1° Trabajo Práctico de Laboratorio QUÍMICA BIOLÓGICA

PREPARACIÓN DE SOLUCIONES y pH
PARTE I: PREPARACIÓN DE SOLUCIONES Objetivos:
- Calcular las concentraciones de las soluciones químicas. - Preparar soluciones químicas y
realizar diluciones.
Expresión de las concentraciones de las soluciones
La concentración de una solución indica la cantidad de soluto disuelto en una
determinada cantidad de solvente, o cantidad de soluto disuelto en una determinada cantidad de
solución. La concentración expresa una proporción entre soluto y solvente.
Preparación de soluciones
Las soluciones se pueden preparar por pesada o por dilución. Cuando se dispone de un
soluto sólido, la solución se prepara pesando una masa determinada de soluto, para luego añadir
suficiente solvente y así alcanzar el volumen requerido (para enrasar hasta el aforo del matraz
volumétrico, por ejemplo). Sin embargo, también es posible preparar soluciones por dilución
cuando se dispone de una solución concentrada, a partir de la cual se han de preparar soluciones
de menor concentración. Para ello se realiza un cálculo de dilución. C
1

.V
1

=C
2

.V
2
Preparación de una solución por pesada
Primero se pesa el sólido
Luego, se disuelve con agua destilada Se trasvasa a un matraz
aforado. Enjuagando muchas veces con poca agua el vaso, el embudo y la varilla.
Luego se adiciona agua destilada hasta cerca del enrase del matraz aforado y se agita con cuidado.
Enrasar cuidadosamente. La base del menisco debe quedar tangente a la señal de enrase del matraz
aforado.
El alcohol y la lavandina: dos compuestos indispensables en el laboratorio de bioquímica
Las palabras desinfectante y antiséptico se usan frecuentemente de manera indistinta, sin
embargo, presentan diferencias y similitudes:
DESINFECTANTES: es un agente químico que destruye o inhibe el crecimiento de
microorganismos patógenos en fase vegetativa o no esporulada. Se aplican sobre objetos y
materiales inanimados, como instrumentos y superficies. Ej: hipoclorito, algunos fenoles y
aldehídos.
ANTISÉPTICOS: es un tipo de desinfectante que, cuando se aplica sobre superficies del
cuerpo o en tejidos expuestos, destruye o inhibe el crecimiento de microorganismos en tejidos
vivos, sin causar efectos lesivos. Ej: solución de iodo povidona, clorhexidina, etanol, etc.
ALCOHOL: el etanol, llamado comúnmente alcohol, en general es buen bactericida, pero
la eficacia es variable frente a hongos y virus, y nula frente a esporas. El alcohol al 70% es
mucho más eficaz como antiséptico que el de 96% que se expende habitualmente en farmacias.
En esta dilución puede matar al 90% de las bacterias de la piel si se mantiene húmeda durante
dos minutos.
El alcohol puro al entrar en contacto con las estructuras externas (membranas) de los
microorganismos, se deshidrata y en ocasiones, forman una capa gruesa que impide el ingreso
del alcohol y protege al microorganismo, impidiendo que sea tan efectivo como se espera. En
cambio, el alcohol diluido al 70% no tiene la capacidad de deshidratar esas capas externas, lo que
permite que el alcohol ingrese mejor en el interior de las bacterias y resulte efectivo para
destruirlas.
HIPOCLORITO DE SODIO: el cloro es un desinfectante universal, activo contra todos los
microorganismos. En general se utiliza en forma de hipoclorito sódico. Es inestable y disminuye
su eficiencia en presencia de luz, calor y largo tiempo de preparación. Es altamente corrosivo por
lo tanto no debe usarse por más de treinta minutos, ni repetidamente en material de acero
inoxidable. Es un químico económico, de fácil consecución, de gran aplicabilidad y se consigue
comercialmente en forma líquida a una concentración entre el 4% y el 6%.
Requisitos para conseguir una máxima eficacia: - Preparar la dilución diariamente antes de su
empleo. - Utilizar recipientes que no sean metálicos. - Mantener el producto en un lugar fresco y
protegido de la luz.
Concentraciones requeridas: La cantidad de cloro requerido para un alto nivel de desinfección
depende de la cantidad de material orgánico presente y se ha definido las siguientes
concentraciones de acuerdo con el nivel de desinfección que se necesite:
•
•
Desinfección de material limpio, es decir, sin resto de sangre o líquidos corporales, se requiere
diluciones de hipoclorito entre 0.05% y 0.1%.
Desinfección de material contaminado con sangre, líquidos corporales etc., se recomienda
concentraciones hasta 0.5% -Desinfección de superficies, en áreas críticas: 0,5% y en áreas no
críticas:
0,25%.
Fórmula de uso práctico para preparar soluciones de lavandina:
ACTIVIDAD PRÁCTICA 1) Escriba la forma molecular, fórmula semidesarrollada y
desarrollada del etanol. 2) Señale el grupo funcional e indicar el tipo de compuesto y grupo
funcional del etanol. 3) Obtener el Peso Molecular del etanol. Calcule la molaridad de una
solución de Etanol 96% v/v.
δ=0.790 g/cm3 4) Indique cómo prepararía 25 mL y 50 mL de etanol al 70% v/v a partir del
Etanol comercial de concentración 96% v/v. 5) Obtenga el Peso Molecular del hipoclorito de
sodio (NaClO). Calcule la molaridad una solucion de NaClO que contiene 55 g/L de NaClO.
δ=1.11 g/cm3 6)
v/v, dependiendo del tamaño de la superficie que se desea desinfectar. Determine cuántos mL de
hipoclorito de sodio 55 g/L deberá emplear para preparar 250 ml 0,1%.

