Cromatografía de gases

La cromatografía de gases es una técnica cromatográfica en la que la muestra se

volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatográfica. La elución se
produce por el flujo de una fase móvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos de
cromatografía, la fase móvil no interacciona con las moléculas del analito; su única
función es la de transportar el analito a través de la columna.

Existen dos tipos de cromatografía de gases (GC): la cromatografía gas-sólido (GSC) y

la cromatografía gas-líquido (GLC), siendo esta última la que se utiliza más
ampliamente, y que se puede llamar simplemente cromatografía de gases (GC). En la
GSC la fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos en ella se produce
mediante el proceso de adsorción. Precisamente este proceso de adsorción, que no es
lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografía tenga aplicación limitada,
ya que la retención del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos
de elución con colas. Su única aplicación es la separación de especies gaseosas de bajo
peso molecular. La GLC utiliza como fase estacionaria moléculas de líquido
inmovilizadas sobre la superficie de un sólido inerte.

Instrumentación

La GC se lleva a cabo en un cromatógrafo de gases. Éste consta de diversos

componentes como el gas portador, el sistema de inyección de muestra, la columna
(generalmente dentro de un horno), y el detector.

Diagrama de un cromatógrafo de gases

Gas portador [editar]

El gas portador debe ser un gas inerte, para prevenir su reacción con el analito o la
columna. Generalmente se emplean gases como el helio, argón, nitrógeno, hidrógeno o
dióxido de carbono, y la elección de este gas en ocasiones depende del tipo de detector
empleado. El almacenaje del gas puede ser en balas normales o empleando un
generador, especialmente en el caso del nitrógeno y del hidrógeno. Luego tenemos un
sistema de manómetros y reguladores de flujo para garantizar un flujo estable y un
sistema de deshidratación del gas, como puede ser un tamiz molecular.

Generalmente la regulación de la presión se hace a dos niveles: un primer manómetro se

sitúa a la salida de la bala o generador del gas y el otro a la entrada del cromatógrafo,
donde se regula el flujo. Las presiones de entrada varían entre 10 y 25 psi, lo que da
lugar a caudales de 25 a 150 mL/min en columnas de relleno y de 1 a 25 mL/min en
columnas capilares. Para comprobar el caudal se puede utilizar un rotámetro o un simple
medidor de pompas de jabón, el cual da una medida muy exacta del caudal volumétrico
que entra a la columna.

Sistema de inyección de muestra [editar]

La inyección de muestra es un apartado crítico, ya que se debe inyectar una cantidad

adecuada, y debe introducirse de tal forma (como un "tapón de vapor") que sea rápida
para evitar el ensanchamiento de las bandas de salida; este efecto se da con cantidades
elevadas de analito. El método más utilizado emplea una microjeringa (de capacidades
de varios microlitros) para introducir el analito en una cámara de vaporización
instantánea. Esta cámara está a 50ºC por encima del punto de ebullición del componente
menos volátil, y está sellada por una junta de goma de silicona septa o septum.

Inyector de muestra para un GC

Si es necesaria una reproducibilidad del tamaño de muestra inyectado se puede usar una
válvula de seis vías o válvula de inyección, donde la cantidad a inyectar es constante y
determinada por el tamaño del bucle de dicha válvula.
Si la columna empleada es ordinaria, el volumen a inyectar será de unos 20 μL, y en el
caso de las columnas capilares dicha cantidad es menor, de 10-3 μL. Para obtener estas
cantidades, se utiliza un divisor de flujo a la entrada de la columna que desecha parte
del analito introducido.

En caso de muestras sólidas, simplemente se introducen en forma de disolución, ya que

en la cámara de vaporización instantánea el disolvente se pierde en la corriente de purga
y no interfiere en la elución.

Según las curvas de Van Demter (HEPT vs. Velocidad Lineal), el mejor gas a usar en la
columna cromatográfica como portador de los analitos es el hidrógeno, sin embargo
dada su peligrosidad, es más usado como gas de encendido en el detector FID, junto con
el aire.

