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UV TOXICOLOGIA
FACULTAD DE BIOANALISIS
TOXICOLOGIA.
CONTENIDO:
1. RECONOCIMIENTO DE MATERIAL DE LABORATORIO DE TOXICOLOGIA.
6. DETERMINACION DE FENOTIACINAS.
8. DETERMINACIÓN DE ANFETAMINAS.
PRACTICA NO. 1
RECONOCIMIENTO DE MATERIAL DE
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA
MATERIAL DE VIDRIO PARA MEDIR:
OBJETIVOS:
Fundamento:
Termómetro. Permite observar la temperatura que van alcanzando algunas sustancias que
se estudian calentando.
Matraz de destilación.
Kitazato.
Picnómetro. Aparato que se utiliza para determinar las densidades de distintas sustancias.
MATERIAL METALICO:
Tripie. Se utiliza como base del material que deba ser calentado.
Soporte universal.
Pinzas para tubo de ensayo. Sirven para presionar o sujetar los tubos de ensayo.
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FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
Tela de alambre con asbesto.
Espátula. Permite tomar sustancias químicas. Evitando que los reactivos se contaminen.
MATERIAL DE PORCELANA:
Utensilios volumétricos.(UV)
Bureta
Es un utensilio que permite medir volúmenes, es muy útil cuando se realizan neutralizaciones.
Matraz volumétrico
Son matraces de vidrio que se utilizan cuando se preparan soluciones valoradas, los hay de
diversas medidas como: de 50 ml, 100 ml, 200 ml, 250 ml, 500 ml,1 L. étc.
Pipetas
Son utensilios que permiten medir volúmenes. Las hay en dos presentaciones:
a) Pipetas graduada: Es un elemento de vidrio que sirve para dar volúmenes exactos, con
esta pipeta, se pueden medir distintos volúmenes de líquido, ya que lleva una escala graduada.
b) Pipeta volumétrica: Es un elemento de vidrio, que posee un único valor de medida, por
lo que sólo puede medir un volumen.
Las pipetas graduadas permiten medir volúmenes intermedios, pues están graduadas,
mientras que las pipetas vulumétricas sólo miden el volúmen que viene indicado en ellas.
Probeta
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FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
Es un utensilio que permite medir volúmenes están hechas normalmente de vidrio pero
también las hay de plástico. Así mismo las hay de diferentes tamaños (volúmenes).
Frasco gotero
Permite contener sustancias. Posee un gotero y por esa razón permite dosificar las sustancias
en pequeñas cantidades.
Tubos de ensayo
Estos recipientes sirven para hacer experimentos o ensayos, los hay en varias medidas y
aunque generalemnte son de vidrio también los hay de plástico.
Aparatos
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FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
Balanza analítica
Es un aparato que está basado en métodos mecánicos tiene una sensibilidad de hasta una
diezmilésima de gramo.
Balanza granataria
Es un aparato basado en métodos mecánicos tiene una sensibilidad de una décima de gramo.
Agitador magnético
Este aparato tiene un agitador magnético y por esta razón permite calentar sustancias en
forma homogénea.
Es un aparato que permite medir que tan alcalina (básica) o ácida esta una sustancia.
Mufla
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FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
Parrilla eléctrica
OBSERVACIONES:
Observe que los materiales de laboratorio, constituyen una actividad de vital importancia en el
desempeño de cada uno de los experimentos que se llevan a cabo. Por ello es necesario que el
estudiante conozca debidamente el material que mas frecuentemente se usará en el laboratorio de
toxicología, para que sea capaz de seleccionarlo y usarlo adecuadamente. El material de laboratorio
esta constituido de diferentes materias primas como son: vidrio, metal, porcelana y varios.
CONCLUSION:
Durante esta práctica conocí y puede usar el material y equipo más común de laboratorio de
toxicología. Además conocí técnicas fundamentales de laboratorio. Entretanto en la práctica me
personalice con los materiales de laboratorio. Por lo tanto esta práctica fue muy necesaria para que el
material que más frecuentemente se usará en el laboratorio de toxicología, sea capaz de seleccionarlo y
usarlo adecuadamente para futuras prácticas de toxicología.
BIBLIOGRAFIA:
Wikipedia® es una marca registrada de la organización sin ánimo de lucro Wikimedia Foundation, Inc.
http://es.wikipedia.org/wiki/Material_de_laboratorio_(qu%C3%ADmica)
PRACTICA NO. 2
OBTENIDO EN: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 15/01/08 11
FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
IDENTIFICACION DE CANNABIS SATIVA.