PARTE II: ÁCIDOS, BASES y pH

Objetivos:
- Medir el pH de distintas soluciones y determinar si éstas son ácidas o básicas. - Conocer los
valores de pH de los líquidos biológicos.
La concentración de NaClO utilizada para desinfección en laboratorios de bioquímica va de
0,1% a 1%
 Las soluciones se clasifican como ácidas o básicas con base en su concentración de iones
hidrógeno relativa al agua pura. Las soluciones ácidas tienen una concentración de H+, mayor
que el agua (mayor a 1 × 10-7), mientras que las soluciones básicas (alcalinas) tienen una
concentración de H+ menor (menor a 1 × 10-7). Normalmente, la concentración de iones
hidrógeno de una solución se expresa en términos de pH. El pH se calcula como el logaritmo
negativo de la concentración de iones hidrógeno en una solución:
pH= -log[H+] Los corchetes que encierran al H+
sólo significan que nos referimos a su concentración. Si introducimos la concentración de iones
hidrógeno del agua 1 × 10-7 en esta ecuación, obtendremos un valor de 7.0, también conocido
como pH neutro.
intracelular tienen valores de pH cercanos al neutro.
La concentración de H+ deja de ser neutra cuando se añade un ácido o una base a una
solución acuosa (basada en agua). Para nuestros propósitos, un ácido es una sustancia que
aumenta la concentración de iones hidrógeno (H+) en una solución, usualmente donando uno de
sus átomos de hidrógeno por disociación. Una base, en cambio, aumenta el pH al aportar iones
hidroxilo (OH) o algún otro ion o molécula que recoja los iones hidrógeno y los elimine de la
solución. Esta es una definición sencilla de ácidos y bases que funciona bien para los sistemas
biológicos.
Cuanto más fuerte es el ácido, más rápido se disocia para generar H+. Por ejemplo, el
ácido clorhídrico (HCl) se disocia completamente en iones hidrógeno y cloruro cuando se mezcla
con agua, por lo que se considera un ácido fuerte. Por otro lado, los ácidos en el jugo de tomate o
el vinagre no se disocian por completo en el agua y se consideran ácidos débiles. De manera
similar, las bases fuertes como el hidróxido de sodio (NaOH) se disocian completamente en el
agua, liberando iones hidroxilo (u otros tipos de iones alcalinos) que puedan absorber H+. La
escala de pH
La escala de pH se usa para clasificar soluciones en términos de su acidez o alcalinidad
(qué tan básica es). Puesto que la escala está basada en valores de pH, es logarítmica, lo que
significa que un cambio en una unidad de pH corresponde a un cambio diez veces mayor en la
concentración de iones H+.
A menudo se dice que la escala de pH va de 0 a 14 y la mayoría de las soluciones entran
en este rango, sin embargo, es posible encontrar soluciones con pH menor a 0 o mayor a 14.
