PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL PERÚ

FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERÍA

Laboratorio 1 de Química Analítica

OCTAVA PRÁCTICA
DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO POR EL MÉTODO DE KJELDAHL

Fecha del experimento: 2 de junio del 2010

Integrantes:
- Brenda D’Acunha
- Said Neme

2010
 1. Objetivo:

- Determinación cuantitativa de nitrógeno en una muestra de harina mediante el método

de Kjeldahl.

2. Procedimiento:

Estandarización de Estandarización de

Preparar 250 ml de solución de NaOH 0.1M Preparar 100 ml de solución de 0.1M

Tomag)
Preparar una solución de biftalato de potasio (pesar entre 0.2-0.25 alícuotas de 10ml de la solución de

Titular hasta punto de equivalencia. Titular con la solución estándar de NaOH

(Realizar duplicados) (Realizar duplicados)
 Determinación de nitrógeno:

1g de muestra

0.25 de sulfato de potasio

Añadir 100ml de agua y trasvasar a un ba

Balón de digestión Hasta obtener Mezcla transparente
0.5g sulfato de cobre
Calentar Enfriar

10ml cc
50ml NaOH 30%
Pedazos de porcelana Solución problema
Pedazos de porcelana

Destilar hasta obtener volumen de 75mL aprox.

Sumergir salida en 25ml de + 4 gotas de indicador rojo de metilo

Titular con NaOH Hasta punto de equivalencia.

3. Equipos importantes:

- Equipo de destilación
- Equipo de digestión de Kjeldahl

4. Datos:

En lugar de trabajar con la muestra de harina, se trabajó con una muestra de sacarosa, que
sirvió como blanco para todos en el laboratorio. Para poder realizar el análisis de la harina,
se tomaron los datos del equipo conformado por Rodrigo Beltrán y Alonso Arguelles.

Blanco:
 Peso de sacarosa: 1.0232g

Estandarización de NaOH 0.1M:

Ensayo Peso de Biftalato (g) Volumen de NaOH

gastado (mL)
1 0.2232 12.8
2 0.2268 11.9
3 0.2174 11.4

Estandarización de H2SO4 0.05M:

Ensayo Volumen de H2SO4

gastado (mL)
1 9.9
2 10
*Se una alícuota de 10mL de NaOH para ambos ensayos

Determinación de nitrógeno:

- Volumen de la muestra al finalizar la destilación: 75mL aprox.

- Volumen de NaOH gastado para titular el exceso de ácido: 25.5mL
- % teórico de nitrógeno en la muestra de sacarosa: 0%

Muestra de Harina:

Peso de la muestra: 1.0215g

Estandarización de NaOH 0.1M:

Ensayo Peso de Biftalato (g) Volumen de NaOH

gastado (mL)
1 0.2416 11.9
2 0.2127 10.6
Blanco - 0.05

Estandarización de Ácido sulfúrico 0.05M:

Ensayo Volumen de H2SO4

gastado (mL)
1 9.9
2 10
Determinación de nitrógeno:

- Gasto de NaOH 0.1M usado en la titulación: 13.6mL

- Volumen de H2SO4 0.05M: 25mL
- % teórico de nitrógeno en la muestra: 10%

5. Cálculos y resultados:

1. Blanco

Estandarización de NaOH :

Por estequiometria se cumple lo siguiente:

n NaOH =n biftalato

Ensayo Biftalato (g) Volumen [NaOH]

NaOH (ml) (M)
1 0.2232 11.8 0.0924
2 0.2268 11.9 0.0933
3 0.2174 11.4 0.093

[ NaOH ] =0.0929 ± 4.58 x 10−3

Estandarización de H 2 SO 4 :

Se estandarizó el ácido sulfúrico tomando alícuotas de NaOH de 10ml. Se usó como indicador rojo
de metilo ya que se tuvo una equivocación al poner el ácido en la bureta en lugar del hidróxido.
Por estequiometria tenemos:

2(n¿ ¿ NaOH )=nH 2

SO 4 ¿

Ensayo Volumen ácido [ H 2 SO 4 ]

gastado (ml) (M)
1 9.9 0.0469
2 10 0.0465

[ H 2 SO4 ]=0.0467 ±2.83 x 10−4

Determinación de nitrógeno en la muestra de sacarosa:

Moles de H2SO4 iniciales:
[H2SO4] x Volumen = (0.046M) x (25x10-3L) = 1.15x10-3moles

Moles de NaOH gastadas para la titulación:

[NaOH] x Volumen = 0.0929M x 25.5x10-3L = 2.295x10-3moles

Por estequiometría, tenemos que 2 n H 2 S O4 =nNaOH

Entonces, las moles finales de H2SO4 para el blanco son:

n de NaOH 2.295 x 1 0−3 −3

= =1.1475 x 1 0 moles de ácido sulfúric o
2 2

Luego, es posible hallar las moles de NH3 presentes ya que:

n amoniaco=2[ ( nácido iniciales )−(nácido en exceso )]

n amoniaco=5 x 10−6

Luego, n amoniaco=nnitrogeno
−6
Y, n nitrogeno enel blanco =5 x 10

2. Muestra de harina:

Estandarización de NaOH :

Volumen de NaOH gastado en el blanco = 0.05ml

Volumen Volumen
Ensayo Biftalato (g) NaOH (ml) corregido [NaOH] (M)
NaOH (ml)
1 0.2416 11.9 11.85 0.0996
2 0.2127 10.6 10.55 0.0986

[ NaOH ] =0.0991 ±7.07 x 10−4

Estandarización de H 2 SO 4 :

Se tomaron alícuotas de 10ml del ácido y se uso como indicador fenolftaleína.

Volumen de NaOH gastado en blanco = 0.05ml

 Volumen Volumen
Ensayo NaOH (ml) corregido de [ H 2 SO4 ]
NaOH (ml) (M)
1 10.1 10.05 0.0498
2 9.9 9.85 0.0488

[ H 2 SO4 ]=0.0493 ±7.07 x 10−4

Determinación de nitrógeno en la muestra de harina:

Moles de H2SO4 iniciales:

[H2SO4] x Volumen = (0.0493M) x (25x10-3L) = 1.23x10-3moles

Moles de NaOH gastadas para la titulación:

[NaOH] x Volumen = 0.0991M x 13.6x10 -3L = 1.35x10-3moles

Por estequiometría, tenemos que 2 n H 2 S O4 =nNaOH

Entonces, las moles finales de H2SO4 para el blanco son:

n de NaOH 1.35 x 10−3 −4

= =6.74 x 1 0 moles de ácido sulf ú rico en exceso
2 2

Luego, es posible hallar las moles de NH3 presentes ya que:

n amoniaco=2[ ( nácido iniciales )−(nácido en exceso )]

n amoniaco=1.112 x 10−3

Luego, n amoniaco=nnitrogeno

−3
Y, n nitrogeno=1.112 x 10

n nitrogeno muestra=n nitrogeno−nblanco =1.112 x 10−3−5 x 10−6

n nitrogeno muestra=1.107 x 1 0−3

14 g
gramos de N muestra =nnitrogeno muestra x =0.015 gr
1 mol de nitrógeno
gramos de nitrógeno 0.015 g
% N muestra= x 100 %= x 100 %=1.52%
peso muestra 1.0215 g

% proteína teórico: 10%

% proteína experimental: 1.52% x 5.7 (factor de conversión de nitrógeno a proteína)=8.65%

10−8.65
%Error= x 100 %=13.52 %
10

6. Discusión y observaciones:

Se pesó 1,0232 g. de sacarosa, para utilizar como blanco del método y se colocó en el balón de
digestión. A continuación, se agregaron 5g de sulfato de potasio, 0.3g de sulfato de cobre (II),
ambos catalizadores en la reacción, y 10mL de ácido sulfúrico concentrado. Al agitar y
homogenizar, la solución resultante se tornó de color marrón oscuro-negro. Además, se agregaron
algunos pedazos de porcelana para evitar salpicaduras al momento de la ebullición.

