de nicho de las SC (10). A partir de estos nichos, se
sucede la renovación de las células del organismo y se encargan de mantener en
equilibrio las que mueren con las que se reponen (eutrofismo o juventud). Con el
transcurso de los años estos nichos se van despoblando y la cantidad celular no puede
ser repuesta en forma acabada, o sea, siempre las que se pierden son más que las que se
reponen (distrofismo o envejecimiento).

Ya que conocemos algunos reservorios de factores de crecimiento y células madre,

diseñamos y realizamos tratamientos intentando disminuir esta relación de
pérdida/reposición.

Los tratamientos los podemos resumir en cuatro grupos bien definidos:

1. Rejuvenecimiento de tejidos (sobre todo piel y faneras), los cuales pueden ser
solos o asociados a otros métodos de rejuvenecimiento (luz pulsada y laser) (11).

2. Como técnicas de cicatrización y rejuvenecimiento en cirugías (maxilofacial y

plástica).

3. Como tratamientos de patologías preexistentes (vasculopatías, cardiopatías).

4. Para revitalización de todo el organismo (como consecuencia de los trasplantes

de MO) (12).

Como un tratamiento alternativo para las enfermedades de base, las intercurrentes y

como revitalización de todos los órganos de la economía es que hemos decidido realizar
en forma IV los tratamientos que habitualmente habíamos realizado en forma local y/o
combinando los mismos. Según las últimas investigaciones en lo que concierne a los
efectos de las SC que se colocan para realizar los tratamientos de las enfermedades de
base (los mismos son en animales) se descubrió que de las tres posibles vías de
administración, una de las mismas es mucho más efectiva.

a) Local (o sea en el lugar de la lesión).

b) Loco regional (a través de una arteria que irrigue la zona).
c) Sistémica (por vía IV que alcance el lugar por circulación habitual).

El tratamiento local es el tratamiento mediante el cual se accede de forma directa al

tejido enfermo, por lo general mediante catéteres (ej. corazón) (13), salvo los que
involucran la córnea. Para esto además se necesita un equipo de hemodinamia y un
cardiólogo intervencionista.

El loco regional es el que actúa sobre la zona a partir de la colocación sobre la arteria
que irriga la zona, esto es dado generalmente para SNC (utilización de las carótidas y
para determinadas patologías arteriales en miembros inferiores).

Paradójicamente contra lo que uno piensa a priori, el método con mayor efectividad es
el sistémico, que consiste en la colocación de todo el concentrado de SC y células
mononucleares (las cuales no separamos ya que además tienen un efecto propio en la
reparación a través del proceso inflamatorio) (14). Este concentrado puede ser
resuspendido tanto en su propio suero, como así también en plasma rico en plaquetas o
en factores de crecimiento (preferimos este último ya que tenemos además efecto
antiapoptóticos y promitóticos de los PDGF). Las bondades de estos tratamientos
también se explica porque la forma habitual de reparación de los tejidos es por la vía de
la quimiotaxis, dentro de las cuales también están involucradas las SC a traves de las
quimioquinas SDF-1 (15), que son las quimioatrayentes específicas y las integrinas (16)
de las SC -proteinas de membrana que son las específicas para la unión en cada tejido-
(p. ej alfa 4 ß1 para el endotelio vascular) (17).

Dada nuestra experiencia en la utilización de las SC en forma local para resolver

patologías específicas, las más utilizadas fueron las de angiogénesis en miembros
inferiores que resolvían en gran medida la patología tratada, pero teníamos
complicaciones en otros órganos (pacientes que revascularizaban su MI pero que luego
sufría infarto de miocardio por su patología arterial) y en
vista a que los mismos cursaban un beneficio clínico agregado, diseñamos esta
terapéutica basada en las últimas investigaciones básicas.

Esta terapéutica se basa en:

1.- Elección de los pacientes.
2.- Preparación de las SC.
3.- Vía de administración.

Elección de pacientes

Prácticamente no hay contraindicaciones para realizar este tratamiento, pero hay que
tener algunas consideraciones. Se realizaron fundamentalmente dos criterios de
exclusión:

a) menores de 30 años, ya que aún están poblando sus nichos.

b) pacientes con sospecha de enfermedades neoplásicas o haberlas padecido (deben

estar en remisión completa por lo menos 5 años comprobados).

Preparación de las SC

Se obtienen SC a partir de aspiración múltiple en esternón (18), se separan las SC y se

ponen a incubar en soluciones estabilizadoras (PBS pH 7.4) y nutrientes celulares
(complejo B y fólico) durante 10 minutos (fig. 1), para luego resuspenderse las mismas
en el PR-PDGF (fig. 2) obtenido en forma previa - más o menos 3 ó 4 veces volumen a
volumen (fig. 3) -.
Vía de administración

Luego se incorporan a una solución salina (fig.

4) y se pasa en forma IV entre 15 y 30
minutos.