OBJETIVO:
Identificación visual y directa por palpación.
FUNDAMENTO:
Descripción
El cáñamo amarillo es una planta anual dioica. Presenta tallos con hojas opuestas
en la base y alternas en el resto, palmaticompuestas con estípulas libres o
persistentes. Flores anemófilas, monoicas o dioicas; pequeñas, en inflorescencias
cimosas, las masculinas ramificadas, paniculiformes y con muchas flores, las
femeninas más compactas y paucifloras.
Farmacología
Las plantas hembras que no han sido polinizadas se denominan “marihuana sin
semilla”. Éstas son las que contienen la mayor cantidad de THC, debido a que la
no polinización produce un estrés en la planta que hace que aumente la cantidad
de THC. Los machos se deben desechar en el cultivo, salvo para poder polinizar y
hacer semillas, pero las plantas polinizadas aportarán sobre todo semillas, en
detrimento de la resina psicoactiva.
CONSUMO
CÓMO SE TOMA
Permanencia en el organismo
MATERIAL:
EQUIPO:
*Microscopio
EQUIPO DE MUESTRA:
*Cannabis Sativa (Marihuana).
Método:
Ela alumno palpa la Cannabis e inmediatamente se le aplica por contacto cinta
adhesiva transparente en la yema de los dedos que estuvieron en contacto con la
marihuana, posteriormente la cinta adhesiva es colocada sobre el portaobjeto y
se observa al microscopio con la finalidad de identificar los rizomas de la
Cannabis que tiene un aspecto de uña de gato.
OBSERVACIONES:
Se observa residuos o fibras de canabis, también aire atrapado entre portaobjeto
y la cinta adhesiva y por ultimo se encuentra los rizomas que tienen forma de una
de gato al observarse al microscopio.
ESQUEMA:
CONCLUSION:
He concluido que es un método sencillo, práctico y rápido para identificar a
personas que han manipulado recientemente cannabis.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.tuotromedico.com/temas/drogas_cannabis.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Cannabis_%28droga%29
PRACTICA NO. 3
FUNDAMENTO:
TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN.
Son diversos los métodos empleados para obtener los alcaloides en forma pura de la
planta que los contiene, pues los compuestos poseen diferentes grados de solubilidad,
pero en todos ellos se aprovecha su carácter básico, algunas técnicas para extraerlos son:
El extracto que contiene la sal se deja en reposo, para que suelten las resinas y grasas y luego se
filtra.
Se trata la disolución ácida con un solvente inmiscible, que extrae más grasas y resinas.
METODO: Se hace en orina, se extrae con éter de petróleo, luego se evapora a sequedad, a
temperatura ambiente, para sembrar en la placa, disolver con 5 gotas de cloroformo.
ANALISIS CUALITATIVO
Prueba de Duquenosis - Levine. 200 mg. de la muestra con 25 ml. de éter de petróleo, filtrar
y evaporar a sequedad en baño de maría, luego agregar 2 ml. de reactivo de Duquenosis.
Agregar 2 ml. de HCL y dejar en reposo por 10 minutos.
MATERIAL:
• 2 Soporte Universal.
• 1 Refrigerante.
• 2 Pinza de 3 dedos.
• 1 Matraz de balón.
• 1 Mechero Bunsen.
• 1 Tripie.
• 1 Tela de Asbesto.
• 2 Mangueras.
• 1 Vaso precipitado.
REACTIVOS:
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FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
• Duquenois.
• Cloroformo.
• Éter de petróleo.
• Benceno.
PREPARACION DE DUQUENOIS:
1.- 0.5 ml de acetaldehído mas 1 g de vainillina (extracto de vainilla) y aforar a 50 ml con alcohol
etílico.
MATERIAL BIOLOGICO:
• Canabis Sativa.
TECNICA:
1.- A una porción de material sospechoso se le agrega de 50 a 100 ml del solvente indicado
(cloroformo).
3.- Se coloca 1 ml del extracto en un tubo de ensayo se agrega de 1 a 2 ml del reactivo Duquenois, se
agita 1 minuto.
4.- Y se le añade 1 ml de acido clorhídrico concentrado este tomara si es positivo una coloración que
puede ir dependiendo de la concentración rosa, violeta, verde y finalmente azul oscuro.
5.- Por último añadir de 2 a 5 gotas de cloroformo, si el color pasa a la capa cloroformica va ser
positivo.
ESQUEMA: }
OBSERVACIONES Y RESULTADOS:
CONCLUSION:
BIBLIOGRAFIA:
• Encarta 1999.