Con ayuda de pinzas y un soporte universal, se procedió a calentar el balón con un mechero
Fischer. Inicialmente, no se observaba cambio alguno en la muestra, pero luego de
aproximadamente media hora de calentamiento, se observó que el color se fue aclarando,
primero ligeramente a un tono anaranjado, hasta obtener finalmente una tonalidad celeste-
verdosa y transparente.
La siguiente reacción se lleva a cabo:

Sacarosa+ Nitrógeno+ H 2 SO 4 +catalizadores +calor → C O 2 +¿

Luego que ocurrió el cambio de color, se dejó en ebullición por 15 minutos más, para asegurarnos
de que todo reaccionó, y se dejó enfriar a temperatura ambiente. Mientras tanto, se procedió a la
estandarización de las soluciones.

Es necesario mencionar, que se cometió un error en la estandarización del ácido sulfúrico, ya que
se colocó el hidróxido de sodio en el matraz, y se utilizó como agente titulante al ácido. Entonces,
para poder continuar sin desechar la solución, se cambió de indicador de fenolftaleína a rojo de
metilo, y se continuó con el procedimiento.

Una vez frío el balón, se agregaron 100mL de agua y se disolvió la solución restante. Se trasvasó a
un balón de 500mL y se preparó el equipo de destilación que se muestra a continuación:

Imagen 1. Equipo de destilación

En el balón (izquierda), se observa la solución que se obtuvo después de la digestión, con 100mL
de agua, 50mL de NaOH al 30% y pedazos de porcelana. En el matraz recolector (derecha), se
colocó una solución de 25mL de ácido sulfúrico 0.05M con 4 gotas de indicador rojo de metilo.

Al agregar el hidróxido de sodio, se conectó de manera inmediata el balón al sistema, ya que se

forma amoníaco en forma de gas, que luego es condensado y recibido en el matraz con ácido
sulfúrico e indicador, y de hacerlo lentamente, se perdería nitrógeno. Acá se incurrió en un error,
ya que al agregar el hidróxido, no se conectó tan rápido al sistema de destilación, pues el sistema
estaba mal ensamblado y se tuvo que arreglar para poder conectar el balón.

La siguiente reacción se llevó a cabo:

El amoníaco formado por la reacción, en forma de gas, se condensaba al pasar por el tubo que
contenía un agente refrigerante, de manera que caía en el matraz como amoníaco acuoso, que a
su vez, reaccionaba con el ácido sulfúrico presente en la solución.

2NH3 +2H2SO4 → (NH4)2SO4 + H2SO4

Entonces, como el amoníaco que se forma es “atrapado” por el ácido sulfúrico, el pH se mantiene
bajo, y por ende, el indicador no cambia de color hasta que se efectúa la titulación.

Se destiló calentando el balón con un mechero bunsen, hasta llegar a recolectar un volumen de
aproximadamente 75mL.

Cuando esto finalizó, se procedió a la titulación del exceso de ácido sulfúrico, que no reaccionó
con el amoníaco formado en la reacción anterior, con hidróxido de sodio. Se pudo ver el punto de
equivalencia cuando la solución rosada se tornó amarilla y con eso se dio fin a la titulación.

El error de 15.4% nos indica que existieron algunas fuentes de error en el experimento, la más
probable es que el nitrógeno se haya perdido durante la digestión, por la digestión incompleta de
la muestra, o al momento de conectar el sistema de destilación al agregar el hidróxido de sodio.
Además, si la salida del destilado no quedaba sumergida en la solución de ácido, el amoníaco
podía escapar al ambiente y así, el porcentaje hallado es menor al real.
7. Conclusiones:

- Se determinó el porcentaje de nitrógeno en la muestra de harina por el método de

Kjeldahl, obteniéndose 1.52% y un error de 13.52%.

- La modificación realizada al método de Kjeldahl que antes se usaba en el laboratorio

resultó exitosa, obteniéndose un rendimiento relativamente alto en una menor cantidad
de tiempo.

8. Bibliografía:

- Vogel’s Textbook of quantitative chemical analysis 5 th ed. Editorial Longman. Nueva York,
1989. Pp.302-303.
- Instituto de salud pública de chile. Determinación de proteínas. En:
http://www.ispch.cl/lab_amb/met_analitico/doc/ambiente%20pdf/Proteina.pdf. Visitado
el día: 09 de junio de 2010.
- Cole-Parmer technical library. Kjeldahl Method for determining nitrogen. En:
http://www.coleparmer.com/techinfo/techinfo.asp?htmlfile=KjeldahlBasics.htm&ID=384.
Visitado el día: 09 de junio de 2010.