Columnas y sistemas de control de temperatura [editar]

En GC se emplean dos tipos de columnas: las empaquetadas o de relleno y las tubulares

abiertas o capilares. Estas últimas son más comunes en la actualidad (2005) debido a su
mayor rapidez y eficiencia. La longitud de estas columnas es variable, de 2 a 50 metros,
y están construidas en acero inoxidable, vidrio, sílice fundida o teflón. Debido a su
longitud y a la necesidad de ser introducidas en un horno, las columnas suelen
enrollarse en una forma helicolidal con diámetros de 10 a 30 cm, dependiendo del
tamaño del horno.

La temperatura es una variable importante, ya que de ella va a depender el grado de

separación de los diferentes analitos. Para ello, debe ajustarse con una precisión de
décimas de grado. Dicha temperatura depende del punto de ebullición del analito o
analitos, y por lo general se ajusta a un valor igual o ligeramente superior a él. Para
estos valores, el tiempo de elución va a oscilar entre 2 y 30-40 minutos. Si tenemos
varios componentes con diferentes puntos de ebullición, se ajusta la llamada rampa de
temperatura con lo cual ésta va aumentando ya sea de forma continua o por etapas. En
muchas ocasiones, el ajustar correctamente la rampa puede significar separar bien o no
los diferentes analitos. Es recomendable utilizar temperaturas bajas para la elución, pero
conforme la temperatura es mayor la elución es más rápida, pero corriendo el riesgo de
descomponer el analito.

Detectores [editar]

El detector es la parte del cromatógrafo que se encarga de determinar cuándo ha salido

el analito por el final de la columna. Las características de un detector ideal son:

 Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con precisión cuándo sale

analito y cuando sale sólo el gas portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-15
g/s de analito.
 Respuesta lineal al analito con un rango de varios órdenes de magnitud.
 Tiempo de respuesta corto, independiente del caudal de salida.
 Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por ejemplo desde temperatura
ambiente hasta unos 350-400ºC, temperaturas típicas trabajo.
 No debe destruir la muestra.
  Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a cantidades iguales de analito debe
dar salidas de señal iguales.
 Alta fiabilidad y manejo sencillo, o a prueba de operadores inexpertos.
 Respuesta semejante para todos los analitos, o
 Respuesta selectiva y altamente predecible para un reducido número de
analitos.

Algunos tipos de detectores:

 Detector de ionización de llama (FID, Flame Ionization Detector).

 Detector de conductividad térmica (TCD, Thermical Conductivity Detector).
 Detector termoiónico (TID, ThermoIonic Detector).
 Detector de captura de electrones (ECD, Electron-Capture Detector).
 Detector de emisión atómica (AED, Atomic Emission Detector).

Otros detectores minoritarios son el detector fotométrico de llama (PFD), empleado en

compuestos como pesticidas e hidrocarburos que contengan fósforo o azufre. En este
detector se hace pasar el gas eluido por una llama hidrógeno/oxígeno donde parte del
fósforo se convierte en una especie HPO, la cual emite a λ = 510 y 526 nm, y
simultáneamente el azufre se convierte en S2, con emisión a λ = 394 nm. Dicha
radiación emitida se detecta con un fotómetro adecuado. Se han podido detectar otros
elementos, como algunos halógenos, nitrógeno, estaño, germanio y otros.

En el detector de fotoionización (PID), el gas eluido al final de la columna se somete a

una radiación ultravioleta con energías entre 8,3 y 11,7 eV, correspondiente a una λ =
106-149 nm. Mediante la aplicación de un potencial a la celda de ionización se genera
una corriente de iones, la cual es amplificada y registrada.

Columnas y tipos de fases estacionarias [editar]

 Columnas de relleno

Las columnas de relleno o empacadas consisten en unos tubos de vidrio, metal (inerte a
ser posible como el acero inoxidable, Niquel, Cobre o Aluminio) o teflón, de longitud
de 2 a 3 metros y un diámetro interno de unos pocos milímetros, típicamente de 2 a 4.
El interior se rellena con un material sólido, finamente dividido para tener una máxima
superficie de interacción y recubierto con una capa de espesores entre 50 nm y 1 μm.
Para que puedan introducirse en el horno, se enrollan convenientemente.