PRACTICA NO. 4
OBJETIVO:
Determinación de Acido Acetil-Salicilico (AAS) en suero.
GENERALIDADES:
MATERIAL:
• 13 Tubos de ensaye de 13 x 100
• 1 Pipeta automática de 200 ul
• Puntillas para pipeta automática
• Gradilla
• Matraz aforado de 250 ml
• Matraz aforado de 100 ml
• 2 pipetas de 1ml
• 1 pipeta de 5ml
MATERIAL BILÓGICO:
• Suero
EQUIPO:
• Espectrofotómetro
• Balanza analítica.
REACTIVOS:
• Agua destilada
• Reactivo de color
• Acido acetil-salicilico
• Cloroformo
TECNICA:
ESTANDAR DE SALICILATO:
ESTANDAR DE TRABAJO:
Se diluyen 25 ml del estandar de salicilato y se diluye a 100 ml con
agua destilada, se agregan unas gotas de cloroformo como preservativo
y esta solución contiene .5 mg de ac. Salicilico sobre mililitro.
A B C D E
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FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
ml de st de
trabajo 0.2 ml 0.4 ml 0.6 ml 0.8 ml 1.0 ml
ml de H2O
destilada 0.8 ml 0.6 ml 0.4 ml 0.2 ml
Concentración
conocida 10mg/100ml 20mg/100ml 30mg/100ml 40mg/100ml 50mg/100ml
PROBLEM BLANC ST A ST B ST C ST D ST E
A O
Reactivo
de color 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
H2O
destilada 200 ul
A 200 ul
B 200 ul
C 200 ul
D 200 ul
E 200 ul
Suero
problema 200 ul
Volume
n final 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml 1.2 ml
Leer a 540 nm
RESULTADOS:
CONCENTRACION: ABSORBANCIA:
ESTÁNDAR A 10 mg/dl 0.288 nm
ESTÁNDAR B 20 mg/dl 0.467 nm
ESTÁNDAR C 30 mg/dl 0.715 nm
ESTANDAR D 40 mg/dl 0.904 nm
ESTÁNDAR E 50 mg/dl 1.087 nm
PROBLEMA 7 mg/dl 0.184 nm
Resultado obtenido con ayuda de la curva de concentración de ASS.
OBSERVACIONES y ESQUEMAS:
CONCLUSIONES:
He concluido que, el AAS, administrado por vía oral, se absorbe rápidamente. El ácido acetilsalicílico
actúa interrumpiendo la producción de las prostaglandinas, por lo que no hay "mensajeros del dolor".
Así, gracias a la utilización de ASS, se restablece la temperatura normal del organismo y se alivia el
dolor. Por lo cual esta técnica es útil para identificar personas que han consumido con exceso ASS y
determinar su concentración en suero.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.aspirina.com/aspirinaProf/default_aspirina.htm
http://www.aspirina.com/aspirinaProf/default_prinActivo.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_acetilsalic%C3%ADlico
http://www.aspirina.cl/que_es.asp
PRACTICA NO. 5
Determinación de Acido Acetil-Salicilico (AAS) en Orina.
OBJETIVO:
Determinación de Acido Acetil-Salicilico (AAS) en orina.
GENERALIDADES:
La aspirina se une poco a las proteínas del plasma, pero debe ser
administrada con precaución a pacientes tratados con fármacos que se
fijan fuertemente a las proteínas del plasma, como es el caso de los
anticoagulantes y antidiabéticos orales.
MATERIAL:
• Tubos de ensaye de 13 x 100
• 1 Pipeta automática de 200 ul
• Puntillas para pipeta automática
• Gradilla
• 2 pipetas de 1ml
MATERIAL BILÓGICO:
• Orina.
EQUIPO:
• Espectrofotómetro
REACTIVOS:
• Agua destilada
• Reactivo de color
• Acido Fosforico.
TECNICA:
PROBLEMA: TESTIGO:
BLANCO: PROBLEMA: BLANCO: TESTIGO:
Reactivo de 1 ml 1 ml 1 ml
color:
Agua 200 ul 1 ml
Destilada:
Orina 200 ul
Diluida 1:10
Acido 200 ul
Fosforico.
CALCULOS:
Donde:
• Factor de Dilución: 10
• Abs. Problema: 0.085 nm.
• Abs. Testigo: 0.010 nm.
