LABORATORIO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL 15 de mayo de 2019

PRÁCTICA N°6: CUANTIFICACIÓN FOTOMÉTRICA UV/VIS DE

UNA SUSTANCIA

DATOS GENERALES:
1. OBJETIVO:

 Demostrar la utilidad de la ley de Beer en el análisis cuantitativo por el método

de la curva de calibración.

2. MATERIAL Y EQUIPO:

 MUESTRA:

 Solución STOCK (400 µg/mL) de colorante ROSA FRESA en agua

destilada

 MATERIAL:

 Fiolas de 25 mL
 Fiola de 50 mL
 Agua destilada
 Pipetas de 1 mL

 EQUIPO:

 Espectrofotómetro de absorción al UV/VIS HP 8452A

VILLENA GRADOS, MILAGROS K. 1

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3. PROCEDIMIENTO:

- Preparar la solución STOCK: transferir 0.02g (400 µg/mL) de Colorante ROSA

FRESA a una fiola de 50mL, disolver y llevar a volumen con agua destilada.

- A partir de esta solución, preparar por dilución con el mismo disolvente, en fiolas
de 25mL, soluciones de menor concentración.

N° mL µg/mL
1 4 64
2 5 80
3 6 96

 SISTEMA 1: Transferir 4 mL de la solución STOCK a una fiola de 25mL,

disolver y llevar a volumen con agua destilada.

 SISTEMA 2: Transferir 5 mL de la solución STOCK a una fiola de 25mL,

disolver y llevar a volumen con agua destilada.

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 SISTEMA 3: Transferir 6 mL de la solución STOCK a una fiola de 25mL,

disolver y llevar a volumen con agua destilada.

- Preparar la solución MUESTRA proporcionada por el profesor responsable, para el

análisis.

- Realizar 3 escaneos de absorbancia de 400 a 500 nm, de las soluciones más diluidas
preparadas a partir de la solución STOCK.

4. DATOS EXPERIMENTALES:

-Temperatura ambiental: T=25°C

-Presión ambiental: P= 1 atm

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I) Lecturas de absorbancia de la solución STOCK a diferentes volúmenes con

menor concentración:

Cuadro N°01: Datos de lecturas de Absorbancia del colorante con soluciones de menor
concentración.

ABSORBANCIA PROMEDIO
mL µg/mL
1 2 3
4 64 0.40521 0.40404 0.40393 0.40439
5 80 0.49590 0.50024 0.49916 0.49843
6 96 0.58363 0.59186 0.59235 0.58928

Cuadro Nº 02: Datos de lectura de Absorbancia de la solución MUESTRA.

ABSORBANCIA
µg/mL PROMEDIO
1 2 3
70.9 0,44568 0,44485 0,44452 0,445016667

II) Estadística de progresión:

ESTADÍSTICAS DE LA REGRESIÓN
Coeficiente de correlación múltiple 0,99937339
Coeficiente de determinación R^2 0,998747173
R^2 ajustado 0,998568197
Error típico 0,003031238
Observaciones 9

III) Análisis de varianza:

Grados de Suma de Promedio de F Valor crítico de
libertad cuadrados los cuadrados F
Regresión 1 0,051274619 0,051274619 5580,36236 2,02658E-11
Residuos 7 6,43188E-05 9,1884E-06
Total 8 0,051338938

Coefici Error Estadís Probabilidad Inferior Superior Inferior Superior

entes típico tico t 95% 95% 95% 95%
Intercepc 0,0351 0,0062 5,6069 0,000810074 0,02032 0,04997 0,02032 0,04997
ión 52222 69446 10883 7339 7105 7339 7105
µg/mL 0,0057 7,7343 74,701 2,02658E-11 0,00559 0,00596 0,00559 0,00596
77708 6E-05 82303 482 0597 482 0597

IV) Ley de Beer:

ɛ − 0.0352
=𝐶
A=ɛbC 0.0058

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5. RESULTADOS:

Gráfica N°01: Absorbancia vs. Concentración.

0.7

0.6 y = 0.0058x + 0.0352

R² = 0.9987

0.5

0.4
Series1

0.3 Linear (Series1)

0.2

0.1

0
0 20 40 60 80 100 120

6. CONCLUSIONES:

- Se determinó la concentración de la MUESTRA que es de 70.9 µg/mL con un error

de 0,003031238

- En la gráfica Nº 01 y utilizando estadística de regresión, se logró determinar la

pendiente de la recta (m=0.0058) y el intercepto (0.0352).

- Se demostró la utilidad de la ley de Beer en el análisis cuantitativo por el método de

la curva de calibración.

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