Identificação Humana

Disciplina de Genética

Profª Carla Streit

Alunos:
Daniela Maffi
Juan Zambon
Andrea Rodales

Fonte: http://www.hemmy.net/2006/08/13/fingerprint-illusions/
 O que é Identificação
Humana?

“Identidade pode ser descrita como a

soma de caracteres que individualizam uma
pessoa, distinguindo-a das demais”
Identificação

Fonte: http://www.coletoresimpress.com.br

“É o emprego de meios adequados para

determinar a identidade ou não
identidade de um indivíduo.”
Identificações não-
conclusivas
 Tipagem sanguínea (AB0,
Rh)
 Marcas e tatuagens
 Identificação visual
 Tamanho do pé
(antropometria)
 Impressão auricular Fonte: http://www.quigleychiro.com/
Identificações Conclusivas
Impressões papilares
(digitais, plantares,
palmares)
Desenho dos seios faciais
Desenho do palato
Arcada dentária
Impressões labiais
Iris
DNA

Fonte: http://www.hemmy.net/2006/08/13/fingerprint-illusions/
Identificação por DNA

Fonte: http://publications.nigms.nih.gov/
Enzimas de
Restrição

Moléculas de DNA são muito

longas
Consiste em milhões de pares de bases

Para estudar a estrutura do DNA, as moléculas

são quebradas em fragmentos menores
por enzimas chamadas enzimas de restrição

Enzimas de restrição não quebram

aleatoriamente o DNA:
Quebra ocorre em lugares específicos
Fragmentos de
restrição
Por exemplo, uma enzima chamada EcoR1*
‘reconhece’ a sequência CAATTC e corta entre os dois As:

reconhecido

--C-C-G-C-A-G-C-T-G-T-C-A-A-T-T-C-T-C-T-C-C-G-G-A-T-C-C-A

cortado
--C-C-G-C-A-G-C-T-G-T-C-A A-T-T-C- T-C-T-C-C-G-G-A-T-C-C-A-

Outras enzimas de restrição cortam o DNA em lugares

diferentes produzindo fragmentos mais fáceis de analisar

--C-C-G-C-A-G-C-T-G-T-C-A A-T-T-C-T-C-T-C-C-G-G-A-T-C-C-C-A-

--C-C-G-C-A-G C-T-G-T-C-A A-T-T-C-T-C-C-G G-A-T-C-C-C-A-

O fragmento cortado pelas enzimas de restrição é
chamado fragmento de restrição

Os fragmentos podem ser separados usando

eletroforese de gel
Genetic fingerprinting
Aprox. 90% ou mais do DNA não carrega trincas
que codificam proteínas.

A área que não codifica DNA é chamada ‘DNA lixo’ mas na verdade
essa área ainda não teve sua função completamente estudada.

Algumas das regiões não codificadoras consistem em sequências

Repetidas de nucleotídeos.

Por exemplo -C-A-T-G-C-A-T-G-C-A-T-G-C-A-T-G- *

O número de repetições numa seção de DNA varia de um

Indivíduo para outro

Como essas seções não codificam proteínas (não são genes),

não há diferença observável nesses indivíduos
Genetic fingerprinting
Enzimas de
Restrição

Áreas particularmente repetitivas podem ser ‘recortadas’

por enzimas de restrição
Por exemplo:
Enzima de restrição corta

aqui……………e…..….…..aqui

-CATCCACGACATGCATGCATGCATGCCACATCCA-
ou

aqui…….…..…..………e…...….…………..aqui

-CCACGACATGCATGCATGCATGCATGCATGCCACAT-
Eletroforese de Gel
Fragmentos de diferentes tamanhos são separados pela
eletroforese de gel

A separação ocorre numa camada de substância gelatinosa, o gel

Amostras de DNA extraídos são colocados em

cavidades (poços) cortados no fim do gel

Uma certa voltagem é aplicada na ponta oposta do gel

DNA tem carga negativa e se move vagarosamente

em direção ao polo positivo

O fragmento menor atravessa o gel mais rápido que os

fragmentos maiores
Gel electrophoresis
Eletroforese de
Gel
Extrato de DNA
adicionado
poço

Camada de gel

solução
Gel
electrophoresis

Amostras de DNA
Nos poços no gel
Fatia de gel
Voltagem

Eletrodo negativo

Eletrodo DNA se move do pólo

positivo + Negativo para o positivo
A amostra com fragmentos
menores de DNA atravessam
o gel mais rápido que
fragmentos maiores
 Aparência de fragmentos separados no gel

Fragmentos
menores de
DNA

Fragmentos
maiores de DNA

©© Prof.
Prof. E. Wood
E.J.Wood

Posições iniciais Aparência das

bandas
Genetic fingerprinting

Análise de DNA pode ser usada para incriminar (ou inocentar)

suspeitos, estabelerer parentesco, descobrir quão próximos
organismos estão e várias outras aplicações