Una vez administrada el paciente puede tener

un discreto decaimiento e incluso un pico
febril que ceden en forma espontánea (en
ningún momento presenta cuadros
importantes) durante las primeras 24 a 36 Figura 4. Se observa un frasco de
horas. solución salina listo para ser
infundido al paciente (se conserva
Entre los 5 días y los 7 días el paciente a temperatura ambiente un
presenta un mejoramiento de su estado general máximo de 3 horas).
manifestando los mismos una sensación como
de “bienestar” y si su patología de base es neurológica, se evidencia una mejoría
importante a partir de la supresión de síntomas tales como parestesias o paresias (más
rápido y mejor cuanto menor evolución en tiempo).

Discusión

Sabemos que sólo hemos dado los primeros pasos para el desarrollo de una terapia
simple pero efectiva. Estamos realizando en la actualidad estudios sitematizados para
poder saber en forma precisa el mejor protocolo para cada una de las patologías
estudiadas (fundamentalmente diabetes y SNC), los cuales van a poder ser utilizados en
forma sistemática en todos los centros de mediana a baja complejidad. Obtuvimos
resultados alentadores tanto para la terapia antienvejecimiento en forma preventiva
como así también como terapia para patologías preexistentes con un mejoramiento de
toda la economía basado en un efecto angiogénico reparador y un beneficio a todos los
órganos que estén afectados.
Bibliografía

1. Martin Körbling, M.D., and Zeev Estrov, M.D.

Adult Stem Cells for Tissue Repair. A New Therapeutic Concept?
N Engl J Med 349;6 august 7, 2003.

2. Rosenthal, N.
Prometheus's Vulture and the Stem-Cell Promise.
N Engl J Med 349:267, July 17, 2003.

3. Steven A. Anderson, Mikhail Menis, Kathryn O'Connell, Dale R. Burwen

Blood use by inpatient elderly population in the United States.
Transfusion Volume 47 Issue 4 Page 582-592, April 2007.

4. Laura E. Benjamin, Itzhak Hemo and Eli Keshet.

A plasticity window for blood vessel remodelling is defined by pericyte
coverage of the preformed endothelial network and is regulated by PDGF-B and
VEGF.
Development 125, 1591-1598 (1998).

5. Carl-Henrik Helding and Bengt Westermark

Mechanism of Action and In Vivo Role of Platelet-DerivedGrowth Factor
Physiological Reviews, Vol. 79, No. 4, October 1999.

6. Dale E. Bredesen, Patrick Mehlen, and Shahrooz Rabizadeh.

Apoptosis and Dependence Receptors: A Molecular Basis for Cellular Addiction
Physiol Rev 84:411-430, 2004.

7. Bernard Swynghedauw.
Molecular Mechanisms of Myocardial Remodeling.
Physiological Reviews, Vol. 79, No. 1, January 1999.

8. Andrea Hoffmann, Gadi Pelled, Gadi Turgeman, et al.

Neotendon formation induced by manipulation of the Smad8 signalling pathway
in mesenchymal stem cells.
The Journal of Clinical Investigation, Volume 116 Number 4 April 2006.

9. Adam J. Singer, M.D.,and Richard A.F. Clarck, M.D.

Cutaneous Wound Healing.
NEJM Volume 341 Number 10,738-746.

10. Tong Yin and Linheng Li.

The stem cell niches in bone.
The Journal of Clinical Investigation, Volume 116 Number 5 May 2006.

11. Helen M. Beere

‘The stress of dying’: the role of heat shock proteins in the regulation of
apoptosis.
Journal of Cell Science 117, 2641-2651, 2004.

12. Nobuko Uchida, Ann Tsukamoto, Dongping He,et al.

High Doses of Purified Stem Cells Cause Early Hematopoietic Recovery in
 Syngeneic and Allogeneic Hosts
J. Clin. Invest. Volume 101, Number 5, March 1998, 961–966.

13. Sabine Werner and Richard Grose.

Regulation of Wound Healing by Growth Factors and Cytokines
Physiol Rev.83: 835–870, 2003.

14. K G Harding, H L Morris, G K Patel

Healing chronic wounds
BMJ volume 324 19 January 2002.

15. Amnon Peled, Valentin Grabovsky, Liliana Habler, Judith Sandbank, et al

The chemokine SDF-1 stimulates integrin-mediated arrest of CD34+ cells on
vascular endothelium under shear flow
J. Clin. Invest. 104:1199–1211 (1999).

16. Hui Jin, Aparna Aiyer, Jingmei Su, et al.

A homing mechanism for bone marrow–derived progenitor cell recruitment to
the neovasculature.
The Journal of Clinical Investigation, Volume 116 Number 3 March 2006.

17. Baochong Gao, Thomas M. Saba, and Min-Fu Tsan.

Role of v3-integrin in TNF--induced endothelial cell migration.
Am J Physiol Cell Physiol 283:C1196–C1205, 2002.

18. Edgardo Celi, MD

Regeneración, rejuvenecimiento de tejidos y optimización de la cicatrización a
través de factores de crecimiento y células madre autólogas.
Revista de Medicina Estética N 50, 2007.