Tema planteado: Efecto de la concentración del sustrato sobre la enzima Catalasa

Objetivo: Medir la cantidad de O2 liberado del agua oxigenada de diferentes

concentraciones por reacción de la catalasa del hígado de pollo.

Variables:

-Variable Independiente.- La reacción de la enzima Catalasa encontrada en el hígado de

pollo junto al agua oxigenada (H2O2). Concentración de agua oxigenada (H2O2) de 10 V Y
20V. Tiempo cada 5 segundos
-Variable Dependiente.- La producción de oxigeno por reacción de la enzima catalasa en el
H2O2, obteniendo valores en ml que se mide en el tubo de ensayo. Volumen de oxígeno en
ml liberado en un tiempo fijo (cada 5 segundos)
-Variable Controlada.- El tiempo específico, controlado en una escala de 5 segundos,
marcando el valor obtenido según la producción de O2. Volumen de H2O2 (20 ml), Peso del
hígado, Temperatura ambiente (26 °C aproximadamente)

Marco teórico:

Las enzimas.

Los enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Los enzimas
son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción, aumentan
notablemente su velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles, sino que solamente
aceleran las que espontáneamente podrían producirse. Ello hace posible que en condiciones
fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían condiciones extremas de
presión, temperatura o pH.
Como toda proteína, las enzimas están formadas por una gran cantidad de aminoácidos, que
cumplen funciones diferenciadas. Entre éstos tenemos los no esenciales, estructurales, de
unión y catalíticos.

 Los aminoácidos no esenciales pueden ser reemplazados, y en algunos casos

eliminados sin una pérdida significativa en la función o conformación de una enzima.
 Los aminoácidos estructurales son vitales para la conformación de la enzima, “forman
su esqueleto”.
 Los aminoácidos de unión participan en la asociación entre la enzima y el sustrato.
 Los aminoácidos catalíticos participan activamente en la transformación del sustrato.

La “estructura” de una enzima puede explicarse en función de los residuos de estos cuatro
tipos de aminoácidos. Obviamente, los residuos estructurales, de unión y catalíticos pueden
considerarse esenciales y cualquier modificación de éstos disminuye la actividad enzimática.
De hecho, si el residuo es particularmente crucial, como en el caso de un residuo clave en la
unión o cualquier residuo catalítico, resulta una pérdida total de la actividad.

El sitio donde se encuentra el conjunto de aminoácidos de unión y catalíticos se denomina

centro activo de la enzima, un lugar estratégico donde, por medio de uniones
intermoleculares, la enzima “atrae” al sustrato en una orientación tal que encajan
correctamente, así como las piezas en un rompecabezas.

Factores que influyen en las enzimas

Como ocurre con toda proteína, la actividad de una enzima depende de factores tales como
la temperatura, el grado de acidez o pH, las disoluciones salinas, los solventes, los
activadores y los inhibidores.

-Factor temperatura:

Si a una reacción enzimática se le aumenta la temperatura, aumenta la energía cinética de

las partículas. El aumento en la movilidad de estas moléculas produce un aumento en el
número de colisiones, aumentando la velocidad de la transformación. Si la temperatura
continúa aumentando, se comienzan a romper algunas uniones intermoleculares
responsables de la conformación de la enzima y, así, comienza a disminuir paulatinamente
su actividad. Si la temperatura es excesiva, la enzima se desnaturaliza perdiendo totalmente
sus propiedades catalíticas.

-Factor pH:

Cuando varía el pH del medio, se producen cambios en el estado de ionización de algunos

grupos ionizables de una enzima, afectando su estructura tridimensional y, por lo tanto, su
actividad biológica. Además, el cambio en el estado de ionización de grupos químicos
localizados en el sitio activo, puede alterar el reconocimiento del sustrato o la reactividad
de los aminoácidos asociados al sitio activo de la enzima. Todas las enzimas tienen dos
valores límites de pH entre los cuales son efectivas. AI traspasarse estos valores, la enzima
se desnaturaliza y deja de actuar.

Enzima Catalasa

La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos,

y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.
La Catalasa es una enzima presente en muchos tipos de células. Su función es proteger a las
células del efecto tóxico del peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) producido en
distintas reacciones redox
Cataliza la reacción: 2 H2O2 -----------> 2 H20 + O2
La reacción catalizada por esta enzima, ocurre en dos etapas, en las cuales interviene el
hierro del grupo hemo de la hemoglobina como cofactor.
Además, la catalasa cumple una función protectora contra determinados microorganismos
patógenos, sobre todo anaerobios. Las bacterias anaerobias, mueren al estar en contacto con
oxígeno, es por esta razón que el oxígeno producido por esta enzima tiene efecto
bactericida sobre estos microorganismos. Tanto es así, que la ausencia de dicha enzima por
defectos genéticos, llamada acatalasemia o enfermedad de Takahara, causa importantes
infecciones en la mucosa bucal, pudiendo llegar a causar la pérdida de dientes y graves
lesiones en los maxilares y tejidos blandos de la cavidad bucal.
Además, la catalasa cumple una función protectora contra determinados microorganismos
patógenos, sobre todo anaerobios. Las bacterias anaerobias, mueren al estar en contacto con
oxígeno, es por esta razón que el oxígeno producido por esta enzima tiene efecto
bactericida sobre estos microorganismos. Tanto es así, que la ausencia de dicha enzima por
defectos genéticos, llamada acatalasemia o enfermedad de Takahara, causa importantes
infecciones en la mucosa bucal, pudiendo llegar a causar la pérdida de dientes y graves
lesiones en los maxilares y tejidos blandos de la cavidad bucal.

En la industria, se también se utiliza la enzima catalasa, para diferentes fines. Por ejemplo,
se usa en la industria textil, para eliminar residuos de peróxido de hidrógeno.

Peróxido de hidrógeno

El peróxido de hidrógeno (H2O2), también conocido como agua

oxigenada, dioxogen o dioxidano, es un compuesto químico con características de un
líquido altamente polar, fuertemente enlazado con el hidrógeno tal como el agua, pero que
en general se presenta como un líquido ligeramente más viscoso que ésta. Es conocido por
ser un poderoso oxidante.

El peróxido de hidrógeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos

organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima
catalasa.

Concentración de Sustrato

En toda reacción enzimática, si se incrementa la concentración del sustrato se produce un

aumento de la velocidad de formación del producto, tendente a restablecer el equilibrio
químico entre la concentración del sustrato y la del producto. En este proceso la enzima no
varía. Se puede explicar considerando que, al abundar más las moléculas del sustrato, son
más probables los encuentros o choques entre estas moléculas y la enzima. Si la
concentración del sustrato es excesiva, la velocidad de reacción no aumentará, debido a que
todas las enzimas están en forma de complejo (E-S). En ciertos casos se producirá un tipo se
inhibición enzimática en la que dos sustratos se unen a la vez a la enzima, inutilizándola.