Cualquier valor menor a 7.0 es ácido y cualquier valor mayor a 7.0 es básico o alcalino.
El pH dentro de las células humanas (6.8) y el de la sangre (7.4) son muy cercanos al
neutro. Los valores de pH extremos, por arriba o por debajo de 7.0, generalmente se consideran
desfavorables para la vida. Sin embargo, el ambiente dentro de tu estómago es muy ácido, con un
pH de entre 1 y 2. Medición del pH con tiras reactivas
El papel de pH contiene diferentes compuestos, a los que se les denomina indicadores de
pH, que cambian de color de acuerdo con el pH en que se encuentran. A estas mediciones se les
considera semicuantitativas, porque no indican el valor exacto del pH. La coloración que
presenta el papel se compara con la gama de colores de referencia incluida en el recipiente de las
tiras. Medición del pH con pH-metro o potenciómetro
Sus características y funcionamiento se estudiaron en la sección de materiales y equipos
de laboratorio.
En el cuerpo humano, tanto la sangre como el fluido
Reactivo: Etanol 10% v/v Fecha 18/05/18 Preparado por:
3) Preparar 100 mL de Hipoclorito de Sodio 0.5% p/v a partir de Hipoclorito de Sodio comercial
que
contiene 55 g/L usando material volumétrico de precisión (pipeta y matraz aforado). δ=1.11
g/cm3
Reactivo: NaClO 5% p/v Fecha 18/05/18 Preparado por:
4) Con una pipeta Pasteur para cada solución, tome un volumen pequeño y póngalo en contacto
con papel pH. Tenga precaución al manipular las soluciones ya que a pesar de ser soluciones
diluidas las mismas son corrosivas, por ello, es conveniente manipularlas con guantes.
Con los datos obtenidos complete la siguiente tabla:
Vaso N0 Solución
pH papel
pH peachímetro
Clasificación (ácido, básico o neutro) 1 NaOH 0,01 M 2 HCl 0,01 M 3 Acetato de sodio
(CH
3

COONa) 0,1 M 4 Ácido acético (CH

3

COOH) 0,1 M
5) De acuerdo con el valor del pH determine la concentración de protones (H+) y de hidroxilos
(OH-) que
presenta cada solución:
Vaso→ 1. - NaOH 2.- HCl 3.- CH
3

COONa 4. - CH
3

C
OOH Valor pH [H+] [OH-]
6) Investigar el pH promedio de los principales líquidos biológicos. ¿Cuál es el rango de pH
normal de
sangre?
ACTIVIDAD PRÁCTICA
1) Realice los cálculos e indique cómo prepararía cada una de las siguientes soluciones:
100 mL de NaOH 0,01 M 100 mL de HCl 0,01 M 100 mL Acetato de sodio (CH
3

COONa) 0,1 M 100 mL Ácido acético (CH

3

COOH) 0,1 M
2) Preparar 25 mL de Etanol al 70% v/v a partir de Etanol comercial al 96% v/v usando material
volumétrico de precisión (pipeta y matraz aforado). Rotular el recipiente:
Las disoluciones preparadas nunca deben conservarse
en el matraz aforado, sino que deben transferirse a un
recipiente adecuado con la ayuda de un embudo.