El material de relleno ideal consiste en pequeñas partículas, esféricas y uniformes, con

una buena resistencia mecánica, para tener una máxima superficie donde interaccionar
la fase estacionaria y el analito. La superficie específica mínima ha de ser de 1 m²/g.
Como todos los componentes de columnas para GC, debe ser inerte a altas temperaturas
(~400ºC) y humectarse uniformemente con la fase líquida estacionaria durante el
proceso de fabricación. El material preferido actualmente (2005) es la tierra de
diatomeas natural, debido a su tamaño de poro natural. Estas especies, ya extinguidas,
utilizaban un sistema de difusión molecular para tomar nutrientes del medio y expulsar
sus residuos. Por tanto, debido a que el sistema de adsorción superficial del analito y la
fase estacionaria es parecido, son materiales especialmente útiles.
El tamaño es crítico a la hora de darse el proceso de interacción del analito, y a menores
tamaños la eficacia de la columna es mejor. Pero existe el problema de la presión
necesaria para hacer circular un caudal estable de gas portador por la columna, ya que
dicha presión es inversamente proporcional al cuadrado del diámetro de dichas
partículas. Así, el tamaño mínimo para usar presiones máximas de 50 psi es de 250 a
149 μm.

 Columnas capilares

Las columnas capilares son de dos tipos básicos: las de pared recubierta (WCOT) y las
de soporte recubierto (SCOT). Las WCOT son simplemente tubos capilares donde la
pared interna se ha recubierto con una finísima capa de fase estacionaria. Las columnas
SCOT tienen en su parte interna una fina capa de material adsorbente como el empleado
en las columnas de relleno (tierra de diatomeas) donde se ha adherido la fase
estacionaria. Las ventajas de las SCOT frente a las WCOT es la mayor capacidad de
carga de esta última, ya que en su fabricación se emplean mayores cantidades de fase
estacionaria, al ser la superficie de intercambio mayor. Por orden de eficacia, en primer
lugar están las WCOT, luego las SCOT y por último las columnas de relleno.

Las columnas WCOT se fabrican a partir de sílice fundida, conocidas como columnas
tubulares abiertas de sílice fundida o FSOT. Estas columnas se fabrican a partir de
sílice especialmente pura, sin apenas contenido de óxidos metálicos. Debido a la
fragilidad inherente a este material, en el mismo proceso de obtención del tubo se
recubre con una capa de poliimida, de esta forma la columna puede enrollarse con un
diámetro de unos pocos centímetros. Estas columnas, con propiedades como baja
reactividad, resistencia física y flexibilidad, han sustituido a las WCOT clásicas.

Las columnas FSOT tienen diámetros internos variables, entre 250 y 320 μm (para
columnas normales) y 150-200 μm para columnas de alta resolución. Estas últimas
requieren menor cantidad de analito y un detector más sensible, al eluir menor cantidad
de gas. Existen asimismo columnas macrocapilares con diámetros de hasta 530 μm, que
admiten cantidades de analito comparables a las de relleno pero con mejores
prestaciones.

En estas columnas existe un problema debido a la adsorción del analito sobre la

superficie de la sílice fundida, adsorción debida a la presencia de grupos silanol (Si-
OH), los cuales interaccionan fuertemente con moléculas polares orgánicas. Este
inconveniente se suele solventar inactivando la superficie por sililación con
dimetilclorosilano (DMCS). La adsorción debida a los óxidos metálicos se ve paliada en
gran parte por la elevada pureza de la sílice empleada.

 La fase estacionaria

Las propiedades necesarias para una fase estacionaria líquida inmovilizada son:

1. Características de reparto (factor de capacidad κ' y factor de selectividad α)

adecuados al analito.
2. Baja volatilidad, el punto de ebullición de la fase estacionaria debe ser al menos
100ºC mayor que la máxima temperatura alcanzada en el horno.
3. Baja reactividad.
 4. Estabilidad térmica, para evitar su descomposición durante la elución.

Existen como mucho una docena de disolventes con estas características. Para elegir
uno, debe tenerse en cuenta la polaridad del analito, ya que a mayor polaridad del
analito, mayor polaridad deberá tener la fase estacionaria. Algunas fases estacionarias
utilizadas actualmente (2005) son:

 Polidimetilsiloxano, fase no polar de uso general para hidrocarburos,

aromáticos, polinucleares, drogas, esteroides y PCBs.
 Poli(fenilmetildifenil)siloxano (10% fenilo), para ésteres metílicos de ácidos
grasos, alcaloides, drogas y compuestos halogenados.
 Poli(fenilmetil)siloxano (50% fenilo), para drogas, esteroides, pesticidas y
glicoles.
 Poli(trifluoropropildimetil)siloxano, para aromáticos clorados,
nitroaromáticos, bencenos alquilsustituidos.
 Polietilenglicol,sirve para compuestos polares, también para compuestos como
glicoles, alcoholes, éteres, aceites esenciales.
 Poli(dicianoalildimetil)siloxano, para ácidos grasos poliinsaturados, ácidos
libres y alcoholes.

Generalmente, en columnas comerciales, la fase estacionaria se presenta enlazada y

entrecruzada para impedir su pérdida durante las operaciones de elución o lavado. De
esta forma se obtiene una monocapa adherida químicamente a la superficie de la
columna. La reacción implicada suele ser la adición de un peróxido al líquido a fijar,
iniciándose una reacción por radicales libres que tiene como resultado la formación de
un enlace carbono-carbono que además incrementa su estabilidad térmica. Otra forma es
la irradiación con rayos gamma.

Otro tipo de fase estacionaria son las quirales, lo cual permite resolver mezclas
enantioméricas. Este tipo de fases suelen ser aminoácidos quirales o algún derivado
adaptado al trabajo en columna.

El grosor de la película varía entre 0,1 y 5 μm; el grosor depende de la volatilidad del
analito. Así, un analito muy volátil requerirá una capa gruesa para aumentar el tiempo
de interacción y separar más efectivamente los diferentes componentes de la mezcla.
Para columnas típicas (diámetros internos de 0,25 o 0,32 mm) se emplean grosores de
0,25 μm, y en las columnas macrocapilares el grosor sube hasta 1 μm. El grosor
máximo suele ser de 8 μm

Aplicaciones [editar]
La GC tiene dos importantes campos de aplicación. Por una parte su capacidad para
separar mezclas orgánicas complejas, compuestos organometálicos y sistemas
bioquímicos. Su otra aplicación es como método para determinar cuantitativa y
cualitativamente los componentes de la muestra. Para el análisis cualitativo se suele
emplear el tiempo de retención, que es único para cada compuesto dadas unas
determinadas condiciones (mismo gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el
volumen de retención. En aplicaciones cuantitativas, integrando las áreas de cada
compuesto o midiendo su altura, con los calibrados adecuados, se obtiene la
concentración o cantidad presente de cada analito.
Cromatografía

Keulemans ha definido la cromatografía como un método físico de separación en el

cual los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales
constituye la fase estacionaria, de gran área superficial, y la otra es un fluido (fase
móvil) que pasa a través o a lo largo de la fase estacionaria.

La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido dispuesto sobre un sólido que
actúa como soporte, de gran área superficial. La fase móvil es un fluido (puede ser gas,
líquido o fluido supercrítico) que se usa como portador de la mezcla.

En la cromatografía ocurren dos fenómenos muy importantes y que son prácticamente

los rectores del proceso de separación: la adsorción y la absorción.

La adsorción es la retención de una especie química en los sitios activos de la

superficie de un sólido, quedando delimitado el fenómeno a la superficie que separa las
fases o superficie interfacial.
Esta retención superficial puede ser física o química. La adsorción depende de la
naturaleza de la substancia adsorbida, de la temperatura, de la naturaleza y estado de
subdivisión del adsorbente, y de la concentración.
La absorción es la retención de una especie química por parte de una masa y depende
de la tendencia que tiene ésta a formar mezcla o reaccionar químicamente con la misma.

Existen muchas maneras de clasificar los métodos cromatográficos.

Según, Giddings, se puede clasificar la Cromatografía por sus variantes:

 Fase Móvil (puede ser gaseosa, líquida ó fluido supercrítico)

 Fase Estacionaria
 Mecanismo de Retención (tipos de equilibrios implicados en la transferencia de
los solutos entre las fases).
 Forma de Contacto entre las fases (columna ó superficie plana)
 Dimensionalidad
 Escala Física
 Gradientes

Teorías del proceso Cromatográfico

El proceso cromatográfico, aparentemente simple en práctica, es en realidad una

compleja unión de fenómenos tales como hidrodinámica, cinética, termodinámica,
química de superficie y difusión.

Hasta la fecha se han propuesto muchas teorías, que incluyen complejos modelos
matemáticos para poder explicar el comportamiento de los solutos en las columnas
cromatográficas. Las más estudiadas son: La Teoría de los Platos Teóricos (Martin y
Synge), la Teoría Cinética (Van Deemter, Zuiderweg, Klinkenberg y Sjenitzer) y la
Teoría Desarrollada (Golay) para Columnas Capilares.

Según la Teoría de los Platos, una columna cromatográfica está constituída por una serie
de platos que contiene una fase estacionaria. Supone que el volúmen de fase
estacionaria en cada plato es constante; que el volúmen de fase móvil es constante de
plato a plato; que en cada plato las dos fases están en equilibrio, y que el valor del
Coeficiente de Distribución es constante e independiente de la concentración del soluto.

La principal desventaja de la Teoría de los Platos Teóricos es la falta de conexión entre

la eficiencia de la columna cromatográfica, el tamaño de la partícula, la difusión, la
velocidad de flujo y la temperatura. La otra desventaja es que utiliza un modelo basado
en muchas suposiciones.

La Ecuación que rige esta teoría es:

N = 16(tr/w)2

La Teoría Cinética considera el proceso cromatográfico en función de los factores

cinéticos que intevienen en él.
Siendo estos factores:

 Las múltiples trayectorias (diferentes rutas) que toma un soluto durante su

movimiento (migración) a través del empaque de la columna, provocando
variaciones en la velocidad del flujo.
 La Difusión Axial o Longitudinal del soluto en la fase móvil.
 La cinética de la resistencia a la transferencia de masa entre las fases móvil y
estacionaria.

La Ecuación de Van Deemter,

HETP ó H = A + B/u + Cu

donde u= L(cm)/ traire(seg)

Columna

Es el lugar donde ocurre la separación. Se dice que es el corazón de un cromatógrafo.

Los materiales con los cuales generalmente se pueden elaborar las columnas son: cobre,
aluminio, acero inoxidable, vidrio ó teflón.
El relleno puede ser un sólido, ó un líquido recubriendo un sólido.
Podemos clasificar las columnas según el propósito del proceso cromátografico:

 Empacadas
o Analítica
o Preparativas
 Capilares
o W.C.O.T. (Wall Coated Open Tubular)
o S.C.O.T. (Support Coated Open Tubular)

Factores que Afectan la Eficiencia de una Columna

 Longitud de la Columna
 Diámetro de la Columna (1/4", 1/8", 1/16" de diámetro externo)
 Tamaño de las partículas del relleno
  Naturaleza de las fases
 Cantidad de fase estacionaria
 Temperatura de la columna
 Velocidad del gas portador
 Cantidad de muestra inyectada
 Material del cual está elaborada la columna
 Enrollado de la columna

Soporte

La función básica del soporte es la de "mantener" (sostener, retener) la fase estacionaria.

Idealmente debería ser un material inerte que "mantiene" la fase estacionaria sobre su
superficie como una película delgada.
La mayoría de los soportes cromatográficos está hecha de diatomita. Químicamente es
casi todo sílice, con algunas impurezas. También se conoce como Tierras Diatomáceas ó
Kiselguhr (palabra alemana). Domina el campo de los soportes debido a su estructura,
superficie y disponibilidad.

Hay que tener en cuenta dos cosas a la hora de escoger un soporte:

 La Estructura, ó Características Físicas (contribuye a la eficiencia de la columna

cromatográfica):
o Tamaño de partícula
o Diámetro del poro
o Densidad
o Área Superficial

 la Química de Superficie ó Características Superficiales (gobierna la

participación del soporte en los resultados de la separación).
o Grupos silanoles activos
o Iones metálicos

Además de las características anteriores, la selección del soporte va a depender también

de:

 la naturaleza de la muestra
 la naturaleza de la Fase Líquida
 el uso que se le va a dar a la columna:
o General
o Específico
 Precio

Podemos resumir que un buen soporte debe reunir las siguientes características:

 Elevada Superficie por unidad de volúmen

 Estabilidad Térmica
 Dureza mecánica suficiente para que pueda resistir los procedimientos de
revestimientos y relleno
  Inactividad química o de adsorción
 Baja resistencia al paso de la fase móvil

La eliminación ó reducción de los sitios activos de adsorción (también conocido como

Desactivación de la Supeficie) de un soporte cromatográfico puede efectuarse de varias
maneras:

 Remoción por lavado con ácido (NAW ó AW)

 Eliminación ó Remoción por reacción del Grupo Silanol
 Saturación de la superficie con una fase líquida
 Impregnando ó recubriendo con material sólido inerte

Fase Estacionaria Líquida

Al hablar de fase estacionaria líquida entramos en contacto con dos palabras ó términos:
Polaridad y Selectividad.

Las fases líquidas podemos clasificarlas según sus polaridades cromatográficas, nos
valemos de unas constantes que determinan dicha polaridad. Existen dos sistemas:

 Constante de Rohrchneider
 Constante de McReynolds

Existen muchas discusiones sobre este tema para poder definir y describir el parámetro
polaridad en cromatografía, podemos decir que la polaridad de una fase estacionaria
líquida se refiere a las interacciones intermoleculares que involucra dipolos
permanentes.
Selectividad es definida como las diferentes atracciones intermoleculares
Varias cualidades ha de reunir un líquido para servir como fase estacionaria:

 Viscosidad
 Tensión Superficial
 Tensión de Vapor
 Selectividad respecto a los componentes de la fase móvil
 Reversibilidad del Reparto
 Estabilidad Térmica

Gas Portador

El gas portador cumple básicamente dos propósitos: Transportar los componentes de la

muestra, y crear una matriz adecuada para el detector.

Un gas portador debe reunir ciertas condiciones:

 Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto con la muestra como con la fase
estacionaria)
 Debe ser capaz de minimizar la difusión gaseosa
 Fácilmente disponible y puro
 Económico
 Adecuado al detector a utilizar
Detectores

Un detector es un dispositivo para revelar la presencia de las sustancias eluídas a la

salida de la columna cromatográfica. Podemos expresar que el detector son los "ojos" de
un cromatógrafo.
El Detector es un dispositivo capaz de convertir una propiedad física, no medible
directamente, en una señal elaborable y ofrecernos información sobre la naturaleza y
magnitud de la propiedad física.
En cromatografía un detector funciona comparando una propiedad física entre el gas
portador puro y el mismo gas portador llevando cada uno de los componentes que
previamente se han separado en la columna, esta acción se traduce en una señal tipo
eléctrica, que posteriormente se amplificará mediante un registrador gráfico ó integrador
permitiendo indicar el momento que salen de la columna los componentes.

Clasificación de los detectores

Estos pueden ser clasificados:

 Detectores según su Grado de Selectividad :

o Universales. Responde a la mayoría de los solutos que pasan por él.
o Específicos ó Selectivos. Exhibe una gran respuesta a un grupo particular
de substancias con un mínimo de respuesta a otras.
 Detectores Destructivos y No destructivos. Esta clasificación, obviamente, es en
referencia a si la muestra es destruída o no.
 Detectores según su Modo de Respuesta:
o Dependientes del Flujo Másico. Producen una señal que es proporcional
a la cantidad de soluto que pasa a través de él en la unidad de tiempo
pero es independiente del volúmen de gas portador requerido para la
elución.
o Dependiente de la Concentración. Dan una señal proporcional a la
cantidad de soluto por unidad de volúmen de gas portador que pasa a
través de él.
 Detectores según el proceso de detección Ionización, Óptico-espectroscópico,
Electroquímico, etc.

