CROMATOGRAFIA

Objetivos

Aprender y hacer uso de los métodos de cromatografía por columna y capa fina

Caracterizar al disolvente y a la capa adsorbente que permita obtener resultados óptimos.

Comprobar mediante la separación la polaridad de cada componente de los compuestos

Identificación de los compuestos naturales que se presentan en la experiencia

Diagrama de flujo del proceso

Discusión

Observación:

En la cromatografía en columna, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente, se coloca

en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para controlar el paso de
sustancias al exterior de la columna. Observamos que al agregar el compuesto orgánico el color
verde se queda impregnado en la arena sin descender, mientras que el color amarillo es
arrastrado por la fase móvil.

Cuando el pigmento de color amarillo empieza a descender notamos un color amarillo-

anaranjado clara, luego sigue el color amarillo intenso el cual es recolectado.

Notamos que la parte verde que no descendió se disolvió en cierta parte pero permanece en la
parte superior.

Al agregar hexano-diclorometano empezó a descender lentamente el color verde quedando la

parte superior poco a poco transparente y sin rastro del compuesto orgánico. Se recolecto el
color verde oscuro.

Al agregar acetona observamos un verde más claro que desciende también es recolectado
para nuestro dato.( no se si se utilizo acetona si no fuera el caso lo borras)

Explicación:

la clorofila a es el pigmento involucrado directamente en la transformación de la energía

lumínica en energía química, las células fotosintéticas casi siempre contienen un segundo tipo
de clorofila, la clorofila b y otro grupo de pigmentos llamados carotenoides.

La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase móvil, la mezcla orgánica que nos
interesa separar, dejamos descender lentamente y adicionamos hexano para que arrastre el
pigmento de color amarillo que desciende lentamente entonces la fase móvil podrá ir
atravesando el sistema.
Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase móvil, poco a poco saldrán de la columna
cromatografía, y se recogen en fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general
las que se retienen poco o nada en el absorbente, serán las primeras en salir de la columna. En
cambio, las sustancias más polares, quedan retenidas por más tiempo en el absorbente, y a
menudo es necesario el uso de la fase móvil por la que el hexano se vuelve a adicionar.

El pigmento que primero se pudo obtener fue el caroteno, ya que al ser no polar como lo
indicado anteriormente, la retención en la columna fue muy poco por lo que su extracción fue
la más rápida.

Siguiendo el orden de polaridad lo segundo obtenido fueron las xantofilas, que poseen
tonalidades amarillentas pero también poseen tonalidades anaranjadas (muy poca), al ser un
compuesto polar.

Para eluir la segunda fracción utilizamos hexano – diclorometano (10:1), la polaridad nos
indicó que el siguiente pigmento obtenido fue la clorofila a, del cual se logró obtener la mayor
cantidad y una parte de la b en proporción mínima.

Para comprobar si aún había otra fracción a eluir se utiliza la acetona 100% lograr que la
clorofila b atravesase la columna se necesita utilizar un eluyente con mayor polaridad. (No
me acuerdo si se utilizó lo borras si no se utilizó)

Conclusión

La cromatografía en columna es quizás uno de los más versátiles métodos, utilizado para la
separación a su vez para la purificación de diferentes compuestos orgánicos que se encuentren
en líquido.

La estructura de los pigmentos vegetales los hace insolubles en agua, razón por la cual se
necesitó de disolventes orgánicos (hexano y acetona).

La polaridad de los pigmentos varía significativamente en siendo los no polares los carotenos,
continuando con una mayor polaridad que los carotenos y la xantofila, a continuación siendo
los más polares la clorofila, siendo el tipo b más polar que el a y se comprobó esto es los
resultados en el laboratorio ya que obtuvimos mayor cantidad de la clorofila a que es de un
color verde oscuro.

Buscar para el fundamento

Clorofila, tipos y componentes

Caroteno,carotenoides y sus componentes

Polarida de la clorofila y carotenos

Diagrama de procesos

Armado del sistema con la Sistema con la fase Compuesto

fase estacionaria para estacionaria coloca en un organico del cual
realizar la experiencia Erlenmeyer, en aquí se 1 mL va para el
utiliza también el vacío sistema armado
para acelerar el proceso.

Aquí se observa
El agregado del Recolección del a la clorofila de
compuesto pigmento un color verde
organico para la amarillo al inicio oscuro. El cual
separación de los del descenso y el nos indica mayor
componentes concentrado. concentración
del tipo a