Instrumentación y Análisis 2010-III Prácticas de Laboratorio

PROCEDIMIENTO:

I. Verificación de las características de operación del espectrofotómetro

1) Conmutar el switch VOLTAJE SELECTOR. Encender “Power on” el instrumento; dejar

calentar 15-30 min.
2) Seleccionar la longitud de onda requerida para el análisis. (484nm). Seleccionar %T usando la
tecla MODE.
3) Preparar las soluciones.
 Solución STOCK 400 ug/Ml.
 Solución PATRÓN 32ug/mL y solución MUESTRA 16ug/mL a partir del STOCK.

PATRÓN
32ug/mL
STOCK
400 ug/mL

MUESTRA
16ug/mL

4) Calibración del equipo:

 Fijar 0 %T. Luego colocar 3mL de agua en el portacubetas y fijar a 100%T.
 Remplazar el agua por solución ESTANDAR observar su %t, ABS y concentración (CON).
Se fija su concentración (32ug/mL) con las teclas de incremento o decremento. Luego
presionar CAL.
 Disponer la solución MUESTRA en el portacubetas y observar automáticamente su
concentración.

II. Respuesta relativa del espectofotómetro:

1) Encontrar la longitud de onda a la cual el instrumento es más sensible siguiendo los pasos
establecidos en la guía.
2) Seleccionar esa longitud de onda y CALIBRAR el espectrofotómetro.
3) En tal condición, seleccionar 400 nm y registrar el %T, continuar el procedimiento para cada
10nm de incremento hasta 700nm.

III. Colores del espectro visible:

 Seguir los pasos descritos en la guía.

 Observar los colores desde 400nm hasta el límite del espectro visible por cada 25 nm de
incremento,

M. Sc. Q.F. Segundo Manuel Miranda Leyva. Profesor Principal a Dedicación Exclusiva
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ANÁLISIS DE DATOS:

CUADRO Nº 01: DATOS DEL PORCENTAJE DE TRASMITANCIA (%T) [respuesta relativa del
espectrofotómetro] VS LONGITUD DE ONDA

LONGITUD DE %T
ONDA (nm)
400 7,2
410 8,7
420 12,3
430 14,6
440 16,3
450 18,1
460 19,3
470 24,2 COLORES CORRESPONDIENTES A LAS LONGITUDES
DE ONDA UTILIDAS
480 32,7
490 36,2
500 37,1
510 38,3
520 39,8
530 41,7
540 43,8
550 45,9
560 48,1
570 50,3
580 52,6
590 54,8
600 57
610 59
620 61,1
630 63
640 64,5
650 54,1
660 71,8
670 100
680 86,2
690 75,4
700 70,7

M. Sc. Q.F. Segundo Manuel Miranda Leyva. Profesor Principal a Dedicación Exclusiva
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GRÁFICO Nº 01: PORCENTAJE DE TRASMITANCIA (%T) [respuesta relativa del

espectrofotómetro] VS LONGITUD DE ONDA

GRAFICO Nº01: PORCENTAJE DE TRASMITANCIA VS LONGITUD DE

ONDA (nm)
120

670 , 100
100

80
%T

60

40

20

0
400 425 450 475 500 525 550 575 600 625 650 675 700

LONGITUD DE ONDA (nm)

CONCLUSIONES:

Se verificó las características de operación del espectrofotómetro de absorción UV / Visible

JENWAY modelo 6105.
Se encontró la longitud de onda a la cual es más sensible el espectrofotómetro (670 nm) , a la
cual se calibró y se obtuvieron respuestas relativas (% T) con respecto a esa longitud de onda
particular .
Se observó los colores del rango UV / Visible de acuerdo a su longitud de onda.

M. Sc. Q.F. Segundo Manuel Miranda Leyva. Profesor Principal a Dedicación Exclusiva