RESULTADO:
Concentración de ASS en orina:
OBSERVACIONES Y ESQUEMAS:
CONCLUSIONES:
El ácido acetilsalicílico se absorbe rápida y completamente. Su
absorción puede variar dependiendo de la disolución del comprimido el
pH y los alimentos. La vida media del ácido acetilsalicílico de 15 a
20 minutos para la molécula intacta. El tiempo para la concentración
máxima es de 1 a 2 horas para el ácido acetilsalicílico. El ácido
acetilsalicílico se elimina por vía renal en forma libre y como
metabolitos conjugados.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/a015.htm
http://www.aspirina.com/aspirina01.htm
PRACTICA No 6
DETERMINACION DE FENOTIACINAS
Las fenotiazinas son antagonistas de la dopamina que actúan por vía central
bloqueando la zona de activación de los quimiorreceptores. Son de especial
interés en la profilaxis y tratamiento de las náuseas y vómitos asociados con las
enfermedades neoplásicas difusas, la enfermedad por radiación y la émesis
causada por fármacos como los opioides, los anestésicos generales y los
citotóxicos. La proclorperazina, la perfenazina y la trifluoperazina son menos
sedantes que la clorpromazina; las fenotiazinas pueden producir reacciones
distónicas graves, sobre todo entre los niños. Otros antipsicóticos como el
haloperidol y la levomepromazina (metotrimeprazina) también se emplean
para aliviar las náuseas. Algunas fenotiazinas se suministran en supositorios para
administración rectal, que pueden resultar útiles a los pacientes con vómitos
persistentes o con náuseas intensas; la proclorperazina también se puede
administrar en un comprimido bucal que se coloca entre el labio superior y la
encía.
METABOLISMO:
Se administra por vía oral y parenteral. La absorción ocurre entre 30 a 60 minutos después de la
ingestión. La misma es incompleta y sólo se aprovecha el 30% de lo administrado. El pico plasmático
máximo aparece transcurridas 2 a 4 horas. Son sustancias con elevada liposolubilidad que atraviesan la
placenta, pudiendo presentar el feto efectos adversos y teratogénicos.
Se excreta en su mayor parte por riñón y en una pequeña proporción por bilis.
MANIFESTACIONES CLINICAS:
Material
• 1 vaso de pp de 250 ml
• 4 tubos de ensayo de 13 x 100
• 1 pipeta graduada de 2 ml
• 1 perilla
• 1 pipeta pasteur
Muestra biológica
• Orina
Técnica
Valores de referencia:
5 – 20mg por dia el vire de rosa a naranja
25 – 70mg por dia el vires rosa intenso.
75 – 120mg por dia el vire violeta.
Esquemas:
Resultados:
• Muestra 1: negativo
• Muestra 2: positivo coloración = rosa intenso = 25-70 mg/dia
• Muestra 3: negativo
• Blanco: negativo
Conclusión
He concluido que las fenotiazinas se usan para tratar enfermedades nerviosas, mentales y emocionales.
Algunos también se usan para controlar la ansiedad o agitación en ciertos pacientes, las náuseas y
vómitos muy fuertes, el hipo muy fuerte y el dolor moderado a muy fuerte. Y que por medio de esta
técnica se puede conocer concentraciones elevadas de fenotiazina en el organismo de un individuo.
Bibliografia
http://healthlibrary.epnet.com/GetContent.aspx?token=8482e079-8512-47c2-960c-
a403c77a5e4c&chunkiid=124870
http://www.cancer.gov/espanol/pdq/cuidados-medicos-apoyo/nausea/HealthProfessional/page6
http://www.infodoctor.org/www/meshd.htm?idos=20968
PRACTICA No. 8
OBTENIDO EN: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 15/01/08 31
FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
OBJETIVO:
Determinación cualitativa de hierro en suero
FUNDAMENTO:
La determinación del hierro sérico nos indicará la cantidad de hierro unido a la transferrina
Se utiliza para evaluar la presencia de una anemia, principalmente la ferropénica o
microcítica.
La falta de hierro en el organismo se puede deber a la falta de su consumo en la dieta, la
alteración en su absorción intestinal, aumento en su consumo (niños en crecimiento, mujeres
embarazadas), o por un aumento de pérdidas (hemorragias, menstruación, perdidas
gastrointestinales ocultas, etc...)
Si falta el hierro en el organismo se disminuye la formación de hemoglobina y por ello los
glóbulos rojos aparecen pequeños, pálidos, que es lo define una anemia microcítica o
hipocroma. En este caso aparece bajo el nivel de hierro en sangre, la CTCH (capacidad de
captación del hierro y transferrina) estará elevada y la saturación de transferrina aparecerá
baja.
El exceso de hierro puede aparecer en forma de hemocromatosis o hemosiderosis, con
exceso de depósito en diferentes órganos (cerebro, hígado, corazón) causando
enfermedades secundarias.