O padrão das bandas na eletroforese de gel é conhecido como

genetic fingerprint (“impressão digital genética”)
ou um perfil genético

Se uma impressão digital genética numa amostra

de sangue ou outro tecido na cena do crime coincide com a
“impressão digital genética“ do suspeito, isto pode ser usado
como evidência
Uma amostra de DNA pode ser obtida do suspeito utilizando
desde sangue, células epiteliais da mucosa bucal até caspa
(epitélio do couro cabeludo escamando do suspeito)

Genetic fingerprinting
Chances de Suponhamos que…………
coincidência
….há uma chance de 1 in 10 que este fragmento
ocorra em vários indivíduos

…e que há a chance de 1 in 20 que este

fragmento ocorra em vários indivíduos

…e que há a chance de 1 in 10 que este

fragmento ocorra em vários indivíduos…

…e que há a chande de 1 in 30 que este

fragmento ocorra em vários indivíduos,
mas…
Probabilidade de
coincidência

…a probabilidade que todas as 4 bandas coincidirem com outra

pessoa é
1 em 10 x 1 em 20 x 1 em 10 x 1 em 30

= 1 em 10 x 20 x 10 x 30 Que é 1 em 60,000

Quando um número maior de bandas está envolvido, a

probabilidade do suspeito não ser culpado se torna um em milhões*
 Perfis de
V S S1 S2 S3 DNA
V Vítima

S Amostra da cena do crime

S1 Suspeito 1

S2 Suspeito 2

S3 Suspeito 3

Mais de 20 fragmentos
do Suspeito 1 coincidem
com a amostra coletada
na cena do crime

Fonte: http://www.biology-resources.com/
 Evidências por genetic fingerprinting:

Genetic fingerprinting é uma poderosa ferramenta em processos

criminais mas…

Muitos fragmentos de restrição podem superlotar uma

única banda

Pode haver variação na velocidade em que os fragmentos

atravessam o gel

Pode haver contaminação com DNA ‘estranho’ como

bactérias, má coleta etc

O juri pode não conhecer a significância do fingerprinting genético

e pode se tornar dependente de explicações dúbias de ‘experts’

Pode haver agumentos sobre a significância estatística de uma

Coincidência entre perfis de DNA
Evidence from genetic fingerprinting
Limitações das evidências
por DNA

Mesmo que haja concordância quanto a coincidência do DNA

do suspeito e amostras forenses, isso simplesmente mostra que o
suspeito passou pela cena do crime e isto não prova que o suspeito
cometeu o crime

Evidência de DNA somente pode ser considerada prova de culpa se

houver outra forma de evidência

Em de disputa de paternidade, a evidência genética é conclusiva

Paternidade pode ser decidida em base de um único sítio de

restrição
Paternity
mãe pai
test

Posição do Parte do DNA

gene de
restrição

criança

A criança recebe uma cópia do fragmento de restrição do pai e um da mãe

Pode ser qualquer das combinações.
 Fingerprint Genético da …
1 mãe
2 criança

3 possível pai A

4 possível pai B

Há uma coincidência entre um

fragmento de restrição
da criança e um da mãe.

Há também coincidência entre o outro

fragmento da crianã e do possível
pai A.
Nenhum dos fragmentos de restrição
Coincidem com os do possível pai B
1 2 3 4

Posição inicial da amostra Paternity test

 Projeto Genoma Humano

Mapear todo o genoma de um indivíduo

O Genoma inclui:
Todos os cromossomos
Todos os genes nos cromossomos
E todo o DNA nos cromossomos

O progeto genoma humano visa…

Identificar os genes no genoma humano (~25,000*)

Descobrir a sequência de pares de bases (~2.8 bilhões)

99% das partes que contém genes do DNA humano foram

analisadas em 2003

Human genome project

 Mapeamento is a identificação de genes e suas
disposições no cromossomo

Técnicas modernas de bioquímica são usadas para verificar

genes e suas posições no cromossomo

Métodos especiais de coloração revelam bandas nos

Cromossomos. Estes não necessáriamente representam genes
mas ajudam a identificar a posição destes.