Características de los Detectores

 Sensibilidad. Medida de la efectividad de un detector para convertir la muestra

en una señal eléctrica medible.
 Linealidad. Rango de masa ó concentración de muestra sobre el cual el detector
mantiene una sensibilidad constante sin una desviación arbitraria. El significado
práctico de la linealidad del detector es el que le indica al analista la
concentración para la cual el detector es confiable. Hay dos límites en la curva
de linealidad:
o El límite de concentración inferior, que es dado por el límite de detección
y,
o El límite Superior, definido por un porcentaje de desviación arbitrario de
la curva de linealidad, normalmente se toma un 5% de desvisción.
 Rango Dinámico Lineal.Rango sobre el cual la sensibilidad del detector es
constante.
  Ruido. Es cuantificado por el promedio de la amplitud pico-pico de la señal. El
significado de conocer el nivel de ruido de un detector es un factor determinante
en la determinación de la cantidad mínima detectable y el límite inferior del
rango lineal.
 Límite de Detección. Está definido como la mínima cantidad de substancia que
puede producir una señal que sea el doble del nivel de ruido.
 Corriente de Fondo. Señal constante de salida generada por el proceso en el que
un detector está operativo sin que alguna substancia pasa a través de él. Esta
señal es muy importante, ya que permite diagnosticar el buen o mal
funcionamiento del detector.

Detectores más usados en Cromatografía de Gases

 Detector de Conductividad Térmica. Mide la conductividad térmica del gas

portador, ocasionada por la presencia de substancias eluídas.
 Detector de Ionización a la Llama. Basado en la medida de las variaciones de la
corriente de ionización en una llama oxígeno-hidrógeno debido a la presencia de
substancias eluídas.
 Detector de Captura Electrónica. Basado en la electronegatividad de las
substancias eluídas, y su habilidad para formar iones negativos por captura de
electrones.
 Detector de Fotometría a la Llama. Basada en la medida de la intensidad de la
emisión molecular de la fluorescencia de heteroátomos en las moléculas
orgánicas.
 Detector de Ionización de Llama Alcalina
 Detector de Espectrometría de Masas

Cromatograma y su Interpretación

Los siguientes términos son los utilizados en un cromatograma típico y recomendados

por la IUPAC:

 Line Base
 Pico Cromatográfico
 Base del Pico
 Área del Pico
 Altura del Pico
 Ancho del Pico
 Ancho del Pico a la mitad de la Altura

Medida de la Altura ó Área de Pico

 Altura del Pico: Medida que se efectua, para cada pico de interés, desde la línea
base hasta el máximo del pico.

Los errores de malas mediciones se pueden atribuir a:

o Insuficiente Resolución
o Variaciones en la línea base
o Picos extremadamente pequeños
 Las desviaciones en la línea base se pueden compensar por interpolación de ésta
entre el prinpio y el final del pico.

 Área del Pico.

Existen varias técnicas para la determinación del Área de un Pico
Cromatográfico:
o Integración Manual
 Métodos Geométricos
 Triangulación: En esta técnica se trazan líneas tangentes a
cada lado del pico. La altura se mide desde la línea base
hasta la intersección de las dos tangentes. El ancho se
mide tomando la intersección de las dos líneas tangentes
con la línea base. Luego se utiliza la fórmula
A=1/2*Altura del Pico* Base del Pico. Las limitaciones
de esta técnica estan en el trazado de las líneas tangentes,
un pequeño error al trazar las tangentes puede afectar la
medida de la altura.
 Altura por ancho a la mitad de la Altura:
 Métodos Mecánicos
 Planimétricos
 Corte y Pesada: Esta técnica requiere recortar el pico del
cromatograma, luego pesarlo en una balanza analítica. El
recorte y pesada depende mucho de la habilidad del
operdor. Pueden introducirse errores por cambios en la
humedad del papel, la grasa de las manos del operador,
homogeneidad del papel. Generalmente se recomienda
utilizar una fotocopia del cromatograma para no destruir
el original.
o Integración Automática
 Electromecánica
 Electrónica

Análisis Cualitativo

Los procedimientos para identificación de los picos cromatográficos podemos dividirlos

en dos categorías:

 Identificación Cromatográfica
o Por Datos de Retención
o Por Serie Homólogas (Indices de Retención de Kovacs)
 Identificación No Cromatográfica
o Análisis Clásicos
o Identificación por:
 Adición de Estándar
 Formación de Derivados
 Sustracción de un Componente
o Identificación con Técnicas Auxiliares: UV, IR, MS, RMN

Análisis Cuantitativo
Existen varios métodos para cuantificar un pico cromatográfico:

 Normalización de Área
 Normalización de Área con Factores de Respuesta
 Estandarización Externa
 Estandarización Interna