MATERIAL:
• 4 Tubos de ensaye de 12 x 75
• Pipetas automaticas
• Pipetas de 5 ml
• Gradilla
REACTIVO:
• Ferrocianuro de potasio al 10 % (K3Fe(CN)6)
OBTENIDO EN: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 15/01/08 32
FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
• HCl
• Agua destilada
MATERIAL BIOLOGICO:
• Suero
TECNICA:
PROBLEMA TESTIGO
SOL. SALINA 1 ML 1ML
SUERO 20 ul -------
H2O DEST -------- 20 UL
(K3Fe(CN)6) 100 ul 100 ul
VALORES DE REFERENCIA:
Niveles normales de Hierro en adultos hombre de 80 a 180 µg/dl
Niveles normales de Hierro en adultos mujeres de 60 a 160 µg/dl
Niveles normales de Hierro en niños menores de 1 año de 100 a 250 µg/dl
Niveles normales de Hierro en niños de 50 a 120 µg/dl
OBSERVACIONES:
CONCLUSION:Podemos concluir que la determinación del hierro sérico nos indicará la cantidad de
hierro unido a la transferrina.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.tuotromedico.com/temas/hierro_en_sangre.htm
http://www.labtestsonline.es/tests/SerumIron.html
Practica 8
Determinación de Anfetaminas
OBTENIDO EN: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 15/01/08 33
FAC. BIOANALISIS. UV TOXICOLOGIA
OBJETIVO:
• Determinación de anfetaminas en orina.
GENERALIDADES:
Química
Mecanismo de acción
MATERIAL BILÓGICO:
• Orina.
REACTIVOS:
No se utilizo ningún reactivo específico.
TECNICA:
RESULTADOS:
Muestra: Positiva
ESQUEMAS
CONCLUSION
Concluyo que la intoxicación por anfetaminas se presenta con una
sensación de bienestar, seguida por la aparición de euforia,
sensación de vigor, tendencia al contacto social, hiperactividad,
inquietud, hipervigilancia, sensibilidad interpersonal, locuacidad,
ansiedad, tensión, estado de alerta, grandiosidad, comportamiento
esteriotipado y repetitivo, cólera, rabia, violencia y deterioro de
juicio.
BIBLIOGRAFIA
http://www.camporenacimiento.com/adiccion/anfetaminas.htm
Practica No.9
Determinación de Marihuana y Cocaína
OBJETIVO:
GENERALIDADES:
MATERIAL:
Tira reactiva para determinar marihuana y cocaína
MATERIAL BIOLÓGICO:
Orina
TECNICA:
1.- Abra el sobre metalizado e inmediatamente escriba el
nombre del paciente en la zona de identificación ID y
fecha.
2.- Abra el cassette dejando al descubierto las partes
inferiores de las tirillas.
3.- Sumerja en la muestra de orina los cojines de absorción
a fin de que cada tirilla pueda absorber durante por lo
menos 10 segundos suficiente muestra. Si así lo prefieres,
puede mantener la prueba en contacto con la muestra hasta
el final del proceso (máximo 5 minutos).
RESULTADOS:
Muestra de orina:
Positiva para Cocaína
Negativa para Marihuana
ESQUEMAS:
CONCLUSIONES:
Bibliografía:
http://www.telemedik.com/articulos.php?id=120
http://es.wikipedia.org/wiki/Cannabis_sativa
FUNDAMENTO:
GENERALIDADES:
MATERIAL Y EQUIPO:
Cantidad Material
1 Pipeta automática
1 Pipeta pasteur
3 Tubos de ensayo de 15 x 150
1 Vaso de precipitado de 250 ml
30 Puntas para pipeta automática
REACTIVOS:
Cantidad Reactivo
100 µl Agua destilada
3 gotas Ácido clorhídrico concentrado
300 µl Ferrocianuro de potasio al 10%
MATERIAL BIOLOGICO:
Suero
TECNICA:
• Si hay presencia de hierro (concentraciones mayores de 600 mg/dl) en suero se forma una
coloración azul Prusia.
• Valores normales de Hierro en sangre: 50 mg/dl
• Valores superiores de Hierro en sangre: 600 mg/dl
OBSERVACIONES:
Hay que tener presente que se tornara el color azul de Prusia cuando los valores de hierro sérico
sobrepasen los 600 mg/dl, pues si son menores, aunque este presente no habrá viraje.
CONCLUSIONES:
ESQUEMAS:
RESULTADOS:
BIBLIOGRAFIA: