AGAR CLED

 Fermentadoras- amarillas
 No fermentadoras- azules
Previene crecimiento exagerado proteus

AGAR MCKONKEY
lactosa
 Fermentadoras- rojas: enterobacter, escherichia, serratia, klebsiella,
enterobacter
 No fermentadoras- amarillas: salmonella, shigella, proteus
Rojo neutro

AGAR CHOCOLATE
Haemophilus influenzae
N patógenas
Soporta muchos tipos bacterias, por eso no útil coprocultivo
neumococo

AGAR SANGRE
N meningitidis
Stafilococos
Estreptococos

AGAR THAYER MARTIN

Selectivo para n gonorrhoeae
TINCION GRAM
 Cristal violeta 1 min
 Lugol 1 min
 Alcohol acetona 5 sec
 Safranina 30 sec

TINTA CHINA Y HISS

 Capsula

SCHAFER FULTON
 Esporas

LEIFFSON
 Flagelos

VAN STOLTEMBERG Y LOEFFLER

 Gránulos metacromáticos

CATALASA
Formación de oxígeno y agua con producción de burbujas por
descomponer peróxido
 Positivo- estafilococo
 Negativo- estreptococo
COAGULASA
Lamina (ligada) o en tubo (libre)
 Positivo- aureus
 Negativo- demás estafilococos

MANITOL
Rojo fenol
 Positivo- amarillo: aureus
 Negativo- rojo: demás estafilococos

DNASA
 Positivo- s aureus
 Negativo- demás estafilococos

NOVOBIOCINA
 Resistente- saprophitycus
 Sensible- otros s coag-negativos

BACITRACINA
 Sensible a bajas concentraciones: s pyogenes

CAMP
 Cultivo satélite de s agalactiae
OPTOQUINA
 Inhibe a bajas concentraciones el neumococo

PRUEBAS KF DE CARBOHIDRATOS
 Positivo-amarillo
 Negativo- rojo

Listeria catalasa positivo, no usan manitol, hidrolizan esculina

Erisipelotrhix catalasa negativo, producen h2s, inmóviles
Corynebacterium inmóviles

PRUEBA DE MOTILIDAD EN SOMBRILLA EN AGAR MOTILIDAD

A 22ªc
 Positivo- listeria
 Negativo- corynebacterium

PRUEBAS DE CARBOHIDRATOS
Rojo fenol
 Positivo- amarillo
 Negativo- rojo

AGAR TSI
Picadura hasta el fondo del tubo y estría en superficie
Rojo fenol
 Acidez- positivo- amarillo- a
 Alcalino- negativo- rojo- k
Co2 y h2
H2s- tiosulfato de sodio: reacciona con sulfato ferroso

AGAR LIA
Asa recta doble picadura hasta el fondo del tubo
Purpura de bromocresol
 amarillo- positivo
 purpura negativo
desaminación en tendido- rojo/a
descarboxilación de lisina- kk- alcalino
fermentación de glucosa sin atacar aminoácido- ka

CITRATO DE SIMMONS
Asa recta solamente en superficie
Un organismo capaz de usar citrato única fuente carbono también capaz
usar sales amonio única fuente nitrógeno. La urea alcaliniza el medio
azul de bromotimol
 azul- positivo- alcalino
 verde- Negativo- acido

AGAR UREA
La ureasa desdobla la urea en amoniaco
Rojo de fenol
 amarillo- negativo
 violeta/rojo- positivo
AGAR SIM
Sulfuro, indol, motilidad.
Triptofanasa indol reactivo de Ehrlich.
 Rojo positivo
 Amarillo negativo

H2s- tiosulfato de sodio: reacciona con hierro peptonado

CALDO MR
Rojo de metilo inmediatamente muestra color
 Rojo positivo
 Amarillo negativo
Vía acida mixta

CALDO VP
Koh y alfa naftol 15 minutos después
 Rojo positivo
 Amarillo/café negativo
Vía butilen glicolica

Mr y vp positivos son muy raros en naturaleza

Mr y vp negativos bacterias no fermentadoras

CALDO FENIL ALANINA

Desaminar fenilalanina
Cloruro férrico mezclar fuerte
 Verde oscuro positivo
 Amarillo castaño negativo

CALDO MALONATO
 Verde negativo
 Virar a azul positivo
Azul de bromotimol

MEDIO OF GLUCOSA
Duplicado con asa recta picadura central
Azul de bromotimol
Poca peptona para evitar neutralizar acidez por oxidación
 Amarillo metabolismo de glucosa

FERMENTACION DE CLUOSA, LACTOSA, SACAROSA

Rojo de fenol
 Acido- positivo amarillo
 Rojo. Negativo. Alcalino

OXIDASA
10- 15 segundos después

API 20 E
21 test bioquímicos para indentificacion rpapida de enterobacterias y otros
pocos bacilos gran negativos.
0124 por cada prueba
Se obtiene un código de 7 cifras
Se busca la especie en base de datos

API 20NE
Pseudomonas, acinetobacter, falvobactreium, moraxella, Vibrio,
aeromonas, pasteurella

VITE
Sistema automatico de identificacion bacteriana por bioquímica y
sensibilidad antimicrobiana

MICROSCAN
Lo mismos que vitek
AGAR EMB
Inhibe gran positivos
Lactosa
 Verde metálico positivas
 Violeta positivas debiles
 Transparentes negativas

AGAR SS
Inhibidores de gran
H2S: reacciona con citrato ferrico
Lactosa
 Positivo y negativo igual que mckonkey
Colonias negras
 H2s

AGAR XILOSA LISINA DESOXICOLATO

Sales biliares inhiben mayoría de gran positivos
Rojo de fenol
AGAR KHEKTOEN ENTERICO
AGAR SULFITO BISMUTO
ANAEROBIOS
No crecen en anaerobiosis (21% o2) o en jarras con vela ya que la cantidad
de O2 es 18-19%

ANAEROBIOS OBLIGADOS ESTRICTOS

Menos de 0.5%

ANAEROBIOS OBLIGADOS MODERADOS

2-8%. Así son la mayoría de anaerobios hallados en muestras clínicas de
humanos
ANAEROBIOS AEROTOLERANTES
Pueden crecer aeróbicamente pero muy lentamente a comparación de la
anaerobiosis. Tienen superóxido dismutasa, catalasa etc..

MICROAEROFILOS
Necesitan oxigeno para receptor de electrones, pero necesitan mínimo
oxígeno.

BACILOS GRAM POSITIVOS

 Actinomices
 Bifidobacterium
 Ecubacterium
 Lactobacilus
 Propionibacterium
 Arcanobacterium

 Clostridium

BACILOS GRAM NEGATIVOS

 Bacteroides
 Fusobacterium
 Mobilincus
 Porphyromonas
 Prevotella
 Sutterella
 Selenomonas

 Campylobacter

 Treponema

 Borrelia

COCOS GRAM POSITIVOS

 Peptostreptococcus
 Peptococcus
 Sarcina
 Ruminococcus
 Staphylococcus
 Streptococcus

COCOS GRAM NGATIVOS

 Acidaminococcus
 Veillonella

MUESTRAS INADECUADAS PARA AISLAR ANAEROBIOS

Escobillados faríngeos nasofaríngeos o gingivales, esputo, contenido
gastrico, contenido intestinal, materia fecal, escobillado rectal, ulceras
superficiales de decúbito, piel mucosa, orina, escobillados vaginales o
cervicales
Aspiración de pus de absecos, orina por punción suprapúbica, muestras
transtraqueales, biopsias, muestras quirúrgicas, liquido ascítico, lcr,
pericárdico, pleural, sinovial

Medios de cultivo selectivo con aminoglucósidos, vancomicina fenil, etil

alcohol etc.