Chromosomo 7

Posição do gene da fibrose cística

Chromosomo 11

Posição do gene da anemia falciforme

Mapeamento
Cromossomos
Gigantes
Com colorações especiais,bandas aparecem no
“Cromossomo gigante” da mosca da fruta
(Drosophila)

© Biophoto Associates
 As bandas não necessáriamente representam genes,
mas, em moscas mutantes, se alguma banda falta, há
um defeito correspondente na mosca

Se bandas faltam nessa região, Se falta bandas aqui, as asas

a mosca não tem coloração dos olhos ficam irregulares
(normalmente vermelho)

A perda dessa banda provoca uma Uma ou mais bandas dessa

Mudança na textura dos olhos Região controlam o desenvol-
Vimento de pelos na mosca
Chromosome banding
 25
Sequenciamento

Sequenciamento visa conhecer a sequência de

Nucleotídeos no DNA

Análise de um pequeno trecho de DNA pode dar

Resultados como este:
GCTTATCGATTCGGTGATACCATAGTGTAGTGTAGTCGCT
ATCCATCGCTTACGAGTCTGATGCGCATTAGCTAGCTAGCT
AGCTAGCCTCAGTTGATCATCGAGTGAGTACTGGACCATG
C
Uma análise posterior é necessária para decidir que sequências
Codificam proteínas e representam genes

Sequencing
 Aplicação dos resultados do
Projeto Genoma Humano
Identificação de genes defeituosos e de
Tratamento precoce

Identificação de genes que podem fazer a pessoa

suscetível a certas doenças, permitindo cuidado precoce

Predição das proteínas que os genes produzem, oferecendo a

oportunidade de estimular ou inibir proteínas por
drogas especialmente desenhadas para isto

Mas... Entre os efeitos negativos…

Seguradoras recusando pessoas que tenham risco de
desenvolver uma doença

Predição de uma doença ou deficiência podem abalar o equilíbrio

emocional do indivíduo
aplicações
Sistema HLA

Antigeno Leucocitário Humano

http://doarvida.blogspot.com/2010/01/o-nosso-sistema-imunitario-o-sistema.html
Sistema HLA
Cada um de nós tem uma individualidade biológica
característica e muito particular.
 “Com o nosso património genético herdamos algumas
características que são marcadores dessa individualidade.
Essas características vão além das que são fisicamente
identificáveis e manifestam-se também na superfície das
nossas células do sangue. Entre elas temos os antigénios
que se expressam à superfície dos eritrócitos, os grupos
AB0, e também outros antigénios que se expressam na
superfície dos nossos leucócitos (glóbulos brancos) e são
conhecidos como antigénios HLA - “Human Leucocyte
Antigens” ou seja, traduzindo para português: Antigénios
Leucocitários Humanos.”
Herança HLA

http://doarvida.blogspot.com/2010/01/o-nosso-sistema-imunitario-o-sistema.html
DNAm
 DNA mitocondrial
(mtDNA)
• Importante marcador genético para identificação humana.
• Um célula possui entre 1.000 à 5.000 copias de mtDNA.
• Tem origem extracelular (é encontrado dentro das mitocôndrias).
• Define linhagem matrilinear.

Mitocondrial:
• > de 1.000 cópias.
•Herança Materna.
•Não único no individuo.
XX Nuclear:
•2 cópias/célula.
•Herança de ambos os pais
•Único no individuo
 DNA mitocondrial (mtDNA)

• Tem formato circular e é resistente a digestão enzimática.

•Por isso é excepcional no estudo de tecidos antigos e
arqueológicos, como dentes, ossos e fios de cabelos.
 DNA mitocondrial (mtDNA)

Identificação humana por mtDNA:

•É utilizado quando o sangue de parentes pode ajudar na pesquisa
laboratorial , como na identificação de desaparecidos por comparação
com parentes.
•Em casos forenses onde o material biológico encontra-se degradado
(incêndios, desastres aéreos), não apresenta DNA núclear(fragmentos de
cabelo sem bulbo) , é muito antigo ou em alto grau de degradação.
 DNA mitocondrial (mtDNA)

Casos de identificação humana por mtDNA:

•Família Romanov.
•Identificação de soldados da segunda guerra mundial.
•DNA de pataxós comprova a origem indígena.
 1-Família Romanov

•A identificação dos restos mortais do Tsair

Nilcolau 11 e de toda a família Romanov foi
feita por intermédios dos teste de mtDNA.
 2- Identificação dos soldados da Segunda
Guerra Mundial

Para a identificação dos soldados mortos na Segunda Guerra Mundial foram

usados exames forenses antropológicos, como a retirada de mtDNA de oss
pulverizados.
Obs: Isso sugere que o mtDNA fica preservado por muitos anos.
Formas não moleculares de
identificação humana:
Impressões papilares (digitais, plantares,
palmares)
Desenho dos seios faciais
Desenho do palato
Arcada dentária
Impressões labiais
Marcas e tatuagens
Identificação visual
Tamanho do pé (antropometria)
Impressão auricular
Papiloscopia
Trata da identificação humana através das
papilas dérmicas da palma das mão e da sola
dos pés.
Papilas dérmicas: são os locais onde a
derme e a epiderme se encontram e
causam ondulações, em locais onde a pele
é mais grossa como pés e mãos elas se
tornam mais visiveis e possuem
configurações distintas, peculiar a cada
indivíduo.
Ramos da papiloscopia

