LAMPIRAN

Pembuatan Larutan Standart Glukosa

 Larutan induk 500 ppm
1 M = 35.500 ppm
500 ppm ?
500 𝑝𝑝𝑚 35500
=
𝑥 1𝑀

X = 0,014 M
Massa glukosa yang diperlukan untuk membuat larutan induk 500 ppm adalah :
M = n/v
0,014 M = n/0,1 L
n = 0,0014 mol
m = n x Mr
m = 0,0014 mol x 180,16 g/mol
m = 0,25 gram

 Larutan Standar 50 ppm
M1 . V1 = M2. V2
500 ppm. V1 = 50 ppm. 10 mL
V1 = 1 mL
 Larutan Standar 100 ppm
M1 . V1 = M2. V2
500 ppm. V1 = 100 ppm. 10 mL
V1 = 2 mL
 Larutan Standar 150 ppm
M1 . V1 = M2. V2
500 ppm. V1 = 150 ppm. 10 mL
V1 = 3 mL
 Larutan Standar 200 ppm
M1 . V1 = M2. V2
500 ppm. V1 = 200 ppm. 10 mL
V1 = 4 mL
 Larutan Standar 250 ppm
M1 . V1 = M2. V2
 500 ppm. V1 = 250 ppm. 10 mL
V1 = 5 mL

Konsentrasi (ppm) Absorbansi

0 0,028
50 0,064
100 0,236
150 0,368
200 0,51
250 0,67

Kurva Larutan Standart Glukosa

0.8
y = 0.0027x - 0.0216
0.7 R² = 0.9826
0.6
0.5
Absorbansi

0.4
Series1
0.3
Linear (Series1)
0.2
0.1
0
-0.1 0 100 200 300
Konsentrasi Glukosa (ppm)

Perhitungan Aktivitas Enzim

mg Vt
[abs sampel−abs kontrol] x Ap x
mL VE
U= t x BM

Ap = 100x
Vt = 3 mL
VEnzim = 0,5 mL
𝑉𝑡
=6
𝑉𝐸

t = 20 menit
BM = 180,16 g/mol
Satuan U (Aktivitas Enzim) adalah = U/mL
𝑚𝑔/𝑚𝐿
Penurunan rumus = 𝑚𝑔 𝑔
𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 1000 𝑥
𝑔 𝑚𝑜𝑙

𝑚𝑜𝑙 𝑥 10−3
= 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 𝑚𝐿
 𝑚𝑚𝑜𝑙
= 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 𝑚𝐿
𝑚𝑚𝑜𝑙
Maka U adalah 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡

Persamaan linear untuk menghitung [abs.sampel-abs kontrol]

y = 0,0027x - 0,0216
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
x = [Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol]
 Supernatan 1
Absorbansi sampel = 0,068
Absorbansi kontrol = 0,056
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
y = 0,012
0,012 = 0,0027x - 0,0216
x = 12,44 ppm
x = 0,0124 mg/mL
0,0124 mg/mL x 100 x 6
U = 20 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 180,16 𝑔/𝑚𝑜𝑙

U = 0,00206 U/mL
U = 2,06 x 10-3 U/mL
 Pelet 1
Absorbansi sampel = 0,275
Absorbansi kontrol = 0,171
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
y = 0,104
0,104 = 0,0027x - 0,0216
x = 44,67 ppm
x = 0,04467 mg/mL
0,04467 mg/mL x 100 x 6
U = 20 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 180,16 𝑔/𝑚𝑜𝑙

U = 0,00744 U/mL
U = 7,44 x 10-3 U/mL
 Supernatan 2
Absorbansi sampel = 0,107
Absorbansi kontrol = 0,100
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
 y = 0,007
0,007 = 0,0027x - 0,0216
x = 10,6 ppm
x = 0,0106 mg/mL
0,0106 mg/mL x 100 x 6
U = 20 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 180,16 𝑔/𝑚𝑜𝑙

U = 0,00176 U/mL
U = 1,76 x 10-3 U/mL
 Pelet 2
Absorbansi sampel = 0,361
Absorbansi kontrol = 0,335
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
y = 0,026
0,026 = 0,0027x - 0,0216
x = 17,3 ppm
x = 0,0173 mg/mL
0,0173 mg/mL x 100 x 6
U = 20 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 180,16 𝑔/𝑚𝑜𝑙

U = 0,00288 U/mL
U = 2,88 x 10-3 U/mL
 Supernatan 3
Absorbansi sampel = 0,071
Absorbansi kontrol = 0,001
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
y = 0,07
0,07 = 0,0027x - 0,0216
x = 33,93 ppm
x = 0,03393 mg/mL
0,03393 mg/mL x 100 x 6
U = 20 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 180,16 𝑔/𝑚𝑜𝑙

U = 0,00565 U/mL
U = 5,65 x 10-3 U/mL
 Pelet 3
Absorbansi sampel = 0,187
Absorbansi kontrol = 0,071
y = Absorbansi sampel - Absorbansi kontrol
y = 0,0116
0,0116 = 0,0027x - 0,0216
x = 50,97 ppm
x = 0,05097 mg/mL
0,05097 mg/mL x 100 x 6
U = 20 𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝑥 180,16 𝑔/𝑚𝑜𝑙

U = 0,00849 U/mL
U = 8,49 x 10-3 U/mL

Sampel Konsentrasi (ppm) Uji Aktivitas (U/mL)

Supernatan 1 12,44 2,06 x 10-3

Pelet 1 44,67 7,44 x 10-3

Supernatan 2 10,6 1,76 x 10-3

Pelet 2 17,3 2,88 x 10-3

Supernatan 3 33,93 5,65 x 10-3

Pelet 3 50,97 8,49 x 10-3