Los anaerobios producen ácidos grasos, que puede saberse por

cromatografía de gases
SCHAFER FULTON
Verde malaquita 1minuto
Calentar 5 minutos hasta emisión vapores
Safranina 2 minutos
R es resistete a rifampicina
H es resistente a isoniazida
MDR es resistente r y h
XDR son resistentes a r y h y a uno de los 3 aminoacidos inyectables
(amikacina, kanamicina, capreomicina), y al menos a una fluoroquinolona
XXDR RESITENTE A TODOS LOS FARMACOS CONOCIDOS A LOS
QUE SE LES PUEDE HACER PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD

BACILOSCOPIA POR ESPUTO

Fácil en adultos inmunocompetentes
Difícil en niños, vih, y extrapulmonar

MUESTREO PARA BACILOSCOPIA

En la mañana que es cuando más esputo esta acumulado
3 muestras, una cada día idealmente, pero puede variar si no es posible
hacer el régimen adecuado

ZIEHL NIELSEN
 Fuscina fenicada
 Calentar 10 minutos hasta emisión de vapores
 Decoloración con alhocol acido durante 3 minutos
 Azul de metileno 1 minuto

CUANDO HACER CULTIVO

 Confirmar el diagnostico de baciloscopia
 Las dos primeras muestras son negativas, se debe cultivar la segunda
 Toda muestra de paciente vih
 Sintomáticos respiratorios en contacto con pacientes mdr
 Pediátricos
 Falla terapéutica

BACTEC MGIT 960 O 320

Detección de fluorescencia por uv para mirar gasto de oxigeno

M tuberculosis son pequeños granulos en el tubo
M n tuberculosas son turbiedad tenue
Contaminación es turbiedad grande

EN NIÑOS
Cuando la bacteriología es negativa se deben tener en cuenta para el
diagnóstico 4 criterios: criterio epidemiológico (antecedentes de contacto
con pacientes tuberculosos), clínico (presencia de un cuadro compatible
con la enfermedad), tuberculínico (hallazgo de una prueba de tuberculina
positiva PPD>10mm) y radiológico (anormalidades en la radiografía de
tórax, descartadas otras causas de dichas anormalidades)

PCR IS6110
Exclusivamente presente en m tuberculosis

ANALISIS CON ENZIMAS E RESTRICCION PCR

PCR EN TIEMPO REAL

RESISTENCIA NATURAL
Cepas silvestres resistentes naturalmente a la droga
RESITENCIA PRIMARIA
En pacientes que nunca han recibido terapia antituberculosa
RESISTNCIA ADQURRIDA
Por mal tratamiento

METODO DE PROPORCIONES MULTIPLES DE CANNETTI, RIST Y

GROSSET
En Colombia es el mas usado. Para determinar resistencia de un cultivo a
fármacos.
Lowenstein Jensen.
Si mas del 1% de la cepa crece a concentración critica para cada fármaco
entonces la cepa es resistente.
GENEXPERTO MTBRIF
Revela a través de pcr-rt resistencia a rifampicina
2-3 horas
Además, comprueba presencia de mtb
GENOTYPE MTBDR PLUS
Comprueba presencia de mtb además de resistencia por hibridación de
oligonucleótidos con genes silvestres sensibles de enzimas o con los genes
mas comunes de resistencia
Rifampicina o isoniazida

BACILOSCOPIA PARA LEPRA

6 muestras
 Oreja derecha
 Orecja izquierda
 Lesión 1 (o codo derecho)
 Lesion 2 (o codo izquierdo)
 Rodilla derecha o falange proximal del dedo corazón derecho
 Rodilla izquierda o falange proximal del dedo corazón izquierdo
BACILOSCOPIA DE ESPUTO
100 campos
Al enfocar la lámina con objetivo de inmersión (100X), los bacilos ácido
alcohol resistentes se verán rojos sobre un fondo azul. Se debe recorrer la
lámina contando el número de baar que se observan en cada campo en
superficie y en profundidad con ayuda del ajuste micrométrico y colocándo
el número en cada cuadro de la cuadrícula de 100 cuadros, hasta
completar los campos que sean necesarios, de acuerdo a la positividad
encontrada, lo cual será evidente con la lectura de los primeros campos.
Recorrer la lámina en línea recta de izquierda a derecha por el centro hasta
el extremo. Baje o suba y regrese de derecha a izquierda

Luego se suma la cantidad de baar observados y se promedia por el

número de campos microscópicos observados. Cuando la muestra contiene
muy poquitos baar o no tiene ninguno, se deben observar los 100
campos,si la muestra contiene de 1 a 10 baar por campo solo será
necesario contar 50 campos y si la muestra contiene de 10 a 100 baar por
campo solo sera suficiente observar 20 campos.