Quiroscopia: processo de identificação

por meio das impressões palmares;
Podoscopia: processo de identificação
por meio das impressões plantares;
Poroscopia: processo de identificação
por meio dos poros das papilas
dérmicas; e
Datiloscopia: processo de identificação
humana por meio das impressões
digitais.
Requisitos exigidos para
uma ferramenta de
identificação:
Unicidade: todos os indivíduos de todas
as raças possuem impressões papilares;
Perenidade: surgem no 6º mês de vida
fetal e só desaparecerem com a
putrefação da pele;
Imutabilidade: o desenho não se altera
durante a existência do indivíduo;
Variabilidade: o desenho papilar varia de
pessoa para pessoa.
Arcada Dentária:
A arcada dentária , tem um papel fundamental na
identificação humana, pois é uma estrutura de
extraordinária resistência e pela sua variedade de
características individualizantes que proporcionam
as peças dentárias.
 Apesar das características mudarem ao longo da vida a
combinação de dentes hígidos, cariados, ausentes e
restaurados é reproduzível e pode ser comparada em
qualquer tempo. A presença e a posição individual
dos dentes e suas respectivas características anatômicas,
restaurações e componentes patológicos
proporcionam dados para comparação individual humana.
 As características anteriormente citadas
comparadas aos elementos fornecidos por
pessoas supostamente conhecidas da vitima
(dados anteriores a morte) como: fotografias, ficha
clínica, radiografias,dentre outros. correspondem a
aspectos específicos que podem caracterizar o
indivíduo.
Etapas da identificação humana
pela arcada dentária:
Coleta de dados da vitima ;
Comparação de similaridade e
discrepâncias entre os dados ante
morte e pós morte;
Sobreposição dos dados anteriores e
posteriores:
DNA e Catástrofes;

O DNA oferece o mais confiável método de

reconhecimento, porque ele é único para cada
indivíduo do planeta- só gêmeos identicos
compartilham o mesmo DNA.
1- Identificação das vitimas do World Trade
center:

Um terço dos desaparecidos foram encontrados pelos métodos tradicionais

como arcada dentária e impressões digitais, mas a análise genética acabou po
indentificar a maioria das pessoas atraves da análise de DNA.
Parentes das vitimas forneceram
pertences pessoais das vitimas para
fornecer amostrar de DNA das vitimas.
2-Identificação das vítimas do Acidente
Aéreo com o avião da TAM:
Para o reconhecimento da maioria das vitimas
Foram utilizados métodos de identificação por
DNA. Mas estudos das impressões de digitais e
Antropológicos, como arcada dentaria ,medição
de ossos e entre outros, etc, foram utilizados e
confrontados com os testes de DNA até que
houvesse a confirmação sobre a identidade da
vítima.
 3-Identificação dos restos
mortais do piloto Blassie.

Em 1972 o avião de Michael Blassie foi abatido. Partes do seus restos mortais
foram recolhidos e feitos exames forenses inadequados, baseados no tipo
sanguínea e em uma análise dos ossos, indicou que não pertenciam a Blassie.
Em 1994 novos exames foram feitos usando o mtDNA dos ossos de Blassie que
foram comparados com o de sua mãe e o de sua irmã , confirmando,cerca
de 20 anos depois,que aquele corpo era de Blassie.
FIM
Referências Bibliográficas

SIEGEL, J., KNUPFER, G. e SUUKKO, P (eds.) Encyclopedia of Forensic Sciences

Biology Teaching and Learning Resources: http://www.biology-resources.com/
Secretaria do Estado de Justiça e Segurança Pública: http://www.seguranca.mt.gov.br/
NY Times: http://topics.nytimes.com/topics/reference/timestopics/people/b/michael_j_blassie/index.html
James D. Watson,Watson, James D. / Berty, Andrew DNA: o Segredo da Vida
DNA Create a DNA Fingerprint: http://www.pbs.org/wgbh/nova/sheppard/analyze.html
Cristiane Miranda Carvalho1, Ricardo José Nazar Adriana Maria Carneiro Moreira Fernanda Capurucho Horta Bouchardet -
IdentIfIcação humana pelo exame da arcada dentárIa. relato de caso
Remualdo, Vanessa Rosália - Avaliação de três métodos de extração de DNA de dentes humanos submetidos ao calor / Vanessa
Rosália Remualdo; orientador Rogério Nogueira de Oliveira
Papiloscopia: Estudo da Pele: http://www.papiloscopia.com.br/estudo_das_papilas.html